产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型研究

肺炎克雷伯菌是医院和社区感染的重要病原菌 ,产生超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,对第三代头孢菌素产生耐药性。为了对我院产肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型特征进行调查 ,以便采取有效措施加以控制 ,我们对 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月临床分离的肺炎克雷伯菌 ,进行了耐药性和基因型研究。一、材料和方法1.菌株来源 :试验菌株全部为我院 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月从各类临床感染性标本中分离出来的肺炎克雷伯菌。2 .仪器 :生物梅里埃公司生产的VITEKAMS全自动微生物鉴定及药敏系统 ,美国BIO RAD公司产的基因扩增仪。3 .抗生素敏…     

COPD合并肺炎患者产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型分析

目的 分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺炎患者产超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)肺炎克雷伯菌基因型.方法 选择2018年1月—2020年1月收治的COPD合并肺炎328例,收集其痰液标本进行病原菌培养、鉴定及药敏试验,采用PCR法对产ESBLS肺炎克雷伯菌基因型进行鉴定.结果 328份痰液标本培养出病原菌131株,...     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测

目的　了解耐氨苄西林肺炎克雷伯菌超广谱β 内酰胺酶 (ESBL)产生情况。 方法　用双纸片扩散法和Etest筛选肺炎克雷伯菌ESBLs ;用SHV PCR检测SHVβ 内酰胺酶基因 ,进一步用PCR NheⅠ酶切检测SHV ESBL。 结果　 36株肺炎克雷伯菌中有 30株产 β 内酰胺酶 ,31株含SHVβ 内酰胺酶基因 ,8株ESBL菌表型阳性 ,其中 3株为SHV ESBL。 结论　肺炎克雷伯菌是产ESBL的常见菌 ,实验室对其检测和监控非常重要     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯杆菌的基因型分型及耐药分析

目的：了解大连市中心医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯杆菌耐药基因型及耐药情况。方法：采用，涵床实验室标准化委员会（CLSI）推荐的表型确认方法，筛选出该院2005年11月至2006年2月产ESBLs肺炎克雷伯杆菌51株。应用K-B纸片扩散法检测其对23种临床常用抗生素的耐药性；应用聚合酶链反应-毛细管电泳方法（PCR—CE）检测产ESBLs肺炎克雷伯杆菌的TEM、SHV、CTX．M基因。结果：51株产ESBLs肺炎克雷伯杆菌中．有50株呈阳性。仅携带一种基因型的分别为TEM型1株（1．96％），SHV型1株（1．96％），CTX—M．I型9株（17． 65％），CTX—M—II型8株（15．69％），CTX-M-Ⅲ型2株（3．92％），CTX—M—IV型6株（11．76％）。有23株（45． 10％）同时携带两种或两种以上基因型，且多为CTX-M型与TEM型或SHV型共同存在。药敏结果显示，碳青酶烯类抗生素对产ESBIs肺炎克雷伯杆菌表现出较高的抗菌活性，其耐药率为0．00％，四环素和复方新诺明耐药率分别为19．61％和27．45％一结论：本院产ESBLs肺炎克雷伯杆菌流行的主要耐药基因型为CTX—M型．碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs肺炎克雷伯杆菌感染最有效的药物。[著者文摘]     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素基因型研究

肺炎克雷伯菌是医院内感染相关的常见细菌之一，对抗生素耐药主要原因是产生了各种β内酰胺酶。为了解我院肺炎克雷伯菌中β内酰胺酶编码基因存在情况，我们进行了相关基因的检测，现将结果报道如下。     

肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶耐药性分析

超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)主要由肠杆菌科细菌产生，尤以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为代表。为了解我院ESBLs菌的发生率和耐药特点，以为临床合理选择抗生素和有效控制ESBLs的传播和流行，我们对82株肺炎克雷伯菌(K．Pn)做了ESBLs的检测，并分析其对11种抗生素的耐药性，结果如下。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究进展

产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是导致肺炎克雷伯菌耐药的主要原因.现对其基因分型、检测方法及产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究作一综述.     

