香草乙酮在细胞水平对NOX-ROS-P38信号传导通路的影响

[目的]探讨香草乙酮在细胞水平对NOX-ROS-P38信号传导通路的影响。[方法]采用鲁米诺化学发光法检测THP-1细胞中ROS的生成,用Real time PCR检测p-P38及NOX_2的表达。[结果]过表达NOX_2时,与对照组相比,经香草乙酮培养组ROS和p-P38的表达均减少(P<0.01,P<0.05)。经香草乙酮培养后,NOX_2基因不敲除组的ROS及p-P38的表达较基因敲除组的减少(P<0.01,P<0.05)。与对照组相比,阻断ROS的生成,p-P38表达明显减少(P<0.01),刺激ROS后,p-P38的表达明显增加(P<0.01)。[结论]NOX在ROS及P38的上游,P38在ROS的下游。香草乙酮可能通过抑制NOX_2的活性或抑制NOX_2促进ROS的生成过程来抑制ROS的生成,进而抑制P38 MAPK磷酸化。     

CaMKⅡ对心肌细胞影响的研究进展

随着心脏疾病的增加,对其发病机理以及干预防治成为当今学术界重点深入研究的方向。大量研究证明[1],钙调蛋白（CaM）是Ca2＋信号变化的重要感受器,也是Ca2＋调节蛋白及转录反应的重要效应器。钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）能调节     

双羟基黄酮醇抑制心衰后CaMKⅡ磷酸化降低室性心律失常易感性

目的:研究双羟基黄酮醇(DiOHF)通过抑制心衰(HF)后钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的磷酸化水平来降低心衰后室性心律失常的易感性。方法:采用主动脉缩窄术(TAC)构建压力负荷性心衰小鼠模型,用小动物超声机确认模型构建成功。假手术组小鼠分为Control组和Control+DiOHF组,心衰小鼠分为HF组和HF+DiOHF组。采用心内程序性电刺激(PES)分别检测4组小鼠的心室起搏阈值和心室不应期,诱导室性心律失常并进行心律失常评分。采用Western Blot分析各组心脏蛋白中的CaMKⅡ及其磷酸化水平。结果:与Control组相比,HF组小鼠的心室起搏阈值减小,不应期缩短,室性心律失常评分显著增高。而HF+DiOHF组相比HF组起搏阈值增大,心室不应期增长,室性心律失常评分显著降低。同时Western Blot显示HF组相比Control组,CaMKⅡ磷酸化水平显著升高,而HF+DiOHF组CaMKⅡ磷酸化水平相比HF组明显下降。结论:CaMKⅡ的过度激活引起心衰后的室性心律失常,而DiOHF可通过抑制心衰后CaMKⅡ的磷酸化水平来减少室性心律失常。     

超容量负荷联合压力负荷制备家兔心衰模型的可行性探讨

目的 探讨超容量负荷联合压力负荷建立家兔心衰模型的可行性。方法 22只家兔随机分为两组：心衰组11只和假手术组11只；先诱导主动脉瓣关闭不全，2周后腹主动脉缩窄，制造超容量负荷及压力负荷，利用心导管术和心脏多谱勒观察术前后家兔血流动力学及心脏结构和功能的变化。结果 （1）心衰组术后主动脉收缩压、脉压、左室舒张末压较术前及假手术组明显增加（P〈0．01）；（2）心衰组术后左房内径、室间隔厚度、左室收缩和舒张末径明显增加（P〈0．01），射血分数及左室缩短率明显降低（P〈0．01）；（3）心衰组左室／体重比、肺脏／体重比明显高于假手术组（P〈0．01）。结论 超容量负荷结合压力负荷建立心衰模型方法可行，心衰形成时间短，重复性好，且成功率较高，符合人类慢性心衰发展过程。     

