临床评价VITEK2高级专家系统对常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析

目的 评价VITEK2高级专家系统(AES)对临床常见细菌β内酰胺耐药表型的检测和分析。方法 用VITEK2 AES检测并分析已知耐药表型的葡萄球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌和阴沟肠杆菌共124株。结果 VITEK2 AES耐甲氧西林葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌产超广语β内酰胺酶[ESBLs(TEM型、SHV型或CTX—M型)]、阴沟肠杆菌产诱导型AmpC酶或高产AmpC酶、ESBLs均能正确检测。对9株同时产ESBLs和高产AmpC酶阴沟肠杆菌检测，其中1株正确，其余8株只报告高产AmpC酶。结论 VITEK2 AES能够对临床菌株中重要的β内酰胺耐药表型准确检测，并能根据所测耐药表型对某些影响临床抗菌药物治疗的药敏结果进行修订。对阴沟肠杆菌某些耐药表型的分析、判断有待进一步改进。     

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别.方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7％、28.3％、6.5％;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8％、38.3％、9.9％.大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型.     

介绍一种同时存在AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测方法

目的：研究自血培养分离的阴沟肠杆菌的耐药特点，以指导临床用药。方法：收集1997-2000年期间我院住院患血液中分离到的10株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对13种抗菌药物进行了检测，用改良的酶提取物三维试验方法进行持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的双重检测。结果：10株阴沟肠杆菌中1株持续高产AmpC酶，1株既有持续主产AmpC酶，又产ESBLs；3株只产ESBLs，其余5株未发现持续高产AmpC酶和ESBLs。2株持续高产AmpC酶和3株产ESBLs均对第三代头孢菌素和β内酰胺酶抑制剂的复方制剂等多种抗菌药显示高度耐药。结论：使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶（包括染色体型和质粒型）和ESBLs的菌株。根据阴沟杆菌产生不同的β内酰胺酶选择性用药，治疗高产AmpC酶多耐药菌，使用第三代头孢菌素和酶抑制复方制剂通常导致临床治疗失败，应选用第四代头孢菌素或碳青霉烯类，或两与氨基糖苷类或氟喹诺酮类联合治疗。碳青霉烯类抗生素是惟一对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素，可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

肠杆菌科产CTX-M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系

目的 了解我院肠杆菌科产CTX-M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系。方法采用琼脂2倍稀释法测定8种B内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度；用针对SHV、TEM、CTX-M基因的特异性引物进行PCR扩增确定p内酰胺酶基因型；对扩增的CTX-M基因进行DNA序列分析。结果16株产CTX—M酶菌中有15株产2种或2种以上β内酰胺酶。产CTX—M酶菌对头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶和头孢哌酮一舒巴坦的耐药率分别为81．3％、75．0％、31．3％和31．3％。结论 产CTX-M酶菌株绝大多数产多种β内酰胺酶，其对头孢噻肟、头孢吡肟的耐药水平高于不产CTX—M型ESBI—S株，耐药表型呈多样性，临床中不推荐使用头孢他啶治疗产CTX-M酶菌株感染。     

临床分离耐药阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测与分型

阴沟肠杆菌已成为医院感染的重要条件致病菌,且有较高的耐药性。由于头孢菌素、碳青霉烯类在临床上的广泛使用,阴沟肠杆菌耐药机制不断发展,其中的细菌产β内酰胺酶（ESBLs）是其耐药的重要机制［1］。目前,ESBLs种类已超过200多种,其中TEM、CTX-M、SHV、KPC型临床上较常见。作者前期的研究,对耐药阴沟肠杆菌,所产ESBLs 进行了检测和分型,22.73％的菌株单产AmpC酶、19.32％菌株单产ESBLs［2］。本文对ESBLs基因进行分型,旨在为进一步研究耐药基因的调控奠定基础。     

产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性监测

目的研究产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性。方法对我院2005年1月-2007年1月间,确认为阴沟肠杆菌感染及产ESBLs和AmpC酶阴沟肠杆菌的检出率及耐药性进行分析。结果 81株阴沟肠杆菌中,29株产ESBLs,检出率35.0%;31株产AmpC酶,检出率38.3%;14株同时产生此二类酶,检出率约17.3%。酶抑制剂联合制剂头孢哌酮/舒巴坦细菌耐药率为3%,细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为1和2%。结论阴沟肠杆菌为医院感染常见病原菌之一,产ESBLs、AmpC酶已成为阴沟肠杆菌耐药的二大主要因素。碳青霉烯类抗生素、第四代头孢菌素头孢吡肟及头孢哌酮/舒巴坦,对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素,可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

非特异性阴道炎患者分泌物肠杆菌产β-内酰胺酶研究

目的：分析非特异性阴道炎患者分泌物的肠杆菌中产β-内酰胺酶情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法应用三维抑制试验回顾性分析2012～2013年625例确诊为非特异性阴道炎患者送检的分泌物经中的肠杆菌产头孢菌素酶（AmpC）、超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、和超超广谱β-内酰胺酶（SSBL）的情况。结果各种肠杆菌β-内酰胺酶表型中,大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌产 ESBLs≥25％属于高产类型;阴沟肠杆菌产AmpC≥25％属于高产酶类型,且所有菌株产β-内酰胺酶均大于或等于10％,提示在非特异性阴道炎患者体内肠杆菌β-内酰胺酶表型比例较高。结论针对非特异性阴道炎患者合理使用β-内酰胺类抗菌药物避免耐药株产生显得非常重要。     