产超广谱β-内酰胺酶多重耐药的肺炎克雷伯菌相关基因研究

目的 了解山西地区五家医院多重耐药的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）的耐药特点,并研究其产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamaes,ESBLs）多重耐药的KP相关基因的流行情况.方法 收集2010年1月-2012年12月山西地区五家医院临床标本中分离的KP2516株,采用药敏试验（K-B法）和ESBLs确证实验筛选多重耐药的KP,采用PCR法扩增ESBLs多重耐药的KP相关基因,选取阳性产物进行测序并在Genbank进行分析.结果 2516株KP中,筛选出40株产ESBLs的多重耐药KP.PCR法基因扩增检测出40株blaTEM型,1株SHV型和4株KPC型;检测出染色体介导的GyrA型32株,质粒介导的qnrA型8株,qnrB型15株,以及qnrS型2株;没有检出金属酶NDM-1基因.结论 多重耐药的KP耐药机制非常复杂,多重耐药菌株的出现导致同一菌株中同时携带几种基因.因此,应加强临床病例的监测,合理使用抗菌药物,减少泛耐药菌株的传播.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究进展

产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是导致肺炎克雷伯菌耐药的主要原因。现对其基因分型、检测方法及产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究作一综述。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的将2009年1月-2011年12月我院培养分离的319株KPN采用双纸片协同试验筛选ESBLs菌株,以美国临床试验室标准化协会（CLSI）2009年版为判断标准。应用WHONET 5.5软件进行统计学分析。结果 KPN和产ESBLs KPN的分离率为14.0%和41.7%。产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株（P〈0.01）。产ESBLs KPN除对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、阿米卡星、呋喃妥因和头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦敏感率较高外,对其他抗菌药物耐药严重。结论应重视对产ESBLs菌株的监控。控制易诱导产生ESBLs的三代、四代头孢菌素的使用。碳青霉烯类是治疗产生ESBLs最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测分析

目的 监测并分析该医院2004年1～12月间产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药性变化,为临床合理使用抗菌药物提供指导。方法 对2004年1～12月从该院临床送检的各类标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片琼脂扩散法（K-B法）与Vitek-AMS的GNS卡Mic法相结合进行药敏试验,并严格按照CLSI／NCCLS（美国临床实验室标准化研究所／美国临床实验室标准化委员会）推荐的标准方法检测ESBLs菌株。结果 分离的498株大肠埃希菌中,产ESBLs的有196株,占39．4％;311株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs的有91株,占29．3％。产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类、单环β-内酰胺类、氨基糖甙类、氟喹诺酮类等抗菌药物产生多重耐药性;ESBLs菌株的耐药性显著高于非ESBLs菌株（P〈0．05）,但对亚胺培南都显示高度敏感性。结论 产ESBLs菌株的感染已成为临床抗感染治疗的难题,临床在抗感染治疗过程中,应严格掌握抗菌药物的应用指标,特别加强对产ESBLs菌株的耐药性监测,合理使用各种抗菌药物,以防止ESBLs菌株的增长、扩散与流行。     

KPC酶在肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药中的研究

目的运用RNA干扰技术探讨blaKPC表达与碳青霉烯类耐药的关系。方法用电转移法将双链小RNA（SiRNA）转入到2株产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2（KPC-2）的肺炎克雷伯菌中,检测RNA干扰前后菌株blaKPC的RNA水平和亚胺培南、厄他培南的最低抑菌浓度（MIC）值的变化。结果菌株在RNA干扰前后blaKPC-2的RNA水平有差异,但干扰前后亚胺培南和厄他培南的MIC值没有变化。结论 SiRNA虽然能在RNA水平上抑制blaKPC的表达,但对产KPC-2菌株碳青霉烯类耐药的影响不明显,证明革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药由多种因素共同引起。     

