大肠癌p53抑癌基因突变与组织类型,Dukes‘分期的关系

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３０例大肠癌组织ｐ５３基因突变状况进行了检测。结果表明：３０例大肠癌ｐ５３基因的突变率为２０％（６／３０），其中１例在第４外显子，５例在第５外显子，第２、３外显子未检出突变。高分化和中等分化肠癌ｐ５３基因突变率均为１／８（１２．５％），低分化为３／１０（３０．０％），未分化为１／４（２５．０％）；在Ｄｕｋｅｓ分期中的突变率分别为：Ｂ２期为１／１０（１０．０％），Ｃ１期为２／１２（１６．７％），Ｄ期为３／８（３７．５％）。结果提示ｐ５３基因突变与Ｄｕｃｋｅｓ分期有关，且肠癌的ｐ５３基因突变很少发生在第２、３外显子     

非小细胞肺癌中p53基因突变的初步研究

为了解非小细胞肺癌中ｐ５３基因突变的情况，应用改良聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测１７例非小细胞肺癌中ｐ５３基因第５～８外显子的突变情况，有８例存在ｐ５３基因突变，突变率为４７．００％（８／１７），其中鳞癌为５５．５６％（５／９），腺癌为３７．５０％（３／８）。本研究结果表明：非小细胞肺癌中ｐ５３基因突变较为常见；改良后的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对非小细胞肺癌的基因诊断具有潜在性应用价值     

卵巢恶性肿瘤p53基因表达产物及检测p53第七外显子突变的初步分析研究

为探讨ｐ５３基因突变表达产物与卵巢恶性肿瘤临床生物学行为以及ｐ５３第七外显子突变情况之间的关系。采用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）对５０例卵巢恶性肿瘤中的２３例病人新鲜组织标本进行ｐ５３基因突变蛋白表达检测。结果显示：卵巢恶性肿瘤免疫组化ｐ５３阳性表达率２４％。２３例新鲜组织标本中４例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测第七外显子异常。提示ｐ５３阳性表达可能与遗传因素有关（Ｐ＝０．０３８）；卵巢恶性肿瘤第七外显子突变可出现ｐ５３蛋白高表达；第七外显子突变可出现于不同临床分期及组织分型     

p53和cyclin E在尖锐湿疣中的表达及意义

目的 探讨ｐ５３和ｃｙｃｌｉｎＥ蛋白的表达与ＣＡ的相互关系及在ＣＡ中ｐ５３和ｃｙｃｌｉｎＥ两者表达的相关性。方法 利用ＨＰＶ６Ｂ／１１原位杂交显示人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）证实ＣＡ,及ＳＰ法免疫组化技术检测ｐ５３和ｃｙｃｌｉｎＥ蛋白。结果ＨＰＶ６Ｂ／１１在ＣＡ中阳性率为９１．７％,ｐ５３蛋白的表达阳性率为５８．３％。与正常包皮对照组有显著性差异（Ｐ〈０．０１）,而与生殖器鳞癌组无显著性差异（Ｐ〉０．     

p53基因突变和人乳头瘤病毒感染与喉鳞癌的关系

喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤,研究表明,人乳头瘤病毒１６型、１８型（ＨＰＶ１６、１８）感染及抑癌基因ｐ５３突变都在喉癌的发生发展中起作用,但二者到底有什么关系呢？为此,我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析技术对喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ和ｐ５３基因点突变进行了检测及相关性分析。１材料与方法１．１标本收集及处理 喉鳞状细胞癌标本４０例,经病理检查确诊高分化１８例,中分化１５例,低分化７例。标本来自青岛大学医学院附属医院和青岛市市立医院。将新鲜肿瘤组织研磨均匀,…     

