类固醇受体辅活化子-3基因敲除小鼠的繁殖与鉴定

目的:繁殖并鉴定类固醇受体辅活化子(steroid receptor coactivator,SRC) - 3基因敲除(SRC - 3-/-)小鼠.方法:通过SRC - 3-/-雄性小鼠与杂合子(SRC - 3+/-)雌鼠杂交,繁殖出SRC - 3+/-及SRC - 3-/-两种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR 法进行鉴定,并进一步提取肝、脾组织总蛋白,采用Western blot进行蛋白表型鉴定.结果:成功繁殖并准确鉴定出更多数目的SRC - 3-/-小鼠.SRC - 3+/+小鼠脾组织SRC - 3蛋白表达水平显著高于肝组织,而SRC - 3-/-小鼠的肝、脾组织均未见SRC - 3蛋白表达. 结论:雄性基因敲除小鼠与雌性杂合子杂交是获取大量SRC - 3-/-小鼠的有效途径,PCR法是其子代简单准确的鉴定方法.     

葡多酚对60Co-γ射线照射小鼠造血系统的辐射损伤修复作用

目的观察葡多酚对⁶⁰Co-γ射线照射小鼠造血系统辐射损伤的修复作用。方法 BALB/c小鼠随机分成5组,即正常对照组、照射对照组及葡多酚150、300、450 mg·kg^-1照射组,照射前15 d灌服给药,每日1次。除正常对照组外,其余小鼠⁶⁰Co-γ射线全身5 Gy辐照1次;于照射后第5日眼部取血后将小鼠颈部脱椎处死,取脾脏和骨髓细胞,对脾集落形成单位和骨髓单个核细胞进行计数,测定外周血白细胞数、骨髓细胞DNA的含量。结果与正常对照组比较,照射对照组小鼠脾脏系数、骨髓有核细胞数、外周血白细胞数和骨髓细胞DNA含量显著降低（P<0.05）,脾结节数显著增多（P<0.05）;与照射对照组比较,葡多酚300、450 mg·kg^-1组小鼠脾脏系数、骨髓有核细胞数、外周血白细胞数和骨髓细胞DNA含量显著增多（P<0.05）,脾结节数显著降低（P<0.05）。结论葡多酚对⁶⁰Co-γ射线引起的小鼠造血系统损伤有保护修复作用。     

芪黄汤对免疫性血小板减少症小鼠作用机制研究

目的 探讨芪黄汤对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠的作用机制。方法 将80只BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组、芪黄汤组,每组各20只。模型组、泼尼松组、芪黄汤组均用豚鼠抗小鼠血小板血清建立ITP模型。正常组、模型组小鼠灌服生理盐水,泼尼松组、芪黄汤组小鼠分别灌服相应药物,连续干预10 d。检测各组小鼠血小板计数(PLT),骨髓有核细胞计数,脾指数,外周血T淋巴细胞CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺PD-1⁺、CD8⁺PD-1⁺、CD4⁺PD-L1⁺、CD8⁺PD-L1⁺。结果 与正常组比较,模型组、芪黄汤组、泼尼松组的PLT、骨髓有核细胞降低,脾指数升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,芪黄汤组、泼尼松组的PLT、骨髓有核细胞升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,模型组小鼠外周血CD8⁺、C...     

相同剂量分割照射与单次照射对小鼠放射性心脏损伤的影响

目的 探索相同剂量分割照射与单次照射对小鼠放射性心脏损伤的影响。方法 野生型C57BL/6J小鼠21只,随机分为正常对照组、分割照射组和单次照射组。采用18 Gy X射线,对小鼠心脏分别进行分割(3 Gy/次,6次)和单次照射,建立放射性心脏损伤模型。照射后7和28 d通过全自动生化分析仪检测小鼠心肌酶损伤标志物肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK?MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和LDH1,以及外周血清离子(K⁺、Ca²⁺、Fe²⁺和Cl^-)的浓度;照射后28 d检测小鼠心脏功能,记录并分析左心室射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室质量(LV mass)和左心室收缩末期容积(LVESV)的变化;激光共聚焦显微镜观察心肌细胞线粒体膜通道孔(mPTP)开放和线粒体膜电位的改变;透射电镜观察心肌超微结构;Masson染色观察心肌纤维化;油红染色观察主动脉粥样硬化;实时定量PCR(RT?qPCR)和Western印迹检测凋亡相关基因与蛋白B细胞淋巴瘤?2相...     

