丹参酮ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的 探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的抑制作用及机制.方法 将32只成年雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、TanⅡA组及卡托普利组.后三组行肾上方腹主动脉缩窄术建立压力负荷增加心肌纤维化模型,假手术组仅分离腹主动脉而不结扎.造模后4周TanⅡA组腹腔注射TanⅡA 20 mg/(kg·d),卡托普利组予卡托普利100 mg/(kg·d)灌胃,均每天上午给药1次,连续给药4周;假手术组及模型组均不给药.8周后检测心脏质量指数和心肌组织病理学变化,ELISA法检测心肌羟脯氨酸(HYP)与血清TNF-α水平,免疫组化法检测心肌组织NF-κB p65蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组心脏质量指数、心肌HYP表达及血清TNF-α和心肌组织NF-κB p65含量均升高(P均＜0.01);与模型组比较,TanⅡA组的心脏质量指数、心肌HYP含量、血清TNF-α和心肌组织NF-κB p65水平均降低(P均＜0.01).结论 NF-κB信号介导的心肌炎症反应参与了压力负荷增加大鼠心肌纤维化的发生与发展.TanⅡA能抑制TNF-α和NF-κB信号通路而改善心肌纤维化.     

丹参酮ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌肥厚的抑制作用

目的:观察RhoA、Rock1蛋白在压力负荷增加大鼠心肌中的表达,探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,Tan Ⅱ A)对压力负荷增加大鼠心肌肥厚的抑制作用。方法:40只成年雄性SD大鼠,随机分成5组(n=8),即假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、Tan Ⅱ A低剂量组[L-Tan Ⅱ A组,10 mg/(kg.d)]、Tan Ⅱ A高剂量组[H-Tan Ⅱ A组,20 mg/(kg.d)]及阳性对照药物卡托普利组[Captopril组,100 mg/(kg.d)]。除Sham组外,其余4组大鼠均行肾上方腹主动脉缩窄术建立压力负荷增加心肌肥厚模型,Sham组大鼠仅分离腹主动脉而不结扎。术后4周成功造模并开始给药,疗程为4周。8周后,检测心脏肥厚指数和心肌组织病理学,ELISA法检测心肌羟脯氨酸含量以及免疫组化和免疫印迹法检测心肌组织中RhoA和Rock1蛋白的含量。结果:与Sham组比较,Model组大鼠的心脏肥厚指数、心肌羟脯氨酸含量及心肌组织中RhoA和Rock1蛋白含量均显著升高(均P<0.01);与Model组比较,Tan Ⅱ A低剂量组的心脏肥厚指数、心肌羟脯氨酸含量及心肌组织中RhoA和Rock1蛋白含量均降低(均P<0.05),而Tan Ⅱ A高剂量组上述指标均显著降低(均P<0.01)。结论:压力负荷增加大鼠心肌组织中RhoA和Rock1蛋白的表达明显升高,表明RhoA/Rock信号通路参与了压力负荷增加大鼠心肌肥厚的发生与发展。Tan Ⅱ A能抑制RhoA/Rock信号通路,从而改善心肌肥厚。     

丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的：探讨丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法：30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹参酮ⅡA组。结扎大鼠单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型。丹参酮ⅡA经腹腔注射,剂量为1．5mg／（kg·d）。术后第10天取梗阻侧肾组织作HE、Masson染色,观察肾间质病理改变。免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅰ型胶原的蛋白表达与定位。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测三者的mRNA水平。结果：模型组术后第10天梗阻侧出现明显的肾间质纤维化,肾组织TGF-β1、α—SMA和Ⅰ型胶原的蛋白及mRNA表达显著增加（P〈0．01）。丹参酮ⅡA组肾间质纤维化程度减轻,肾组织TGF-β1、α—sMA及Ⅰ型胶原表达下调（P〈0．05）。结论：丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化有明显的抑制作用,其机制可能与下调TGF-β1表达,抑制成纤维细胞增殖和表型转化,减少胶原沉积有关。     