产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析

目的了解阴沟肠杆菌的耐药特性及其产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况。方法对2005年4月-2007年7月的各类标本进行阴沟肠杆菌的分离培养,用VITEK32全自动微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。ESBLs检测采用NCCLS纸片确证试验,用酶提取三维试验检测AmpC酶。结果在63株阴沟肠杆菌中,20．6％的菌株单产AmpC酶;38．1％的菌株单产ESBLs;9．5％的菌株同时产生AmpC酶和ESBLs;31．8％的菌株均不产AmpC酶和ESBLs。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同时产生AmpC酶和ESBLs的菌株中尤为严重。结论本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。产AmpC酶及ESBLs的细菌耐药性不完全相同,产酶类型不同,需选用不同类型的抗菌药物。     

改良三维试验同时检测阴沟肠杆菌中的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的研究瑞安市人民医院临床标本分离出的的阴沟肠杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况，以指导临床用药。方法收集瑞安市人民医院2006年1～12月临床标本分离到的96株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对14种抗菌药物进行了药敏试验，用改良三维试验进行持续高产AmpC酶和ESBLs的双重检测。结果96株阴沟肠杆菌中11株（11．5％）高产AmpC酶；2株（2．1％）既持续高产AmpC酶又产ESBLs；40株（41．6％）只产ESBLs；其余43株（44．8％）未发现持续高产AmpC酶或ESBLs。结论使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶和ESBLs菌株，应根据阴沟肠杆菌产生不同的ESBLs来选择性用药。     

阴沟肠杆菌β-内酰胺酶的检测与分型

目的：了解该地区临床细菌感染分离的标本中阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药性以及细菌产β-内酰胺酶的类型。方法在该地区医院通过细菌培养分离阴沟肠杆菌88例，用纸片扩散法进行药敏测定；通过改良三维实验检测临床耐药菌高产β-内酰胺酶及其分型。结果在研究菌株中，有17例菌株单产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），占19．32％。有20例菌株单产AmpC酶，占22．73％。有5例菌株同时产AmpC酶和ESBLs ，占5．68％。有47例菌株AmpC酶和ESBLs均不产生，占52．27％。结论该地区临床分离的阴沟肠杆菌存在普遍耐药，将近一半的耐药菌产AmpC酶或/和ESBLs ，尚有52．27％的菌产生其他β-内酰胺酶。     

阴沟肠杆菌ESBLs、AmpC酶和AmpC酶基因型的检测及耐药性分析

目的探讨阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶的产生情况、AmpC酶的耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和K-B纸片法测定药敏结果;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并通过酶粗提物头孢西丁三维试验、接合试验、PCR测序等实验分析该菌株的基因型。结果 157株阴沟肠杆菌ESBLs和AmpC酶总检出率分别为31.21%和32.48%,其中,单产AmpC酶、同产AmpC酶+ESBLs、单产ESBLs检出率分别为17.20%、7.64%和23.57%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:30株为DHA型,9株为CIT型。产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产与非产AmpC酶(和)ESBLs菌株对亚胺培南的敏感率几乎达100%。结论台州地区阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高,AmpC酶以DHA-1基因型为主。产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药,限制β-内酰胺类抗菌药物的应用是减少产酶株流行的重要措施。     

多重耐药产PER-1型超广谱β内酰胺酶阴沟肠杆菌的研究

目的研究多重耐药阴沟肠杆菌017对β内酰胺类抗菌药物耐药的机制。方法使用双纸片扩散法和改良三相试验对阴沟肠杆菌017进行β内酰胺酶的表型检测，并用聚合酶链反应(PCR)扩增β内酰胺酶基因，对PCR产物进行测序确定基因型别。结果阴沟肠杆菌017经双纸片扩散法证实产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经三相试验证实该菌除了产ESBLs外，还同时产AmpC酶。PCR产物经测序长度为579bp，与GENEBANK的PAPER1A基因序列100％符合，确定为PER-1基因。结论阴沟肠杆菌017耐β内酰胺类抗菌药物的主要原因是PER-1型ESBLs和AmpC酶所致。     

从临床分离的阴沟肠杆菌所产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的特性研究

自从1983年欧洲首先报道了细菌因产生了超广谱β-内酰胺酶（Extended—spectrumβ-lactamases，ESBLs）而对二三代头孢菌素耐药，到目前为止，国际上已报道有几十种ESBLs，ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，大多为TEM-1、TEM-2和SHV-1的突变酶。本文对从临床分离的多重耐药的阴沟肠杆菌所产ESBLs的特性进行了系统的研究。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药机制研究