ALK3基因在心肌细胞凋亡中的作用研究

目的 研究心脏特异性骨形态形成蛋白受体IA(BMPR1 A,又名ALK3)基因敲除小鼠心肌组织中的细胞凋亡情况,探讨ALK3基因在心肌细胞凋亡过程中的作用及细胞凋亡与室间隔缺损的关系. 方法 实验分为纯合子小鼠(α-MHC Cre+/-,ALK3 F/-),杂合子小鼠(α-MHCCre+/-,ALK3 F/+)和野生型小鼠(C57)3组,每组取5只.20只雌性α-MHCCre+/-,ALK3+/-小鼠和20只雄性ALK3 F/F小鼠交配获得心脏特异性ALK3基因敲除的纯合子小鼠(α-MHC Cre+/-,ALK3 F/-)和杂合子小鼠(α-MHC Cre+/-,ALK3 F/+);雌性和雄性C57小鼠各10只交配获得子代野生型小鼠;均取13.5d胚胎.提取胎膜DNA,PCR鉴定基因型.光镜下HE染色显示心脏组织形态,透射电镜观察心肌细胞的超微结构和凋亡情况,并以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡率. 结果 光镜显示α-MHC Cre+/-,ALKS F/-小鼠存在室问隔缺损现象,α-MHC Cre+/-,ALK3 F/+小鼠和C57小鼠心脏形态正常;透射电镜和TUNEL提示α-MHC Cre+/-,ALK3 F/-小鼠心肌细胞凋亡现象较α-MHC Cre+/-,ALK3 F/+小鼠和C57小鼠严重. 结论 ALK3基因在调控心脏发育和心肌细胞凋亡过程中起重要作用.心脏特异性ALK3基因敲除小鼠中,室间隔缺损可部分归因于心肌细胞的过度凋亡.     

Mxi1基因敲除小鼠遗传背景的转换研究

目的 对FVB/N品系Mxi1基因敲除(knock out,KO)(Mxi1-/-)小鼠进行遗传背景转换,为研究疾病发病机制提供更多种类的基因修饰小鼠.方法 将FVB/N品系杂合子小鼠(Mxi1+/-)与异性C57BL/6品系野生型(wild type,WT)小鼠(Mxi1+/+)杂交,获得杂合子F1代后将其与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,再选择F2杂合子与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,依此再回交8次后,子代互交.利用鼠尾DNA进行基因型鉴定及微卫星DNA(msDNA)检测,组织信使RNA(mRNA)和组织蛋白检测背景转换效率.结果 基因型鉴定为Mxi1-/-的互交子代小鼠msDNA检测结果与WT型C57BL/6小鼠一致,与FVB/N小鼠不同.PCR和Western印迹结果显示,随机选取的任意自交子代纯合子小鼠体内不表达Mxi1的mRNA和蛋白质,成功获得C57BL/6品系Mxi1-/-小鼠.结论 通过杂交-回交的方式成功获得的新品系Mxi1-/-小鼠能稳定地将突变基因传递给子代.这一成果为疾病动物模型的建立提供了更多的选择.     

7Gyγ射线照射后4h小鼠骨髓差异表达基因的初步研究

目的 为探讨急性放射病骨髓损伤的分子机制,研究整体照射条件下,辐射前后骨髓基因表达的变化。方法 运用抑制消减杂交、cDNA阵列杂交及Northern杂交等方法,筛选C57BL/6J小鼠受7Gy60Co γ射线照射后4h骨髓组织差异表达基因。结果 筛选到一系列辐射后可能表达升高的基因,其功能涉及细胞周期调控、抗氧化、DNA损伤修复和造血免疫,实验确证CDKN1A及S100A8基因的差异表达。结论 辐射后差异表达基因的功能说明骨髓受辐射后即发生哺乳细胞普遍发生的辐射效应(如DNA损伤、细胞周期阻滞、过氧化反应),同时骨髓的造血免疫功能及神经内分泌调节发生改变。     