丹参酮ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨丹参酮(Tan)ⅡA对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的影响。方法选择SD大鼠60只,采用腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加大鼠心肌纤维化模型,动脉夹闭4周后,将存活大鼠40只随机分为假手术组、模型组、TanⅡA低剂量组[L-TanⅡA组,10mg/(kg·d)]、TanⅡA高剂量组[H-TanⅡA组,20mg/(kg·d)]及阳性对照药物卡托普利组[卡托普利组,100mg/(kg·d)],每组8只。8周末检测心脏质量指数、左心室质量指数、心肌组织病理学、心肌羟脯氨酸含量、心肌同组基因蛋白A(RhoA)、Rho激酶1(ROCK1)、结缔组织生长因子和血清TNF-α蛋白的水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠心脏质量指数、左心室质量指数、羟脯氨酸、RhoA、ROCK1、结缔组织生长因子和TNF-α蛋白水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,L-TanⅡA组和H-TanⅡA组上述各项指标明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 TanⅡA可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路,降低下游炎性细胞因子和促纤维化细胞因子分泌,从而减少压力负荷增加大鼠心肌炎性反应和纤维化,为心肌纤维化的治疗提供新的依据。     

丹参酮ⅡA抗心肌纤维化作用机制实验研究

目的：研究丹参酮ⅡA（TSN）对大鼠心脏成纤维细胞（CF）内转化生长因子β1（TGFβ1）信号转导的影响,探讨TSN抗心肌纤维化的作用机制。方法：采用胰酶消化法和差速贴壁法获取新生SD大鼠CF,应用5ng／ml TG即1刺激及不同浓度（10^-6、10^-5、10^-4mol／L）TSN预处理。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测纤维连接蛋白（FN）mRNA表达,western blot检测FN和Smads蛋白表达。结果：TGF^-在一定范围内以时间依赖方式诱导FN及Smads表达,刺激终末FNmRNA和蛋白表达量分别增加1．3倍和1．8倍（P〈0．01,P〈0．01）,磷酸化Smad2／3（p-Smad2／3）蛋白表达量增加3．9倍（P〈0．01）。TSN预处理可下调FN和p-Smad2／3表达,而且效应呈剂量依赖性。10～mol／L TSN预处理对FN和p-Smad2／3表达几无影响（P〉O．05,P〉0．05）;1015和1014mol／LTSN预处理后,FNmRNA表达量分别下降32．7％、42．9％（P〈0．05,P〈0．01）,FN蛋白表达量分别下降45．8％、57．1％（P〈0．01,P〈0．01）,p-Smad2／3蛋白表达量分别下降40．5％、55．4％（P〈0．05,P〈0．01）。结论：TSN抗心肌纤维化作用可能与其抑制TGFβ1诱导的Smad2／3磷酸化,阻断CF内TGFβ1／Smads信号通路有关。     

丹参酮ⅡA 磺酸钠腹腔注射对阿霉素心肌病大鼠心功能及左心室纤维化的影响

目的观察丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对阿霉素心肌病大鼠心功能及左心室(左室)肌纤维化的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为实验组、模型组和对照组各10只。实验组腹腔注射STS、阿霉素各2 mg/kg,模型组腹腔注射阿霉素2 mg/kg,每周1次,对照组腹腔注射生理盐水10 m L/kg,各组每周注射1次、共3次。实验第7周末,进行心脏彩色多普勒超声(彩超)检查测算左室舒张末径及左室射血分数(LVEF),行颈动脉逆行插管测左室内压,HE染色观察左室组织病理变化,VG染色观察左室纤维化程度,采用ELISA法检测各组心肌组织匀浆中的心肌结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β1(TGF-β1),采用Western blotting法检测各组心肌细胞中的β-catenin。结果实验组血压高于模型组、低于对照组(P均<0.05)。模型组较对照组左室内径明显增大且室壁变薄,LVEF降低(P均<0.05);实验组较模型组左室内径减小、室壁变厚、LVEF升高(P均<0.05)。实验组左室压最大上升速度高于模型组、低于对照组,左室最大下降速度高于模型组、低于对照组(P均<0.05)。实验组心肌组织结构改变及纤维化程度较模型组减轻。实验组心肌组织中TGF-β1和CTGF水平低于模型组、高于对照组(P均<0.05),实验组心肌细胞中β-catenin表达量低于模型组(P<0.05)。结论 STS可在一定程度上减轻阿霉素心肌病大鼠左室纤维化程度,改善心功能,这些作用可能与下调TGF-β1、CTGF及β-catenin表达有关。     