目的了解阴沟肠杆菌临床分离株AmpC酶和ESBLs的产生情况并分析其耐药特性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用改良的酶提出物三维试验法对186株阴沟肠杆菌进行AmpC酶和ESBLs检测,用K-B法对14种常用抗菌药物进行药物敏感试验。结果186株阴沟肠杆菌中,产AmpC酶的菌株63株,占33．9％;产ESBI_s的菌株有28株,占15．1％;同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有18株,占9．7％。药敏结果显示,186株阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林、头孢西丁等抗菌药物的耐药率较高,对亚胺培南、舒普深的耐药率较低。结论阴沟肠杆菌已呈现出多重耐药性,其耐药机制较为复杂,可表现为阻遏高产AmpC酶、产ESBLs,也可表现为同时产AmpC酶和ESBLs等多种耐药表型。     

铜绿假单胞菌β-内酰胺类抗生素耐药基因的研究

目的调查佛山地区铜绿假单胞菌对β-内酰胺酶类抗生素的耐药情况,并研究其β-内酰胺酶编码基因的存在情况。方法用法国梅里埃ATBExpression细菌分析系统鉴定微生物分析仪进行菌种鉴定和药敏试验,采用表型确证试验确认产ESBLs的菌株。应用聚合酶链式反应（PCR）技术检测耐药基因。结果50株产ESBLs铜绿假单胞菌中9株具有AmpC酶基因（18％）,TEM和VIM-1阳性菌各6株（12％）,SHV类（SHVI、SHV2、SHV3、SHV4）阳性菌3株（6％）,CTX-M9和IMP-2阳性菌各2株（4％）,其余PER、CTX-MI、CTX-M2、VEB、IMP-1和VIM-2基因检测均为阴性。结论质粒型AmpC基因、TEM、VIM-1、SHV、CTX-M9及IMP-2基因是导致本地区临床分离的铜绿假单胞菌对β-内酰胺酶类抗生素耐药的主要原因,且呈多重耐药。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型研究

目的 了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）表型和基因型分布情况.方法 对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应（PCR）扩增分析,选部分产物测序.结果 88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs（35.2%）菌株.产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%.PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型（90.3%）,其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型.结论 我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见.     

陕西某院产β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的分析陕西中医学院第二附属医院阴沟肠杆菌的流行现状与耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2011年10月至2014年10月该院分离的142株阴沟肠杆菌,通过改良三维试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和β-内酰胺酶(AmpC),使用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验。结果 142株阴沟肠杆菌中,产ESBLs或AmpC酶共74株(52.11%),其中单产ESBLs的48株(33.80%),单产AmpC酶的18株(12.68%),同时产2种酶的8株(5.63%)。检出阴沟肠杆菌较高的科室为ICU和妇科,构成比分别为38.03%、23.94%,痰液和尿液检出菌株构成比分别为54.93%、25.35%。药敏结果显示,产ESBLs或AmpC阴沟肠杆菌对亚胺培南100.0%敏感,对其他12种抗菌药均产生不同程度的耐药。结论产ESBLs或AmpC阴沟肠杆菌对二、三代头孢菌素高度耐药,重症患者可首选碳青霉烯类药物,轻、中度患者可依据药敏结果选择头霉素类、β-内酰胺类/AmpC抑制剂,加强耐药菌株的监测,积极控制院内感染是目前控制含耐药基因菌株产生和传播的有效方法。     

阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的明确阴沟肠杆菌产头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析细菌产酶与药物耐药间的关系,指导临床合理用药。方法非重复阴沟肠杆菌共174株采用Microscan walkaway-40SI全自动细菌鉴定与药敏分析仪进行细菌鉴定及药敏试验;采用多底物协同-拮抗法(MSSAT)检测ESBLs和AmpC酶。结果 174株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶92株(52.87%),其中高诱导型25株,部分去阻遏型33株,完全去阻遏型22株;同时产AmpC酶和ESBLs 54株(31.03%);单产ESBLs 1株(0.57%);AmpC酶和ESBLs均不产有27株(15.52%);阴沟肠杆菌产酶株的耐药率明显高于不产酶株的耐药率(P0.05),同时产AmpC酶和ESBLs菌株的耐药率高于单产AmpC酶株的耐药率(P0.05);产AmpC酶和ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率均高于92.0%,对氨曲南耐药率高达88.9%,对阿米卡星耐药率较低(14.8%),对亚胺培南耐药率为0%。结论阴沟肠杆菌以产AmpC酶为主,单产ESBLs菌株少,同时产AmpC酶和ESBLs的菌株对三代头孢菌素、单环类、青霉素类具有高度耐药性,对碳青霉烯类药物敏感;碳青霉烯类抗菌药物依然是治疗多重耐药阴沟肠杆菌感染的首选。     

尿培养分离的大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测及耐药分析

目的对尿培养分离的大肠埃希菌进行AmpC酶和ESBLs检测并分析其耐药机理，以指导临床合理用药。方法采用双纸片抑制协同法分别进行AmpC酶和ESBLs检测。结果110株大肠埃希菌AmpC酶和ESBLs检测率分别为2．7％（3／110）、35．5％（39／110），同时产AmpC酶和ESBLs检测率为1．8％（2／110），产酶菌株对抗生素的耐药率高于不产酶菌株。结论大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，临床经验用药可选碳青酶烯类抗生素。