流感病毒快速检测法对甲型H1N1流感的临床诊断价值

目的 评价国产（A型）流感病毒快速检测试剂盒（广州万孚生物技术有限公司,中国）对甲型H1N1流感的临床诊断价值.方法 对2009年10月20日～11月23日本院发热门诊的符合流感样病例的患者35例,使用国产（A型）流感病毒快速检测试剂盒进行鼻拭子甲型H1N1流感病毒快速检测（简称快速试纸法）,同时取咽拭子行聚合酶链式反应（PCR）检测.结果 快速试纸法检测病毒阳性率为68.5%,PCR法流感病毒检出率为60%.与PCR法相比,前者的敏感性为90.4%,特异性为64.2%,阳性预测值79.1%,阴性预测值为81.8%.结论 快速试纸法检测有较高的敏感性,可以满足临床快速诊断甲型H1N1流感的需要.     

AlphaLISA检测新型冠状病毒

目的 建立均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)快速检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2).方法 采用新型冠状病毒抗体偶联发光微球,生物素标记另一抗体,以及链霉亲和素偶联感光微球构建新型冠状病毒AlphaLISA检测体系.采用SARS-CoV-2真核表达抗原和灭活病毒对AlphaLISA方法进行评价,并与商业化ELISA试剂盒进行比对.结果 确定单抗1#与多抗组别作为新型冠状病毒AlphaLISA检测的抗体对,AlphaLISA对新型冠状病毒抗原的检出限为0.39 ng/ml,具有较好的重复性,批内差1.90％～8.93％,批间差1.75％～9.04％,对不同临床样本的检测具有较好的耐受性,与ELISA试剂盒相比对灭活病毒的检测敏感性更高.结论 AlphaLISA可实现对SARS-CoV-2的高效快速检测.     

SWI对轻型颅脑损伤的诊断价值

目的:探讨SWI在轻型颅脑损伤(mTBI)诊断中的应用价值。方法:收集42例mTBI患者的常规MRI、DWI、SWI图像及临床资料,比较SWI与常规MRI、DWI对异常信号及微出血灶的检出能力,评价SWI在mTBI诊断中的作用。结果:SWI共检出81个微出血灶,病灶检出率为72.3%,明显高于常规MRI及DWI,差异均有统计学意义(均P0.001)。SWI序列上,格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分为13、14、15分患者的微出血灶平均数目分别为2.4、1.8、1.5个,微出血灶主要分布于皮层/皮层下白质及深部白质,而胼胝体、基底节区及脑干/小脑则较少见。结论:SWI较常规MRI和DWI对mTBI患者微出血灶具有更高的诊断敏感性。     

轻度颅脑损伤诊断研究进展

轻度颅脑损伤（mTBI）是一种常见多发疾病。尤其在军队,指战员在军事训练或执行任务时很易发生mTBI,但缺乏标准化的指南用于现场快速诊断并决定是否本级留治或后送。目前检体诊断、神经影像学、电生理技术、实验室生物标志物检测和快速便携诊断技术等都广泛应用于mTBI诊断。一些先进产品也相继问世,其中一些方法具有良好应用前景。笔者梳理了这些方法并作简要概括。     

