Bcl－2和反义bcl－2逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

Ｂｃｌ－２和反义ｂｃｌ－２逆转录病毒表达载体的构建与鉴定朱峰，金明，惠宏襄，赵永同，王成济（生物化学及分子生物学教研室西安７１００３３）关键词细胞凋亡；ｂｃｌ－２基因；逆转录病毒载体中图号Ｒ７５３为了研究ｂｃｌ－２与肿瘤细胞的关系，我们构建了正义和反...     

人类bcl—2蛋白在CHOdhfr^—细胞中的表达

目的：建立表达人类ｂｃｌ－２蛋白的哺乳类细胞模型，为探讨ｂｃｌ－２的作用机制及其与其它基因间的关系奠定基础。方法：通过将９１０ｂｐ的含有完整开放阅读框的人类ｂｃｌ－２ ｃＤＮＡ以正向克隆逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ的ＥｃｏＲＩ位点而构建重组真核表达载体ｐＬＸＳＮ／ｓ－ｂｃｌ－２。利用电穿孔技术将ｐＬＸＳＮ／ｓ－ｂｃｌ２转染于ＣＨＯｄｈｆｒ＾－细胞，筛选＋出Ｇ４１８抗性克隆，经免疫印迹检测人类ｂｃｌ－２     

bcl—2基因高表达与乳腺癌生物学行为的相关性研究

ｂｃｌ┐２基因高表达与乳腺癌生物学行为的相关性研究专业肿瘤外科硕士研究生欧阳雯导师张祥福教授杨发端主任医师目的细胞凋亡与恶性肿瘤的发生有关，而ｂｃｌ－２原癌基因所编码的蛋白产物对细胞凋亡具有明显的抑制作用，研究ｂｃｌ－２基因表达与乳腺癌生物学行为的相...     

抗凋零基因bcl－2逆转录病毒表达载体的构建与鉴定

抗凋零基因ｂｃｌ－２逆转录病毒表达载体的构建与鉴定陈协群，王文亮，王成济，黄高升，沈素芸（西京医院血液科病理学教研室生物化学教研室）关键词调零；ｂｃｌ－２基因；逆转录病毒表达载体中图法分类号Ｒ７５３基因转染是探讨人ｂｃｌ－２基因调控细胞凋零（ａｐｏｐ...     

胃粘膜上皮细胞系GES—1细胞凋亡密度依赖性的研究

目的：探讨细胞密度对ＧＥＳ－１细胞凋亡的影响及其机制。方法：细胞凋亡的存在以Ｇｉｅｍｓａ染色证实，ｂｃｌ－基因的表达采用细胞原位杂交技术。结果：正常培养情况下ＧＥＳ－１细胞凋亡呈细胞密度依赖性，８ｍｇ／Ｌ的五肽胃泌素能增强ｂｃｌ－２基因的表达但不能抑制密度依赖的细胞凋亡。结论：ｂｃｌ－２基因表达可能与ＧＥＳ－１细胞凋亡的密度依赖性无关。     

亡相关基因bcl－x在霍奇金病中的表达

亡相关基因ｂｃｌ－ｘ在霍奇金病中的表达＊白庆咸１黄高升１陈协群２（１第四军医大学病理学教研室西安７１００３３２第四军医大学西京医院血液科）关键词ｂｃｌ－ｘ基因霍奇金病细胞凋亡中图号Ｒ５５１ｂｃｌ－ｘ（Ｂ细胞淋巴瘤－Ｘ）基因是１９９３年克隆的一种新的ｂ...     

bcl—2和bax表达与大肠癌化疗的预后

ｂｃｌ┐２和ｂａｘ表达与大肠癌化疗的预后薛佩莲１胡家露１王剑波２（第四军医大学西京医院：１消化科，２病理科西安７１００３３）关键词大肠癌化疗预后癌基因ｂｃｌ－２ｂａｘ中图号Ｒ７３５．３４诱导肿瘤细胞凋亡是化疗药物作用机制之一［１］．化疗诱导的凋亡受抑...     

凋亡相关基因bcl—2基因族大乳腺癌中的预后作用

目的 探讨癌基因ｂｃｌ－２及其基因族成员ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘ的表达水平与乳腺癌生物学行为的关系及对乳腺癌预后的意义。方法 运用免疫组化方法对９１例乳腺癌石蜡组织切片ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白表达水平进行检测,运用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测１６例新鲜乳腺癌组织标本ｂｃｌ－ｘｌｍＲＮＡ表达水平。结果 ９１例乳腺癌病例中,ｂｃｌ－２阳性率６５．９％,ｂａｘ阳性率６４．８％。ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白表达水平与凋亡     

反义bcl—2RNA促进HL—60细胞的凋亡

目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础，方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用，结果：ｐ     

bcl—2,bcl—xl,bax在短暂性脑缺血后海马区的表达及对 …

探索神经细胞凋亡与ｂｃｌ－２家族基因表达的关系。方法短暂性脑缺血后海马区神经细胞ｂｃｌ－２家族基因的表达。结果在缺血后２４ｈ，ｂｃｌ－２、ｂｃｌ－ｘｌ的表达显著下降，７２ｈ表达量更低，ｂａｘ则相反，在缺血后表达量呈逐渐增高趋势。结论ｂｃｌ－２家族基因与缺血后海马神经元细胞的延性死亡有密切关系。     

反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡

目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用．结果：ｐＤＯＲ－ＡＢ转入ＨＬ－６０细胞并表达ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ；细胞内Ｂｃｌ－２蛋白含量明显下降；细胞周期分析可见凋亡峰；电镜下可见凋亡细胞；ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带．结论：反义ｂｃｌ－２瞬时表达可促进ＨＬ－６０细胞的凋亡，ｂｃｌ－２在ＨＬ－６０细胞凋亡的调节中起重要作用     

