不同剂量致敏原对小鼠哮喘模型气道反应性的影响

目的:探讨不同剂量致敏原鸡卵蛋白(OVA)制备哮喘模型时对哮喘小鼠气道反应性的影响。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为哮喘组和正常对照组(C组),哮喘组又分为小剂量OVA致敏组(A组)和大剂量OVA致敏组(B组),每组各10只。A、B组在开始和第14天时给予含OVA的致敏液200μl(A组含10μg OVA,B组含2 mg OVA,两者含同样的氢氧化铝及生理盐水),21 d开始雾化吸入OVA,连续雾化6 d,操作时观察小鼠活动及呼吸情况;各组分别于末次雾化激发24 h后测定小鼠的无创肺功能中的增强呼气间歇(Penh)值以评价气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞总数、嗜酸粒细胞计数;取肺组织作HE染色病理切片;ELISA方法测外周血、BALF上清液中的IgE、IFN-γ含量。结果:哮喘B组在第二次致敏后可见喘息、呼吸困难、口唇和尾巴黏膜发紫表现,并在雾化时出现扭体、燥动、呼吸加快等症状。哮喘A、B组的Penh值明显高于C组(P<0.01);从乙酰甲胆碱(Mch)6.25 mg.m l-1开始时哮喘B组的Penh值明显高于哮喘A组(P<0.01)。哮喘A组的BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数(2.41±0.90,0.93±0.18)较正常对照组明显增高(0.65±0.34,0.30±0.16,均P<0.05);哮喘B组中BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数(4.89±3.49,1.74±0.76)较正常对照组增高(均P<0.05);哮喘B组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞数与哮喘A组比较差异无统计学意义。哮喘A、B组的支气管、血管周围,肺间质及肺泡腔内可见嗜酸粒细胞、淋巴细胞浸润,气道上皮损伤,结构紊乱,气道内杯状细胞肥大增生,气道内分泌大量黏液并有黏液栓形成;正常对照组肺组织气道结构清晰,气道纤毛上皮排列整齐,无明显的炎症改变。哮喘A、B组中外周血和BALF的IgE含量均较正常组的增多(P<0.01);哮喘B组中外周血及BALF的IgE含量(37.47±6.18,26.10±7.18)较哮喘A组(26.09±3.76,12.47±3.02,均P<0.01)明显增多。哮喘A、B组中外周血和BALF中的IFN-γ含量均较正常组减少(P<0.01);哮喘B组中外周血及BALF的IFN-γ含量(35.29±10.92,37.44±21.01)与哮喘A组比较差异无统计学意义(32.22±10.04,36.89±22.00,均P>0.05)。结论:哮喘小鼠组模型制备成功。在观察气道高反应方面,较高剂量OVA致敏哮喘模型较低剂量OVA致敏的气道高反应性更敏感。     

斯钙素-1改善哮喘小鼠气道炎症和气道重塑的机制

目的 探讨斯钙素-1(STC-1)减轻哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的机制.方法 采用腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)与氢氧化铝凝胶[Al(OH)3]的混合物致敏、OVA雾化激发成功诱导构建哮喘小鼠模型.随机将40只雌性C57BL/6J小鼠分为正常对照组、哮喘组、哮喘+低剂量重组人斯钙素-1(rhSTC-1,1.25 μg/L...     

呼吸道合胞病毒感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的观察

【】 目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力变化的影响。方法 6～8周龄雄性BalB/c小鼠30只,每组10只,随机分为空白组、OVA组(哮喘模型组)、OVA/RSV组(RSV+哮喘模型组)3组。OVA组用卵清蛋白(OVA)致敏和激发;OVA/RSV组在OVA 致敏后,隔日用RSV滴鼻,连续3次,复制急性病毒感染哮喘模型;空白组予等量PBS。末次激发24h后,用小鼠动物呼吸机(Buxco RC系统)检测小鼠气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析;留取肺组织,进行HE染色、PAS染色、VG染色,观察肺组织炎症反应。结果 OVA组肺功能和BALF嗜酸粒细胞比例(EOS％)与正常组相比差异有显著性 (P<0.05);OVA/RSV组肺功能和BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％) 与正常组相比有极显著性差异(P<0.01);OVA/RSV组气道反应性及BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％)与哮喘组相比差异有显著性 (P<0.05)。OVA组小鼠肺组织有炎性细胞浸润,气道可见粘液分泌物,气道周围可见胶原增生。OVA/RSV组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,肺泡腔明显狭窄,毛细血管扩张充血,气道可见明显粘液分泌物,气道周围胶原增生明显。结论 呼吸道合胞病毒感染能明显增加重哮喘模型小鼠肺部组织炎症反应同时气道阻力明显增高。     