用于氯霉素和克伦特罗兽药残留检测的高通量悬浮芯片技术研究

目的：建立一种检测氯霉素（chloramphenieol,CAP）和克伦特罗（clenbuterol,CL）兽药残留的新型高通量悬浮芯片技术。方法：合成2种兽药的牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）结合物,并进行紫外和质谱鉴定。将2种兽药的BSA蛋白结合物偶联于悬浮芯片的固相载体——聚苯乙烯荧光微球上,在液相反应体系中,2种小分子兽药抗原和微球上的结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗,优化和筛选出微球上偶联BSA结合物和反应抗体的最适加入量。绘制2种兽药残留检测的标准曲线,进行特异性检测和盲样的测定。结果：2种小分子兽药可与BSA成功偶联,CAP和CL与BSA的偶联比分别为40：1和31：1。经过优化,2种结合物的最适加入量均为5μg／100μl羧基微球;最佳抗体加入量分别为5和1 ng／2000个反应微球。检测的标准曲线方程和方程相应的决定系数分别为：YCAP=-250．323＋4103．517／[1＋（X／30121．243）^0.980],F2=0．994和Yα=-263012．682＋265751．765／[1＋（X／6．063）^0.115],r^2=0．989。2种兽药悬浮芯片的检测区间分别为40～6．25×10^5 ng／L和50～7．81×10^5 ng／L;最低检出限为：40ng／L和50ng／L。CAP和CL最低检出限均低于国标。同时,悬浮芯片的特异度测试良好,与其他药物无明显交叉反应。悬浮芯片对盲样测定的检测浓度值与实际浓度偏差较小。扫描电镜对微球表面微观结构的观察也直观地确证了蛋白在微球上的成功偶联。结论：高通量悬浮芯片技术操作简单,灵敏快速,成本低廉,为多种兽药残留的快速检测提供了新方法,具有广阔的应用和发展前景。     

基于上转发光免疫层析技术快速检测单核细胞增生李斯特菌

目的：建立可快速检测单核细胞增生李斯特菌（ Listeria monocytogenes, LM）的上转发光免疫层析技术（ up-converting phosphor technology based lateral flow assay , UPT-LF）,即LM-UPT-LF。方法针对LM特异的p60蛋白制备单克隆抗体,并与上转发光纳米颗粒（ up-converting phosphor nanoparticles , UCP-NPs）共价偶联作为结合物,采用双抗体夹心免疫层析模式建立LM-UPT-LF,并对其敏感性与特异性进行评价。结果建立了可快速检测LM的LM-UPT-LF平台,在样本＜10 cfu、10～99 cfu、100～1000 cfu绝对LM污染量条件下可分别在培养20、18、16 h检出阳性。其他13种食源性致病菌在高浓度（109 cfu／ml）时无非特异性交叉。结论所建立的LM-UPT-LF操作简便快速,具有良好的敏感性和特异性,适用于一线病原调查与检测。     

131I-BAC5和CT-BAC5联合应用对鼻咽癌CNE-2细胞微球的作用

目的 观察中华眼镜膜毒素（CT）和131I与抗鼻咽癌（NPC）单克隆抗体BAC5的偶联物，对NPC CNE－2细胞微球的抑制或破坏作用。方法 采用氯胺－T法制备131－I－BAC5，并用异型双功能交联剂（SPDP）偶联CT－BAC5，分别或联合应用于NPC CNE－2细胞微球，观察微球生长的体积变化率和评价其受抑制或受破坏的情况，结果 CT和BAC5的偶联率为32．4％，与对照组比较，CT对微球的生长无明显抑制作用（P＞0．05），CT－BAC5的偶联率为32．4％，与对照组比较，CT对微球的生长无明显抑制作用（P＞0．05），CT－BAC5有明显的抑制作用（P＜0．05），131I－BAC5，131I－BAC5＋CT－BAC5有非常明显的破坏作用（P＜0．01），结论 肿瘤多细胞微球是一种用于体外研究肿瘤治疗效果的理想模型之一，CT－BAC5和131I－BAC5联合免疫导向治疗NPC比单项治疗效果更好。     

腺病毒IgM抗体AlphaLISA快速检测方法

目的 建立一种腺病毒IgM抗体的均相光激化学发光免疫快速检测方法(AlphaLISA).方法 通过筛选小鼠抗人IgM单克隆抗体标记受体微球、链霉亲和素偶联供体微球和生物素化腺病毒抗原的最适比例,构建腺病毒IgM抗体均相AlphaLISA快速检测体系;采用呼吸道感染样品对该检测体系进行评价,并与间接免疫荧光方法比较.结果...     

