围着床期子宫内膜解偶联蛋白2的表达变化及与不孕的关系

目的探讨解偶联蛋白2(UCP2)在子宫内膜表达规律、围着床期变化及其与不孕的关系。方法分别应用原位杂交和Westem blot检测21例正常子宫内膜，22例不同原因不孕患者分泌期子宫内膜以及7例早孕蜕膜和绒毛UCP2 mRNA和蛋白表达。结果子宫内膜组织内存在UCP2蛋白的表达，分泌期子宫内膜UCP2的表达高于增殖期子宫内膜，蜕膜组织UCP2的表达增加明显。在早孕绒毛滋养细胞层也存在UCP2的表达。与其他不孕妇女相比．输卵管积水者分泌期子宫内膜UCP2表达明显增加。结论UCP2可能参与子宫内膜蜕膜化过程，并可能参与胚胎着床调节．UCP2表达显著增加可能是子宫内膜拮抗活性氧族水平过度增高的代偿反应，反映了子宫内膜可能的氧化应激．后者可能是输卵管积水不孕的重要原因之一．     

解偶联蛋白2在子宫内膜的表达变化及其与妊娠的关系

目的　探讨UCP2可能参与子宫内膜蜕膜化和胚胎着床的作用。方法　应用Westernblot检测了 2 3例子宫内膜和 7例早孕蜕膜UCP2表达的周期性变化。结果　子宫内膜组织内存在UCP2蛋白的表达 ,分泌期子宫内膜UCP2的表达明显高于增殖期子宫内膜 ,并且早孕蜕膜组织内UCP2蛋白的表达增加明显。结论　UCP2可能在参与子宫内膜蜕膜化过程 ,并在胚胎着床调节中起重要作用。     

脂肪变肝细胞中解偶联蛋白2表达的变化

目的:探讨解偶联蛋白2(UCP2)在正常肝细胞及不同程度脂肪变肝细胞中的表达情况.方法:用不同浓度的脂肪乳剂培养肝细胞,使其发生不同程度的脂肪变,作为脂肪变的肝细胞模型.正常细胞作为对照组,另设三组为模型组,其培养液内脂肪乳剂的浓度分别0.5, 1.0,2.0 μl/ml.应用RT-PCR技术检测细胞内UCP2 mRNA表达水平,蛋白质印迹检测UCP2的表达情况.结果:正常肝细胞内可以检测到UCP2 mRNA表达,且随着脂肪乳剂浓度的不断增加,脂肪变肝细胞内UCP2 mRNA相对表达量也增加.模型组与正常对照组表达量差异有统计学意义(P<0.01),模型组之间的表达量差异也具有统计学意义(P<0.01).正常组内未检测到UCP2蛋白,模型组中随着肝细胞脂肪变程度的加重,UCP2蛋白表达也增加(P<0.05).结论:脂肪变性的肝细胞中UCP2表达较正常肝细胞增加,且表达随脂肪变程度的加重而增加.     

子宫内膜异位症患者抗子宫内膜抗体与不孕的关系

对正常人和子宫内膜异位症不孕患者进行了血清、腹腔液抗子宫内膜抗体(EMAb)、子宫内膜抗原(EMAg)及其特异性免疫复合物(EM-IC)等体液免疫研究,和与 EMAb 有关的细胞免疫状态进行对比分析。结果表明,子宫内膜异位症患者体内表现为广泛的体液、细胞免疫系乱,EMAg 组份异于正常人。本文结果部分解释了在子宫内膜异位症及不孕机理中,EMAb 等免疫学因素所起的作用。     

子宫内膜病变中AgNOR与C-erbB-2蛋白表达关系的研究及临床意义

目的研究核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)与C-erbB-2蛋白在子宫内膜病变中的表达规律及二者关系。方法用银染法、免疫组化S-P法检测正常子宫内膜25例作为对照组,子宫内膜增殖症25例、非典型增生19例、子宫内膜腺癌高分化26例、中分化18例、低分化19例,共107例作为观察组,观察在正常子宫内膜及不同内膜病变中AgNOR的计数值和C-erbB-2蛋白表达情况以及两者的关系。结果AgNOR计数在子宫内膜腺癌中升高,与对照组和子宫内膜良性病变组比较有统计学意义(P<0.05),在高、中、低分化组中的计数值分别为(4.69±2.32)、(5.38±2.99)、(7.54±2.09),低分化组与高分化组比较有统计学意义(P<0.05);AgNOR计数在非典型增生和子宫内膜增殖症组中虽升高,与对照组比较无统计学意义(P>0.05);C-erbB-2蛋白在子宫内膜腺癌中阳性表达率明显升高,与对照组和子宫内膜良性病变组比较有统计学意义(P<0.05);二者存在正相关(r=0.854,P<0.05)。结论AgNOR和C-erbB-2蛋白与子宫内膜腺癌的发生密切相关,AgNOR计数增高与C-erbB-2蛋白的表达存在正相关。AgNOR值增高提示患者可能患有子宫内膜腺癌且提示子宫内膜腺癌恶性程度高,如合并C-erbB-2蛋白的阳性表达率增高可进一步提示患者患有子宫内膜腺癌。     

