硫代乙酰胺致大鼠肝性脑病模型的量-效关系

目的 :探讨不同剂量硫代乙酰胺 (TAA)致大鼠肝性脑病 /轻微型肝性脑病 (HE/MHE)的量 -效关系。方法 :设立 3个TAA剂量组 ,分别以 2 0 0、2 5 0、35 0mg/(kg·d)剂量的TAA隔日行腹腔内注射 ,共 2次 ,建立不同剂量TAA致大鼠肝性脑病的动物模型 ,1d后进行检测脑干听觉诱发电位 (BAEP)和门静脉血浆内毒素 ,血氨 ,肝功能 ,肝脏病理等指标。结果 :不同剂量TAA组的大鼠在HE/MHE发生率 ,肝性脑病分级评分 ,内毒素 ,血氨 ,肝功能和肝脏病理变化等方面均差异显著 (P <0 .0 5 ) ,TAA剂量越大 ,内毒素和血氨水平越高 ,肝功能损害和肝脏病理变化越明显 ,HE/MHE发生率和肝性脑病分级评分越高 ,存在明显的量 -效关系。结论 :TAA致大鼠肝性脑病模型具有显著的量效关系 ,其中 2 0 0mg/(kg·d)剂量TAA为制备MHE模型的适宜剂量。     

加味桃核承气汤对肝纤维化大鼠TGF-β1蛋白表达的影响

[目的]观察加味桃核承气汤对四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达的影响。[方法]用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,研究分组为正常对照组、模型对照组、加味桃核承气汤高、中、低剂量治疗组和秋水仙碱对照组;灌胃给药,疗程8周;用免疫组化技术检测肝组织TGF-β1的蛋白表达;检测血清ALT、AST水平;用苦味酸-天狼红胶原染色方法进行半定量肝纤维化计分(SSS)。[结果]高、中、低剂量组及秋水仙碱组的TGF-β1的表达水平均低于模型对照组;经加味桃核承气汤治疗后血清ALT、AST水平及肝纤维化SSS计分显著下降。[结论]加味桃核承气汤可抑制肝纤维化大鼠TGF-β1的表达,达到抗肝纤维化作用。     

肝性脑病大鼠肝和脑组织一氧化氮及一氧化氮合酶的研究

目的:探讨一氧化氮(NO)与肝性脑病(HE)的关系。方法:用硫代乙酰胺(TAA)制造大鼠HE模型,35只大鼠随机分为2组,HE模型组25只,正常对照组10只。HE模型组第1天均腹腔注射TAA300mg·kg-1,第2～4天,每日分别注射TAA150mg·kg-1,直至出现HE症状。正常组每日注射等量生理盐水。采用分光光度法测定两组大脑、小脑、肝组织中NO含量和一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:HE模型组大脑、小脑、肝组织中NO含量与正常组比较明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01);NOS活性与正常组比较明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05,P<0.01);HE模型组大脑、小脑、肝组织中NO含量与NOS活性呈正相关(r=0.7284,r=0.8220,r=0.7010;P<0.001)。结论:NO可能是肝性脑病的重要影响因素之一。     

依布硒啉对肝性脑病大鼠的保护作用

目的  探讨依布硒啉对肝性脑病(HE)大鼠的保护作用并探讨其机制。方法  Wistar大鼠随机分为4组：空白对照组(Ⅰ),HE模型组(Ⅱ),依布硒啉处理组(Ⅲ)和溶剂对照组(Ⅳ)。用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射,建立Ⅱ期HE模型后分别给予生理盐水、依布硒啉和二甲基亚砜(DMSO)灌胃1周。检测各组血清3-硝基酪氨酸(3 NT)、谷丙转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;观察肝脏的病理改变。结果  Ⅲ组大鼠HE症状较Ⅱ组和Ⅳ组进展缓慢;Ⅲ组与Ⅱ组、Ⅳ组比较各血清指标差异均有统计学意义(P<0.05),与Ⅰ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论  依布硒啉对TAA诱导的HE大鼠有一定的保护作用,可减缓HE的发展。其机制可能与依布硒啉能够清除体内过氧亚硝酸阴离子且阻止酪氨酸硝基化有关     

桃核承气汤改善四氯化碳诱导的大鼠肝损伤

目的：探讨桃核承气汤对四氯化碳诱导的大鼠肝损伤的保护作用。方法：30只大鼠分为正常对照组,模型组,大、小剂量桃核承气汤组和水飞蓟素组。桃核承气汤组灌胃桃核承气汤（0．3g／kg或0．5g／kg）,水飞蓟素组灌胃水飞蓟素25mg／kg。灌胃后1h腹腔注射四氯化碳1．5mL／kg。注射24h后将大鼠处死,检测肝组织病理学改变,血液中天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate amino transferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）活性及脂质过氧化程度。结果：桃核承气汤不仅明显降低血液中AST及ALT活性,抑制四氯化碳引起的肝脏脂质过氧化,并且增加肝脏中谷胱甘肽含量;组织病理分析发现桃核承气汤可抑制脂质堆积,肝细胞坏死及淋巴细胞浸润。结论：桃核承气汤具有类抗氧化物之作用,对肝损伤有保护作用,甚至功能优于水飞蓟素。     

