采用S/D病毒灭活后凝血酶原复合物在犬非停滞模型上致血栓性的研究

目的：进一步评价采用有机溶剂／表面活性剂（Ｓ／Ｄ）技术灭活病毒后新工艺凝血酶原复合物（ＰＣＣ）的潜在致血栓性。方法：采用犬非停滞模型进行实验研究，动态监测血小板数（即刻测定），Ｄ－二聚体、ＴＸＢ２、ＦⅤ∶Ｃ、ＦⅧ∶Ｃ、蛋白Ｃ和ＰＴ７项指标，并与未经病毒灭活处理的旧工艺ＰＣＣ进行比较。结果：新工艺ＰＣＣ组的上述指标动态变化所表明的潜在血栓倾向均明显低于旧工艺ＰＣＣ组。结论：经病毒灭活处理的新工艺ＰＣＣ不但病毒安全性已提高，其血栓形成的危险性也明显降低。     

一期法测定正常人和甲型血友病病人血浆及冷沉淀中FⅧ：C结果分析

一期法测定正常人和甲型血友病病人血浆及冷沉淀中ＦⅧ：Ｃ结果分析１６１００５齐齐哈尔市红十字中心血站孙维萍，陈月，张立建ＦⅧ：Ｃ促凝血活性缺乏可引起甲型血友病［１］。临床上，诊断血友病、监测血友病病人治疗效果及检测凝血因子Ⅷ制剂（如冷沉淀）都需要测定Ｆ...     

逆转录病毒载体介导入凝因子因子Ⅷ的体外高效表达

目的建立逆转录病毒载体介导的人凝血子因子Ⅷ（ＦⅧ）体外高效表达体系。方法将－Ｂ区缺失（７６０ａａ－１６３９ａａ）的人ＦⅧｃＤＮＡ（ＦⅧＢＤｃＤＮＡ）克隆至逆转录病毒载体ｐＬＮＣＸ,构建了重组表达载体ｐＬＮＣ－ＦⅧＢＤ。经ＰＡ３１７细胞包装后,感染多种靶细胞。分别采用一期法、ＥＬＩＳＡ法和ＲＴ－ＰＣＲ检测细胞培养上清中人ＦⅧ的凝血活性（ＦⅧ：Ｃ）和抗原含量（ＦⅧ：Ａｇ）以及细胞中ＦⅧＢＤ ｃＤＮＡ的     

肺癌患者血小板功能及血浆D—二聚体的测定

测定７５例肺癌患者血小板α颗粒膜蛋白ＧＭＰ－１４０、血小板粘附试验（ＰＡｄＴ）、血小板聚集试验（ＰＡｇＴ）、血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）、血浆因子Ⅷ凝血活性（Ⅷ∶Ｃ）、血浆血管性假血友病因子（ｖｏｎＷｉｌｅｂｒａｎｄＦａｃｔｏｒ，ｖＷＦ）、纤维蛋白原（Ｆｇ）、血浆Ｄ－二聚体（Ｄ－Ｄ）的水平。结果除ＰＡｇＴ、６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α外其余均较正常人显著升高（Ｐ＜０．００１）。表明肺癌患者血液处于高凝状态，血小板功能增强，继发性纤溶活性亢进。及时应用抑制促凝物质活性及血小板活性的药物可能有助于肺癌的治疗。     

人FⅧ基因高效表达质粒的构建及其在Cos-7细胞中的表达

目的：构建人ＦⅧ真核表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋＦⅧＤＢ并观察其在Ｃｏｓ－７细胞中的表达活性。方法：采用缺失大部分Ｂ结构域的人凝血因子ⅧｃＤＮＡ（ＦⅧＤＢ），长度为４．６ｋｂ，将其插入含腺病毒序列表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋ１，构建了ＦⅧ真核表达质粒——ｐＡｄＣＭＶＬｉｎｋＦⅧＤＢ，用脂质体介导法将其转染Ｃｏｓ－７细胞，转染后２４，４８，７２小时分别用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、ＥＬＩＳＡ法及一期法测定培养细胞中ＦⅧＤＢｍＲＮＡ及ＦⅧ的含量与活性。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法可检测到ＦⅧＤＢｃＤＮＡ转录的ｍＲＮＡ，ＥＬＩＳＡ法测得７２小时后ＦⅧ的含量为每２４小时１８ｎｇ／１０６细胞，一期法测得活性为每２４小时０．６Ｕ／１０６细胞，相当于正常人血浆中１００μｇ／ＬＦⅧ所产生的凝血活性的６０％。结论：所构建的ＦⅧ真核表达质粒在Ｃｏｓ－７细胞中具有一定的表达活性。     

3例获得性血友病甲因子Ⅷ抑制物测定结果分析

３例获得性血友病甲因子Ⅷ抑制物测定结果分析张继斌敖忠芳陆化（南京医科大学第一附属医院血液科，南京２１００２９）关键词因子Ⅷ抑制物获得性血友病甲血友病甲因子Ⅷ抑制物（ＦａｃｔｏｒⅧＩｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＦⅧＩ）是由于病人机体内免疫系统的紊乱所产生的抗人凝...     