布地奈德对哮喘气道重塑小鼠p-VEGFR2表达的影响及其机制研究

目的:磷酸化研究血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在哮喘气道重塑小鼠肺组织中的表达水平以及布地奈德对其干预作用.方法:24只BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组以及布地奈德干预组,每组8只;以鸡卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘气道重塑模型.布地奈德干预组OVA激发前30 min给予布地奈德混悬液10 ml...     

咪喹莫特对哮喘小鼠气道反应性及气道重塑的影响

目的:观察咪喹莫特对哮喘小鼠气道反应性,气道重塑和肺组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法:30只小鼠按随机数字表法分成3组,每组10只.正常对照组、哮喘组、咪喹莫特组.小鼠于第0、14天以鸡卵白蛋白(OVA)致敏,第24天开始雾化吸人1%OVA激发并持续28天,建立哮喘气道重塑模型.咪喹莫特组在吸人OVA前2 h雾化吸人咪喹莫特30 min.于最后一次雾化结束后24 h,利用肺功能仪测小鼠气道阻力;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类;对肺组织切片行HE染色观察病理学改变:运用医学图像分析软件测定肺组织切片中的血管计数、血管壁平滑肌厚度、血管壁平滑肌细胞计数:用免疫组化方法检测肺组织VEGF的蛋白表达水平;用RT-PCR检测肺组织VEGF mRNA表达水平.结果:哮喘组小鼠呼气阻力(Re)高于对照组(P<0.05),咪喹莫特组Re低于哮喘组(JP<0.05);哮喘组BALF中细胞总数及各种炎症细胞数均较对照组升高(P<0.05).咪喹莫特组较哮喘组降低(P<0.05);哮喘组血管计数、血管壁平滑肌细胞计数较对照组增高,差异均有统计学意义(P<0.05),咪喹莫特组血管计数较哮喘组下降,差异有统计学意义(P<0.05);对照组VEGF蛋白和mRNA在气道不表达或轻度表达,哮喘组VEGF蛋白和mRNA表达较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05),咪喹莫特组能减少VEGF蛋白和mRNA的表达,与哮喘组比较差异有统计学意义(P<0.05),但较对照组仍增加,差异无统计学意义(P>0.05).结论:早期预防性雾化吸入咪喹莫特通过部分抑制哮喘肺组织VEGF蛋白和mRNA的过度表达,阻止慢性哮喘小鼠的血管生成,可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道重塑和气道高反应性.     

Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中的作用

目的:观察Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中作用。方法:24只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和过继转移组,每组8只;随机选取8只CD1d-/--BALB/c小鼠为CD1d-/-组。对照组和哮喘组、CD1d-/-组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,过继转移组采用OVA致敏,在第1次激发前24h给予Ⅰ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平;流式细胞仪检测肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量。结果:哮喘组小鼠肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量明显高于对照组(均P<0.05);过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显高于哮喘组(均P<0.05);CD1d-/-组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,CD1d-/-组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显低于哮喘组,但明显高于对照组(均P<0.05)。结论:Ⅰ型NKT细胞可以增强哮喘小鼠气道炎症,但并不是哮喘小鼠气道炎症形成的必需因素。     

N-乙酰半胱氨酸对哮喘小鼠模型气道炎症和氧化应激的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对哮喘模型小鼠气道炎症和氧化应激反应的影响及可能的机制.方法:选择18只SPF级BALB/c雌性小鼠,随机均分为对照组、哮喘组、N-乙酰半胱氨酸组,每组6只.哮喘组、N-乙酰半胱氨酸组雾化激发构建小鼠哮喘模型,N-乙酰半胱氨酸组每次雾化开始前30 m...     

