IFCC参考方法对两种常规检测系统ALP结果正确度的验证

目的评价常规检测系统测定血清碱性磷酸酶(ALP)的正确度。方法以国际临床化学联合会(IFCC)参考方法和两种常规检测系统(简称A法、B法)同时测定20份新鲜单人份血清样品。按美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件评价两种常规检测系统测定结果的正确度,并用改良Bland-Altman图形分析法进行验证,评价常规检测系统与参考方法测定结果的一致性,综合判断常规检测系统的测定结果。按CLSI EP14-A2文件评价A、B两种方法校准品的基质效应。结果 A法、B法与IFCC参考方法测定结果的直线回归方程分别为YA=0.982 9XIFCC+0.010 8,YB=0.938 3XIFCC+0.012 9,平均偏倚分别为-1.1%、-5.5%。A法和B法检测结果的相关方程为YB=0.955 2XA+0.001 36,R2=0.997 6。A法和B法的校准品均存在基质效应,其中A法校准品的基质效应更明显。结论 A法与IFCC参考方法正确度性能一致,B法与IFCC参考方法正确度性能不一致。     

8个临床检测系统检测α-淀粉酶与参考测量程序的比对分析

目的观察不同临床检测系统与参考测量程序测定α-淀粉酶(Amy)的可比性。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件,用8个临床检测系统与参考测量程序分别测定患者血清、国际和国内实验室间比对样本、商用校准品及质控品的Amy活性水平,并进行比对。以卫生部临床检验中心室间质评Amy允许总误差的1/2为标准,评价临床检测系统检测血清Amy结果的临床可接受性。结果 8个临床检测系统(依次编号为Y1～Y8)与参考测量程序(X)测定血清样本的相关性方程分别为Y1=0.934 7X-2.375 0、Y2=0.801 6X+13.901 4、Y3=1.139 7X+13.979 5、Y4=0.829 3X+0.702 4、Y5=0.830 6X+5.826 9、Y6=0.791 0X+12.195 8、Y7=0.728 4X-0.826 5、Y8=0.721 9X+44.318 0。其中,Y1、Y2、Y5、Y6系统检测患者血清Amy结果为临床可接受,而Y4、Y7系统经参考测量程序赋值新鲜血清校准后检测结果为临床可接受。结论用参考测量程序赋值的新鲜血清对临床检测系统进行校准可提高不同检测系统间检测Amy的可比性;建立参考测量程序是保证不同检测系统间Amy检测结果可比性的关键。     

血清葡萄糖参考方法的复现及一种避免校准品基质效应的赋值方法

目的 根据国际医学检验溯源联合委员会(JCTLM)公布的血清葡萄糖参考测量程序复现血清葡萄糖参考方法,研究不具备互换性的水溶液校准品作为工作校准品时的赋值方法,以此实现对常规测量方法的量值传递。方法 通过测定2022年RELA-A、B及有证参考物质SRM965b Level1～4对参考方法的精密度和正确度进行评估。首先,将参考方法测定样本浓度值与常规方法测定样本的信号拟合成直线方程。再把常规方法测定工作校准品的信号值代入方程中计算出工作校准品的浓度,并以样本比对的方式对工作校准品的赋值进行验证。结果 葡萄糖标准曲线方程为：Y=0.049 63X+0.047 93,R²=1.000 0;测量样本的不精密度(CV)小于1.5%;测量SRM965b Level1～4偏倚均在±1.5%内;参考方法测定样本的浓度值与常规方法测定样本的信号值拟合方程为Y=500.74X-82.328,R²=0.999。校准后的常规方法与参考方法同时测定49例样本,回归方程为Y=0.994 5X+0.023,R²=0.999 5。结论 复现了血清葡萄...     

