膝骨性关节发病过程中细胞因子的变化及降钙素的影响

目的探讨膝骨性关节发病过程中细胞因子的变化及降钙素(CT)的影响。方法将36只健康大耳白兔随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、CT治疗组(C组),B、C两组采用改良Hulth法复制膝骨性关节炎模型,A组除切开皮肤和关节腔外,不做其他处理,从术后第6周开始C组每天皮下注射CT 5 U/kg,A、B组给予等量生理盐水皮下注射,连续注射20 d后处死动物。分别观察3组动物膝关节液中白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及关节软骨组织病理形态和转化生长因子-β(TGF-β)、TNF-α表达的变化以及CT对上述指标的影响。结果与A组比较,B组股骨髁软骨退变评分和Mankin’s评分明显升高,IL-1、IL-6、TNF-α表达明显增高,而TGF-β表达明显减少(P<0.05);与B组比较,C组股骨髁软骨退变评分和Man-kin’s评分明显降低,软骨损伤明显减轻,IL-1、IL-6、TNF-α表达也明显降低,而TGF-β表达则明显增高。结论 CT可以明显改善兔膝骨性关节炎的软骨损伤,此作用可能与细胞因子的改变有关。     

关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎的影响

目的观察膝关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎的影响,研究不同浓度医用臭氧对骨性关节炎的治疗效果。方法将健康家兔32只随机分为A组（空气组）、B组（25μg/ml医用臭氧组）、C组（40μg/ml医用臭氧组）、D组（80μg/ml医用臭氧组）,每组兔右膝关节均使用Hulth法复制出膝骨性关节炎（OA）模型,造模成功后,每组每周1次给予膝关节腔内注射医用臭氧,每次2ml,共4周。末次注射后3d处死实验兔,取股骨内侧髁附近软骨组织行病理学观察及Mankin评分;取关节液行NO检测;分别在造模前、造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度。结果各组造模成功时右膝关节活动度较造模前降低,处死前B、组C组和D组右膝关节活动度较造模成功时升高,B组处死前即刻右膝关节活动度较C组和D组明显升高（P〈0.05）;各组右膝关节软骨病理检查均出现关节软骨损害改变,B组关节软骨退变程度轻,Mankin评分较左膝差异无统计学意义（P〉0.05）,C组和D组关节软骨退变明显,Mankin评分较左膝差异有统计学意义（P〈0.05）;各组右膝关节关节液中NO含量升高,B组关节液中NO含量相对于C组和D组降低程度最大。结论三种浓度的医用臭氧均能够减轻骨性关节炎的炎症反应,而40μg/ml和80μg/ml的医用臭氧会导致关节软骨组织结构破坏,臭氧浓度越高损害越重。     

补肾壮骨胶囊对兔膝骨关节炎软骨ADAMTS-4表达的影响

目的:观察补肾壮骨胶囊对兔膝骨性关节炎软骨细胞ADAMTS-4表达的影响。方法:将新西兰白兔40只分为A正常组、B模型组、C治疗组、D对照组,B、C、D 3组按照Hulth造模方法造成兔膝骨性关节炎模型。C组给予补肾壮骨胶囊,D组给予壮骨关节丸。给药8周后测定关节软骨ADAMTS-4阳性细胞数。结果:正常组软骨很少表达ADAMTS-4,模型组中的ADAMTS-4表达显著高于正常组(P<0.01),治疗组和对照组的ADAMTS-4表达显著低于模型组(P<0.01),但高于正常组(P<0.01)。结论:补肾壮骨胶囊抑制KOA软骨中ADAMTS-4的表达。     

丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨陛关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法将健康Wistar大鼠80只随机分为4组,分别为丹紫康膝组,西药组,模型组,正常组。除正常组外,其他组予以改良Hultll造模法造成大鼠膝骨性关节炎模型,于造模6周后对各组进行干预,干预4周后肉眼观察大鼠膝关节大体形态,抽取关节液检测一氧化氮（NO）含量,TUNEL法检测关节软骨细胞凋亡率。结果肉眼观察下见模型组造模膝关节软骨明显退变,局部溃疡,关节边缘增生,正常组膝关节软骨光滑润泽,丹紫康膝组和西药组可见造模膝关节有新生软骨生成;膝关节滑膜液NO含量正常组较其余3组低（P〈0．05）,丹紫康膝组和西药组NO含量较模型组低（火0．05）;丹紫康膝组和西药组细胞凋亡率明显低于模型组（P〈0．05）,丹紫康膝组、西药组、模型组细胞凋亡率均较正常组高（P〈0．05）。结论丹紫康膝冲剂能降低大鼠膝关节关节液NO含量．从而抑制由N0介导的关节软骨细胞凋亡。     