人乳头瘤病毒感染和p53基因突变与宫颈癌的关系

目的：探讨人乳头瘤病毒１６ 和１８ 型及抑癌基因ｐ５３ 突变对宫颈的致癌作用以及 Ｈ Ｐ Ｖ 感染与ｐ５３ 基因突变的相关性。方法：采用聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 技术和限制性酶切片段多态性分析（ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 技术对３４ 例原发性宫颈癌组织及３０ 例正常宫颈组织 Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ 型 Ｄ Ｎ Ａ 及抑癌基因ｐ５３ 的突变进行了检测。结果： Ｈ Ｐ Ｖ１６ ,１８ Ｄ Ｎ Ａ 在宫颈癌的总阳性率为６４７ ％ （２２／３４） ,正常宫颈组织只有６７ ％ 阳性,８例宫颈癌组织出现ｐ５３ 基因第６ 外显子突变,其中２ 例为 Ｈ Ｐ Ｖ１６ Ｄ Ｎ Ａ 阳性、１ 例 Ｈ Ｐ Ｖ１８ Ｄ Ｎ Ａ 阳性。结论：宫颈癌的发病与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染及ｐ５３ 基因突变有关,宫颈癌组织中ｐ５３ 基因突变与 Ｈ Ｐ Ｖ 感染无关。     

宫颈鳞癌细胞中HPV和C-erbB-2基因扩增的检测

应用ＰＣＲ和差别ＰＣＲ方法，平行检测４０例宫颈鳞癌和６例宫颈炎细胞中的ＨＰＶ感染和Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。结果宫颈鳞癌中ＨＰＶ混合型别（ＨＰＶＳ）感染阳性率为６５．０％（２６／４０），其中，ＨＰＶ１６占３７．５％（１５／４０），ＨＰＶ１８仅占５．０％（２／４０）；而宫颈炎中仅１例ＨＰＶｓ感染，两者具有显著性差异（χ２＝５．０１，Ｐ＜０．０５），所有宫颈癌和宫颈炎中均不见Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。结果表明：ＨＰＶ感染与宫颈鳞癌的发生关系密切，但与Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因扩增没有直接联系。     

肺癌支气管活检组织及痰液中p53基因突变的检测及临床应用

采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法，从分子水平探讨了ｐ５３基因突变与肺癌发生之间的关系。对４３例肺癌支气管活检组织及１０例痰液标本进行了ｐ５３基因第５～８外显子突变的检测，发现４３例中有１７例发生了ｐ５３突变，突变率为３９．５％（１７／４３），其中鳞癌为３０．８％（４／１３），腺癌为３５．３％（６／１７），小细胞癌为５８．３％（７／１２），大细胞癌为０％（０／１）。本文对同一患者的痰液标本检测结果与组织标本中ｐ５３基因突变检出率一致，均为３０．０％（３／１０）。采用χ２检验表明，ｐ５３突变在性别构成、临床分期、组织类型及淋巴结转移等方面两组均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。但吸烟组ｐ５３突变率（５３．８％）明显高于非吸烟组（１７．６％）；低中分化组ｐ５３突变率（５１．７％）明显高于高分化组（１４．３％），提示ｐ５３基因突变与吸烟及细胞的分化程度存在相关性（Ｐ＜０．０５）。     

食管鳞癌人乳头瘤病毒DNA的检测研究

目的：对新疆食管鳞状细胞癌中进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ检测。方法：采用多重引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术。结果：新疆５个地区４个民族１０４例食管鳞癌中ＨＰＶＤＮＡ阳性者占５０．９６％（５３／１０４），其中ＨＰＶ１６型为４９．０６％（２６／５３），ＨＰＶ１８型５．６％（３／５３），ＨＰＶ６／１１型７．５％（４／５３）；１６型和１８型同时阳性者２０．７５％（１１／５３），１８型和６／１１型１１．３２％（６／５３），１６型、１８型和６／１１型三者同时阳性５．７％（３／５３）；两个或三个类型的混合感染占３７．７％（２０／５３）。５个地区的食管鳞癌中均有不同程度的ＨＰＶＤＮＡ感染，４个民族中以哈萨克族食鳞癌ＨＰＶ感染率较高（８０．４８％）。结论：新疆地区食管鳞状细胞癌中ＨＰＶ有较高的感染率，以１６型为主，伴随与其它类型的混合感染，哈萨克族食管癌的发生发展与ＨＰＶ具有密切关系。     

乳腺癌p53基因突变规律及其预后意义

目的 探讨ｐ５３基因突变在乳腺癌发生发展中的演变规律及其与预后的关系。方法 应用ＰＣＲ－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析方法检测５５例原发性乳腺癌患者ｐ５３基因５～８外显子的突变情况。结果 ｐ５３基因突变发生的频率为３６．４％（２０／５５）,Ｉ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌中ｐ５３基因突变阳性率分别为４７．２％（１７／３６）和１５．８％（３／１９）,而且突变多发生在５～６外显子。突变阳性患者其无病生     