基于液相色谱串联质谱技术对血清同型半胱氨酸常规检测系统的正确度评价

目的以同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)为比对方法,评价酶循环法测定血清同型半胱氨酸(Hcy)的正确度。方法采用ID-LC/MS/MS和酶循环法同时检测20份新鲜单人份血清中的Hcy浓度,对测定结果进行方法学比对和评价。采用ID-LC/MS/MS和酶循环法同时测定5个水平的工作校准品,根据比对结果调整酶循环法校准品值,直至酶循环法的测定结果与比对方法的测定结果一致。结果采用ID-LC/MS/MS检测SRM 1950标准物质,测定结果与证书标示值一致,相对偏移1.0%。酶循环法与ID-LC/MS/MS的线性拟合方程为Y=1.204 1X+0.364 6(r~2=0.987 9),平均偏移为24.0%。调整后的酶循环法与ID-LC/MS/MS的线性拟合方程为Y=0.988 6X+0.260 3(r~2=0.999 7),平均偏移为-0.09%。结论 ID-LC/MS/MS能准确测定血清Hcy水平,或许可作为Hcy常规检测系统正确度评价的比对方法。     

Jaffe速率法、电极法和酶法测定肌酐结果的比较

目的分析Jaffe速率法、电极法和酶法测定血清肌酐的结果是否一致,为实验室评估提供依据。方法按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件进行评估,将测定结果进行相关回归分析,计算三种方法间的偏倚。结果酶法和Jaffe速率法相关系数r12=0.999,回归方程为Y1=1.008X 15.600。酶法和电极法相关系数r22=0.992,回归方程为Y2=1.010X 6.500。酶法和Jaffe速率法、电极法各有明显恒定偏倚。结论必须对方法原理不同的肌酐测定方法建立不同参考范围,同一实验室采用不同方法,建议以酶法为基准。     

用患者样本进行方法学对比及在两种葡萄糖测定法中的应用

目的 用患者样本分析葡萄糖氧化酶-氧电极法(简称电极法)和己糖激酶(HK)法测定血清葡萄糖(GLU)时的偏倚。方法 依据美国临床实验室标准化委员舍(NCCLS)EP9—A文件，每天取患者样本8份，分别用两种方法测定血清葡萄糖含量，共测定5d，记录检验结果，去除离群点，计算线性方程和相关系数，并进行偏倚估计。结果 在进行患者葡萄糖测定时，电极法(Y)和HK法(X)测定结果的回归方程为：Y＝0．9857X 0．08967，r^2=0．9992；电极法和HK法测定结果的预期相对偏倚在GLU＝15mmo1／L时为0．80％，GLU＝9mmo1／L时为0．44％，GLU＝6mmo1／L时为0．00％，GLU＝3mmo1／L时为1．67％。结论 电极法和HK法测定血清葡萄糖时，测定结果在低浓度时偏倚较大，在中、高浓度时偏倚较小，两法间有良好的相关性。     

化学法、离子选择电极法检测血清钙方法的比较

对日立7080全自动分析仪化学法和ISM-972电解质分析仪离子选择电极法，依据美国国家临床实验窄杯准化委员会EP9-A2文件，每天选择临床标本8份，分别用2种方法测定标本Ca^＋＋含量，共测定5d，记录检验结果，检查相关系数（r），并对其进行评估。结果化学法与离子选择电极法测定Ca^＋＋r为0.838，两者比较相关性较好，结果无显著性差异。化学浊和离子选择电极法检测血清Ca^＋＋结果基本一致，离子选择电极法速度快，适用于急诊检验，化学法较稳定，适合大批量常规检验。     

EDTA-K2抗凝剂对干式法检测ALT的基质效应分析

目的观察EDTA-K2抗凝剂对罗氏干式法检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)的基质效应。方法罗氏Cobas P800全自动生化分析仪、罗氏Cobas ALT测定试剂盒、罗氏Cobas校准品及质控品组合为比较的检测系统(X),Reflotron快速干式生化分析仪、配套ALT检测试纸及质控条组合为待评价的检测系统(Y),分别对新鲜血清样品和EDTA-K2抗凝血浆进行ALT比对检测,参考EP14-A文件介绍的方法,对新鲜血清样品的结果做直线回归分析,绘出估计值(Y)的95%预期区间,用于观察EDTA-K2抗凝血是否存在基质效应。结果 EDTA-K2抗凝血浆的部分对比点在新鲜血清对比点估计值的95%可信区间以外,结果呈线性偏差。结论 EDTA-K2抗凝剂对罗氏干式法检测ALT引入的基质效应,浓度越高,基质效应越明显。     