cAMP直接激活的交换蛋白在哮喘小鼠气道重塑中的作用

目的:观察抑制环磷酸腺苷(cAMP)直接激活的交换蛋白(Epac)对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法:18只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组(PBS组)、哮喘组(OVA组)、Epac抑制剂组(ESI-09组),每组6只。3组小鼠均给予卵清蛋白(OVA)致敏,PBS组给予PBS激发,OVA组和ESI-09组给予OVA激发,其中ESI-09组于每次激发前30 min给予腹腔注射ESI-09(溶于DMSO)处理,PBS组和OVA组对应给予等浓度DMSO处理。末次激发24h后,取小鼠肺组织固定、切片行PAS、Masson三色染色及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学检测,以便分别对气道杯状细胞增生、胶原沉积及平滑肌细胞增生肥大等情况进行评估,结果以杯状细胞(PAS+)、胶原(Masson+)及平滑肌细胞(α-SMA+)着色面积/支气管基底膜周长(μm2/μm)表示。结果:OVA组和ESI-09组杯状细胞的增生均显著高于PBS组[3.05±0.12、11.45±1.28比0.00±0.00(PBS组未见PAS+区域),均P<0.01],且ESI-09组显著高于OVA组(P<0.05);Masson染色显示,胶原的沉积OVA组和ESI-09组均显著高于PBS组(3.40±0.35、5.28±0.58比1.10±0.11,均P<0.01),且ESI-09组显著高于OVA组(P<0.01);α-SMA免疫组化可见OVA组α-SMA的表达显著高于PBS组(3.90±0.23比2.48±0.39,P<0.05),且ESI-09组(5.55±0.59)又显著高于OVA组(P<0.05)。结论:抑制Epac明显加重了慢性哮喘小鼠模型气道重塑,因此cAMP-Epac信号通路可能对慢性哮喘小鼠气道重塑起保护作用。     

阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症和Th2细胞因子的影响

目的观察不同浓度阿奇霉素对哮喘小鼠气道炎症细胞和辅助性T细胞2(Th2)型细胞因子IL-4、IL-5的影响。方法BALB/c小鼠40只随机分为5组:A组(哮喘模型组,8只)、B组(小剂量阿奇霉素治疗组,8只)、C组(中剂量阿奇霉素治疗组,8只)、D组(大剂量阿奇霉素治疗组,8只)、E组(正常对照组,8只)。A、B、C、D组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白(OVA)20μg和氢氧化铝1mg的混悬液腹腔注射致敏,于第21～30天每天给予雾化吸入2%OVA生理盐水溶液建立哮喘模型,第14～30天,A组每天激发前30min给予生理盐水0.2ml腹腔注射作为阳性对照组,B、C、D组每天激发前30min分别给予阿奇霉素50、100、150mg.kg-1.d-1腹腔注射,均为每天1次。E组以生理盐水代替OVA致敏和激发。所有动物于第31天处死,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),制备肺组织石蜡切片,用计数板检测BALF中炎症细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中IL-4、IL-5水平。结果A、B、C、D组的BALF中炎症细胞总数、EOS数及IL-4、IL-5水平较E组明显增高,HE染色显示A、B、C、D组支气管黏膜周围有EOS、淋巴细胞等炎症细胞浸润,EOS分别与IL-4、IL-5呈显著正相关。阿奇霉素可明显降低哮喘小鼠的气道炎症和IL-4、IL-5水平。结论阿奇霉素具有明显抗哮喘气道炎症的作用,可通过抑制Th2反应,减轻慢性气道炎症。     

通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症的影响

目的 观察通光散对小鼠哮喘模型气道反应和气道炎症的影响.方法 35只6周龄BALB/c小鼠随机分为哮喘模型组、正常对照组和药物实验组.模型组和药物组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏、激发;药物组在最后一次致敏后每天灌胃给予通光散汤0.72 mL(相当于0.04 g生药);对照组以等体积的NS代替OVA致敏、激发.末次激发48 h后处理小鼠:无创法测定小鼠的气道高反应性,观察气道阻力变化;支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞学分类;观察肺组织的病理变化.结果 ①药物组小鼠气道阻力的变化与模型组相比明显下降,差异显著(P＜0.05);②药物组BALF白细胞总数和Eos(％)与模型组相比明显降低(P＜0.05).③模型组小鼠肺脏组织支气管、血管黏膜下和周围肺组织有明显的炎症细胞浸润,大量炎症细胞向支气管和血管迁移,上皮细胞部分有脱落,部分可见黏液栓,血管壁明显水肿;治疗组小鼠肺组织炎性细胞浸润和管腔黏液分泌情况较模型组明显减轻,气道粘液的分泌量得到明显的控制.结论 通光散汤对小鼠哮喘模型气道高反应性和气道炎症有显著抑制作用.     