人凝血因子Ⅷ cDNA 体外真核表达的初步研究

目的：建立人凝血因子ⅧｃＤＮＡ体外真核高效表达的体系。方法：将人ＦⅧＢ区大部分缺失（Δａ７６０１６３９）的ＦⅧｃＤＮＡ插入ｐＣＩ真核表达载体、ｐＧＲＥ５．２／ＥＢＶ载体和逆转录病毒载体ｐＭＳＣＶ，构建了５种表达框架，在体外转染和感染了多种靶细胞。结果：ｐＣＩⅧ在ＮＩＨ３Ｔ３细胞产生了低水平表达，而ｐＧＲＥ５．２／ＥＢＶⅧ和ｐＭＳＣＶⅧ系列分别在Ｈｅｌａ细胞和Ｂｏｓｃ２３逆转录病毒包装细胞中呈较高水平的表达。Ｂｏｓｃ２３细胞培养上清感染的ＮＩＨ３Ｔ３和３２ＤＣ不能有效地产生ＦⅧ。结论：在ＦⅧ体外表达及基因治疗的方案设计中，靶细胞的选择是一重要因素。     

变性梯度凝胶电泳检测到一种新的凝血因子Ⅷ基因突变

凝血因子Ⅷ基因的第８号和第１４号外显子的３′端编码ＦⅧ的重要功能区，涉及凝血酶的激活、蛋白Ｃ的降解灭活及与ｖＷＦ结合。应用ＰＣＲ和变性梯度凝胶电泳（Ｄｅｎａｔｕｒｉｎｇｇｒａｄｉｅｎｔｇｅｌｅｌｅｃ－ｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＤＧＧＥ）技术，研究了２８例血友病甲患者ＦⅧ基因的这两个外显子，发现一例轻型血友病甲患者ＦⅧ基因第８号外显子的ＤＧＧＥ行为发生了改变，经双脱氧链终止法测序证实，该外显子发生了单个碱基的置换：Ｔ（ＧＡＴ）→Ｇ（ＧＡＧ），导致Ａｓｐ３４９Ｇｌｕ。     

胎脾组织细胞培养液凝血因子Ⅷ：C活性动态观察

胎脾组织细胞培养液凝血因子Ⅷ：Ｃ活性动态观察王海林，初俊杰，张素芬，王世贤，冯新丽，刘永祥凝血因子Ｖｌｌｌ：Ｃ（ＦＶＩＩＩ：Ｃ）合成部位至今尚未定论，目前认为肝脏是合成ＦＶＩＩＩ：Ｃ主要场所，肝外合成也起很大作用。故将胎脾组织行长期培养，动态观察ＦＶ...     

2A型血管性血友病vWF基因Ala737→Glu的突变

目的阐明２Ａ型血管性血友病（ｖＷＤ）临床表现型与基因型的相关性。方法研究来自同一家系的２例患者,他们具有初期止血障碍的出血特点,ｖＷＦ∶Ａｇ和ＦⅧ∶ＣＡｇ减少,瑞斯托霉素诱导的血小板聚集明显降低,大、中多聚物分子消失,临床表型符合２Ａ型血管性血友病。用聚合酶链反应方法扩增患者的ｖＷＦ基因的２８号外显子,并用特异性内切酶的方法获得真基因,变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）筛选突变基因,对电泳行为异常的片段进行测序。结果该２Ａ型ｖＷＤ家系ｖＷＦ基因的４３７０～４５９０区域ＤＧＧＥ有明显减慢的条带。ＤＮＡ序列测定,表明在ｖＷＦ基因４４９９位Ｃ→Ａ致ｖＷＦ蛋白Ａ２区域Ａｌａ７３７→Ｇｌｕ。结论该突变有助于研究ｖＷＦ蛋白功能域的精细功能及ｖＷＤ表型与基因型的相关性。     

一例凝血因子Ⅷ1680A→G点突变

为了研究在无内含子２２倒位的甲型血友病中的ＦⅧ基因的其他遗传性点突变。应用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）、单链构象多态性（ＳＳＣＰ）对５１例无内含子２２倒位的甲型血友病患者的ＦⅧ基因外显子１４３′侧进行研究。结果发现一例遗传性点突变，密码子１６８０ＴＡＴ（酪）→ＴＧＴ（半胱）的突变。阐明甲型血友病的点突变有助于了解ＦⅧ蛋白各功能域的精细功能，为甲型血友病家系携带者检测和产前诊断提供一种有价值的方法     

一例凝血因子Ⅷ1680A→C点突变

为了研究在无内含子２２倒位的甲因友病中的ＦⅧ基因的基他遗传性点突变。应用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）、单链构象多态性（ＳＳＣＰ）对５１例无内含子２２倒位的甲型血友病患者的ＦⅧ基因外显子１４３＇侧进行研究。结果发现一例遗传性点突变，密码子１６８０ＴＡ（酷）→ＴＧＴ（半胱）的突变。阐明甲型血友病的点突变有助于了解ＦⅧ蛋白各功能域的精细功能，为甲型血友病家系携带者检测和产前诊断提供一种有价值的方法。     