常规方法检测血清总胆红素的正确度评价

目的探讨并比较常规方法检测血清总胆红素(T-Bil)的正确度的评价方法。方法参照CLSI EP15-A2文件,用常规方法测定有证参考物质、国际参考实验室室间比对计划(RELA)样本、卫生部临床检验中心室间质评样本T-Bil水平,用BioRad Unity实验室室间质评数据分析本实验室与对等组和方法组间的偏移及标准差指数(SDI),与参考方法比对等方案评估常规测量T-Bil的正确度。结果 NIST SRM 909b参考物质、2010～2011年RELA样本、2012年卫生部临检中心第1次室间质评样本测定结果均在可接受范围内。2012年1～6月Unity实验室间质评数据结果偏移及SDI指数均满足要求。与参考方法比对结果相关性好(Y=1.129 9X-5.734 3,r=0.999 8),小于300μmol/L时,偏移可接受;大于300μmol/L时,偏移较大(10%～13%),不可接受。用去离子水稀释5倍使其浓度约达到50～100μmol/L后重测,偏移可接受,满足临床需要。结论 "单点浓度"的正确度评价具有局限性,临床实验室应分析全测量范围内的正确度情况,与参考方法比对是实现常规测量正确度评价的有效方法之一。     

总蛋白改良参考方法的建立及其用于临床检测结果的溯源性研究

目的建立测量总蛋白(TP)参考方法,评价不同实验室TP测定结果的溯源性。方法参照美国疾病控制与预防中心推荐的参考方法及相关文件,建立37℃温浴10min的总蛋白参考方法。根据美国临床实验室标准化协会系列文件对方法的精密度、正确度、线性范围等性能进行评价。应用该参考方法对新鲜血清进行赋值作为校准品校准广州21家实验室,比较校准前、后赋值血清校准品、血清样本测定结果间的偏移,进行检验结果的可比性评价。结果改良参考方法的精密度评价样本浓度为55.48、88.68g/L的CV分别为0.56%、1.23%,标准参考物质909C与靶值的偏移为1.76%,分析测量范围上限128.69g/L。与参考方法测量结果比较,赋值血清校准品校准前平均偏移为6.38%,校准后降为1.86%,样本血清1、2校准前偏移分别为6.04%和8.71%,校准后降为-1.61%、-0.13%。结论改良的双缩脲法测量TP方法性能好,应用参考方法对新鲜血清进行赋值能够实现不同检测系统结果的溯源性。     

化学法与电极法测定血清钙的方法学对比与评估

血清钙测定是临床上最常用的生化指标之一。根据卫生部全国质评资料分析，现阶段我国临床实验室开展的血清钙测定主要为化学法[如邻甲酚酞络合酮（OCPC）法]和电极法。我们对这2种方法的精密度和准确度进行了初步评价，并依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）批准的《用患者样本进行方法学比对及偏差评估EP9-A指南文件》，对这2种实验方法进行对比实验和偏差评估。     

糖化血红蛋白不同测定方法的可比性研究

目的对离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和高效毛细管电泳法(HPCE)测定糖化血红蛋白(HbA1c)进行比对分析和偏倚评估,实现不同方法检测结果的可比性。方法以IE-HPLC法为参比方法(该法已通过美国NGSPⅠ级实验室认证),HPCE法和AC-HPLC法为实验方法,依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件进行方法学比对和偏倚评估,比对前进行参比方法正确度验证和实验方法精密度验证;对不可比的实验方法用经NGSP样本赋值传递的新鲜全血实施校准,校准后进行可比性的验证。结果参比方法对10个定值NGSP样本进行检测,检测结果全部在靶值的±6%内。两个实验方法的批内CV均1.5%,批间CV均2.0%。HPCE法在医学决定水平处与参比方法的偏倚分别为-0.06%和-0.07%,小于1/2 CAP TEa,与参比方法具有可比性;AC-HPLC法分别为-0.31%和-0.31%,均大于1/2 CAP TEa,与参比方法不可比;用经NGSP样本赋值传递的两个浓度新鲜全血校准AC-HPLC法,校准后的偏倚分别为0.08%和0.09%,均小于1/2 CAP TEa,与参比方法具有可比性。结论不同方法对HbA1c的测定结果可能存在差异,CLSI EP9-A3是评估这些差异的有效工具,用经NGSP样本赋值传递的新鲜全血对不可比的方法实施校准,可实现检验结果的可比性。     