非小细胞肺癌p53基因突变检测及临床病理分析

目的　探讨ｐ５３基因点突变在非小细胞肺癌中的发生情况及临床病理联系。方法　运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性分析方法（ＳＳＣＰ）检测原发性非小细胞肺癌的ｐ５３ 基因第５－８外显子点突变。结果　８例良性肿瘤均无点突变发生,４０ 例肺癌中１９例（４７．５％ ）有点突变发生,点突变发生与临床分期和淋巴结累及程度明显相关（Ｐ＜ ０．０２）。结论　ｐ５３基因点突变在非小细胞肺癌的发生和进展中起着相当重要的作用。     

人脑胶质瘤与SV40的关系及其p53、RB蛋白的表达

目的：探讨人脑胶质瘤与猴病毒４０（ＳＶ４０）的关系及其ｐ５３和ＲＢ蛋白的表达。方法：采用核酸原位杂交和免疫组织化学技术对２５６例人脑胶质瘤和１１例正常脑组织进行了ＳＶ４０ ＤＮＡ和抑癌基因产物ｐ５３、ＲＢ蛋白检测。结果：胶质瘤ＳＶ４０阳性１０４例,阳性率４０．６％,正常脑组织均未检测出ＳＶ４０ ＤＮＡ,未发现ＳＶ４０感染与胶质瘤病理分级存在明显相关（Ｐ〉０．０５）;ＳＶ４０阳性胶质瘤ｐ５３、ＲＢ蛋     

食管鳞状上皮细胞癌中P53基因突变的PCR—SSCP检测

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了４０例食管鳞状细胞癌Ｐ５３基因第５、６、７和第８外显子的突变情况。结果显示：１３例（３２．５％）有Ｐ５３基因突变，突变主要发生在第５和第８外显子，与癌分化程度无明显关系，但伴淋巴结癌转移病例中的Ｐ５３基因的突变频率明显高无转移者（Ｐ〈０．０５）。本研究提示，Ｐ５３基因突变存在于中，晚期食管癌中，并可能与食管鳞癌的进展与转移有关。     

原发性肝细胞癌组织中乙肝病毒整合与p53基因突变关系研究

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法检测１５例原发性肝细胞癌及癌旁组织乙肝病毒（ＨＢＶ）存在状态，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（Ｐｏｌｙ－ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ－ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）银染技术研究其ｐ５３基因突变。结果癌组织中１３例（８６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，同时３例伴游离ＨＢＶＤＮＡ；癌旁４例（２６．７％）有ＨＢＶＤＮＡ整合，而游离的ＨＢＶＤＮＡ却有６例。癌组织中ｐ５３基因变异８例（５３．３％），１例位于第５外显子，各有２例位于第６、第７外显子，３例位于第８外显子，癌旁组织未见ｐ５３基因异常，ｐ５３基因异常的癌组织中均有ＨＢＶＤＮＡ整合。研究结果表明，ＨＢＶＤＮＡ整合与ｐ５３基因突变密切相关，ＨＢＶＤＮＡ可能通过整合基因组后导致抑癌基因突变失去抑癌作用而引发肝癌。     

鼻咽癌中p53基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同位素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子突变，而ＨＫ１为第５外显子突变。ＤＮＡ测序发现ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１的突变点在ｅｘｏｎ８的密码子（ｃｏｄｏｎ）２８０上，由ＡＧＡ（精氨酸）→ＡＣＡ（苏氨酸）。结论：ｐ５３基因突变热点的ｅｘｏｎ５、６、７和８可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义，而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。ＥＢＶ由于和鼻咽癌的关系密切，在鼻咽癌中可能存在ＥＢＶ编码蛋白与ｐ５３结合或蛋白表达被ＥＢＶ抑制等其他途径使ｐ５３失活。     