CaMK Ⅱ在小鼠重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的 观察钙调素依赖蛋白激酶（CaMK Ⅱ）在重症急性胰腺炎（SAP）小鼠胰腺组织中的表达情况,并探讨其抑制剂KN93对SAP胰腺损伤的保护作用和机制。方法 36只健康雄性C57小鼠随机分为假手术组、SAP组、KN93组、SAP组+KN93组,9只/组。于造模后24 h收集血清和胰腺组织;采用HE染色观察胰腺组织病理改变;Elisa检测血清脂肪酶、淀粉酶活性以及炎性因子变化情况;免疫印迹法检测CaMK Ⅱ、p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、MAPK、p-MAPK在小鼠胰腺组织中的表达变化。 结果 与假手术组比较,SAP组p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、p-MAPK表达水平升高（P<0.05）。KN93干预后,SAP小鼠胰腺组织病理损伤减轻,血清脂肪酶、淀粉酶以及炎性因子（TNF-α、IL-6）水平降低（P<0.05）,同时NF-κB、ERK和MAPK蛋白磷酸化也降低（P<0.05）。结论 CaMK Ⅱ蛋白在SAP疾病胰腺组织活性升高,CaMK Ⅱ抑制剂KN93能有效减轻SAP小鼠胰腺损伤和炎症程度,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关。     

shRNA敲降CaMKⅡβ对抑郁症小鼠行为及神经递质水平的影响

目的:探讨shRNA敲降CaMKⅡβ对抑郁症小鼠行为及神经递质水平的影响。方法:45只小鼠随机分为对照组、模型组和实验组。实验组小鼠经皮层注射CaMKⅡβshRNA腺相关病毒1×109CFU/只,对照组和模型组经皮层注射对照shRNA腺相关病毒1×109CFU/只。感染4周后模型组和实验组采用慢性不可预见性应激制备抑郁症模型,然后进行悬尾、强迫游泳、糖水消耗和蔽箱实验测试;采用酶联免疫反应(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定3组小鼠前额叶皮层多巴胺(dopamine,DA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平。结果:与对照组和模型组比较,实验组小鼠采用Ca MKⅡβshRNA明显降低了CaMKⅡβ蛋白的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。3组小鼠水平运动和垂直运动次数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组和实验组小鼠悬尾实验和强迫游泳实验持续不动时间明显增加,糖水消耗量显著减少,差异有统计学意义(P<0.0...     

急性酒精染毒小鼠的学习记忆与海马CaMKⅡ的表达

目的:研究急性酒精染毒小鼠的学习记忆与海马CaMKⅡ的表达关系。方法:以0.15g/ml、0.30g/ml、0.45g/ml三种浓度,按15ml/kg体重酒精灌胃,各组分别在灌胃3d、7d、14d后进行行为学检测(避暗实验)、病理学观察和CaMKⅡ的免疫印迹实验。结果:低浓度、中浓度染毒14d,高浓度染毒3d、7d、14d小鼠学习记忆能力损伤明显(P<0.05);低浓度、中浓度染毒14d,高浓度染毒3d、7d、14d小鼠大脑海马CaMKⅡa蛋白表达较对照组有明显下降(P<0.05)。结论:急性酒精中毒对学习记忆损伤与灌胃时间、浓度呈直线正相关,可能主要通过降低CaMKⅡa蛋白表达水平影响小鼠学习记忆能力。     

对硝基苯乙酮生产工艺的改进

对硝基苯乙酮生产工艺的改进陈炬熹（广州市医药建设开发公司，广州５１０１３０）关键词对硝基苯乙酮；工艺中图号ＴＱ４６０．１对硝基苯乙酮是氯霉素的中间体，国内外对其合成工艺的研究很多［１］，目前我国均采用对硝基乙苯空气氧化法生产，合成的工艺条件相对已比较...     

压力负荷增加大鼠模型血浆内皮素水平的改变

目的：观察压力负荷增加对大鼠血浆内皮素水平的影响。方法：采用腹主动脉狭窄法所致压力负荷增加诱发大鼠左室肥厚模型,观察左室重量指数（LVMI）,采用放射免疫分析法检测血浆内皮素水平。结果：LVMI模型组明显高于假手术组（P〈0．01）;血浆内皮素水平模型组较假手术组显著升高（P〈O．01）。结论：腹主动脉缩窄所致压力负荷增加可诱发大鼠左室肥厚,该作用可能与血浆内皮素水平升高有关。     

压力负荷增加大鼠模型左室肥厚的观察

目的模拟充血性心力衰竭左室重构的病理生理改变,采用腹主动脉缩窄法制备大鼠左室肥厚模型,观察压力负荷增加大鼠心肌肥厚的改变。方法将雄性SD大鼠26只随机分为假手术组、模型组,造模方法：分离腹主动脉和肾动脉后,在肾动脉上方约1cm处,用银夹造成腹主动脉狭窄（银夹内径0．7mm）,假手术组不用银夹缩窄,观察手术4周和8周后心肌肥厚指标的改变。结果与假手术组比较,模型组LVMI（‰）明显增加（P〈0．01）,病理结果显示,模型组心肌细胞直径增大,细胞排列不整齐。结论腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠在造模4周即已形成左室肥厚的病理生理改变,是较为理想的充血性心力衰竭左室肥厚模型。     