根据NCCLS-EP9-A2方案对不同生化检测系统血清钙可比性分析

目的通过对血清钙不同检测系统的测定进行方法比对和偏倚评估,探讨血清钙在不同检测系统间测定结果的可比性,为不同实验室检验结果的互认和医学实验室正确度认可提供数据。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的EP9-A2文件,以宁波美康生物科技股份有限公司MS-880生化分析仪、宁波美康生物科技股份有限公司试剂、宁波美康生物科技股份有限公司校准品和质控品组成的检测系统1(参加室间质评成绩优秀,定期校准)为比较方法(X),检测系统2是以另一台日立7600-020生化分析仪为实验方法(Y),用患者新鲜血清测定钙离子,计算(X)和(Y)之间的相对偏差(SE%)和预期偏差的可信区间,以CLLA′88规定的室间质评为标准,允许误差范围定为1/2,以不同检测系统的测定结果判断在不同医学决定水平的可比性。结果该实验中钙在两种生化分析系统不同医学决定水平处检测结果的预期偏倚在允许误差范围内,线性回归方程及相关性良好(r20.95),结果具有可比性。结论在严格按照操作规程进行校准和质控在控的前提下,使用同一检测方法及两种分析系统测定血清钙的结果基本一致,在同一实验室可以同时使用这2种系统检测相同的项目。     

血清尿酸测定的基质效应

目的检测21种样本(血清及制备物)的尿酸水平,评价其对13种尿酸常规检测系统的基质效应。方法根据卫生行业标准WS/T356-2011,以同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)为比对方法,将不同厂商生产的13种尿酸检测试剂盒(均为酶法)分别与日立7180全自动生化分析仪组成常规检测系统,并以此为评价方法。样本包括4种校准品、5种室间质量评价(EQA)样本、6种质控品、3种制备物(1种猪血清和2种水溶液制备物)、1种美国国家标准与技术研究院(NIST)的标准参考物质(SRM)909c、2种国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)检验医学参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本,共计21种。用比对方法和评价方法分别测定40份新鲜冰冻血清和上述21种样本。将比对方法和评价方法尿酸测定结果进行直线回归分析,求得Y预测值双侧95%可信区间,评价血清及制备物的基质效应。结果 21种评价样本中有5种基质为新鲜血清或冻干血清的样本(2种EQA正确度验证血清、2种RELA样本和SRM 909c)在所有常规检测系统中均未观察到基质效应。2种校准品(朗道和迪瑞)仅在1种常规检测系统中有基质效应。5种EQA样本中除用于正确度验证的新鲜血清样本外,其他冻干血清样本在较多常规检测系统中存在基质效应。6种质控品中有4种在所有常规检测系统中无基质效应,2种高值质控品显示负基质效应。结论新鲜血清基质样本是可靠的检测样本,可在标准物质制备、质控品制备和EQA中使用。某些校准品在非配套系统中可能存在基质效应而产生校准偏差,因此在使用这些校准品前最好经过基质效应评价或方法验证。     

室内不同生化分析系统间偏差控制方法

同一实验室内有多个不同生化分析系统时,由于系统问仪器、试剂、校准品、检测程序的差异.测定结果肯定存在着偏差.此时必须按照NCCLs的EP9-A文件[1],对测定同一项目的不同系统进行比对及偏差评估,明确哪些项目结果是一致的,哪些项目结果是需要改进的,从而保证不同系统对同一患者检测结果一致.     

邻甲酚酞络合酮法与离子选择电极法测定血清钙的比较

目的探讨邻甲酚酞络合酮法与离子选择电极法测定血清钙结果间的一致性。方法以日立7180全自动生化分析仪,Randox试剂、校准品和质控品组成的检测系统为比较方法,以迅达XD685电解质分析仪及其配套试剂和校准品为实验方法,对106例患者血清样本同时进行钙测定,判断两种方法结果间的一致性。结果邻甲酚酞络合酮法与离子选择电极法测定结果分别为：2.32±0.26 mmol/L、2.35±0.23 mmol/L,均值间t检验,t=0.8898,P〉0.05;两种方法结果配对t检验t=-2.747,P〈0.05,相关系数γ=0.8945,P〈0.001。结论邻甲酚酞络合酮法和离子选择电极法测定血清钙结果均值间具有较好的一致性,可为临床所接受,但单次结果间可能存在较大的差异,选用离子选择电极法测定血清钙应慎重,应注意排除其诸多的影响因素,才能为临床提供稳定可靠的血清钙结果。     