急性髓系细胞白血病bcl—2表达水平与预后的关系

采用免疫组化方法测定５８例急性髓系细胞白血病患者抗凋亡基因ｂｃｌ－２蛋白表达水平,分析ｂｃｌ－２基因与临床预后关系。结果表明,高表达ｂｃｌ－２患者,化疗反应差,预后不良,提示ｂｃｌ－２表达水平可作为判断急性髓系细胞白血病预后的重要指标之一。     

抗细胞凋亡基因bcl—2及其在肿瘤研究中的应用

ｂｃｌ－２（Ｂｃｅｌｌｙｍｐｈｏｍａ－２，ｂｃｌ－２）基因是从滤泡性淋巴瘤相关的ｔ（１４；１８）染色体易位的断裂点部位克隆出的一种原癌基因〔１〕。随着对ｂｃｌ－２基因的深入研究，人们发现ｂｃｌ－２并没有促进细胞增殖的能力，但它却能阻止细胞的凋亡，同时...     

人乳腺癌MCF—7细胞凋亡过程中p53与bcl—2表达的时序性

目的：研究细胞凋亡过程中ｐ５３与ｂｃｌ－２基因表达变化的时序关系，以探索ｐ５３调控ｂｃｌ－２的可能性。方法：选择具有野生型ｐ５３的人乳腺癌ＭＣＦ－７细胞系，用５－Ｆｕ为诱导剂诱导细胞凋亡；用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测细胞凋亡过程中ｐ５３与ｂｃｌ－２表达变化的时序性。结果：ｐ５３表达增高出现在ｂｃｌ－２表达降低之前。结论：ｐ５３在时序上具有作为ｂｃｌ－２基因负调控转录因子的可能性     

bcl—x基因在白血病细胞中的表达及意义

目的：探讨ｂｃｌ－ｘ基因在白血病中的表达及意义，方法：采用免疫组织化学方法检测１９例白血病及４株白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ的表达，并用Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹法确定白血病细胞株中Ｂｃｌ－ｘ表达形式。结果：白血病中Ｂｃｌ－ｘ阳性率为７３．７％（１４／１９），４株白血病细胞均表达Ｂｃｌ－ｘ－１形式。结果：白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ１表达可能与白血病发病有关。     

Bcl—2基因与子宫内膜增生发病关系的研究

目的：探讨凋亡抑制基因ｂｃｌ－２在子宫内膜增生发病过程中的作用。方法：彩免疫组化法检测８９例子宫内膜增生病例和２０例正常月经周期子宫内膜组织ｂｃｌ－２表征特征。结果：子宫内膜增生病例ｂｃｌ－２表达明显强于正常月经周期子宫内膜;随子宫内膜增生病变发展。ｂｃｌ－２表达逐渐减弱（Ｐ〈０．０５）;在不同程度不典型子宫内膜增生病例中其ｂｃｌ－２表达水平无显著差异（Ｐ〉０．０５）。结论：ｂｃｌ－２抑制细胞凋亡的机制可能在子宫内膜增生病变发生早期起作用。     

足叶乙甙诱导HL—60细胞凋亡及其bcl—2基因表达

目的：研究ＨＬ－６０细胞在足叶乙甙诱导的细胞凋亡中ｂｃｌ－２基因表达，以说明药物致凋亡的分子机制。方法：采用细胞存活率，形态改变，ＤＮＡ梯形片段分析和原位缺口标记法，分析药物引起的细胞凋亡，以细胞原位杂交和免疫组化分析ｂｃｌ－２ ｍＲＮＡ及其蛋白的表达水平。     

乳腺癌中bcl—2及nm23表达的研究

为探讨抗凋亡基因ｂｃｌ－２及转移抑制基因ｎｍ２３对乳腺癌生物行为的影响，对乳腺癌４０例进行了免疫组化检测，结果表明，ｂｃｌ－２表达与患者年龄，肿瘤大小，有无淋巴结转移无关，而与乳腺组织学分级呈负相关，高，中分化组ｂｃｌ－２表达率高于低分化组（Ｐ＝０．００４１），ｎｍ２３低表达与淋巴结转移有关（Ｐ〈０．０５），也与乳腺癌低分分化有关（Ｐ＝０．００７６）ｂｃｌ－２与ｎｍ２３表达呈正相关，ｂｃｌ－２影响     

bcl—2癌基因在肝肿瘤的表达

ｂｃｌ－２癌基因在肝肿瘤的表达王万忠王家耀杜德利为了探讨ｂｃｌ－２癌基因的表达与肝肿瘤发生的关系，我们采用免疫组织化学方法，对肝细胞癌、肝内胆管细胞癌、肝母细胞瘤和肝转移癌中ｂｃｌ－２癌基因的表达进行了定位观察。一、材料与方法１．标本与试剂：选用我院...     

fas／apo—1,bcl—2蛋白在急性髓系白血病细胞的表达特点及意义

用免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）分析了１９例急性髓系白血病（ＡＭＬ）骨髓细胞ｆａｓ／ａｐｏ－１，ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化，结果表明大部分ＡＭＬ骨髓过表达ｂｃｌ－２蛋白，部分病例表达ｆａｓ／ａｐｏ－１两者表达呈一定的负相关性，分析结果显示ｂｃｌ－２蛋白过表达所致的凋亡抑制状态是化疗耐药的主要机制之一，而ｆａｓ／ａｐｏ－１的表达是预后较好的特征。