细胞外信号调节激酶1／2传导通路对增生性瘢痕的影响

目的：观察细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）传导通路对增生性瘢痕的影响。方法：用免疫组化方法和常规病理技术检测Ras、磷酸化ERK1／2和C－fos在14例增生性瘢痕和14例正常皮肤中的表达变化规律。结果：在正常皮肤中，Ras、磷酸化ERK1／2和C-fos蛋白表达较低，随着增生性瘢痕不断成熟，这3种蛋白表达逐渐增强。在成熟期瘢痕中，这3种蛋白阳性细胞率明显高于正常皮肤（P＜0．01）。结论：增生性瘢痕的发生和成熟可能与激活ERK1／2信号传导通路，促进C-fos转录因子表达有关。     

细胞外信号调节激酶1/2传导通路对增生性瘢痕的影响

目的观察细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)传导通路对增生性瘢痕的影响。方法用免疫组化方法和常规病理技术检测Ras、磷酸化ERK1/2和C-fos在14例增生性瘢痕和14例正常皮肤中的表达变化规律。结果在正常皮肤中,Ras、磷酸化ERK1/2和C-fos蛋白表达较低,随着增生性瘢痕不断成熟,这3种蛋白表达逐渐增强。在成熟期瘢痕中,这3种蛋白阳性细胞率明显高于正常皮肤(P<0.01)。结论增生性瘢痕的发生和成熟可能与激活ERK1/2信号传导通路,促进C-fos转录因子表达有关。     

细胞外信号调节激酶5在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌是男性发病率最高的恶性肿瘤,病死率较高,关于前列腺癌的发病机制尚未完全明确。细胞外信号调节激酶5是丝裂原活化蛋白激酶家族中研究相对较少的一条通路,但其已经被证明在癌症的发病中起着重要的作用,其对前列腺癌的生长发生、病理分期、预后以及转移侵袭都有影响。本文就细胞外信号调节激酶5在前列腺癌的研究进展及其与前列腺癌的关系作一综述。     

血小板源生长因子对瘢痕成纤维细胞胞外信号调节激酶的影响

目的：分析血小板源生长刺激因子(PDGF)刺激后各种成纤维细胞中胞外信号调节激酶(ERK)的表达及磷酸化情况，研究瘢痕特别是瘢痕疙瘩发病过程中ERK的作用。方法：应用免疫印迹(IB)方法检测5例瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)、瘢痕疙瘩周边相对正常皮肤成纤维细胞(rNHDF)及正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)的ERK表达及其蛋白磷酸化。结果：①无刺激条件下，ERK在KFB，rNHDF及NHDF中的表达及磷酸化无差异。②PDGF-BB刺激后，3组成纤维细胞ERK磷酸化增强，非磷酸化含量无明显改变。③DGF-BB刺激后，KFB中ERK蛋白磷酸化明显高于其他两组成纤维细胞。结论：瘢痕疙瘩细胞外基质的过度沉积可能与KFB内PDGF结合位点自身磷酸化和ERK的磷酸化增强有关。     

痹肿消汤干预胶原诱导关节炎模型大鼠关节滑膜组织细胞外信号调节激酶1/2及细胞外信号调节激酶5的表达

背景：滑膜细胞信号转导异常是类风湿性关节炎的重要发病机制之一。中药复方痹肿消汤治疗类风湿性关节炎具有较好的临床疗效,但在细胞信号转导水平探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制是十分必要的。目的：观察中药复方痹肿消汤对胶原诱导关节炎模型大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5表达的影响。方法：SD大鼠45只随机数字表法分为对照组、模型组、痹肿消汤组。胶原诱导关节炎模型大鼠,用痹肿消汤药液3.0～3.5mL灌胃,1次/d,连续14d。检测造模后第14,21,28天大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化水平。结果与结论：造模后,大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化表达随时间而增加（P〈0.05）。痹肿消汤治疗后,细胞外信号调节激酶1/2,5磷酸化表达水平则明显下降（P〈0.05）。提示痹肿消汤能抑制细胞外信号调节激酶1/2,5蛋白激酶的激活,从而抑制细胞外信号调节激酶1/2,5信号转导通路的活化,这可能是其阻抑类风湿性关节炎滑膜异常增殖、关节骨质侵蚀的重要机制之一。     