量子点的表面修饰、表征及其活细胞成像研究

目的 通过对疏水性量子点表面进行亲水性改造并偶联单克隆抗体,制备免疫荧光探针用于细胞荧光标记示踪.方法 将牛血清白蛋白(BSA)作为乳化剂分子对疏水性量子点进行表面亲水性改造,检测亲水性改造后的量子点物理特性,采用MTT法测定其对细胞活力的影响.将亲水性改造后的量子点与trastuzumab偶联,对HER-2阳性乳腺癌细胞进行实时荧光成像检测.结果 经亲水性改造后的量子点粒径约70nm,分布较均一;在不同离子强度和pH环境中,仍保持良好的发光性能和胶体稳定性;生物相容性佳,未检测到明显细胞毒作用;经表面偶联肿瘤特异性单克隆抗体后,成功地对HER-2阳性乳腺癌细胞进行了长时间的活细胞跟踪成像研究.结论 亲水性量子点可通过选择性偶联抗体获得免疫量子点荧光探针,从而对细胞、组织等进行特异性荧光成像和检测.     

早孕试条法联合pH试纸法诊断胎膜早破的价值

目的　探讨早孕试条法联合pH试纸法 ,在胎膜早破诊断中的价值。方法　对 80例胎膜早破孕妇的宫颈阴道分泌物进行早孕试条法和pH试纸检测。结果　联合法诊断胎膜早破的准确率 88 3 0 %,敏感性 84 3 5 %,特异性 1 0 0 .0 0 %。结论　早孕试条法联合pH试纸法诊断胎膜早破 ,是一种特异性的诊断方祛 ,适用于临床难于确诊的胎膜早破的诊断     

石头鱼毒素胶体金检测试纸条的研制

目的：研制石头鱼毒素（neoverrucotoxin,stonefish toxin,neoVTX）的胶体金检测试纸条,建立一种该毒素的快速检测方法。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,以neoVTX马血清抗体用于胶体金标记,并将该抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,利用双抗体夹心法原理制备胶体金检测试纸条。结果制备的检测试纸条对该毒素检测灵敏度为50 ng／ml,该试纸与牛血清白蛋白、卵清蛋白及水母毒素等蛋白无反应,具有较好的特异性。结论成功研制了石头鱼毒素胶体金检测试纸,该试纸条灵敏度高,特异性好,可用于该毒素的快速检测。     

应用阳离子微电流检测技术在手术中定性诊断肿瘤的研究

目的：探讨一种手术中快速定性检测肿瘤新的方法。方法：选择术中切取的组织标本185例,进行冷冻切片诊断同时,同步应用阳离子微电流检测技术进行检测。CQ-1肿瘤检测仪探头置于样本上,荧屏上出现并行2条曲线,红线为标准线,黑线为检测线。单点测试5-10s,多点检测。冷冻切片诊断常规进行,检测结果与冷冻切片、石蜡切片相对照。结果：阳离子浓度曲线值恶性肿瘤0μA以上,交界性肿瘤0--3μA,良性肿瘤0μA以内。结果与冷冻切片诊断符合176例（95.14%）,与常规病理诊断符合174例（94.05%）。结论：该技术可广泛适用于外科、病理科室手术中对肿瘤的诊断,操作简便,准确率高,可多点大块定性检测肿瘤标本,判断切缘,确认病变范围,单次时间比冷冻切片诊断提前20 min。液态、已坏死、钙化与骨组织标本不适用。     