流式细胞仪在白血病中的应用

流式细胞仪（Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）是一咱利用光学和电学方法对溶液中细胞或微粒进行理化分析的一种仪器。该仪器具有高度的精密性、测定数据准确可靠，既可分析单个细胞，也可区别群体细胞。检测细胞敏感快速（每秒可检测５０００－－１００００个细胞），并可测定细胞的大小、内部结构、表面标记。通过ＦＣＭ内的计算机进行多参数数据处理，为临床诊治提供细胞或分子水平的实验依据。本文就ＦＣＭ在白血病中的应     

肝细胞癌唾液甲胎蛋白测定的临床价值

应用放射免疫分析（ＲＩＡ）对５６例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者，３０例肝外恶性肿瘤患者和正常人的血清与唾液甲胎蛋白（ＡＦＰ）含量进行测定，并对部分ＨＣＣ患者唾液ＡＦＰ含量动态观察，探讨唾液ＡＦＰ含量对ＨＣＣ诊断、疗效观察等临床价值。结果表明唾液ＡＦＰ与血清ＡＦＰ含量呈明显正相关（Ｐ＜０．０１），唾液ＡＦＰ含量测定对ＨＣＣ的诊断、疗效判断有临床价值。     

反相高效液相色谱法测定人血中血小板活化因子方法学的研究及其临床意义

目的：探讨用反相高效液相色谱法（ＲＨＰＬＣ）测定人血中血小板活化因子（ＰＡＦ）方法学的实用性。方法：分析实验影响因素，并与生物法对比观察，对不同年龄段正常人与冠心病患者血中ＰＡＦ含量进行测定与分析。结果：证实ＲＨＰＬＣ法测定ＰＡＦ操作简便，与经典生物法有良好的相关性（ｒ＝０．９０７９）。结论：用ＲＨＰＬＣ法测定人血中ＰＡＦ的干扰因素少，重复性好，测定的血ＰＡＦ值具有可靠性，能较准确地反映血中ＰＡＦ的水平。     

糖尿病与非糖尿病脑梗塞患者血浆血小板α颗粒膜蛋白与因子Ⅷ相关抗原含量的比较

糖尿病与非糖尿病脑梗塞患者血浆血小板α颗粒膜蛋白与因子Ⅷ相关抗原含量的比较方桂远卢宏方树友我们对糖尿病和非糖尿病脑梗塞患者血浆血小板α颗粒膜蛋白（Ｇｒａｎｕｌｅｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ１４０，ＧＭＰ１４０）及因子Ⅷ相关抗原（ｖＷＦ∶Ａｇ）进行了...     

慢性呼吸袁竭患者凝血状态检测

慢性呼吸袁竭患者凝血状态检测温州医学院附属二院（３２５００３）丁红香温州医学院附属一院王明山本文检测了３７例慢性呼吸衰竭（慢呼衰）患者和３５例正常人血浆中血管性血友病因子相关抗原（ｖＷＦ：Ａｇ）、因子Ⅷ促凝活性（Ⅷ：Ｃ）、纤维蛋白原（Ｆｂｇ）及血小板...     

反相高效液相色谱法测定人血中血小板活化因子方法学的…

目的：探讨用反相高效液相色谱法（ＲＨＰＬＣ）测定人血中血小板活化因子（ＰＡＦ）方法学的实用性。方法：分析实验影响因素，并与生物法对比观察，对不同年龄段正常人与冠心病患者血中ＰＡＦ含量进行测定与分析，结果：证实ＲＨＰＬＣ法测定ＰＡＦ操作简便，与经典生物法有良好的相关性，（ｒ＝０．９０７９）。结论；用ＲＨＰＬＣ法测定血中ＰＡＦ的干扰因素少，重复性好，测定的血ＰＡＦ值具有可靠性，能较准确地反映血中的ＰＡ     

凝血因子V缺陷：血栓形成与出血转换的分子基础

第Ｖ因子（ＦＶ）是分子量为３３０ＫＤ的单链糖蛋白,与第Ⅷ因子（ＦⅧ）及铜蓝蛋白之间在结构上有许多相似之处,ＦＶ参与凝血过程中的凝血酶的生成,促进凝血,同时,活化的蛋白Ｃ（ＡＰＣ）通过灭活ＦＶ来抑制凝血,ＦＶ陷根据产生机制不同可导致对ＡＰＣ的抵抗（ＡＰＣＲＥ）引起血栓病或遗传性ＦＶ缺乏症,导致出血,目前已证实部分ＡＰＣＲ和遗传性ＥＦＶ缺乏症均存在分子缺陷,本文主要对ＦＶ的结构,功能,活化蛋白Ｃ抵抗及     

930701血浆和中纯FⅧ国家标准品FⅧ：C检测结果及分析

９３０７０１血浆和中纯ＦⅧ国家标准品ＦⅧ：Ｃ检测结果及分析中国药品生物制品检定所１０００５０刘大英，沈琦，云志宏笔者用一、二期凝结法和基质显色法，对９３０７０１血浆和中纯ＦⅧ国家标准品ＦⅧ：Ｃ进行了标定，现将结果报告如下。１材料和方法１．１标准品ＷＨ...