痹肿消汤干预胶原诱导关节炎模型大鼠关节滑膜组织细胞外信号调节激酶1/2及细胞外信号调节激酶5的表达

背景:滑膜细胞信号转导异常是类风湿性关节炎的重要发病机制之一.中药复方痹肿消汤治疗类风湿性关节炎具有较好的临床疗效,但在细胞信号转导水平探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制是十分必要的.目的:观察中药复方痹肿消汤对胶原诱导关节炎模型大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5表达的影响.方法:SD大鼠45只随机数字表法分为对照组、模型组、痹肿消汤组.胶原诱导关节炎模型大鼠,用痹肿消汤药液3.0～ 3.5 mL灌胃,1次/d,连续14 d.检测造模后第14,21,28天大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化水平.结果与结论:造模后,大鼠滑膜细胞外信号调节激酶1/2,5的磷酸化表达随时间而增加(P < 0.05).痹肿消汤治疗后,细胞外信号调节激酶1/2,5磷酸化表达水平则明显下降(P < 0.05).提示痹肿消汤能抑制细胞外信号调节激酶1/2,5蛋白激酶的激活,从而抑制细胞外信号调节激酶1/2,5信号转导通路的活化,这可能是其阻抑类风湿性关节炎滑膜异常增殖、关节骨质侵蚀的重要机制之一.     

哮喘豚鼠初级传入神经元细胞外信号调节激酶的表达

目的:探讨细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERK)信号转导途径在哮喘豚鼠初级传入神经元(C7～T5脊神经节)的作用及地塞米松的抑制作用。方法:健康白色豚鼠40只,随机分为4组:生理盐水组8只,单纯致敏组8只,哮喘组12只,地塞米松组12只,利用免疫组织化学结合显微图像分析,研究哮喘豚鼠C7～T5脊神经节活化的ERK免疫反应变化。结果:与生理盐水组(175.37±8.12)和单纯致敏组(173.57±5.67)相比,哮喘组豚鼠(148.53±8.56)活化ERK免疫反应在C7～T5脊神经节神经元的核中明显上调(t=20.532,t=20.201,P<0.01),其阳性细胞比率(84.50±4.02)%明显高于生理盐水组(19.43±3.88)%和单纯致敏组(21.20±2.05)%,地塞米松组豚鼠活化ERK免疫反应(168.18±8.17)在C7～T5脊神经节神经元的核中明显低于哮喘组(t=11.605,P<0.01)。结论:C7～T5脊神经节神经元中ERK的活化提示可能参与哮喘的发病过程,地塞米松抑制哮喘豚鼠C7～T5脊神经节神经元中ERK活化的表达为预防治疗哮喘及早期康复提供了新的可能途径。     

Aβ1～42致老年性痴呆大鼠海马神经元细胞外信号调节激酶1,2的表达

目的:建立老年性痴呆大鼠模型,观察老年性痴呆大鼠海马神经元细胞外信号调节激酶1,2表达的变化,探讨其在老年性痴呆发病机制中的作用。方法:采用立体定向下双侧海马注射Aβ1~42,建立老年性痴呆动物模型,经Y型电迷宫试验测试其行为学,采用免疫组织化学、蛋白印迹等方法观察细胞外信号调节激酶1,2表达变化。结果:模型组大鼠学习记忆能力较对照组显著下降,免疫组化显示海马CA1区细胞外信号调节激酶1,2的免疫反应阳性神经元数目及细胞平均光密度值均显著减少,蛋白印迹显示模型组较对照组条带变细,灰度值变小,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:海马神经元细胞外信号调节激酶1,2表达的减少可能参与了老年性痴呆的发病机制。     