类泛素化蛋白酶8对T细胞活化与分化的影响

目的 探讨类泛素化蛋白酶8(SENP8)在T细胞活化和分化过程中的作用。方法 C57BL/6背景的Senp8基因打靶小鼠(Senp8^F/F小鼠,简称WT小鼠)与同背景的Cd4-Cre转基因小鼠交配,获得在T细胞中特异性缺失SENP8的小鼠(Senp8^F/F;Cd4-Cre小鼠,简称KO小鼠),通过鼠尾基因组DNA PCR以及胸腺细胞免疫印迹实验进行基因型鉴定。流式细胞术分析SENP8缺失对稳态T细胞比例和数量的影响,并以李斯特菌尾静脉注射感染WT和KO小鼠,7 d后流式细胞术分析CD8⁺T细胞活化、扩增、效应因子表达情况。结果 PCR鉴定结果揭示,KO小鼠有Cd4-Cre基因和纯合的Loxp片段;免疫印迹结果显示,KO小鼠胸腺细胞中的SENP8蛋白表达下降;证明成功构建了T细胞中特异性敲除SENP8的小鼠模型。流式细胞术检测结果表明,CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞在稳态WT和KO小鼠脾脏中的比例和数量并无显著差异。李斯特菌感染7 d后,条件性缺失SENP8不影响CD4^...     

加味四物汤对小鼠镇痛作用及偏头痛的影响

目的比较加味四物汤不同提取工艺制备得到的样品（A、B、C、D）对小鼠镇痛作用和偏头痛保护作用,为进一步研究其作用机制提供前期药理学依据。方法采用小鼠醋酸扭体法记录小鼠在15 min内扭体次数,计算药物对扭体反应的抑制率。断头张口呼吸实验记录小鼠断头后张口喘息的时间。采用利血平致小鼠偏头痛模型,观察药物对血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）的活力和丙二醛（MDA）、钙离子(Ca²⁺)以及脑组织5-羟色胺（5-HT）含量的影响。结果加味四物汤样品A^D能明显延长小鼠断头张口喘息时间（P<0.05或P<0.01）;A和C能明显提高小鼠扭体反应抑制率（P<0.05或P<0.01）;能有效增强偏头痛模型小鼠血清SOD和GSH的活力（P<0.05或P<0.01）,降低MDA和Ca²⁺含量（P<0.05或P<0.01）,提高脑组织的5-HT含量（P<0.05或P<0.01）。结论加味四物汤样品A和C有明显镇痛作用和偏头痛保护作用,即当归和川芎的挥发油以及处方的乙醇提取部分可能为其有效作用的物质基础,其作用机制可能与调节血液自由基和Ca²⁺水平反常,以及脑组织的神经递质有关。     

真核起始因子(eIF6)对M2型巨噬细胞炎性介质表达的影响

目的探讨真核细胞起始因子(e IF6)基因对M2型巨噬细胞纤维化相关因子分泌及重要蛋白酶表达的影响。方法采用e IF6野生型(e IF6+/+)及敲降型(e IF6+/-)C57BL/6雄性小鼠,腹腔灌洗获得巨噬细胞,通过白介素4(IL-4)诱导形成M2型巨噬细胞。应用基因芯片比较e IF6+/+与e IF6+/-小鼠M2型巨噬细胞基因表达谱的差异,并通过RT-PCR及ELISA对芯片检测结果进行验证。结果基因芯片检测结果显示,与e IF6+/-小鼠组比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)基因表达显著下调,基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达显著上调。RT-PCR及ELISA检测结果显示,与e IF6+/-小鼠相比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中VEGF、TIMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05),而MMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论 e IF6可能通过抑制VEGF生成而防止血管及肉芽组织过度增生,同时通过调节MMP-2/TIMP-2的比例以平衡细胞外基质的降解与沉积,从而缓解瘢痕形成。     