子宫内膜异位症与不孕

子宫内膜异位症是不孕症的常见原因之一.它对不孕的影响是多因素、多环节共同作用所致.通过改变盆腔正常解剖结构,引起卵泡和腹腔局部免疫反应,干扰卵子的成熟和排出,从而导致不孕.据统计,确诊患者中,约30%～50%合并不孕.它的治疗手段主要是手术和药物.另外,通过辅助生育技术可使很多内异症合并不孕症患者获得妊娠.     

体外受精-胚胎移植周期颗粒细胞解偶联蛋白2的表达与胚胎发育的关系

目的 探讨体外受精周期颗粒细胞解偶联蛋白2(UCP2)的表达与细胞内活性氧水平关系以及对胚胎发育的影响.方法 运用UCP2抗体和DCFH-DA,采用流式细胞仪技术,分别检测了53例体外受精周期颗粒细胞UCP2表达和细胞内活性氧水平.其中≤35岁组35例,＞36岁组18例.结果 颗粒细胞UCP2的表达与细胞内活性氧水平负相关(r=-0.578,P＜0.01),并且,年长妇女颗粒细胞UCP2表达下降,UCP2表达低者,良好胚胎形成率降低,取卵数大于等于15个的患者颗粒细胞UCP2表达升高,卵母细胞成熟比例低.结论 颗粒细胞通过增加UCP2表达反馈性抑制细胞内活性氧水平过高,进而控制卵泡液活性氧水平,保护卵母细胞免受氧化应激损伤.     

钻粘附蛋白在子宫内膜的表达及其与不孕的关系

目的：探讨钙粘附蛋白在子宫内膜的表达及其在不孕的关系。方法：应用特异性单克隆抗体免疫组化技术，SABC法，检测37例正常生育妇女和35例不孕妇女月经周期不同阶段的子宫内膜上皮型钙粘附蛋白（Ecadherin)的表达。结果：正常子宫内膜腺上皮各阶段均见E－cadherin的表达，但在植入窗期表达最高。不孕妇女植入窗期腺上皮表达E－cadherin较正常妇女低，其中不明原因不孕及黄体功能不全性不孕者明显降低。间质细胞未见E-cadherin表达。结论：钙粘附蛋白在引导胚泡附着及植入过程中起着重要的作用，其表达异常可能是不孕症发病的重要原因之一。     

米非司酮对小鼠围着床期子宫内膜Dickkopf-1表达的影响

目的 研究孕酮抑制剂米非司酮对妊娠小鼠围着床期子宫内膜Dickkopf-1（DKK1）表达的影响，探讨DKK1在胚胎着床过程中的作用。方法 用半定量逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）及免疫组织化学SP法检测米非司酮组、载剂对照组和空白对照组小鼠在妊娠第3～7天DKK1 mRNA及蛋白的动态表达。结果载剂对照组和空白对照组小鼠在妊娠第4天出现DKK1 mRNA及蛋白的表达峰值，且两组在第3～7天各时间点DKK1的表达差异无显著性意义；米非司酮组DKK1 mRNA及蛋白的表达较两对照组显著降低（P〈0．01），在妊娠第4天亦无表达高峰。结论 DKK1是介导胚胎着床的重要因子之一，其表达可能受到孕激素的正向调节。     

高原低氧对解偶联蛋白2mRNA表达的影响

目的探讨高原低氧对Wistar大鼠白色脂肪组织（White Adipose Tissue,WAT）解偶联蛋白2（Uncoupling Protein2,UCP2）mRNA表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分成6组,每组10只,分为对照组、低氧1天组、低氧3天组、低氧7天组、低氧15天组和低氧30天组。分别在西宁和可可西里地区（1天、3天、7天、15天和30天）采集WAT标本,应用半定量逆转录一聚合酶链式扩增反应（RT-PCR）方法检测UCP2mRNA的表达水平。结果低氧1天组、低氧3天组、低氧7天组、低氧15天组和低氧30天组的UCP2 mRNA表达水平降低,尤以30天组降低明显。血红蛋白值与UCP2 mRNA的表达呈较高的负相关。结论随着低氧时间的延长,UCP2mRNA的表达水平逐渐降低是对低氧环境的一种适应性反应。     