豚鼠前庭上皮胰岛素样生长因子1及其受体与细胞外信号调节激酶1／2表达在庆大霉素损伤后的变化

背景:在内耳毛细胞发育中,胰岛素样生长因子1是重要的促有丝分裂因子,也是不可缺少的调节因子。细胞外信号调节激酶1/2在哺乳动物前庭器官也有表达。目的:观察庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮胰岛素样生长因子1及其受体、细胞外信号调节激酶1/2的表达和分布变化。设计:随机对照实验。单位:解放军成都军区总医院耳鼻喉科。材料:选用健康成年豚鼠20只,体质量300～350g,由解放军第四军医大学实验动物中心提供。按随机数字表法分为对照组(n=4)和实验组(n=16),实验组又按停药后1,7,14,21d4个时间点进行观察,每个时间点4只。方法:实验于2002-01/2002-05在解放军第四军医大学西京医院耳鼻喉科实验室完成。实验组豚鼠每天腹腔注射庆大霉素80mg/kg,对照组动物每天腹腔注射生理盐水1mL,连续10d。豚鼠出现步态不稳或眼震认为造模成功。每天观察豚鼠的步态、眼震及进食量。分别于停药后1,7,14,21d将实验组动物腹腔注射戊巴比妥50mg/kg过度麻醉后,取出并剪开双侧听泡,去除镫骨底板,固定、脱钙、包埋。取与蜗轴平行方向连续切片。对照组动物于停止注射生理盐水后1d采取相同措施。苏木精-伊红染色观察前庭上皮形态改变,免疫组织化学法观察胰岛素样生长因子1及其受体和细胞外信号调节激酶1/2的表达及分布变化。主要观察指标:①各组动物庆大霉素损伤后行为学和前庭上皮形态学的变化。②胰岛素样生长因子1及其受体、细胞外信号调节激酶1/2的表达及分布变化。结果:纳入的20只豚鼠全部进入结果分析。①庆大霉素注射期间,所有豚鼠的前庭功能均受损,停药后未经任何治疗,其前庭功能均部分恢复。②注射庆大霉素后,前庭上皮形态学改变明显,但停止注射庆大霉素1周后明显改善。③对照组豚鼠胰岛素样生长因子1及其受体有低水平表达,庆大霉素损伤后停药1d其表达最强,之后逐渐下降,但停药后21d其表达仍高于对照组。各组间胰岛素样生长因子1及其受体表达灰度值比较差异明显(F=51.8,45.7,P<0.05)。二者变化规律基本一致。④对照组豚鼠细胞外信号调节激酶1/2有低水平表达。庆大霉素损伤后其表达逐渐增强,停药后7d表达最强,之后逐渐下降,停药后21d其表达仍高于对照组。各组间细胞外信号调节激酶1/2表达比较差异明显(F=103.7,106.4,P<0.05)。二者变化规律相近。结论:庆大霉素损伤后豚鼠前庭上皮胰岛素样生长因子1及其受体,细胞外信号调节激酶1/2表达增加。胰岛素样生长因子1可能是内源性的促有丝分裂剂,通过旁分泌或自分泌的方式在豚鼠前庭毛细胞修复的早期发挥重要作用。细胞外信号调节激酶1/2可能在庆大霉素损伤后豚鼠前庭毛细胞自发修复中发挥重要的信号转导作用。     

细胞外信号调节激酶通道与支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘（以下简称哮喘）主要以气道慢性嗜酸性粒细胞炎症、气道高反应性（airwayhyperrespo—siveness,AHR）和不可逆性气道重塑（airwaytemod—elling）为主要特点。气道重塑是气道反复炎症损害与修复的结果．是造成哮喘患者不可逆气道阻塞的病理基础。是诱发气道高反应性和哮喘慢性化的主要原因。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中蛋白激酶A活性测定