银杏叶提取物对哮喘小鼠气道重塑的影响及机制

目的:探讨哮喘小鼠气道重塑与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系以及银杏叶的干预作用.方法:建立哮喘小鼠气道重塑模型,40只BALB/c小鼠按随机数字法分为4组:对照组,哮喘组,银杏叶干预组,地塞米松干预组.以鸡卵清蛋白(OVA)致敏并激发制备小鼠慢性哮喘模型.对肺组织切片行苏木精-伊红染色观察气道重塑情况.RT-PCR检测各组小鼠肺组织MMP-9 mRNA表达.结果:哮喘组动物出现管壁增厚、平滑肌增生、黏液分泌增加等气道重塑的特征性改变,MMP-9 mRNA水平增高.地塞米松干预组和银杏叶干预组与哮喘组比较,炎症反应轻微,平滑肌增生、粘液分泌不明显,MMP-9 mRNA水平表达降低,与对照组比较差异有统计学意义.结论:长期吸入变应原可导致气道重塑,MMP-9在气道重塑中发挥了作用,银杏叶的干预作用说明在血小板活化因子(PAF)和MMP-9之间可能存在某种联系.     

红景天苷对哮喘模型小鼠气道炎症的抑制作用及其机制

目的:探讨红景天苷(SAL)对小鼠急性哮喘气道炎症的干预作用,并阐明其作用机制.方法:将50只清洁级BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组、低剂量SAL组、高剂量SAL组和地塞米松组,每组10只.于实验第1、7和14天,腹腔注射混合液200μL(由生理盐水、10 mg OVA和1 mg氢氧化铝组成)建...     

谷氨酰胺对内质网应激介导的哮喘小鼠气道重塑模型的干预作用

[目的]探讨谷氨酰胺对内质应激介导的哮喘小鼠气道重塑模型的干预作用及其机制.[方法]取雌性BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组(OVA慢性气道重塑)及谷氨酰胺治疗组(750 mg/kg),给予相应处理.在末次给药24 h后,给予不同剂量乙酰胆碱激发行气道反应评估;取小鼠肺组织,采用免疫组织化学染色法检测α-SAM表达水平,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中OVA特异性IgE、细胞因子IL-6,IL-12含量,Western blot法检测肺组织中的CHOP,GPR78含量.[结果]与模型对照组比较,谷氨酰胺治疗组OVA诱导的哮喘小鼠气道高反应性明显降低(P<0.05),肺组织中α-SAM表达明显减少(P<0.05),BALF中OVA特异性IgE和IL-6水平显著降低,IL-12水平明显升高(P<0.05);Western blot检测结果显示,与模型对照组比较,谷氨酰胺治疗组CHOP和GRP78蛋白表达量显著降低(P<0.05).[结论]谷氨酰胺可通过抑制内质网应激减缓气道炎症及气道重塑,对过敏性哮喘具有保护作用.     

组蛋白去甲基化酶KDM2A在支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑中的作用

目的 研究组蛋白去甲基化酶—赖氨酸特异性的去甲基化酶2A(KDM2A)在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用。方法 通过腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)致敏雾化激发哮喘大鼠模型。将18只6～8周龄SPF级SD雌性大鼠随机分为3组：对照组、哮喘4周组、哮喘8周组。哮喘模型成功后,通过HE染色观察肺组织气管及血管周围炎性细胞浸润;PAS染色观察杯状细胞增生及黏液分泌;Masson染色观察气道壁纤维化;荧光免疫组织化学法观察气道平滑肌增殖情况;Western blot法检测KDM2A蛋白表达水平。结果 哮喘4周组、哮喘8周组大鼠炎症评分、炎症细胞计数均高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,哮喘组气道上皮中杯状细胞增生和黏液分泌、肺组织中胶原纤维沉积及气道平滑肌细胞增生均增加(P<0.01),随着OVA致敏时间延长,哮喘8周组较哮喘4周组气道炎症及气道重塑改变更严重。Western blot结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠肺组织KDM2A表达高于对照组,哮喘8周组KDM2A表达亦高于哮喘4周组,差异均有统计学意义(P<0.01);各组大鼠肺组织KDM2A蛋白表达与气道...     