Trophinin粘附分子在子宫内膜的表达及其与不孕的关系

目的探讨trophinin粘附分子在人子宫内膜的表达规律及其与不孕的关系。方法运用特异性单克隆抗体,采用免疫组化技术,对39份分别取自正常月经周期第6~28天的内膜及24份不同原因不孕症患者“着床窗”期的子宫内膜进行trophinin 蛋白表达的检测。结果Trophinin蛋白分子均表达于分泌期子宫内膜,且分泌中期表达最强;同正常妇女相比,输卵管阻塞性不孕患者子宫内膜中trophinin蛋白分子的表达无差异,子宫内膜异位症、不明原因不孕患者子宫内膜中trophinin蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论Trophinin参与了子宫内膜容受性的形成,其异常表达可能是导致某些不孕的重要原因之一。     

原发性不孕症子宫内膜组织学诊断分级及其临床意义

目的探讨原发性不孕症子宫内膜组织学诊断分级及其与临床治疗的关系。方法对112例原发性不孕症患者月经来潮6h内的子宫内膜进行组织学观察,并进行分级诊断,即分为增生和分泌反应两类,再各以其反应强度由弱到强分为Ⅰ～Ⅲ级。同时筛选16例有生育史的子宫内膜标本作为对照组。结果原发性不孕症组及对照组分泌反应类显著高于增生反应类(P均<0．01)。不孕症组分泌反应Ⅲ级显著低于分泌反应Ⅰ级与Ⅱ级之和(P<0．01),而对照组分泌反应Ⅲ级则高于分泌反应Ⅰ级与Ⅱ级之和(P<0．05)。原发性不孕症组分泌反应Ⅲ级显著低于对照组(P<0． 01),治疗以激素为主。结论原发性不孕症子宫内膜组织学分级对指导临床治疗有重要意义。     

原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞UCP2 的表达及其细胞因子的分泌

目的 探讨蜕膜巨噬细胞UCP2的表达、IL10/IFNy,分泌细胞比值相互关系,及与原因不明复发性流产发病的关系.方法 应用磁珠细胞分选法从11例原因不明复发性流产患者和12例正常早孕妇女蜕膜分离巨噬细胞,采用流式细胞仪分析巨噬细胞UCP2表达,应用ELISPOT法检测细胞因子IL10和IFNy分泌.结果 与正常早孕相比,原因不明复发性流产患者蜕膜巨噬细胞UCP2表达明显下降(136±25,201±31,P＜0.01).并与IL1O/IFNy分泌细胞比值正相关(r=73,P＜0.01).结论 UCP2通过调控蜕膜巨噬细胞IL1O和IFNy的分泌,可能在维持正常妊娠免疫耐受和导致原因不明复发性流产发病中起重要作用.     

解偶联蛋白2基因多态性与中国人2型糖尿病的关系

目的研究解偶联蛋白2(UCP2)基因外显子8一个45 bp的插入/缺失(I/D)多态性与中国上海地区汉族人2型糖尿病及肥胖之间的关系.方法采用病例-对照研究方法,以聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳方法,对195例2型糖尿病患者及181例正常对照者解偶联蛋白2第8外显子的45 bp的I/D多态性进行基因分型.结果 45 bp I/D多态性的基因型频率和等位基因频率在2型糖尿病组与正常对照组中的分布无显著性差异;将所有入选者根据体重指数(BMI)分成BMI≤23 kg/m2组和BMI≥25 kg/m2组,在这两组中I/D多态性的基因型频率和等位基因频率的差异亦无显著性;而且纯合缺失(D/D)组与杂合缺失(I/D)+纯合插入(I/I)组间的BMI亦无明显差异(P均＞0.05).结论 UCP2基因的第8外显子45 bp的I/D多态性与上海地区汉族人群中2型糖尿病和肥胖无显著相关性.     