目的测定增生性瘢痕(hypertrophicscar,HS)、瘢痕疙瘩(keliod,K)、成熟瘢痕、健康人皮肤和增生程度减轻的增生性瘢痕组织中PKA活性。方法用32P掺入底物法测定组织中的蛋白激酶A(PKA)活性。结果各种组织中PKA活性没有变化。结论瘢痕增生可能与PKA信号通道没有活化有关。     

针刺对大鼠局部筋膜和脊髓细胞外信号调节凝酶1/2和P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的:观察针刺捻转拉伸大鼠皮下筋膜对局部筋膜和脊髓背角细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase, ERK1/2）和丝裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)信号通路的影响及筋膜结缔组织的形态学变化。方法：20只SD大鼠通过随机分组,每组5只,针刺后三里组和针刺非穴位组进行手针捻转,拉伸刺激组进行拉伸刺激,采用免疫组化技术观察筋膜和脊髓组织中细胞信号蛋白的变化;利用相差显微镜观察拉伸刺激组局部皮下筋膜形态学变化。结果：组织学改变：拉伸刺激组皮下筋膜的纤维以拉伸点为中心呈向心性分布,单位面积内细胞密度增大,细胞骨架和胞核重构成“扁梭形”。 细胞信号蛋白变化：针刺组筋膜结缔组织ERK1/2和P38MAPK表达与对照组相比均有增加,但以非穴组增加显著;ERK1/2与P38MAPK在脊髓中的表达位置由胞质转向胞核,ERK1/2与空白对照组相比差异没有显著性意义;P38MAPK的表达有所增加。结论：针刺对局部浅筋膜的ERK1/2和P38有上调作用,但与脊髓中的信号蛋白增加幅度并不完全一致,说明针刺对机体除了神经调节外,筋膜结缔组织支架可能在微观的信号转导层面对局部细胞分化与增殖具有促进作用。     

血小板源性生长因子及其受体在增生性瘢痕中表达特征

目的观察血小板源性生长因子(PDGF)两亚基(A,B)和α和β两种受体在增生性瘢痕形成机制中的作用。方法用免疫组化方法和常规病理技术检测这四种蛋白在8例增生性瘢痕和8例正常皮肤中的表达变化规律。结果PDGF-A在正常皮肤与增生性瘢痕中的阳性细胞率分别为(15.2±5.6)%和(18.9±4.1)%,而PDGF-B分别为(22.4±7.4)%和(25.5±6.5)%。从正常皮肤到增生性瘢痕,两亚基含量虽有升高趋势,但差异不明显(P>0.05)。PDGFR-α在正常皮肤与增生性瘢痕中的阳性率分别(36.7±4.3)%和(44.2±5.8)%,而PDGFR-β则分别为(15.3±4.8)%和(22.9±5.2)%,两种蛋白在瘢痕中的表达阳性率都显著高于正常皮肤(P<0.05)。结论增生性瘢痕形成可能与PDGFR-α和PDGFR-β蛋白高表达有关,而PDGF在增生性瘢痕发生中的作用,还需进一步探讨。     

重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C与细胞外信号调节激酶的表达

目的探讨重症胰腺炎并急性肺损伤大鼠肺组织蛋白激酶C（PKC）与细胞外信号调节激酶（ERK）的表达及意义。方法健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组（n=8）与胰腺炎组,胰腺炎组再按6、12、24、48h分（B1、B2、B3、B4）亚组。以大鼠重症胰腺炎所致ALI为模型,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清TNF-α、IL-1β及IE-6,Western blot检测肺组织PKC与ERK的蛋白表达,EMSA检测NF-κB活性变化,观察肺脏含水量、肺脏病理变化。结果内毒素致重症胰腺炎并发急性肺损伤早期即发生肺血管通透性增高,肺脏含水量上升,组织学显示肺脏出现明显的病理损害,血清TNF-α、IL-1β及IL-6增高,肺组织PKC、ERK与NF-κB DNA活性同步增强。结论PKC与ERK的活化参与了重症胰腺炎时ALI的发病,即ERK／NF-κB信号通路的活化。     