葛根素对心肌纤维化模型大鼠左室心肌组织中转化生长因子β_1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究葛根素对心肌纤维化模型大鼠左室心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:采用异丙肾上腺素(5mg·kg-1.d-1×10d)皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素(100mg·kg-1.d-1)干预,实验共8周。32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组,空白对照组,葛根素早期干预组,葛根素后期干预组;每组于实验末,计算左室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色、免疫组化染色,分别测算胶原容积积分(CVF)、CTGF蛋白和TGF-β1蛋白含量,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度和运用RT-PCR半定量分析CTGFmRNA和TGF-β1mRNA水平。结果:葛根素减少模型组大鼠左室质量指数、左室心肌组织CVF及羟脯氨酸浓度(P0.01),模型组大鼠左室心肌组织CTGF和TGF-β1的过度表达(P0.05)。相关分析显示4组大鼠的左室心肌组织CTGF蛋白含量与左室心肌组织CVF和羟脯氨酸浓度呈正相关(P0.05)。结论:葛根素减少心肌纤维化大鼠的左室心肌间质胶原沉积,减轻和延缓大鼠心肌纤维化,这种作用机制可能是通过抑制左室心肌组织中CTGF、TGF-β1的过度表达来实现。     

Smad7的表达对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响

目的研究心肌梗死（MI）后大鼠心肌Smad7的表达及其与心肌纤维化的关系。方法结扎冠状动脉建立大鼠MI模型,并另设假手术组为对照组。8周后,测定心室的质量/体质量（HW/BW）。以多普勒超声评价心脏功能。以Mallory’s Trichrome染色法检测非梗死区胶原的含量。分别以RT-PCR和Western blot法检测非梗死区左室心肌转化生长因子（TGF）-β1、Smad7 mRNA及蛋白表达的水平。结果与假手术组比较,MI组的HW/BW（P<0.01）、左心室舒张末期内径（LVEDD,P<0.01）、E峰/A峰比值（E/A,P<0.01）、非梗死区胶原的含量（P<0.01）、非梗死区左室TGF-β1mRNA及蛋白的表达（P<0.01）均显著增加;Smad7 mRNA及蛋白的表达（P<0.01）、射血分数（EF,P<0.01）及短轴缩短率（FS,P<0.01）均显著降低。结论MI后大鼠心肌Smad7的表达降低,与MI后的心肌纤维化密切相关。     

丹参酮ⅡA 磺酸钠对大鼠肾间质纤维化的影响及机制探讨

目的：探讨丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组及丹参酮组;后三组制备肾间质纤维化模型。制模前依那普利组予依那普利灌胃,丹参酮组予丹参酮ⅡA磺酸钠腹腔注射。术后10 d取各组肾组织观察病理学变化;免疫组化法检测血小板源性生长因子D（PDGF-D）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达,PCR法检测PDGF-D、HO-1 mRNA表达。结果模型组肾间质纤维化程度重于依那普利组及丹参酮组,PDGF-D表达量明显高于、HO-1表达量明显低于依那普利组及丹参酮组,P均＜0．05;依那普利组与丹参酮组PDGF-D、HO-1蛋白及PDGF-D、HO-1 mRNA表达无明显差异。结论丹参酮ⅡA磺酸钠对大鼠肾间质纤维化有抑制作用,其机制可能与下调PDGF-D、上调HO-1的表达,抑制间质细胞增生、表型转化密切相关。     

丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化大鼠VCAM-1表达的影响

目的 研究丹参酮ⅡA(Tsn)对动脉粥样硬化(AS)大鼠VCAM-1表达的影响.方法 采用高胆固醇饲料喂饲建立大鼠AS模型.测定各组血清中总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇,免疫组化观察内膜粥样硬化斑块中VCAM-1的表达情况.结果 Tsn组内膜增生较模型组明显减轻.VCAM-1在Tsn组中表达较模型组明显减少(P＜0.05).结论 Tsn可明显抑制VCAM-1表达,此可能为其防治AS的机制之一.     

