实验性大鼠肾草酸钙结石模型的筛选研究

目的 筛选简捷且成石效果好的实验性大鼠肾草酸钙结石造模法.方法 采用两类10种诱导法制作大鼠肾草酸钙结石模型,比较各组大鼠24 h尿草酸排泄量和肾组织草酸钙结晶情况,综合评价10种造模法.结果 10种造模法组的24 h尿草酸排泄量及草酸钙结晶评分均显著高于空白对照组(P<0.05),其中1%乙二醇 + 1%氯化胺饮水1周建模效果好,且耗时最短.结论 1%乙二醇 + 1%氯化铵饮水1周为首选造模法.     

几种实验性大鼠肾草酸钙结石模型的比较研究

采用几种不同诱石剂诱导大鼠肾草酸钙结石模型成功后，检测各组大鼠肾功能、草酸钙结晶、24h尿总钙和草酸，以比较几种目前国内外常用的实验性大白鼠肾草酸钙结石模型，设计并寻找一种成石效果好、简便、稳定的结石模型。结果发现：乙二醇和1α（OH）VitD3诱导模型组的尿钙、肾钙明显高于其它模型组，肾组织可见大量草酸钙结晶沉积。乙二醇和氯化铵诱导的模型组与乙二醇和1α（OH）VitD3诱导的模型组情况类似。研究显示：乙二醇和1α（OH）VitD3与乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石形成效果显著、简便、稳定。     

两种草酸钙结石大鼠模型的比较研究

目的 比较乙二醇法与草酸铵法大鼠草酸钙结石模型的肾脏病理改变及功能损害情况,探讨两种草酸钙结石模型的选择与应用。方法 36只SPF级雄性健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、乙二醇组和草酸铵组(n=12)。乙二醇组大鼠给予1%乙二醇自由饮水和每日2%氯化铵2 m L灌胃,草酸铵组大鼠给予5%草酸铵饲料。造模后,检测各组大鼠血尿素氮(UN)、血清肌酐(Cr)及血清钙(Ca2+)、磷(P)和镁(Mg2+)含量,24 h尿草酸、Ca2+、P和Mg2+含量;显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化。结果 乙二醇组和草酸铵组大鼠的尿草酸、Ca2+及P含量明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。两种方法复制大鼠草酸钙结石模型的成石效果均较显著、稳定,但大鼠肾脏病理改变及功能损害程度的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 与乙二醇法造模比较,草酸铵法造模致大鼠肾脏病理改变及肾损害较严重,更适合应用于结石病致肾功能受损的研究。     

不同葡萄糖浓度对大鼠草酸钙结石模型的影响

目的研究不同葡萄糖浓度对大鼠肾草酸钙结石的影响。方法以目前普遍使用的肾草酸钙结石造模方法为基础,设立传统的对照组和加入不同浓度葡萄糖的实验组,同时设立空白对照。A组(生理盐水),B组(1%氯化铵+1%乙二醇),C组(5%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇),D组(10%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇)E组(15%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇)。建模完成后,收集各组大鼠24 h尿液、血清,比较各组大鼠24 h尿量、尿草酸钙结石程度、血清肌酐(Cr)、血糖(Glu)、尿素氮(BUN)、左肾重量,光镜下观察肾脏HE染色结果,比较各组大鼠肾脏病理改变程度和肾小管内草酸钙结石形成情况。结果 A组肾小管完整,尿液,肾组织中均未发现有草酸钙结晶;相比于A组,3个实验组:C组、D组、E组的肾脏、尿液草酸钙沉积在光镜(400×)下均有明显的增加(P <0.05);D组、E组的草酸钙沉积在光镜(400×)下比B组有显著提高(P <0.05);B组、C组、D组、E组的血肌酐相比于A组有明显增高(P <0.05);C组、D组、E组的血肌酐之间差异有统计学意义(P <0.05);C组、E组... 更多     