急性肝性脑病大鼠脑水肿与脑水通道蛋白-4的相关性

目的 探讨水通道蛋白-4(AQP4)在急性肝衰竭肝性脑病与脑水肿的相关性。方法 采用硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射制备急性肝衰竭肝性脑病大鼠模型。将健康雄性SD大鼠随机分为对照组8只和模型组24只,其中模型组根据造模后处死大鼠时间不同,分为24、48、60h组。观察大鼠一般情况,评估HE等级,测定血浆丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素和血氨,观察肝组织病理学,检测脑含水量和脑组织AQP4（包括蛋白和mRNA）表达水平。结果 模型组大鼠表现出典型肝性脑病症状,随着造模后观察时间延长,HE等级进行性升高,肝脏生化和血氨水平较对照组显著升高(P＜0.05),肝组织病理变化与对照组差异有统计学意义。脑含水量和AQP4表达水平（包括蛋白和mRNA）明显高于对照组(P＜0.05),并且AQP4蛋白和mRNA表达水平分别与脑含水量呈正相关(r =0.536,P＜0.01;r=0.566,P=0.01)。结论 急性肝衰竭肝性脑病大鼠脑水通道蛋白-4(AQP4)表达与脑水肿密切相关,因此AQP4是急性肝衰竭肝性脑病脑水肿发生发展的重要分子机制之一。     

四氯化碳诱导大鼠肝性脑病模型的制备

目的 建立肝性脑病(HE)动物模型.方法 应用四氯化碳联合酒精自饮法制作慢性肝功能衰竭引起HE发生的模型,进行迷宫试验、脑电图、血液生化、形态学、行为活动观察等检测.结果 1.肉眼下可见模型组肝脏普遍肿大,表面较粗糙,有较粗的颗粒,暗红色;正常组肝脏未见异常.模型组肝内有大量纤维增生,肝细胞溶解,弥漫性大片坏死,残留肝细胞成片气球样变.2.与对照组大鼠比较,造模组第九周水迷宫测试逃避潜伏期明显延长,以潜伏期延长超过正常x+2.5 s为标准,本实验有14/20(55％)只大鼠水迷宫潜伏期明显延长;3.HE模型组血氨浓度明显高于正常对照组,组间比较差异有显著性(P＜0.01);4.正常组脑电图以α波为主,无明显异常;模型组出现肝性脑病变化.结论 1.建立了肝硬化合并肝性脑病较为理想的动物模型;2.水迷宫测试联合检测更易检出HE.     

加减桃核承气汤防治雷公藤多苷致雌性大鼠性腺抑制的研究

目的:探索应用加减桃核承气汤防治雷公藤多苷致雌性大鼠性腺抑制的可行性。方法:健康8 w龄从未妊娠的雌性SD大鼠51只,随机分成正常对照组、模型组、西药组各10只,加减桃核承气汤高、中、低剂量组各7只。灌胃给药10 w,检测大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)的含量。结果:加减桃核承气汤各剂量组血清E2、P含量高于模型组(P0.05),LH、FSH含量低于模型组(P0.05),有剂量依赖性;加减桃核承气汤高剂量组血清E2、P含量高于西药组(P0.05),LH、FSH含量低于西药组(P0.05)。结论:加减桃核承气汤能防治予雷公藤多苷致雌性大鼠性腺抑制,且高剂量时对性腺的保护作用优于西药利维爱片。     

肝性脑病动物模型的鉴定指标分析

目的:通过对慢性肝功能衰竭引起肝性脑病(hepat-ic encephalopathy,HE)发生模型的多指标观察和分析,寻找理想的HE模型的特征指标。方法:应用四氯化碳联合内毒素法制作慢性肝功能衰竭引起HE发生的模型,进行行为活动观察,血液生化、形态学、迷宫试验等检测。结果:模型组大鼠在造模过程中先后有67%(10/15)的动物死亡,出现呆滞、步态蹒跚、疼痛反应迟钝甚至消失等神经系统功能异常表现,并伴有血氨升高趋势,总胆红素、直接胆红素、γ-谷氨酰转肽酶升高(P<0.05),血浆蛋白、钙、钠和氯显著降低(P<0.01)。电镜检查显示模型组大鼠肝脏有纤维化性变化,海马脑片的神经元有趋向死亡性变化。完成造模的模型组大鼠与对照组相比,迷宫实验的测试结果没有显著性差异。结论:用四氯化碳联合内毒素法制作的慢性肝功能衰竭引起HE发生的模型,行为变化明确,但其他检测指标具有多样性和复杂性,需做进一步的综合性分析。     