肥厚性瘢痕的基因表达

肥厚性瘢痕是影响烧伤和创伤后患者康复的一大难题,其发病机制至今仍不清楚。肥厚性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达明显增高,可能是其形成的重要原因;另一方面肥厚性瘢痕基质金属蛋白酶表达降低,金属蛋白酶组织抑制因子表达增高,可能是胶原降解减少,瘢痕形成的另一重要原因。生长因子在瘢痕的形成中可能具有重要的作用。转化生长因子β、血小板衍化生长因子、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子、白介素1和白介素15在瘢痕中的高表达,与瘢痕的形成密切相关。     

胰岛素样生长因子结合蛋白2和细胞外调节蛋白激酶1/2在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其临床意义。 方法收集2017年6月至2019年4月在济宁医学院附属医院泌尿外科行手术治疗的174例ccRCC患者的临床资料,并同期选择健康体检中心30例正常健康者的血液标本。应用免疫组织化学方法检测ccRCC患者肿瘤组织、癌旁组织(距肿瘤边缘2 cm)中IGFBP2和ERK1/2的表达情况,并与肿瘤临床分期、组织学分级及肿瘤大小进行相关性分析;同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ccRCC患者及健康者血清中IGFBP2、ERK1、ERK2的水平。 结果IGFBP2和ERK1/2在ccRCC组织中的表达阳性率[87.93%(153/174),80.46%(140/174)]比癌旁组织[6.67%(2/30),10.00%(3/30)]高,均差异有统计学意义(χ²＝92.59,65.87;均P<0.01)。IGFBP2和ERK1/2在直径≥4 cm的肿瘤中的表达阳性率[高于<4 cm的肿瘤表达阳性率,均差异有统计学意义(χ²＝7.81,13.02;均P<0.05);IGFBP2和ERK1/2的表达在患者的年龄(χ²＝0.78,0.60)、性别(χ²＝0.05,1.33)、肿瘤左右侧位置(χ²＝0.96,0.57)中比较均差异无统计学意义(均P>0.05)。IGFBP2及ERK1/2的阳性表达率随着临床分期及组织学分级的升高而升高,且在不同组织分级(Z＝-8.17,-3.80)和不同临床分期(Z＝-5.63,-9.94)间差异具有统计学意义(均P<0.05)。IGFBP2和ERK1/2在ccRCC组织中的表达呈正相关(r＝0.32,P<0.05)。ELISA实验结果表明,IGFBP2、ERK1、ERK2在ccRCC患者血清中的表达水平[(858.33±132.89)μg/L,(12.49±1.22)μg/L,(153.61±33.37)ng/L]较健康对照组[(267.65±86.56)μg/L,(8.69±1.80)μg/L,(105.63±12.03)ng/L]明显升高,均差异具有统计学意义(t＝11.78,5.53,4.28;均P<0.05)。 结论IGFBP2和ERK1/2在ccRCC患者血清及肿瘤组织中均表达升高,组织中组织学分级越高、临床分期越晚、肿瘤体积越大,阳性表达率越高,两者在肿瘤的进展中可能起到协同作用。     