改良伸直位固定法建立兔膝骨性关节炎模型的研究

目的用改良伸直位固定法建立兔膝骨性关节炎动物模型,为艾灸防治早期膝,骨性关节炎提供动物模型。方法 24只日本大耳白兔随机分为改良伸直位固定纽(A组)、伸直位固定组(B组)和正常组(C组),每组8只。A组用改良法固定兔膝关节于伸直位;B组管型石膏固定兔膝关节伸直位:C组不做固定正常喂养。在造模8周后,各组分别从肉眼、光镜下、透射电镜下观察兔膝关节组织形态学情况,并用Mankin评分比较各组膝关节软骨损伤情况。结果通过肉眼、光镜、电镜下观察,A、B纽均呈现OA典型病理改变,在Mankin评分上:A、B组明显高于C组,比较均有有非常显著意义(f=21.177,P0.01;f=32.233,P0.01);A组高于B组,但比较无显著意义(t=1.342,P0.05)。结论改良伸直位固定法能成功建立兔膝0A模型,且本造模法具有简单、固定牢固、无创伤和造模成功率高等优点,有利于研究艾灸疗法对兔膝OA的防治作用。     

关节止痛胶囊治疗膝骨性关节炎的实验研究

目的:探讨关节止痛胶囊治疗膝骨性关节炎的作用机制。方法:将新西兰兔32只分为A空白组、B模型组、C对照组、D治疗组,每组8只,按ACLT法造成膝骨性关节炎模型。手术1周后给予关节止痛胶囊,给药8周后拍摄膝关节正位CR片并测定有关指标,动物处死后取股骨髁进行退变关节软骨大体观察评分、光镜观察。结果:B组膝关节软骨有明显退行性改变及滑膜炎性改变,C、D组病理改变介于A、B组之间。血清、关节液中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量,C、D组较A组显著升高,但是较B组显著降低;D组血清、关节液中IL-1、TNF-α含量与C组比较有显著性差异(P<0.05);但D组MMP-1含量与C组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:关节止痛胶囊通过降低IL-1、TNF-α、MMP-1水平,减少软骨细胞凋亡,减轻DNA氧化损伤,促进软骨基质合成及抑制其分解,减缓胶原类型改变,抑制滑膜炎症,改善临床症状,恢复膝关节功能。     

“拔伸松动手法”对兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的影响

目的：研究拔伸松动手法对兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的影响。方法采用成年日本大白兔,按Videman T的造模方法制作兔膝骨性关节炎模型,随机分成拔伸松动手法组、注射透明质酸钠组、模型组及空白组,观察治疗后兔膝骨性关节炎电镜下软骨超微结构的改变。结果与模型组比较,拔伸松动手法治疗有利于兔膝骨性关节炎损伤软骨细胞的修复,并可促进软骨表面结构的修复。结论拔伸松动手法可促进兔膝骨性关节炎损伤软骨细胞和软骨表面结构的修复,是该法治疗膝关节骨性关节炎的客观依据。     

自体富血小板血浆对兔膝关节骨性关节炎的治疗效果观察

目的 探讨富血小板血浆(PRP)对膝关节骨性关节炎(KOA)的治疗机制及作用.方法 取成年清洁级新西兰大白兔32只,分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、PRP治疗组(C组)、玻璃酸钠治疗组(D组).A组行模拟造模,B、C、D组按Hulth方法诱发建立兔KOA动物模型.动物模型建立成功后,C组予PRP 0.5 mL关节腔注射治疗,3周1次,共2次;D组予玻璃酸钠注射液关节腔注射,每周1次,连续5周;A、B组于C组同一时间点给予等量无菌生理盐水注射.在普通光学显微镜下观察关节软骨的组织结构、细胞数量、潮线的完整性和甲苯胺蓝染色等情况,比较各组间Mankin′s评分的差异.收集适量关节液测定各组花生四烯酸的表达情况.结果 A组关节软骨结构形态正常,无明显破坏;B、C、D组关节软骨结构形态均有不同程度的破坏,尤以B组软骨结构改变较大,C、D组软骨形态结构虽有改变,但与A组软骨结构较接近.A组Mankin′s评分最低,B组评分最高,C、D组经干预治疗后评分明显降低;B组与C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05),C组与D组比较,差异有统计学意义(P<0.05).A组花生四烯酸水平最低,B组最高,C、D组水平介于A、B组之间,且C组低于D组(P<0.05).结论 PRP对KOA具有较为明显的治疗及缓解作用.     