卵巢恶性肿瘤p53基因表达产物及检测p53第七外显子突变的初步 …

为探讨ｐ５３基因突变表达产物与卵巢恶性肿瘤临床生物学行为以及ｐ５３第七外显子突变情况之间的关系，采用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）对５０例卵巢恶性肿瘤中的２３例病人新鲜组织标本进行了ｐ５３基因突变蛋白表达检测，结果显示：卵巢恶性肿瘤免疫组化ｐ５３阳性表达率２４％，２３例新鲜组织标本中４例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测第七外显子异常。提示ｐ５３阳性表达可能与遗传因素有关（Ｐ＝０．０３８），     

大肠癌的p53基因点突变

作者以改良的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ的ＰＣＲ直接测序方法，分析了２２例大肠癌原发灶和１例转移淋巴结组织中ｐ５３基因第七外显子的基因结构变化。发现２７％（６／２２）大肠癌原发灶和检测的１例转移淋巴结中存在ｐ５３基因第七外显子点突变，突变位点分别为２４５、２５１、２５９和２６０密码子。５０％点突变是２４５密码子中碱基Ｇ∶Ｃ向Ａ∶Ｔ转换，其它突变形式是碱基插入和碱基缺失。本研究ｐ５３点突变阳性标本均为结肠癌，其中低分化腺癌突变率高于高、中分化腺癌（Ｐ＝０．０１７８），ＤｕｋｅｓＣ１期突变率高于ＤｕｋｅｓＡ２、Ｂ期（Ｐ＝０．０３６１）。此结果提示，临床检测大肠癌原发灶和转移淋巴结中是否存在ｐ５３基因第七外显子突变，可有助于识别高度恶性的大肠癌和判断大肠癌病员的预后。     

p53基因点突变与肝细胞癌侵袭性的关系

研究了Ｌ０２人肝细胞株、Ｂｅ１７４０２、ＳＭＭＣ７７２１人肝癌细胞株和１９例肝细胞癌标本及其癌周肝组织中ｐ５３基因第２４９密码子点突变的发生率及其与肝细胞癌侵袭性的关系。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增从细胞株、癌及非癌肝组织中提取的ＤＮＡ中的ｐ５３基因第７外显子，结合ＨａｅⅢ酶切研究ｐ５３基因点突变发现３种细胞株（ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性）中ｐ５３均无突变，１９例癌组织（８４．２％ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性）中，１０例有ｐ５３点突变（５２．６％），其中包膜不完整、有肝内播散或多发结节者ｐ５３突变率明显高于包膜完整（７０％ｖｓ３３．３％，Ｐ＜０．０５）、无肝内播散（７１．４％ｖｓ４１．６％，Ｐ＜０．０５）或单发结节者（８３．３％ｖｓ３８．５％，Ｐ＜０．０５）；而其癌周肝组织则均无突变。提示：第２４９密码子是中国大陆人肝癌ｐ５３基因的突变热点，可能与ＨＢＶ感染有关。ｐ５３突变可能与肝癌的侵袭性密切相关，可望成为防治肝癌复发的较理想的靶基因。     

p53基因突变与人非小细胞肺癌临床病理生理分析

目的 探讨ｐ５３基因点突变与人非小细胞肺癌临床生理特征的联系。方法 应用聚合酶反应－单链构象多态性分析方法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ０检测原发性非小细胞肺癌癌组织的ｐ５３基因第５～８外显子点突变。结果 ４０例肺癌组织中１９例（４７．５％）有点突变发生,８例良性肿瘤组织均无ｐ５３基因点突变发生,点突变发生与病理分期和淋巴结转移有明显关系（Ｐ〈０．０２５）,结论ｐ基因估变在非小细胞肺癌的发生和进展中可能起重要作用。     

肝癌非高发区安徽省肝细胞癌p53基因249密码子点突变的研究

目的：研究ｐ５３基因２４９密码子在肝癌非高发区安徽省的点突变的发生率。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术肝细胞癌ｐ５３基因２４９密码子突变的频率。结果：所检测的３８例肝细胞癌均无出现ｐ５３基因第七外显子纯合性缺失,４例有ｐ５３基因２４９密码子的点突变,且均为杂合型突变,突变率为１０．５％（４／３８）。结论：本资料说明,在肝细胞癌非高发区中,肝细胞癌中ｐ５３基因第七外显子发生的点突变并非为高发事件。提示