增生性瘢痕组织中p53和c-myc蛋白含量的变化及其对瘢痕内细胞凋亡发生的影响

目的 :观察 p5 3和 c myc两种蛋白在增生性瘢痕和正常皮肤组织内的表达特征及其对增生性瘢痕内细胞凋亡发生的影响。方法 :在 16份被测标本中包括创面愈合后不同时期的增生性瘢痕 8例和其对应的周围正常皮肤组织 8例 ,用免疫组织化学方法和常规病理技术确定 p5 3和 c myc两种蛋白在增生性瘢痕和正常皮肤组织中的定位和表达量及变化规律。结果 :p5 3和 c myc蛋白在正常皮肤和瘢痕组织内都有表达。正常皮肤组织中 p5 3蛋白主要分布于表皮基底层细胞的胞质和胞核中 ;而 c myc蛋白的阳性信号则存在于表皮基底细胞、血管内皮细胞、毛囊和汗腺细胞的胞浆和胞核内。增生性瘢痕组织中 p5 3和 c myc两种蛋白表达均增强 ,p5 3主要存在于角质形成细胞和部分成纤维细胞的胞质和胞核内 ;而 c m yc阳性表达颗粒则分布于表皮细胞和部分成纤维细胞内。与正常皮肤组织相比 ,增生性瘢痕的 p5 3蛋白含量虽有增高趋势 ,但差异不显著 ;而c m yc蛋白的阳性颗粒明显增多。结论 :在增生性瘢痕发生过程中 ,p5 3和 c myc蛋白不同的分布和表达变化规律显示 ,这两种蛋白可能参与调控增生性瘢痕形成过程中细胞凋亡的发生 ,以 c myc蛋白的作用更为重要。     

p38丝裂素活化蛋白激酶与细胞外调节蛋白激酶在重症胰腺炎炎症反应和免疫抑制中的作用

目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶（p38 mitogen—activated protein kinase,p38MAPK）与细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）炎症反应和免疫抑制中的作用。方法75只Wistar大鼠随机分为对照组、SAP组、ERK抑制组（PD组）、p38MAPK抑制组（SB组）、ERK＋P38MAPK联合抑制组（PD＋SB组）各15只。对照组仅作开腹缝合处理,其余4组大鼠建立大鼠SAP模型,其中PD组大鼠术前30min尾静脉注射PD98059,SB组大鼠尾静脉注射SB203580,PD＋SB组大鼠尾静脉注射PD98059与SB203580。术后6、12h观察5组腹腔积液量变化情况。检测5组血清肿瘤坏死因子-α水平,并计算大鼠肺组织湿／干比值。结果对照组腹腔积液量、肺组织湿／干比值及血清肿瘤坏死因子-α水平明显低于其他4组（P〈i0．05）,PD＋SB组低于SAP组、PD组和SB组（P〈0．05）,PD组和SB组低于SAP组（P〈0．05）。结论ERK、p38MAPK在SAP炎症反应和免疫抑制中发挥重要作用,抑制其活性可抑制SAP过度活化的炎症反应,改善细胞免疫功能低下状态。     

补阳还五汤对大鼠脑缺血后蛋白激酶B1和c-Jun氨基末端激酶1/2表达的影响

目的探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠蛋白激酶B1（AKT1）和c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）的影响。方法将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组,每组12只。采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型。补阳还五汤组大鼠于术后2h起灌服补阳还五汤（主要由生黄芪120g、当归6g、赤芍4.5g、川芎3g、西红花3g、桃仁3g、广地龙3g组成）14.2 g/kg,每日1次,连续7 d。其他各组动物均给予等体积生理盐水。于第7日处死大鼠,取脑组织,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定AKT1 mRNA表达,采用免疫组化法检测JNK1/2蛋白表达。结果与正常对照组和假手术组比较,模型组AKT1 mRNA表达量〔吸光度（A）值〕明显降低（0.48±0.08比0.63±0.11、0.61±0.09,均P＜0.05）,JNK1/2阳性细胞数（个/mm2）明显增多（34.13±4.57比16.15±1.09、16.23±2.05,均P＜0.05）;与模型组比较,补阳还五汤组脑组织中AKT1 mRNA表达（0.93±0.11）和JNK1/2阳性细胞数（45.04±5.68）明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论补阳还五汤可上调缺血脑组织AKT1 mRNA和JNK1/2阳性细胞数表达,是其脑保护作用机制之一。