高通量测序结合捕获技术检测非霍奇金B细胞淋巴瘤中重链基因重排VDJ区的临床研究

目的探讨高通量测序（Next-Generation Sequencing,NGS）结合基因捕获技术检测非霍奇金B细胞淋巴瘤中免疫球蛋白重链基因（Immunoglobulin heavy chain gene,IgH）重排的临床应用。方法收集2019年3月至2020年5月在中国人民解放军总医院第一医学中心治疗的15例成熟B细胞淋巴瘤病例,包括11例弥漫大B细胞淋巴瘤,1例滤泡性淋巴瘤,2例边缘区淋巴瘤,1例边缘区淋巴瘤伴局部弥漫大B转化淋巴瘤。采集其初诊时的组织样本与血浆样本,通过NGS检测IgH重排,并分析其与临床病理特征的相关性。结果在组织样本中,平均检出11 212条唯一的互补决定区3（Complementarity Determining Region 3,CDR3）序列,范围从515到41 476条;在血浆样本中,平均检出1 689条唯一的CDR3序列,范围从238到6 499条。在73.3%（11/15）的患者组织中检出特异性寡克隆扩增,在其对应的血浆样本中,72.7%（8/11）存在组织中的特异性寡克隆,并且二者的比例显著相关（Spearman rho=0.803,P=0.003）。另外,存在特异性寡克隆的组织样本中,克隆指数显著高于没有特异性寡克隆的样本（P<0.05）,表明存在特异性寡克隆的样本的IgH重排多样性较低。现有数据尚未发现克隆指数及组织中特异性寡克隆数与各项临床病理指标存在显著相关性。结论通过NGS检测非霍奇金B细胞淋巴患者的IgH重排,可以有效获得具体量化的CDR3序列,全面评估克隆多样性,并在大部分样本中得到特异性寡克隆序列。血浆检测结果与组织中的结果显著相关,可用于后续微小病灶残留的检测与复发监测。     

用免疫微球荧光测定法检验C_1型葡萄球菌肠毒素的研究

用 NalO_4醛化 Sepharose CL4B 微球。将兔抗 C_1 型葡萄球菌肠毒素抗体(兔抗SEC_1抗体)偶联到醛化的 Sepharose CL4B 微球上,制得 Sepharose CL4B 免疫微球。我们用 FITC 示标的兔抗 SEC_1抗体作示踪溶液,用上述免疫微球检验 SEC_1,用光学纤维显微荧光计测量标本的荧光发射。方法的检测敏感度为156ng SEC_1/ml。该方法也可用于检测其他可溶性抗原或抗体。     

自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的临床价值

目的：探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病诊断中的临床价值。方法87例自身免疫性肝病分为原发性胆汁性肝硬化（PBC）组（n=45例）和自身免疫性肝炎（AIH）组（n=49例），同期选择40例乙型肝炎病毒（HBV）感染者和45例门诊健康体检者。采用免疫印迹法检测抗线粒体抗体（AMA-M2）、抗三联融合蛋白抗体（M2-3E）、抗核点型抗体（SP100）、抗早幼粒细胞白血病蛋白（PML）、抗核糖核蛋白抗体（GP-210），采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗核抗体（ANA）及肝炎病毒标志物。结果 PBC组和AIH组患者自身抗体检出阳性率（93.3%、83.3%）均明显高于HBV组和对照组（7.5%、2.2%）（P<0.05）。结论自身抗体检测对自身免疫性肝病诊断具有较高的临床价值，其中AMA-M2、M2-3E等抗体诊断PBC的敏感性较高，而ANA诊断AIH的敏感性最高。     

载鼠疫亚单位疫苗多孔微球的制备及其免疫效果评价

目的制备载鼠疫F1抗原疫苗多孔微球,并评价其免疫效果。方法采用生物可降解高分子材料PLGA制备多孔微球,考察不同致孔剂对微球形态和孔隙率的影响,并将鼠疫F1抗原蛋白疫苗吸附到多孔微球上,分别于第0天和第21天肌肉注射免疫BALB/c小鼠,以其为实验组,分别以单独注射疫苗和单独注射多孔微球的小鼠为对照组。在第6、8、10周取血测定抗体滴度,并于第10周取血后皮下注射鼠疫杆菌攻毒（剂量：600×LD50）,攻毒后观察14d。结果 F1抗原多孔微球组抗体滴度明显高于对照组（P〈0.05）;攻毒后,F1抗原多孔微球组免疫的小鼠全部存活,且健康状况良好,而F1抗原对照组小鼠存活率为20%,多孔微球对照组小鼠全部死亡。结论多孔微球球形良好,孔隙率高,用作鼠疫亚单位疫苗载体可以明显提高其免疫效果。     