小青龙汤合香砂六君子汤对过敏性哮喘小鼠气道反应性与细胞因子的影响

目的:探讨中药名方小青龙汤与香砂六君子汤的合方,对于小鼠过敏性哮喘模型气道反应性与细胞因子的影响。方法:将20只雌性BALB/c小鼠,随机平均分为正常对照组(control组)、哮喘模型组(OVA组)、中药合方低剂量组(LD组)、中药合方高剂量组(HD组)。OVA、LD、HD组使用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发以制作哮喘模型。在OVA激发结束后24 h以整体体积描记法检测小鼠气道反应性(Penh)。将小鼠犠牲后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计算嗜酸性颗粒细胞(EOS)所占比例,并将BALF经离心后取上清液,以酶联免疫吸附法(ELISA)测定其中白细胞介素-4,5,13(IL-4,IL-5,IL-13)与Ig E之含量变化。接着取小鼠肺叶支气管组织切片经HE染色后,以光学显微镜观察组织型态与炎性细胞浸润情况。结果:中药合方高、低剂量组之小鼠气道反应性(Penh)、BALF中EOS所占比例、BALF上清液中细胞因子(IL-4,IL-5,IL-13,Ig E)含量,与OVA组相比,均有显著下降(P0.05)。结论:小青龙汤合香砂六君子汤能有效降低哮喘小鼠的气道反应性,调控细胞因子含量水平,从而改善哮喘之气道炎性反应。     

小鼠哮喘模型气道反应性检测方法的建立

目的 建立小鼠哮喘模型气道反应性检测方法。方法 20只BABL／c小鼠随机分为两组：模型组以OVA致敏、激发;对照组以等体积的NS代替OVA致敏、激发。末次激发48h后处理小鼠：用Buxco小鼠肺功能仪有创肺阻抗法测定小鼠的气道反应性,观察气道阻力增高一倍时乙酰甲胆碱的浓度（PC100）;支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞学分类;观察肺组织的病理变化。结果 ①模型组PC100均≤6．25mg／ml,对照组PC100均≥6．25mg／ml。②模型组BALF白细胞总数和Eos（％）与对照组相比明显增高（P〈0．01）。③模型组小鼠肺脏组织支气管及血管周围大量炎性细胞浸润,气道上皮分泌大量黏液。结论 在成功建立BALB／c小鼠哮喘模型的基础上,通过小鼠有创肺功能仪成功建立了小鼠气道反应性的检测方法。     

抗CD1d单克隆抗体对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察抗CD1d单克隆抗体对鸡卵清白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:将15只BALB/c小鼠随机分为抗CD1d单克隆抗体组、哮喘组和对照组,每组5只。抗CD1d单克隆抗体组、哮喘组和对照组分别采用OVA和PBS致敏和激发;抗CD1d单克隆抗体组在激发前1h尾静脉注射抗CD1d单克隆抗体,哮喘组和对照组以等量PBS代替。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和支气管杯状细胞数量;瑞氏-姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数和分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平;流式细胞术检测肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4~+和IFN-γ~+Ⅰ型NKT细胞的数量。结果:抗CD1d单克隆抗体组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞减少;BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞数量明显减少、血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平明显低于哮喘组(均P<0.05)。抗CD1d单克隆抗体组小鼠肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4~+和IFN-γ~+Ⅰ型NKT细胞数量明显低于哮喘组(均P<0.01)。结论:抗CD1d单克隆抗体可能通过抑制Ⅰ型NKT细胞活性减轻哮喘小鼠气道炎症。     