肾草酸钙结石大鼠肾小管细胞损伤的机制

目的探讨肾草酸钙结石大鼠肾小管上皮细胞损伤的机制,为临床预防和治疗肾结石提供理论依据。方法 20只大鼠随机分为模型组和对照组,每组10只。模型组制备肾草酸钙结石大鼠模型。分离大鼠肾小管上皮细胞并进行培养,用乳酸脱氢酶释放法检测上皮细胞活性,酶联免疫吸附法检测肾小管上皮细胞中caspase-3活性,Western blot方法检测肾小管上皮细胞中Bcl-2、Bax和Cyto C的表达。结果模型组大鼠肾小管上皮细胞活性显著低于对照组(P<0.05),且细胞中caspase-3活性显著升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),Cyto C释放显著增多(P<0.05)。结论肾草酸钙结石大鼠肾小管上皮细胞的损伤可能是由线粒体途径介导的细胞凋亡引起的。     

实验性骨质疏松症大鼠模型的制备

目的：探讨骨质疏松症大鼠动物模型的制备条件及理想的方法。方法：wistar大鼠随机分3组，即去卵巢大鼠组，假性去卵巢大鼠组和正常对照组，用去卵巢办法制备骨质疏松症动物模型，用双能X线骨密度测定仪测骨密度，观察不同时期大鼠骨密度的改变。结果：去卵巢大鼠在10周可见其全身骨密度的下降（P＜0．05），而12周下降更明显（P＜0．01），同时其股骨及胫骨的骨密度也下降（P＜0．01），此外，去卵巢大鼠还表现为毛发稀疏，活动迟缓，反应迟钝等症状的改变，, 大鼠骨质疏松症模型以10周较为理想，测定全身或股骨及胫骨骨密度均能反映其骨密度的改变，故测定其中任何一个部位均有临床意义。     

排石冲剂对大鼠草酸钙结石生成的干预效果及其机制研究

目的 探讨排石冲剂防治草酸钙结石形成的机制,为其临床治疗尿路结石提供依据。方法 将SPF级健康雄性Wistar大鼠（48只）应用随机数字表法分为正常组、模型组、枸橼酸钾组、排石冲剂组,每组12只。采用1%乙二醇自由饮水和2%氯化铵灌胃建立大鼠草酸钙肾结石模型,同时各组给予相应药物,观察各组大鼠体质量、24 h尿量、尿草酸、Ca2+、P3+、Mg2+水平及血清BUN、Cr、Ca2+、P3+、Mg2+水平;显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化。结果 大鼠24 h尿量比较,枸橼酸钾组和排石冲剂组均高于正常组和模型组（P＜0.05）;枸橼酸钾组与排石冲剂组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。4组大鼠24 h尿草酸、Ca2+、P3+水平两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;大鼠尿Mg2+水平比较,模型组、枸橼酸钾组与排石冲剂组均低于正常组,均高于模型组（P＜0.05）;枸橼酸钾组与排石冲剂组尿Mg2+水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。4组大鼠血清Mg2+和P3+水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;BUN、Ca2+水平比较,枸橼酸钾组与排石冲剂组均高于正常组,均低于模型组（P＜0.05）;枸橼酸钾组与排石冲剂组BUN、Ca2+水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;4组Cr水平两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。枸橼酸钾组和排石冲剂组草酸钙结晶评分均高于正常组,低于模型组（P＜0.05）;排石冲剂组结晶评分低于枸橼酸钾组（P＜0.05）。结论 排石冲剂可降低尿草酸、血Ca2+等促肾结石形成物质的水平,促进肾结石溶解,明显抑制尿中和肾组织中草酸钙晶体的形成及减轻肾功能损伤程度,保护肾脏。     

实验性糖尿病足大鼠模型的研究进展

动物模型具有可控性高、依从性好、可操作性强、价格廉价等优点.糖尿病足发病原因复杂,可由血管病变、神经病变及感染等因素单一或共同作用导致,很难有一种模型能完全模拟整个发病过程.目前公认的糖尿病大鼠造模方法是高脂饮食与链脲佐菌素诱导结合法,较常用的足溃疡造模方法是外科手术切除足部皮肤法.     