磁性亲和分离的实验研究

目的：以磁性微球作为载体材料，使亲和分离过程更为简便迅速，并降低成本。方法与结果：使用自制的磁性微球偶联伴刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）用于重组人血小板生成素（ｒｈＴＰＯ）的亲和富集；偶联抗体用于甲状腺素（Ｔ４）的放射免疫测定和水样中志贺菌的浓集和聚合酶链反应（ＰＣＲ）鉴定的前处理，效果也均较好，结论：本研究为上述３个领域的工作提供了一种有效可行而简便廉价的方法。     

~(131)IBAC_5和CT-BAC_5联合应用对鼻咽癌CNE-2细胞微球的作用

目的　观察中华眼镜蛇膜毒素 (CT)和131I与抗鼻咽癌 (NPC)单克隆抗体BAC5的偶联物 ,对NPCCNE 2细胞微球的抑制或破坏作用。方法　采用氯胺 T法制备131I BAC5,并用异型双功能交联剂 (SPDP)偶联CT BAC5,分别或联合应用于NPCCNE 2细胞微球 ,观察微球生长的体积变化率和评价其受抑制或受破坏的情况。结果　CT和BAC5的偶联率为 32 .4% ,与对照组比较 ,CT对微球的生长无明显抑制作用 (P >0 .0 5 ) ,CT BAC5有明显的的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,131I BAC5、131I BAC5 CT BAC5有非常明显的破坏作用 (P <0 .0 1)。结论　肿瘤多细胞微球是一种用于体外研究肿瘤治疗效果的理想模型之一。CT BAC5和131I BAC5联合免疫导向治疗NPC比单项治疗效果更好。     

免疫金标探针快速检测棘球蚴囊肿抗体

目的：建立斑点免疫金标渗滤法（DIGFA）检测棘球蚴囊肿抗体。方法：用金标探针检测血清抗体，并与ELISA法同步比较。结果：用DIGFA法检测已确诊棘球蚴肿病40例，抗体阳性38例，阳性率为90.4%，其它疾病94例，阳性6例，假阳性率6.2%，此方法的特异性和敏感性分别为90.4%和92.5%。与ELISA法相比无统计学差异（P＞0.05）。但具有操作简便、快速、实用等特点。结论：DIGFA是诊断棘球缦囊肿病实用有效的血清学检测手段。     

2022年乌鲁木齐市牛、羊包虫病感染抗体的检测与分析

【目的】掌握2022年乌鲁木齐市牛、羊包虫病的感染情况。【方法】采用包虫病抗体ELISA检测试剂盒对从乌鲁木齐市采集的835份非免疫牛、羊血清进行包虫病抗体检测和分析。【结果】所有样品的检测结果显示,牛、羊平均包虫病抗体阳性率为20.96%,其中牛为4.24%,羊为31.88%;对比不同区（县）检测结果,全市8个区（县）的羊均检出包虫病抗体阳性,其中乌鲁木齐县羊阳性率最高,为73.33%;牛有3个区（县）检出阳性,其中头屯河区的牛阳性率最高,为15.00%;对比散养户、规模场、活畜交易市场、屠宰场不同场点检测结果,牛散养户抗体阳性率为7.18%,其他场点阳性率均为0.00%,羊的抗体阳性率分别为36.21%、38.25%、16.67%、3.33%;对比牧区、半农半牧区、农区不同养殖环境检测结果,牛的抗体阳性率分别为0.00%、3.03%、7.50%,羊的抗体阳性率分别为50.00%、46.78%、20.09%。【结论】从全市采集的835份非免疫牛、羊血清中检出包虫病抗体阳性样本,说明我市牛、羊均存在包虫病的感染;对于不同采样场点,牛只有散养户检出阳性,羊是各类场点均检出阳性,其中,散养...