卤族和类卤族元素对氯化物测定的干扰研究

[目的]研究卤族元素溴、碘和氟离子以及类卤族元素硫氰酸和迭氮离子对不同测定氯离子方法的干扰情况。[方法]使用混合血清建立对照组和加入不同浓度可疑干扰物质的实验组，分别使用酶法、硫氰酸汞比色法、离子选择电极法和硝酸汞滴定法测定血清氯化物，计算干扰百分率进行比较。[结果]样品中加入可疑干扰物终浓度达10mmol／L的溴化钾、83．3mmol／L的碘化钾、50．0mmol／L的氟化钠或100．0mmol／L的氟化钾、10mmol／L的硫氰酸钾和15．87mmol／L的迭氮钠对酶法测定氯化物无干扰：氟化物对测定氯化物的4种方法均无干扰；上述浓度的溴、碘、硫氰酸和迭氮离子对硫氰酸汞比色法和硝酸汞滴定法具有显著的正干扰作用；溴、碘和硫氰酸离子对离子选择电极法亦具有显著正干扰。[结论]卤族元素氟的化学性质与其它卤族元素：氯、溴、碘离子和类卤族元素：硫氰酸和迭氮离子不同，对氯化物测定无干扰，酶法测定血清氯化物在抗卤族元素和类卤族元素干扰方面具有显著的优越性。     

血清肌酐测定基质效应的研究

目的 评价血清肌酐测定常规方法的校准偏差及肌酐制备物常在常规方法上的基质效应.方法 根据美国临床实验室和标准化协会(CLSI)EP14-A2评价方案,同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)测定血清肌酐的方法为比对方法,15种常规肌酐测定系统(7种酶法,8种苦味酸法)为待评方法,测定40个新鲜冰冻人血清和36种制备物的肌酐浓度,评价制备物的基质效应和测定系统的校准偏差.结果 大部分商品制备物(29/30)在苦味酸法系统上表现出基质效应,少部分商品制备物(13/30)在部分酶法系统上表现出基质效应.我中心6个制备物在所有15个系统上均未观察到基质效应.所有常规系统新鲜冰冻血清测定值与比对方法测定值间均呈较好的直线相关,所有苦味酸法和部分酶法测定肌酐方法存在校准偏差.结论 基质效应和校准偏差存在于常规肌酐测定方法,必须重视这些因素,提高肌酐测定结果的正确度和可比性.     

两种检测系统测定血清钾离子的结果比对

目的 探讨同一实验室两种检测系统测定血清钾离子(K+)结果的可比性.方法参照EP9-A2文件,以采用离子选择电极法(ISE)的Roche c501检测系统为比较方法(X),以采用酶法的Hitachi 7080检测系统为实验方法(Y),通过患者新鲜血清K+测定结果进行比对,计算线性回归方程,以医学决定水平浓度处的系统误差小于或等于美国临床实验室修正法规(CLIA′88)允许总误差(TEa)的1/2为标准,判断结果的可比性.结果 两种检测系统的血清K+测定结果具有可比性(r=0.997 7,P<0.01),3个医学决定水平浓度处两种系统间的误差(SE)均小于0.25 mmol/L,临床可以接受.结论 通过方法学比对和偏倚评估,可实现同一实验室不同检测系统之间的可比性.     

化学法与电极法测定血清钙的方法学对比与评估

血清钙测定是临床上最常用的生化指标之一。根据卫生部全国质评资料分析,现阶段我国临床实验室开展的血清钙测定主要为化学法[如邻甲酚酞络合酮(OCPC)法]和电极法。我们对这2种方法的精密度和准确度进行了初步评价,并依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)批准的《用患者样本进行方法学比对及偏差评估EP9-A指南文件》[1],对这2种实验方法进行对比实验和偏差评估。一、材料和方法1.仪器电极法试验于Beckm an LX20全自动生化分析仪MC部分进行,OCPC法试验于H itach i 7170S全自动生化分析仪进行。2.试剂OCPC法试剂由上海复星长征科…