结缔组织生长因子与心肌纤维化

结缔组织生长因子（CTGF）在纤维化组织中高表达,促进细胞增殖和细胞外基质的合成和积聚,从而参与纤维化的发生发展。本文对CTGF与心肌纤维化的关系进行论述。     

中药复方对肝纤维化大鼠细胞因子的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)mRNA与转化生长因子 β1 (TGFβ1)mRNA在免疫性大鼠肝纤维化中的表达状况及中药复方(汉丹肝乐)对其的影响作用。 方法 用猪血清腹腔内注射复制免疫损伤性肝纤维化模型,造模同时给予汉丹肝乐口服作为肝纤维化防治组;免疫攻击12周后处死动物。取肝作HE染色显示肝纤维化形成状况,原位杂交方法检测肝内CTGF mRNA、TGFβ1 mRNA表达,并对指标作半定量评分。 结果 12周后模型组大鼠形成典型的肝纤维化,肝内CTGF mRNA与TGFβ1 mRNA表达均显著增强,同时二者阳性分布部位相近,表达程度呈正相关性(r=0.799,P<0.05);汉丹肝乐组,肝纤维化程度明显减轻,CTGF mRNA和TGFβ1 mRNA表达的阳性指数分别为12.5±2.3和25.4±3.2,模型组分别为28.8±1.4和37.3±5.4,t=5.208、5.655,P<0.01。Spearman等级相关分析显示,CTGF mRNA表达与组织病理上肝纤维化变化呈正相关性(r=0.822、0.808,P<0.05)。 结论 CTGF与TGFβ1基因的增高表达与肝纤维化形成有密切关系;汉丹肝乐能有效抑制CTGF与TGFβ1基因的表达。通过在转录环节上阻断肝纤维化相关的细胞内信号转导途径,可能是该药物作用的重要分子机制之一。     

SnoN蛋白对心肌纤维化的影响

心肌纤维化是心血管系统疾病发展到一定阶段的共同病理变化,是心脏功能减退、恶性心律失常发生发展的基础。转化生长因子-β1(TGF-β1)是促进心肌纤维化的重要细胞因子,而核转录共抑制因子SnoN能通过Smads蛋白抑制TGF-β1信号通路,从而抑制心肌纤维化的发生发展。     

洛沙坦对老龄大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨洛沙坦对老龄大鼠心肌纤维化的影响及其发生机制。方法W istar大鼠30只:青年组10只(3月龄);老年组20只(18月龄),其中非用药组10只,用药组10只(洛沙坦,20 mg.kg-1.d-1,用药8 w)。生化方法测定心肌羟脯氨酸浓度(HC),胶原VG染色法检测心肌胶原容积分数(CVF)、心肌血管周围胶原面积和管腔面积比例(PVCA);免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠心肌组织的表达。结果与青年组相比,老年非用药组HC、CVF和PVCA明显增高(P<0.01,P<0.001,P<0.01);与老年非用药组相比,老年用药组上述指标明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05),TGF-β1表达在老年非用药组较青年组明显增强(P<0.05)。TGF-β1表达与HC、CVF和PVCA呈正相关(rs分别为0.462、0.391、0.416;P<0.01,P<0.05,P<0.05)。结论TGF-β1随增龄表达逐渐增加,可能参与了增龄过程中老龄大鼠心肌纤维化的形成。洛沙坦在一定程度上抑制了老龄大鼠心肌纤维化的形成。     

银杏叶提取物对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用

目的研究银杏叶提取物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞纤维化的干预作用。方法体外培养心肌成纤维细胞,加入10-7mol AngⅡ模拟大鼠心肌纤维化体外模型。ELISA检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β(TGF-β)含量。结果银杏叶提取物可明显降低AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原分泌增加,并能降低CTGF、TGF-β表达。结论银杏叶提取物可改善AngⅡ引起的心肌成纤维细胞Ⅰ型胶原分泌增加,其机制可能与CTGF、TGF-β有关。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠血清前胶原末端肽的影响