胃癌组织肾筋膜下NOD/SCID小鼠移植瘤模型的建立及其MRI表现

目的 采用内镜下活检胃癌组织块肾筋膜下移植法建立 NOD/SCID 小鼠胃癌异位移植瘤模型,观察其 MRI 表现,为研究胃癌个体化治疗临床前实验提供适宜的动物模型。材料与方法 将 2020 年 12 月—2021 年 2 月在兰州大学第二医院经病理及影像确诊的 9 例晚期胃癌患者内镜下活检的约 1 cm³新鲜肿瘤组织种植到 NOD/SCID 小鼠右侧肾筋膜下。种植后每周行 1 次 MRI 检查至发现肾筋膜下成瘤,继续观察 4 周,采用 T2WI 序列测量并计算肿瘤体积,然后处死小鼠,取出瘤组织,将游标卡尺测量的肿瘤体积与最后一次 MRI 测量结果进行对比,并对移植瘤进行病理学检查。结果 异位移植瘤 T1WI 呈等低混杂信号,T2WI 呈等高信号,增强后明显不均匀强化,肿瘤向前挤压肾脏变形。MRI 与游标卡尺测量肿瘤体积分别为(512.12±25.52)mm³、(506.95±29.24)mm³,差异无统计学意义(t=0.808,P=0.436)。病理结果显示移植前后肿瘤组织学保持一致性。结论 本研究建立的胃癌异位移植...     

人参皂苷Rg1对小鼠学习记忆环节的影响

目的考察人参皂苷Rg1对小鼠学习记忆环节的影响。方法分别以戊巴比妥钠(500 mg·kg^-1)、亚硝酸钠(120 mg·kg^-1)、30%乙醇(10 ml·kg^-1)将昆明种小鼠造成记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,给予人参皂苷Rg1(100mg·kg^-1),采用Morris水迷宫考察其对上述模型小鼠学习记忆的影响。结果人参皂苷Rg1对模型小鼠的学习记忆获得障碍、巩固障碍和再现障碍均有显著的改善作用。结论人参皂苷Rg1改善学习记忆的机理是同时作用于获得、巩固和再现3个环节。     

不同剂量137Cs γ射线照射对小鼠造血系统的影响

目的 探讨不同剂量γ射线照射对不同品系小鼠造血功能的影响。 方法 用137Cs γ射线分别对IRM-2、ICR、615品系小鼠进行一次性全身4.0 Gy γ射线照射,在照后不同时间检测小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞（BMNC）的变化。对IRM-2小鼠、C57BL/6小鼠进行6.0 Gy γ射线照射,照后第45日,检测小鼠外周血象的变化。 结果 IRM-2、ICR、615品系小鼠经4.0 Gy照射后第2日,白细胞和BMNC数量降至最低值。第9日,IRM-2小鼠的BMNC计数与ICR、615小鼠相比,差异有统计学意义（t=3.725,P＜0.01;t＝8.487,P＜0.001）。第12日,IRM-2小鼠白细胞计数与ICR、615小鼠相比,差异有统计学意义（t=4.811和4.302,P均＜0.001）。第21日,IRM-2、ICR、615小鼠白细胞计数分别恢复到正常值的52.0%、60.7%、50.8%;BMNC计数分别恢复到正常值的90.8%、82.1%、75.4%。IRM-2、C57BL/6小鼠经6.0 Gy γ射线照射后第45日,IRM-2小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白（Hgb）、红细胞压积（Hct）计数均明显高于C57BL/6小鼠（t=5.629、7.788、4.929和6.064,P均 < 0.001）;IRM-2小鼠白细胞、红细胞、Hgb、Hct数量分别恢复至正常值的75.00%、98.95%、98.78%、97.55%;C57BL/6小鼠白细胞、红细胞、Hgb、Hct数量分别恢复至正常值的40.60%、93.88%、93.31%、93.84%。 结论 IRM-2、ICR、615、C57BL/6小鼠受照后造血功能的恢复趋势相同,但IRM-2小鼠在辐射损伤后其造血功能的恢复较快于ICR、615、C57BL/6小鼠。     

HPLC法同时测定高原多维元素片中四种水溶性维生素的含量

目的建立同时测定高原多维元素片中维生素B₁、B₂、B₆和烟酰胺的HPLC检测方法。方法采用Diamonsil C₁₈柱;流动相:庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠0.6 g加冰醋酸6 ml与三乙胺1 ml,加水至1000 ml,用2 mol·L^-1氢氧化钠溶液调节pH值至3.80)-甲醇（86:14）;流速:1.0 ml·min^-1;柱温:30℃;检测波长:280 nm。结果烟酰胺、维生素B₁、B₂、B₆分别在45.38¹13.46、15.85³9.63、15.53³8.82、1.59⁴.51μg·ml^-1浓度范围内峰面积与浓度之间呈良好的线性关系。结论本方法专属性强、准确度、精密度符合定量分析的要求,是一种简便、快速、准确的军特药质量检测方法。     