补阳还五汤对间歇低氧大鼠心肌miRNA-214/CaMKⅡ信号通路的影响

目的:探讨补阳还五汤对间歇低氧大鼠心肌损伤的保护作用及分子机制.方法:采用间歇低氧大鼠心肌为研究对象,实验随机分为常氧组、间歇低氧组、补阳还五汤组,每组8只.利用超声心动仪评估大鼠左心室结构与功能,HE染色法观察大鼠心肌病理学变化,TUNEL法及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒法检测组织氧化应激水平及凋亡效应;qPCR检测心肌组织中miRNA-214、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)变化,Western blot检测CaMKⅡ蛋白表达变化.结果:与间歇低氧组对比,补阳还五汤组左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)减少(P<0.05),射血分数(EF)和心肌缩短分数(FS)增加(P<0.05),补阳还五汤能够明显减少氧化损伤,MDA表达水平及Tunel阳性细胞数明显降低,而SOD表达升高(P<0.05).此外,补阳还五汤组上调miRNA-214表达,显著抑制CaMKⅡ表达(P<0.05).结论:补阳还五汤可通过调控miRNA-214/CaMKⅡ信号通路改善间歇低氧大鼠心肌组织损伤引起的氧化应激反应.     

葛根素保护压力负荷诱导的心肌肥厚

目的 探讨葛根素在压力负荷诱导的心肌肥厚中的作用及其机制。 方法 雄性C57小鼠随机分为假手术组、葛根素治疗+手术组和单纯手术组。在胸主动脉缩窄术后1周开始喂药[小鼠饮食中加葛根素,给药剂量约65mg/(kg·d)持续12周,12周后取心脏,比较各组小鼠心重体重比、肺重体重比和心重胫骨长度比,同时比较各组小鼠的死亡率以评价葛根素对压力负荷诱导的心肌肥厚的影响。 结果 手术12周后葛根素组心重体重比、肺重体重比和心重胫骨长度比明显低于手术组,且葛根素治疗组小鼠死亡率明显下降,病理染色结果显示与手术组相比葛根素治疗组NF-κB核转位明显下降,提示葛根素可能通过NF-κB该信号通过减轻心肌肥厚。 结论 葛根素能减轻压力负荷诱导的心肌肥厚,其机制可能是通过抑制NF-κB信号通路发挥作用。     

补肾复方对压力负荷增加大鼠心肌局部血管紧张素Ⅱ水平的影响

目的:观察补肾复方对压力负荷增加大鼠左心室心肌局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响,探讨补肾复方逆转左心室重构的可能机制。方法:造模,将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组、补肾复方大剂量组及补肾复方小剂量组,每组12只。观察5组左心室重量指数(LVMI)及病理形态。采用放射免疫分析法测定左心室心肌局部AngⅡ水平。结果:模型组LVMI、左心室心肌局部AngⅡ水平较假手术组显著升高(P<0.01);卡托普利组、补肾复方大剂量组和小剂量组均明显低于模型组(P<0.01)。除模型组外,余4组心肌病理形态改变类似。结论:补肾复方与卡托普利具有基本一致的延缓压力负荷大鼠左心室重构的作用,其作用可能与减少左心室心肌局部AngⅡ水平有关。     

帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ活力的影响

目的探讨帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ活力的影响。方法将成年雄性SD大鼠随机分为6组：对照组（Ⅰ）、抑郁模型组（Ⅱ）、抑郁模型＋给药1次组（Ⅲ）、抑郁模型＋给药1周组（Ⅳ）、抑郁模型＋给药2周组（Ⅴ）和抑郁模型＋给药4周组（Ⅵ）。抑郁模型为强迫大鼠游泳4周。采用同位素法检测蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ的活力。结果（1）在海马，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ组大鼠PKA[分别为（3．92&#177;0．23）&#215;10^-2（3．68&#177;0．092）&#215;10^-2，（3．56&#177;0．11）10^-2，和（3．52&#177;0.18）10^-2]和CaMKⅡ[分别为（12．89&#177;0．31）10^-2，（15．08&#177;2．07）10^-2，（16．32&#177;2．87）10^-2，和（17．00&#177;1．52）10^-2】活力明显低于Ⅰ组[PKA（5．63&#177;0.41）10^-2；CaMKII（48．91&#177;1．86）10^-2]和Ⅵ组『PKA（4．92&#177;0．36）10^-2；CaMKII（46．74&#177;1．34）10^-2（P〈0．01或P〈0．05）；Ⅱ组大鼠PKC的活力[（0．55&#177;0．017）&#215;10^-2明显低于对照组[（1．48&#177;0．27）10^-2（P〈0．01），各用药组大鼠海马PKC活力与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）（2）在前额叶皮质，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠PKA活力[分别为（0．9&#177;0．027）10^-2（0．92&#177;0．081）10^-2（0．92&#177;0．028）10^-2与对照组[（0．99&#177;0．072）10^-2]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；而Ⅴ【（1．14&#177;0．045）10^-2]和Ⅵ[（1．27&#177;0．040）10^-2]组的PKA活性则显著高于其它四组（P〈0.01）；Ⅱ和Ⅲ组的PKC活性[分别为（0．15&#177;0．013）10^-2（0．14&#177;0．007）10^-2）]均显著高于对照组[（0．099&#177;0．0007）10^-2]和其它用药组（P〈0．01），Ⅳ组PKC活性【（0．11&#177;0．0006）10^-2】与Ⅰ组比较差异无统计学意义（P〉0．05），Ⅴ和Ⅵ组PKC活性[分别为（0．077&#177;0．0005）10^-2，（0．03&#177;0．00017）10^-2]显著低于Ⅰ组（P〈0．01）；模型组[（6．84&#177;0．22）10^-2]和各用药组[分别为（6．68&#177;0．23）10^-2，（6．89&#177;0．15）&#215;10^-2（6．55&#177;0．14）10^-2，（6．53&#177;0．13）10^-2]的CaMKII活性显著低于对照组[（16．57&#177;0．19）10^-2（P〈0．01）。结论帕罗西汀长期用药逆转慢性应激所致大鼠海马PKA、PKC和CaMKⅡ活力降低，而对前额叶皮质PKA、PKC和CaMKⅡ活力改变的作用复杂。     

缺氧缺血性损伤对新生猪脑内钠钾ATP酶及CaMKⅡ表达的影响

目的 探讨缺氧缺血性损伤对新生猪脑内钠钾ATP酶及CaMKⅡ表达的影响。方法 28头雄性新生约克夏猪随机分为对照组（进行假手术,n=4）、模型组（建立缺氧缺血脑损伤模型,n=24）。模型组根据缺氧缺血时间均分成6个亚组（0～2 h组、2～6 h组、6～12 h组、12～24 h组、24～48 h组、48～72 h组）,每组4头。利用免疫荧光染色法对各组脑切片进行染色,比较各组钠钾ATP酶、CaMKⅡ的表达状况。结果 各组均见钠钾ATP酶阳性表达,6～12 h组表达最低;相邻两两比较结果显示,0～2 h组与2～6 h组、2～6h组与6～12 h组、6～12 h组与12～24 h组、12～24 h组与24～48 h组钠钾ATP酶表达均有统计学差异（均P <0.05）。钠钾ATP酶表达呈先下降后上升然后继续下降的趋势。各组均见CaMKⅡ阳性表达,6～12 h组表达最低;0～2 h组与2～6 h组、2～6 h组与6～12 h组、6～12 h组与12～24 h组、24～48 h组与48～72 h组CaMKⅡ表达有统计学差异（均P <0.05）,CaMKⅡ表达呈现先减低然后增高,然后再...     