KPC酶在肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药中的研究

目的运用RNA干扰技术探讨blaKPC表达与碳青霉烯类耐药的关系。方法用电转移法将双链小RNA(SiRNA)转入到2株产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2(KPC-2)的肺炎克雷伯菌中,检测RNA干扰前后菌株blaKPC的RNA水平和亚胺培南、厄他培南的最低抑菌浓度(MIC)值的变化。结果菌株在RNA干扰前后blaKPC-2的RNA水平有差异,但干扰前后亚胺培南和厄他培南的MIC值没有变化。结论 SiRNA虽然能在RNA水平上抑制blaKPC的表达,但对产KPC-2菌株碳青霉烯类耐药的影响不明显,证明革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药由多种因素共同引起。     

下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的了解引起下呼吸道感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLS和AmpC基因型，指导临床合理用药。方法收集产ESBLs肺炎克雷伯菌36株，用纸片扩散法进行药敏性试验，表型筛选法检测出同时产AmpC酶的菌株，PCR法检测ESBLs和AmpC酶的基因型。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南全部敏感，对所测试的其他药物最小同程度耐约。36株产ESBLs肺炎克雷伯菌中，20株扩增出CTX—M—Ⅲ群基因，15株扩增出TEM基因，SHV和OXA基因各1株，ACT-1（MIR-1）和DHA-1（DHA-2）各4株，12株细菌同时携带2种以上的基因型。结论本院下呼吸道感染患营中分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌主要携带CTXM和TEM基因型，少数携带ACT、DHA、SHV和OXA基因型，可介导对口内酰胺类药物的耐药。本研究未对TEM和SHV基因型作进一步分析。     

产KPC-2肺炎克雷伯菌的基因分型、毒力基因和血清型特征研究

目的分析我院产KPC-2肺炎克雷伯菌基因分型、毒力基因和血清型特点。方法收集碳青霉烯类不敏感肺炎克雷伯菌菌株75株(采用改良Hodge试验和DNA测序以确定其表型和基因型)和同期分离的敏感株97株,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,PCR检测9种毒力基因all S、rmp A、mrk D、kfu BC、cf29a、fim H、uge、wab G、ure A和K1、K2、K5、K54、K57、K206种血清型。比较产KPC-2和非产KPC-2肺炎克雷伯菌的毒力基因和血清型差异。结果 75株碳青霉烯类不敏感肺炎克雷伯菌菌株中,有61株细菌经改良Hodge试验初筛为产碳青霉烯酶菌株,PCR扩增及DNA测序确定其为产KPC-2酶。PFGE结果显示,依据相似度80%的折点,产KPC-2酶组的61株细菌来源于30个克隆菌株,不产KPC-2酶组的111株肺炎克雷伯菌来源于96个克隆菌株。all S基因在不产KPC-2组中的阳性率(21.9%)高于在产KPC-2组的阳性率(3.3%),差异有统计学意义(P0.05)。血清型K1、K2和K54在产KPC-2组与不产KPC-2组间的分布差异无统计学意义(P0.05),其他3种血清型未检测到。结论产KPC-2肺炎克雷伯菌临床分离株携带的尿素酶基因all S减少,且大多不属于高致病性血清型,但作为高度耐药菌,应加强监控。     

三亚地区综合性医院213株产ESBLs肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性基因的检测

目的了解三亚市人民医院肺炎克雷伯菌的标本来源及耐药基因情况,为临床合理用药和控制院内感染提供依据。方法从2013年1月至2014年12月各临床送检标本中分离肺炎克雷伯菌,采用Phoenix-100全自动细菌鉴定药敏系统进行药敏试验,按照标准纸片扩散法进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型的筛选和确证,依据当年的美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准判读结果,用WHONET 5.6软件对所有数据进行统计分析。用聚合酶链反应(PCR)对213株产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行常见的几种的耐药基因进行检测。结果分离并确认213株产ESBLs肺炎克雷伯菌,标本来源主要是痰、呼吸道分泌物,占78.4%;其次是分泌物标本和中段尿,分别占8.92%和5.2%。对头孢噻肟耐药率最高(98.1%);对亚胺培南的耐药率最低(2.86%)。213株产ESBLs肺炎克雷伯菌中有195株能检测到1个或多个耐药基因,分别为CMY,CTX,TEM,SHV,DHA1和KPC,其检出率分别为6.10%、76.53%、59.62%、76.06%、12.21%和2.82%。结论该院肺炎克雷伯菌主要分离自痰、呼吸道分泌物,对常用抗菌药物均产生了一定的耐药性,应进一步了解该院产ESBLs菌株的耐药基因的分布,预防医院感染的发生和多重耐药菌的产生。     