目的 研究丹参酮ⅡA(TSN)对于自发性高血压大鼠(SHR)血清I型前胶原羧基端肽(PⅠCP)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)水平的影响.方法 24只8周龄SHR大鼠随机分为三组:SHR对照组,丹参酮组,缬沙坦组.另有8只相同周龄Wistar大鼠为正常对照组.给予相应的药物治疗4 w后,测量鼠尾血压和心室质量,用VG染色检测心肌胶原容积分数(CVF),并用放射免疫分析法测定血清PⅠCP和PⅢ NP浓度.结果 SHR对照组血压、心室质量、心室质量指数、CVF均显著高于其他组(P＜0.01);血清PⅠCP和PⅢNP水平亦明显升高(P＜0.05).经丹参酮和缬沙坦治疗4 w后,其血压(P＜0.01)、心室质量、心室质量指数(P＜0.05)、CVF(P＜0.01)较SHR对照组有不同程度的降低;血清PⅠCP和PⅢ NP水平较SHR对照组亦有不同程度的降低(P＜0.05).结论 TSN能够抑制心肌纤维化,其机制可能与其抑制心肌胶原合成有关.     

丹参酮ⅡA通过调节PI3K/AKT通路对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚及纤维化的影响

目的 研究丹参酮ⅡA对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚及纤维化的影响及对磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B(AKT)通路的调节作用。方法 72只大鼠随机分为空白对照组、模型组、丹参酮ⅡA低、中、高剂量组及PI3K抑制剂组,共六组,每组各12只。按照5 mg/kg的剂量皮下注射异丙肾上腺素建立心肌肥厚大鼠模型。丹参酮ⅡA低、中、高剂量组分别腹腔注射给予大鼠17.5 mg/kg、35mg/kg、70 mg/kg的丹参酮ⅡA,PI3K抑制剂组尾静脉注射给予大鼠0.3 mg/kg的LY294002,1/d,连续给药28 d。生物机能实验系统测定大鼠左心室收缩压（LVSP）、左心室舒张末期压力（LVEDP）及左心室内压最大变化速率（±dp/dtmax）。计算大鼠心脏质量及心脏指数,酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠心肌组织Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白水平,苏木精-伊红（HE）染色和Masson染色对大鼠心肌组织进行病理学检查。免疫印迹法（Western blot）检测大鼠心肌组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白水平。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠LVEDP、心脏质量、心脏指数、Ⅰ...     

外源性硫化氢对阿霉素心肌病大鼠心肌纤维化影响的研究

目的:本实验以阿霉素(盐酸多柔比星ADR)诱导的心肌病大鼠为研究对象,探讨外源性硫化氢(H2S)供体硫氢化钠(Na HS)是否通过调控转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,从而减轻心肌纤维化。方法:40只,雄性,SD大鼠,随机分为四组:1ADR组(n=12);2 ADR+Na HS组(n=12);3Na HS组(n=8);4对照组(n=8);药物均腹腔注射,连续用药10周,用心脏超声心动仪检测大鼠心功能,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠心肌组织中H2S、TGF-β1以及I型和III型胶原的浓度;用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测大鼠心肌组织中TGF-β1mRNA的表达量。结果:阿霉素组大鼠心功能较对照组明显降低(P<0.05),心肌组织中TGF-β1以及I型和III型胶原的表达较对照组明显增多(P<0.05),另外H2S浓度较对照组明显减少(P<0.05)。补充外源性硫化氢后大鼠心功能明显好转,心肌组织中TGF-β1以及I型和III型胶原的表达较阿霉素组明显减少(P<0.05)。结论:补充外源性硫化氢可通过减少TGF-β1的表达,减轻心肌纤维化,改善大鼠心功能。     

生脉注射液对大鼠心肌纤维化作用的影响

目的:观察生脉注射液对异丙肾上腺素(Iso)引起大鼠心肌纤维化的干预作用,并探讨其抗心肌纤维化的可能机制。方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、卡托普利组和生脉注射液组(生脉组),每组各12只,采用Iso 5mg.kg-1.d-1皮下注射制造心肌纤维化模型,给予生脉注射液100mg.kg-1.d-1灌胃。测算大鼠左室射血分数(LVEF)、左室质量指数(LVMI)和胶原容积积分(CVF),应用分光光度法检测羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)活性,运用反转录聚合酶链式反应半定量分析结缔组织生长因子(CTGF)mRNA水平。结果:与模型组相比,生脉组CVF、Hyp、LVMI及MDA含量降低,SOD活性增强,CTGF的过度表达被抑制(均P<0.01)。结论:生脉注射液能明显改善心室重构和心肌纤维化,这可能与其抗氧化、抑制CTGF过度表达有关。