利拉鲁肽对大鼠压力负荷型慢性心衰的保护作用

目的研究利拉鲁肽对压力负荷型慢性心衰大鼠心脏功能的作用及其机制。方法 30只SD大鼠随机分成假手术组、心衰组、利拉鲁肽组,每组10只大鼠。心衰组、利拉鲁肽组采用腹主动脉缩窄法制备模型,假手术组只穿线不缩窄。利拉鲁肽组术后12周给予利拉鲁肽皮下注射,2 mg/kg·d,共30 d。假手术组和心衰组给予同等剂量的生理盐水。给药30 d后给大鼠称重,并使用压力容积系统来检测血流动力学指标,同时对大鼠的各个器官称重。将大鼠麻醉后,腹主动脉抽血离心后取血清,按试剂盒方法测定超氧化物歧化酶(SOD)、B型钠尿肽(BNP)、丙二醛(MDA)。结果心脏称重显示,利拉鲁肽组的心脏重量明显低于心衰组(P0.05)。压力容积系统检测血流动力学显示,相比于假手术组,利拉鲁肽组大鼠的Ves、Ved、Pmax、Pes、Ped值均有明显降低(P0.05),d P/dt max、-d P/dt min、EF和Pow Max值则明显增加(P0.05)。和心衰组相比,利拉鲁肽组大鼠血清中的SOD值明显增加(P0.05),BNP值则明显降低(P0.05)。结论利拉鲁肽可以改善心衰大鼠左心室的收缩和舒张功能,减轻心肌细胞的损伤,其机制可能与抗氧化作用相关。     

氯胺酮的快速抗抑郁作用与大鼠缰核内βCaMKⅡ表达下调的关系

 目的   探讨氯胺酮抗抑郁作用的潜在分子机制,以及对抑郁大鼠缰核β钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(β calcium/calmolulin-dependent protein kinase type Ⅱ,βCaMKⅡ)和谷氨酸受体1(glutamic acid receptor 1,GluR1)分子表达的影响。方法  成年Wistar大鼠11只(正常组),Wistar Kyoto (WKY) 大鼠22只随机分为抑郁组和氯胺酮(Ket组)。Ket组给予氯胺酮10 mg/kg腹腔注射,抑郁组和正常组则腹腔注射等容量的生理盐水,连续3天。第4天行糖水偏好试验,测定大鼠的糖水偏好程度。第5天行开场试验及强迫游泳试验,测定大鼠的行为。行为学试验结束后0.5 h取大鼠脑组织,Western blot检测大鼠缰核βCaMKⅡ和GluR1的表达。结果  抑郁组与正常组大鼠相比,糖水百分比降低,站立次数减少,强迫游泳不动时间显著增加,缰核βCaMKⅡ的表达水平升高(P<0.05);Ket组与抑郁组大鼠相比,糖水百分比升高,站立次数增加,强迫游泳不动时间缩短,缰核βCaMKⅡ的表达水平降低(P<0.05),GluR1的表达无变化。结论  氯胺酮具有快速的抗抑郁作用,其机制可能与缰核βCaMKⅡ的表达下调有关。     

压力负荷增加大鼠左心室重构模型的建立

目的心力衰竭是临床常见的危重症之一,研究其发病机制,建立合适的动物模型是其必要条件。文中通过腹主动脉缩窄法致压力负荷增加大鼠模型,模拟充血性心力衰竭左心室重构的病理生理改变,探讨压力负荷增加大鼠心力衰竭模型建立的可行性。方法将雄性SD大鼠30只随机分为假手术组和模型组,观察造模4周和8周后心肌肥厚[左心室重量指数（left ventrieular mass index,LVMI）、左心室心肌病理形态苏木精-伊红（HE）染色、左心室心肌细胞超微结构]和心肌纤维化（左心室心肌病理形态胶原染色、左心室心肌间质超微结构）指标的改变。结果模型组大鼠造模4周、8周时LVMI较假手术组显著升高（P〈0．05）。左心室心肌病理形态HE染色及左心室心肌细胞超微结构也可见明显异常改变。结论腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠在造模4周即已形成左心室重构的主要病理生理改变,是较为理想的充血性心力衰竭左心室重构模型。     

压力负荷对大鼠血浆CGRP的改变及鹿角方的影响

为研究压力负荷增加大鼠血浆降钙素基因相关肽（CGRP）的改变及鹿角方的影响。36只大鼠建立腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠充血性心力衰竭（CHF）心肌肥厚模型,随机分为3组,假手术组（A）、模型组（B）和鹿角方组（C）,观察左室重复指数（LVMI）,并检测血浆CGRP。结果：B组LVMI明显高于A组（P＜0．001）,C组LVMI与B组比较有明显下降（P＜0．01）;B组血浆CGRP水平明显低于A组（P＜0．05）,C组血浆CGRP较B组显上升（P＜0．05）。提示压力负荷增加所致充血性心力衰竭心肌肥厚大鼠血浆降钙素基因相关肽水平是降低的;鹿角方具有升高该大鼠血浆CGRP水平,逆转心肌肥厚的作用。