解偶联蛋白2过表达对脓毒症大鼠心肌细胞线粒体的保护作用

目的：探讨解偶联蛋白2（UCP2）过表达对脓毒症大鼠心肌细胞线粒体的保护作用,阐明其作用机制。方法：构建UCP2过表达的H9C2心肌细胞。H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、脂多糖/聚糖肽（LPS/PepG）刺激组、空病毒组和过表达组,除正常对照组外其余各组予LPS/PepG刺激。采用RT-PCR和Western blotting法检测各组心肌细胞中UCP2 mRNA和蛋白表达水平,采用分光光度计法和ELISA法检测脓毒症心肌细胞模型建立指标肌酸激酶（CK）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,采用电镜观察各组心肌细胞线粒体形态表现,采用流式细胞术检测各组心肌细胞线粒体膜电位（MMP）水平,采用多功能酶标仪检测各组心肌细胞线粒体活性氧（ROS）和三磷酸腺苷（ATP）水平。结果：与正常对照组比较,LPS/PepG刺激组心肌细胞中CK和TNF-α水平明显升高（P<0.05）,且线粒体形态明显损害,MMP水平明显降低（P<0.05）,线粒体ROS水平明显升高（P<0.05）,ATP水平明显降低（P<0.05）;与LPS/PepG刺激组比较,过表达组心肌细胞中CK和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,且线粒体形态结构明显好转,MMP水平明显升高（P<0.05）,线粒体ROS水平明显降低（P<0.05）,ATP水平明显升高（P<0.05）;与LPS/PepG刺激组比较,空病毒组心肌细胞中CK、TNF-α、MMP、ROS和ATP水平差异均无统计学意义（P>0.05）,线粒体肿胀度无明显改变。结论：UCP2过表达对脓毒症大鼠心肌细胞线粒体有保护作用,其机制可能与UCP2通过解偶联作用调控膜电位,进而影响ROS和ATP的合成有关。     

雌激素β受体在不育妇女子宫内膜中的表达及意义

目的　通过研究雌激素 β受体 (ERβ)在不育妇女和相同年龄段正常育龄妇女增生期子宫内膜中的表达 ,探讨ERβ在不育子宫内膜中的分布特点及其与不育的可能关系。 方法　对 40例符合筛选条件的不育妇女在宫腔镜直视下用活检钳钳取增生期子宫内膜 ,采用免疫组织化学方法检测ERβ、ERα在上述组织中的表达及分布特点 ,并与 3 0例相同年龄段正常育龄妇女增生期子宫内膜对照。结果　ERβ在不育妇女增生期子宫内膜腺体中明显表达 ,在正常育龄妇女增生期子宫内膜中表达下降或不表达 ,两者比较差异有显著意义 (P <0 .0 5 )。结论　ERβ在不育妇女增生期子宫内膜中广泛表达 ,ERβ的过度表达可能与不育有一定关系     

定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果

目的 观察定坤丹治疗子宫内膜薄型不孕的临床效果,为优化子宫内膜薄型不孕的治疗方案提供参考。方法 选取187例子宫内膜薄型不孕患者,在保证组间基本特征匹配原则上,利用计算机软件产生的随机数,按照1∶1的比例分为对照组(93例)和观察组(94例)。对照组给予雌二醇+地屈孕酮干预,观察组在对照组的基础上加用定坤丹。比较治疗3个周期后两组患者的子宫内膜厚度、孕激素浓度及临床妊娠率。结果 观察组患者排卵期平均子宫内膜厚度显著高于对照组(P<0.01),黄体期孕激素浓度显著高于对照组(P<0.01),累计临床妊娠率显著高于对照组(P<0.05)。结论 定坤丹可以明显改善子宫内膜薄型不孕患者排卵期子宫内膜厚度,提高黄体功能,改善妊娠结局。     

解偶联蛋白2基因多态性与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的探讨解偶联蛋白2（UCP~）基因8号外显子3’-末端（3’-UTR）45bp插A／缺失（I／D）多态性与糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）的关系。方法183例糖尿病患者（分为伴有DR组51例,不伴DR组132例）,检测所有患者的基因组DNA,用聚合酶链反应（PCR）方法对UCP-2基因进行扩增,记录各组UCP-2等位基因及基因型频率并进行比较。结果UCP-2基因8号外显子3’-末端45bp插入／缺失多态性在DR组和不伴DR组中基因型分布无显著性差异（X^2=1．71,P＞0．05）,2组的等位基因频率亦无显著性差异（X^2=0．16,P＞0．05）。结论ucP-2基因8号外显子3’-末端（3’-UTR）45bp插入／缺失多态性与中国人糖尿病并发视网膜病变无关系。