复方中药预防和治疗肝硬化大鼠亚临床肝性脑病实验研究

目的观察复方中药对内毒素诱导的肝硬化大鼠亚临床肝性脑病的预防和治疗作用并初步探讨其作用机制。方法采用皮下注射40?l4橄榄油溶液建立大鼠肝硬化模型,应用小剂量内毒素尾静脉注射诱导亚临床型肝性脑病。以复方中药低、中、高剂量为治疗组,乳果糖为对照组,观察对肝硬化大鼠的SHE的发生率、大鼠的肝功能、血氨(BA)、内毒素、肝组织病理炎症活动度等的影响。结果复方中药低、中、高剂量组对上述指标均有不同程度的改善,其中中、高剂量组对大鼠的肝功能、血氨、内毒素、肝组织病理炎症活动度等改善优于乳果糖组。结论由虎杖、生山楂、酸枣仁、蒲公英、石菖蒲等组成的复方中药对亚临床肝性脑病有显著的预防和治疗作用,其机制可能为:①改善肝功能情况,减轻肝脏炎症活动;②抑制肠道对氨类物质的吸收,降低血氨水平;③降低机体对内毒素的敏感性。     

肝性脑病大鼠肝及脑组织蛋白质硝基化和细胞凋亡的研究

目的 探讨肝性脑病（HE）大鼠肝脏及脑组织中的蛋白质硝基化和细胞凋亡与HE发病的关系。方法 雄性Wistar大鼠随机分为HE组和空白对照组。HE组用硫代乙酰胺（TAA）制造大鼠HE模型。采用链霉亲和素-生物素-酶复合物（SABC）免疫组化法检测肝脏和脑组织硝基化蛋白质和一氧化氮合酶（NOS）;用原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法（TUNEL）检测细胞凋亡,并计算凋亡指数;空白对照组大鼠用生理盐水做平行对照。结果 HE组大鼠肝脏和脑组织中检测到明显的硝基化蛋白质沉积,而对照组少见;HE组大鼠肝脏和脑组织中检测到NOS的表达,对照组甚少;HE组大鼠肝脏和脑组织细胞凋亡指数较对照组明显增高（P<0.01）。结论 HE与其肝脏和脑组织蛋白质硝基化关系密切。     

四物汤干预减轻乙醇对小鼠肝脏的损伤作用

目的通过四物汤对小鼠酒精性肝损伤的干预效果的研究,阐明其对乙醇损伤肝脏的影响,为四物汤临床防治酒精性肝病提供实验数据。方法选择60只C57小鼠,随机分为对照组、模型组和四物汤低、中、高剂量(0.91、1.82、3.64 g/kg/d)组,每组12只,用50%乙醇灌胃建立酒精性脂肪肝模型,同时用四物汤进行干预。实验6周后,对各组小鼠的体质量、肝指数、血清生化指标和肝脏病理学改变进行综合对比分析。结果四物汤各剂量组小鼠与模型组相比其体重增长量均显著增加(P<0.05),肝指数明显降低(P<0.05),血清ALT、AST和TG含量(P<0.05)均显著降低。四物汤从低到高剂量组的肝脏外观从粗糙逐渐变光滑,颜色逐渐加深。病理结果也显示肝脏脂肪变随着剂量从低到高呈递减的程度,而高剂量组小鼠的脂肪变改善效果最显著。结论四物汤对小鼠酒精性肝损伤具有一定的保护作用。     

桃核承气汤联合肠梗阻导管治疗粘连性肠梗阻临床研究

目的:观察桃核承气汤联合肠梗阻导管治疗粘连性肠梗阻的临床疗效。方法:将62例粘连性肠梗阻患者按随机数字表法分为A组、B组,每组各21例,C组20例。三组患者均采用西医保守治疗,A组加用桃核承气汤[桃仁15 g,桂枝9 g,生大黄(后下)15 g,甘草6 g,芒硝(冲)6 g]联合肠梗阻导管治疗;B组采用肠梗阻导管减压法治疗;C组采用鼻胃管减压法治疗。观察两组患者临床疗效,腹痛腹胀消失时间,中转手术比率,以及白细胞计数、C反应蛋白(C-reactionprotein,CRP)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平。结果:治疗后A组患者腹痛、腹胀等临床症状缓解迅速,中转手术比率下降,在治疗第5天起白细胞计数、CRP、TNF-α水平显著下降,与B组、C组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:桃核承气汤联合肠梗阻导管治疗粘连性肠梗阻临床疗效显著。     