5-甲氧基色胺-α-硫辛酸盐对6.0 Gy受照小鼠造血系统的辐射防护作用

目的 探讨新化合物5-甲氧基色胺-α-硫辛酸盐（MLA）对亚致死剂量受照小鼠造血系统损伤的辐射防护作用。方法 将15只C57BL/6小鼠完全随机分为对照组、照射组和照射+MLA组。对照组接受假照射（0 Gy）,其余两组进行6.0 Gy全身137Cs γ射线照射。照射后2 h将照射+MLA组小鼠按10 mg/kg灌胃给药,持续给药3 d。待照射后30 d处死小鼠,取外周血和单侧骨髓细胞进行计数,检测骨髓细胞克隆形成能力、造血细胞活性氧以及烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸氧化酶4（NOX4）的表达。结果 与对照组比较,照射组小鼠骨髓有核细胞计数、粒细胞-单核细胞集落生成数量（CFU-GM）均明显下降（t=9.304、7.493,均P＜0.05）;骨髓细胞活性氧水平和NOX4表达显著升高（t=14.74、53.12,均P＜0.05）,且差异有统计学意义。与照射组相比,照射+ＭＬＡ组小鼠外周血WBC、CFU-GM显著升高（t=4.858、3.947,均P＜0.05）;骨髓细胞活性氧水平和NOX4表达显著下降（t=11.21、33.93,均P＜0.05）,且差异有统计学意义。结论 ＭＬＡ对辐射引起的造血系统损伤有一定的防护作用。     

载脂蛋白E基因多态性与初发急性缺血性脑卒中的相关性及其对近期预后的影响

 目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E, ApoE)基因多态性与初发急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke, AIS)的相关性,及其对AIS短期预后的预测价值。方法 选择2016-01至2018-01收治的445例初发AIS住院患者(初发AIS组)及363例体检者为研究对象(对照组)。全自动生化仪检测患者血脂、血糖等相关生化指标,采用实时荧光定量PCR的方法检测ApoE基因型。AIS患者按照中国急性缺血性脑卒中指南治疗。并于住院24 h内和出院6个月后,使用改良Rankin量表(modified Rankin scale, mRS)进行评估。采用χ²检验的方法,在不同人群分析ApoE基因多态性的差异。结果 在初发AIS患者中,ApoE基因型分布与对照组有统计学差异(χ² =13.31,P<0.01);入院即刻mRS>2组的患者中,ApoE 基因分型与mRS≤2组的患者明显不同(χ²=7.70,P<0.01)。出院后6个月,短期预后不良患者(mRS>2)ApoE基因型分布与预后较好的患者(mRS≤2)有统计学差异(χ²=11.31,P<0.01)。结论 ApoE基因多态性与初发AIS风险增加及严重性密切相关,并且该基因型可能是AIS短期预后不良的预测因素。     

shRNA重组慢病毒载体在小鼠造血系统中的长期高效表达

目的构建在小鼠造血干细胞中高效表达的shRNA重组慢病毒载体并研究其在小鼠造血系统中的长期稳定表达。方法将p-CMV和重组并鉴定正确的p-SFFV慢病毒载体与辅助病毒载体PAX2和PMD2G混合后,采用磷酸钙方法共转染293T包装细胞,获得具有感染能力的成熟慢病毒感染经流式细胞仪分选并体外培养的小鼠骨髓造血干细胞,分析其表达效率后,选取感染效率较高的p-SFFV慢病毒载体感染小鼠骨髓造血干细胞,并通过骨髓移植技术输入放射线照射后的小鼠体内。在移植后4周和9周分别获取小鼠外周血样本,移植后16周获取小鼠骨髓样本,分析供体细胞在小鼠体内的表达。结果成功重组了p-SFFV慢病毒载体并在小鼠骨髓造血干细胞中高效表达（感染效率72.4%）;骨髓移植实验表明,携带外源性shRNA的慢病毒载体可在小鼠造血系统内长期稳定表达（感染效率92%）。结论shRNA重组慢病毒载体在小鼠造血系统中可长期稳定表达。     