泽泻有效部位对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究泽泻有效部位对大鼠肾草酸钙结石形成和肾组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响,探讨泽泻抑制尿结石形成的机制。方法采用现代植化和生物活性导向分离的方法分离、提取泽泻的有效部位。将30只大鼠随机分成3组对照组、模型组、泽泻组。以乙二醇和1α-羟基维生素D3ig制备大鼠肾草酸钙结石模型。检测各组大鼠血及尿生化、肾Ca2 水平、24h尿草酸分泌量和肾组织病理学改变,并采用免疫印迹(Western blotting)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别观察各组大鼠肾组织OPN蛋白及其mRNA的表达水平。结果ig泽泻有效部位(主要以四环三萜类化合物为主)大鼠的血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、肾Ca2 水平、24h尿Ca2 分泌量、肾组织草酸钙晶体的分布、OPN蛋白及其mRNA的表达水平均显著低于模型组(P<0.01)。结论泽泻有效部位能抑制大鼠肾组织OPN的表达,减少肾组织草酸钙结晶的沉积,从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

金钱草总黄酮对草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的观察金钱草总黄酮对草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法30只SD大鼠随机数字表法分为正常对照组、结石模型组、金钱草总黄酮组,每组10只,采用乙二醇饮水和氯化铵灌胃作为成石剂。金钱草总黄酮组在成石基础上加金钱草总黄酮243mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,正常对照组和结石模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续给药4周。4周后,各组取大鼠肾脏在显微镜下观察肾脏草酸钙结晶形成情况,检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,RT-PCR检测肾组织OPN-mRNA表达,Western blot检测肾组织OPN蛋白表达。结果与结石模型组比较,金钱草总黄酮组大鼠肾结晶形成程度评分、肾小管扩张程度评分均明显降低[(1.60±0.70)比(2.30±0.82),P0.05;2(1-3)比3(1-4),P0.05],肾组织SOD活性显著增高[(52.82±12.65)比(36.64±9.77),P0.01],MDA含量降低[(6.67±1.86)比(8.83±2.34),P0.05],OPN蛋白、OPN mRNA表达水平显著降低[OPN:(0.47±0.13)比(0.78±0.15),P0.05;OPN mRNA:(0.70±0.39)比(1.13±0.32),P0.05]。结论金钱草总黄酮具有抗氧化应激,抑制骨桥蛋白表达的作用,能有效抑制草酸钙结晶形成。     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法 将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C₁₈(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20 ℃。结果 大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R²=0.9984和y=7810.5x-16635,R²=0.9967;最低检测浓度为5 μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00 μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00 μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均＜0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

泽泻水提取液预防草酸钙结石形成的体外及动物实验研究

分别采用Robertson籽晶粒度法和乙二醇与活性维生素D3诱导的大白鼠实验性肾结石模型，测定泽泻水提取液体外对草酸钙结晶生长和聚集以及对大白鼠的实验性肾结石形成的影响，结果发现泽泻的水提取液体外能明显抑制草酸钙结晶的生长和聚集，体内能明显降低肾钙含量和减少肾小管内草酸钙结晶形成而抑制大白鼠的实验性肾结石形成。     

草酸钙结石形成的原因

本文从化学角度应用微溶电解质的动力学理论,研究了尿路草酸钙结石形成的原因:①明确了形成草酸钙结石的成石反应是H_2C_2O_4与Ca~(2 )的作用;②发现了尿中存在物质对成石反应的相互影响。尿素、氨基酸能降低草酸过饱和比;氯化钠,氯化铵则能升高草酸过饱和比,高过饱和比草酸和钙离子共存是使草酸钙结石长大的直接原因。     

草酸钙尿石症患者尿液和结石中凝血酶原片段检测及其意义

为比较正常人和尿石症患者尿液中凝血酶原片段1（UPTF1）在含量及其与草酸钙晶体的结合能力，以探讨UPTF1含量或功能异常与草酸结石形成的关系，用ELISA法检测正常人和尿石症患者24h尿液、用过饱和结晶法制备的晶体表面结合物质和结石基质中UPTF1的含量。结果发现尿石症患者尿液中能与草酸钙结合的UPTF1的浓度及其在24h尿中含量显著低于正常人组；UPTF1普遍存在于含钙结石中。结果表明：尿石症患者尿液中抑制结石形成的UPTF1明显减少可能是结石形成的重要原因。     

烟酸对体外草酸钙结晶生长抑制作用的实验研究

采用放射性示踪的草酸钙结晶生长动力学模型,研究了烟酸对草酸钙结晶生长的抑制作用。结果表明,在亚稳过饱和液内,两种不同浓度的烟酸(高浓度为5g/L,低浓度为1g/L)均对草酸钙结晶生长有较强的抑制作用,抑制时间达80min。     