薄荷醇下调肺组织P物质改善哮喘气道炎症及气道高反应性的研究

目的 探讨雾化吸入薄荷醇对哮喘小鼠气道炎症及气道高反应性的作用及其对肺组织P物质(substance P,SP)含量的影响.方法 按随机数字表法将30只6～8周龄BALB/c雌鼠分为对照组、哮喘组及薄荷醇治疗组,哮喘组和薄荷醇治疗组用鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏激发建立哮喘模型,薄荷醇治疗组于每次雾化激发前给予1.6％薄荷醇溶液5 mL雾化吸人30 min,连续10 d,对照组用PBS替代.于末次雾化24 h内行肺功能检测小鼠气道高反应性;48 h内灌取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)计数细胞总数及细胞分类;肺组织HE染色观察肺部病理改变;ELISA检测血清总免疫球蛋白E(IgE)水平及肺匀浆SP含量;免疫组化染色检测肺组织SP的表达.结果 哮喘组气道高反应性明显高于对照组(P＜0.05),而薄荷醇治疗组较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞绝对计数均较对照组明显增加(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组显著减少(P＜0.01);HE染色显示,哮喘组支气管和血管周围炎症细胞浸润明显,薄荷醇治疗组较哮喘组明显减轻;ELISA结果显示,哮喘组血清总IgE水平及肺匀浆SP含量均较对照组升高(P＜0.01),薄荷醇治疗组较哮喘组减轻(P＜0.05);免疫组化染色结果显示,哮喘组肺组织SP在气道上皮细胞及血管周围强阳性表达,薄荷醇治疗组中度阳性表达.结论 雾化吸入薄荷醇能减轻哮喘小鼠气道炎症及降低气道高反应性,可能与减少SP含量进而减轻肺部神经源性炎症相关.     

间充质干细胞在哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用

目的 探讨间充质干细胞(MSCs)在哮喘大鼠慢性气道炎症及气道重塑中的作用.方法 将18只SD雌性大鼠随机分为:正常对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只.卵清蛋白(OVA)致敏后,雾化吸入OVA制作哮喘模型.哮喘模型成功后,测定气道压力;通过HE染色、Image-ProPlus图像分析软件分析大鼠气道平滑肌的嗜酸性粒细胞(ESO)浸润情况,测定支气管管腔的内周长、管壁面积,支气管平滑肌面积、平滑肌细胞核数;采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,通过流式细胞仪检测各组MSCs的含量,并分析其与哮喘气道炎症及气道重塑的关系.结果 哮喘4周组、哮喘8周组大鼠的气道反应性、气道壁EOS计数、支气管管壁面积、支气管平滑肌面积、平滑肌细胞核数目、外周血中MSCs比例均较正常对照组显著增加(P ＜0.01,P＜0.05);哮喘两组间上述指标差异均有统计学意义(P＜0.01);Pearson线性相关显示:各组大鼠外周血单个核细胞中MSCs的含量与气道反应性、EOS浸润数、支气管壁面积、支气管平滑肌厚度及支气管平滑肌细胞核数均呈正相关(P＜0.01).结论 MSCs在哮喘状态下含量增加,可能参与了哮喘的慢性气道炎症及气道重塑.     

两种激素干预对小鼠哮喘气道重塑模型的影响

目的 建立小鼠哮喘气道重塑模型,观察腹腔注射地塞米松和雾化吸入布地奈德对气道重塑的干预作用.方法 将32只BALB/C级小鼠随机分为4组:对照组(A组)、哮喘气道重塑模型组(B组)、地塞米松治疗组(C组)、布地奈德治疗组(D组),每组8只.B,C,D组以卵蛋白致敏,后以卵蛋白反复激发,C组在每次激发前给予腹腔注射地塞米松,D组在每次激发前给予布地奈德雾化吸入,A组以生理盐水代替致敏和激发,解剖小鼠肺组织包埋、切片,行HE染色和Masson染色.然后分析HE染色下各组支气管壁总面积(Wat)和支气管壁平滑肌面积(Wam),分析Masson染色下基底膜下胶原沉积面积(Wcol).结果 B组小鼠支气管壁总面积(Wat)/基底膜周径(Pbm)、支气管平滑肌面积(Wam)/基底膜周径(Pbm)、胶原沉积面积(Wcol)/基底膜周径(Pbm)均高于A组正常对照组的小鼠(P<0.05);C组和D组的(Wat)/(Pbm),(Wam)/(Pbm),(Wcol)/(Pbm)都低于B组(P<0.05);C组和D组比较,无明显的差异(P>0.05).结论 小鼠哮喘形成过程中,气道重塑起着重要作用;腹腔注射地塞米松及雾化吸入布地奈德均能抑制气道重塑的形成,两者比较作用无差异.