小鼠尾悬吊法模拟微重力对骨代谢的影响

 目的 研究模拟微重力条件对小鼠骨代谢的影响。方法 8周龄野生型C57小鼠,分别尾悬吊0周(对照组)、2周、4周,检测小鼠血清生化指标(Ca²⁺、ALP、BGP);分离股骨行Micro-CT扫描,检测股骨微观结构的改变;三点弯曲试验检测股骨的力学性能。所得数据用SPSS18.0进行统计学分析。结果 与对照组相比,尾悬吊2、4周组小鼠血清Ca²⁺浓度依次升高,而血清ALP、BGP浓度逐渐降低:血清Ca²⁺在悬吊0、2、4周值为(2.134±0.081)mmol/L,(2.261±0.079)mmol/L,(2.388±0.061)mmol/L,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05);血清ALP浓度为(4.598±0.478)U/100 ml,(3.447±0.393)U/100 ml,(3.142±0.328)U/100 ml,差异具有统计学意义;血清BGP浓度(8.529±0.523)ng/ml、(8.108±0.392)ng/ml、(7.832±0.282)ng/ml。股骨Micro-CT扫描结果显示:悬吊组小鼠股骨骨小梁数量减少,间隙增大,厚度降低,其中以骨体积比下降最为明显,悬吊2、4周值为对照组的47.3%、14.3%。三点弯曲结果显示尾悬吊后股骨极限强度及弹性模量均降低,对力耐受减弱,对照组、悬吊2、4周股骨骨折断裂能量为(6.220±0.482)mJ;(4.395±0.301)mJ;(2.855±0.425)mJ,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。结论 尾悬吊法能造成小鼠骨钙流失和骨质疏松,且严重程度与悬吊时间成正相关。     

血管内皮细胞生长因子基因治疗对骨髓微血管照射损伤的修复

目的　探讨内皮生长因子对骨髓移植小鼠骨髓微血管损伤修复的影响。方法　利用腺病毒介导人血管内皮细胞生长因子1 6 5(hVEGF1 6 5)在骨髓移植小鼠体内表达 ,检测骨髓微血管系统和造血细胞容量变化。结果　 10d接受hVEGF1 6 5基因治疗的小鼠胫骨中央静脉肿胀程度明显轻于注射腺病毒AdEGFP组和常规移植组 (P <0 0 1) ; 2 0d时该组小鼠胫骨中央静脉直径、微血管灌注面积已恢复正常 (P >0 0 5 ) ,且骨髓细胞容量高于其他组 (P <0 0 5 )。结论　VEGF基因体内高效表达可以加快全身照射引起的骨髓移植小鼠骨髓微血管损伤的修复 ,重塑微血管结构 ,促进骨髓造血功能的重建。     

FGFR2功能获得性突变对长骨发育过程的影响

目的 对比观察Fgfr2+/S252W突变型小鼠和同窝野生型小鼠长骨的生长发育情况,探讨FGFR2功能持续增强对软骨内成骨过程的影响.方法 采用经基因敲入技术建立的模拟人Apert综合征的Fgfr2+/S252W小鼠模型,经繁殖、鉴定后分为Fgfr2+/S252W功能获得突变型和同窝野生型.于出生后7、10、14、28d分别处死突变型和野生型小鼠各3只,对长骨进行长度测量、X线检查及Micro CT检查,另取部分长骨标本进行HE染色和免疫组化染色观察.结果 Fgfr2+/S252W突变小鼠呈典型Apert综合征圆颅和短颅畸形,体形发育缓慢,体长、四肢长度明显小于同窝野生小鼠,且长骨发育障碍,第二骨化中心延迟出现,骨密度及骨小梁数量低于同窝野生型小鼠.组织学观察可见突变小鼠胫骨近端生长板软骨细胞增殖区和肥大区厚度缩短,细胞排列不及野生型整齐,肥大软骨细胞体积小,免疫组化检测显示软骨相关增殖、分化基因表达均减弱.结论 FGFR2功能持续增强可导致小鼠长骨发育障碍.FGFR2可能具有调控成骨细胞系及软骨细胞系发育的功能,在骨骼发育等方面发挥重要作用.