产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌相关耐药基因研究

目的了解常州地区肺炎克雷伯菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因。方法用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度（MIC）。采用聚合酶链反应（PCR）检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌16种相关耐药基因,并用DNA测序仪测序。结果120株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率为44．2％（53株）。从53株肺炎克雷伯菌中检出TEM、SHV、CTX—M-1群、CTX—M-9群、OXA-1群、LEN、OKP和DHA8种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为75．5％、22．6％、18．9％、7．5％、11．3％、5．7％、3．8％和41．5％,其中2株菌同时检出6种B-内酰胺酶基因。基因测序证实为TEM-1、TEM-11、SHV-13、SHV．28、CTX—M-22、CTX—M-55、OXA-1和OKP-6等。结论本地区肺炎克雷伯菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,是其对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一。     

产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌相关耐药基因研究

目的了解常州地区肺炎克雷伯菌耐药状况及β-内酰胺类耐药基因。方法用琼脂稀释法检测氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林-他唑巴坦、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和亚胺培南对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(MIC)。采用聚合酶链反应(PCR)检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌16种相关耐药基因,并用DNA测序仪测序。结果120株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率为44.2%(53株)。从53株肺炎克雷伯菌中检出TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1群、LEN、OKP和DHA 8种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为75.5%、22.6%、18.9%、7.5%、11.3%、5.7%、3.8%和41.5%,其中2株菌同时检出6种β-内酰胺酶基因。基因测序证实为TEM-1、TEM-11、SHV-13、SHV-28、CTX-M-22、CTX-M-55、OXA-1和OKP-6等。结论本地区肺炎克雷伯菌已携带多种β-内酰胺酶耐药基因,是其对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因之一。     

广州地区肺炎克雷伯菌分布和耐药性调查

目的:了解广州地区肺炎克雷伯菌分布和耐药情况,指导临床合理选择抗菌药物。方法:对广州地区1999-2004年从临床分离的1556株肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法药敏试验,用WHONET5.3软件进行统计分析。结果:718株(46.1%)分离自痰标本,从尿液和血液分离到261株(16.8%)和164株(10.5%);对亚胺培南的敏感率最高,其次是头孢吡肟,产超广谱β-内酰胺酶的比率达41.3%～44.7%;从尿液中分离的肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药率明显高于从其它部位分离的菌株。结论:本地区肺炎克雷伯菌临床分离株对抗菌药物耐药率较高,合理使用抗菌药物是当务之急。     

1株泛耐药肺炎克雷伯菌耐药机制的研究

目的研究1株泛耐药肺炎克雷伯菌(Kpn)的耐药机制。方法用Vitek-2系统进行细菌鉴定,纸片扩散法和肉汤稀释法进行药敏试验;PCR和DNA测序检测β-内酰胺酶基因和7个管家基因,多位点序列分型(MLST)进行7个管家基因的序列分析;改良Hodge试验、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确证试验、利用抑制剂的双纸片增效试验和改良ESBLs确证试验检测β-内酰胺酶表型。结果该菌株呈泛耐药性,携带KPC-2和CTX-M-15基因,MLST显示ST11型;改良Hodge试验检出碳青霉烯酶;ESBLs确证试验呈假阴性结果,改良ESBLs确证试验呈阳性结果;用3-氨基-苯酚硼酸(APBA)的双纸片增效试验呈阳性结果,显示产KPC型A类碳青霉烯酶。结论该菌株的泛耐药性可能是由于产KPC酶,利用抑制剂的表型试验能简便准确地检出KPC和ESBL。