间α胰蛋白酶抑制物在大鼠肾草酸钙结石模型中的表达

目的　研究间α胰蛋白酶抑制物(IαI) 在实验性肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义。方法　采用乙二醇和氯化铵诱导形成大鼠肾草酸钙结石模型, 检测各组大鼠肾功能、肾组织Ca2 含量和草酸钙晶体沉积、尿生化,并用免疫组化和计算机图像分析技术观察IαI在肾组织的表达情况。结果　模型组大鼠的血清Cr、BUN、肾Ca2 含量、24 h尿Ca2 和草酸分泌量均明显高于正常组(P<0. 05)。正常肾组织IαI分布仅在近曲小管, 而在结石组肾组织的近曲小管、上皮细胞、皮髓质交界处等的表达显著增加。结论　高草酸尿和草酸钙结晶的沉积能使肾脏通过合成更多的IαI来抑制草酸钙晶体的形成。     

泽泻总三萜提取物对大鼠泌尿系草酸钙结石形成的影响

目的研究泽泻总三萜提取物对大鼠尿草酸钙结石形成的影响,从而确认泽泻抗泌尿系结石的活性成分。方法在实验的28d内给予乙二醇及阿法骨化醇诱导雄性SD大鼠泌尿系草酸钙结石形成。造模的同时分别给予不同剂量的泽泻总三萜提取物,分别为205.2、68.4及22.8mg/kg。实验结束时,检测各组大鼠体重,血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、P、Ca2+、Mg2+含量,24h尿量,尿pH值,24h尿Ca2+、Mg2+、尿草酸(Ox)的分泌量,右肾系数,肾Ca2+、Mg2+含量;显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化,评价泽泻总三萜对泌尿系结石形成的影响。结果乙二醇及阿法骨化醇诱导的泌尿系草酸钙结石大鼠血BUN、Cr、24h尿Ox、尿Ca2+分泌量、肾Ca2+含量及右肾系数明显升高,肾Mg2+含量明显下降。泽泻总三萜提取物能降低泌尿系结石大鼠的血BUN、Cr、24h尿Ca2+含量、肾Ca2+含量及右肾系数水平,增加24h尿量及肾组织Mg2+含量。肾组织病理学检查可知泽泻总三萜能减少大鼠肾组织内草酸钙晶体的沉积,改善肾脏组织的损伤情况。结论泽泻总三萜提取物可以有效抑制乙二醇及阿法骨化醇诱导的大鼠泌尿系草酸钙结石的形成,泽泻总三萜是泽泻抗泌尿系结石的活性成分。     

夏枯草提取物抑制大鼠肾草酸钙结石形成作用的研究

目的 研究夏枯草提取物对大鼠肾草酸钙结石的作用及机制. 方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组、模型组、夏枯草提取物低剂量(50 g/L)和高剂量(100 g/L)实验组.实验4周后处死动物,将各组大鼠肾脏标本制成组织切片,H-E染色,观察大鼠肾组织病理学改变;检测大鼠血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)、磷(P)和Ca2+的含量,检测24 h尿液中Ca2+和草酸(Ox)的含量;运用荧光定量PCR和Western-blot检测大鼠肾内TRPV5 mRNA和蛋白的表达,并进行统计学分析. 结果 与对照组比较,模型组大鼠肾呈现草酸钙结石病理改变,不同浓度的夏枯草提取物作用后,可明显改善其病理变化.模型组血清BUN,Cr,Ca2+和P含量明显升高,经不同浓度的夏枯草提取物作用后,实验组BUN及Cr含量明显低于模型组(P＜0.05),但实验组和模型组Ca2+及P含量比较无显著性差异;模型组尿液Ca2+,Ox含量较对照组明显升高,经不同浓度的夏枯草提取物作用后,可降低实验组Ca2+含量,且成药物剂量依赖性(P＜0.05),但对Ox的含量无显著性作用;模型组肾内TRPV5mRNA和蛋白的表达明显降低,经不同浓度的夏枯草水提取物作用后,实验组TRPV5 mRNA和蛋白的表达逆转,且具有统计学意义(P＜0.05). 结论 夏枯草对大鼠肾草酸钙结石具有防治作用;可能是通过上调大鼠肾脏尿钙调控信号TRPV5的表达,降低血清中BUN、Cr含量及尿液中Ca2+的含量.