胆总管内注射无水乙醇致胆道闭锁动物模型的建立

目的 应用胆总管内注射无水乙醇建立SD大鼠胆道闭锁模型. 方法 将SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组,在实验组中经静脉留置针插入胆总管注入无水乙醇,对照组注入生理盐水.观察SD大鼠的生化及病理结果. 结果 在实验组中SD大鼠根据病理及生化检测分为肝功能持续恶化组和肝功能修复组,肝功能持续恶化组在8周以后生化明显高于对照组及肝功能修复组.常规HE染色及SMA、Masson染色也出现明显变化.结论 胆总管无水乙醇注射诱导胆道闭锁模型是一种可靠的动物模型,此动物模型会帮助人们进一步研究胆道闭锁提供更多的研究手段.     

脂多糖受体CD14在急性脑出血应激性肝损害中的作用及星蒌承气汤的效应研究

目的研究白细胞分化抗原14(CD14)在急性脑出血应激性肝损害内毒素信号转导通路中的作用以及星蒌承气汤的靶向调控机制。方法采用大脑注射Ⅶ型胶原酶法建立SD大鼠急性脑出血模型,随机分为正常组、脑出血组、脑出血痰热腑实证组、星蒌承气汤组,造模后24、48、72 h实时荧光定量PCR观察肝组织CD14 mRNA表达,并观察肝组织HE染色结果。结果脑出血急性期肝组织CD14 mRNA表达升高,星蒌承气汤能降低急性脑出血痰热腑实证肝组织CD14 mRNA表达,并能明显减轻肝组织病理损伤。结论 CD14在介导内毒素性肝损伤中起重要作用,星蒌承气汤对脑出血急性期痰热腑实证肝脏具有一定的保护作用。     

Hepcidin-orchestrated Hemogram and Iron Homeostatic Patterns in Two Models of Subchronic Hepatic injury

Objective This study was designed to evaluate hematological disorders and the orchestrating roles of hepcidin and IL-6 in rat models of thioacetamide(TAA) and carbon tetrachloride(CCl_4) hepatotoxicity. Methods Rats were intraperitoneally injected with TAA(10 mg/100 g rat weight dissolved in isosaline) or CCl_4(100 μL/100 g rat weight diluted as 1:4 in corn oil) twice weekly for eight consecutive weeks to induce subchronic liver fibrosis. Blood and tissue samples were collected and analyzed. Results CCl_4 but not TAA significantly decreased the RBCs, Hb, PCV, and MCV values with minimal alterations in other erythrocytic indices. Both hepatotoxins showed leukocytosis, granulocytosis, and thrombocytopenia. By the end of the experiment, the erythropoietin level increased in the CCl_4 model. The serum iron, UIBC, TIBC, transferrin saturation%, and serum transferrin concentration values significantly decreased, whereas that of ferritin increased in the CCl_4 model. TAA increased the iron parameters toward iron overload. RT-PCR analysis revealed increased expression of hepatic hepcidin and IL-6 m RNAs in the CCl_4 model and suppressed hepcidin expression without significant effect on IL-6 in the TAA model. Conclusion These data suggest differences driven by hepcidin and IL-6 expression between CCl_4 and TAA liver fibrosis models and are of clinical importance for diagnosis and therapeutics of liver diseases.     

马大正应用攻下法治疗盆腔结缔组织炎的经验介绍

[目的]总结马大正应用攻下法治疗盆腔结缔组织炎(Pelvic connective histitis,PCH)的辨证特点和选方经验。[方法]分析马大正对盆腔结缔组织炎病因病机及诊断要点的认识,阐述攻下法在临床应用中的理论依据,分析桃核承气汤组成、方义及功用,并附典型临床案例佐证。[结果]马大正认为寒、湿、瘀、热等邪毒留滞胞宫是盆腔结缔组织炎的重要病因病机,其诊断要点在于腰骶部疼痛,且妇科三合诊触摸到两侧子宫骶骨韧带时有痛感。临床治疗采用破血、下瘀、泻热之攻下法,以桃核承气汤为根本,包括桃仁、大黄、炙甘草、桂枝、芒硝等药,取桃仁活血破瘀及大黄下瘀泻热之力,配伍芒硝泻热软坚、桂枝通行血脉,使邪有出路,而诸症自平。所附临床案例病因在于气血瘀滞局部,初诊时伴素体寒凉,故治疗时兼顾温通活血、下瘀行气,取桃核承气汤加红藤、蒲公英、升麻等药,使寒凉得解后遵循月经周期继予攻下之法,病症随局部气血复通而消失。[结论]马大正运用攻下法治疗盆腔结缔组织炎的临床经验,值得学习效法。