六味地黄丸对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察六味地黄丸对兔骨性关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。方法 将36只日本大耳兔随机分组为正常对照组(A组)，OA模型组(B组)，OA治疗组(C组)。用石膏管型伸直位固定B组及C组24只兔左后腿膝关节，A组不予固定。A、B组每天喂以正常饲料，C组2周后予喂以投药后的混合饲料，8周后制备标本并处死动物。采用原位末端标记(TUNEL)及细胞色素C免疫组化分别观察软骨细胞的凋亡状况。结果 用药组软骨细胞凋亡指数明显低于OA模型组。结论 六味地黄丸能有效抑制细胞色素C的释放，减缓软骨细胞凋亡。     

附桂骨痛胶囊对膝关节骨性关节炎NO及iNOS影响的实验研究

目的 通过观察附桂骨痛胶囊对膝骨性关节炎血清及关节液NO、关节软骨iNOS的影响,探讨其治疗作用机理及膝骨性关节炎的发病机制.方法 按照Hulth造模方法将30只新西兰大白兔造成膝骨性关节炎模型,并随机分为正常组、模型组、壮骨关节丸对照组、附桂骨痛胶囊治疗组,给药8 W后测定血清、关节液NO含量,动物处死后对软骨及滑膜组织的匀浆进行iNOS的测定.结果 附桂骨痛胶囊治疗组关节液NO含量降低的程度与壮骨关节丸对照组比较,差异显著（P＜0.05）,软骨及滑膜组织中iNOS的含量与对照组比较有显著性差异（P＜0.05）.结论 附桂骨痛胶囊通过抑制iNOS的表达,可降低NO含量,减少软骨细胞凋亡,促进软骨基质合成及抑制其分解,抑制滑膜炎症,延缓关节软骨退变,促进了关节软骨的修复.     

消瘀接骨散对兔膝骨关节炎模型关节液中MMP-1、MMP-3表达的影响

目的 观察消瘀接骨散对兔膝骨关节炎模型中关节软骨病理改变及关节液中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-1、MMP-3表达的影响。 方法 将24只新西兰大耳白兔分为正常组、模型组、用药组,每组8只。采用膝关节石膏制动方法复制膝骨关节炎模型,模型复制成功后,正常饲养并驱赶1周,给予用药组家兔消瘀接骨散外敷,给予模型组和正常组家兔相同大小药棉、绷带、胶布固定。光镜下观察膝关节软骨退变情况,采用酶联免疫吸附法测定关节液中MMP-1、MMP-3表达水平。 结果 用药组家兔膝关节软骨损伤较模型组明显减轻,关节软骨表面较正常组粗糙,滑膜增厚、稍有肿胀,镜下可见细胞排列规律尚可,偶见少量细胞簇集现象,关节软骨细胞有轻度变性,潮线尚完整。用药组家兔膝关节软骨的Mankin评分及关节液中MMP-1、MMP-3表达水平明显低于模型组（P<0.05）。 结论 消瘀接骨散外敷治疗兔膝骨关节炎的机制与其降低关节液中MMP-1、MMP-3的表达水平有关。     

化痰祛湿剂对兔膝骨性关节炎软骨及滑膜的影响

目的:观察化痰祛湿剂膝痹康对兔实验性膝骨性关节炎模型关节软骨及滑膜病理学变化的影响。方法:健康家兔40只,体重2.8~3.2kg,随机分为模型组、膝痹康组(为本院制剂,批号050411,主要由制南星、制川乌、薏苡仁、刺五加、丹参、地龙等组成,含生药2.0g/mL的合剂,功效化痰祛湿、消肿止痛)、阳性药(美洛昔康)对照组、假手术对照组,每组家兔10只。模型组、膝痹康组、阳性药(美洛昔康)对照组家兔通过改良的Hulth法复制兔膝关节炎动物模型,假手术组仅切开膝关节表面的皮肤,膝痹康组、阳性药对照组家兔于造模成功后开始用药,连续用药8周,4组家兔于造模后全部处死,切除患侧胫骨全层关节软骨及滑膜进行肉眼、光镜组织学检查,并对关节软骨进行透射电镜检查。结果:显示模型组兔患侧关节软骨表面粗糙,变暗呈灰黄色,并有裂纹、糜烂及溃疡形成;滑膜存在不同程度增生、粘连,关节液量增多,且呈泡沫状、浑浊,Mankin’s评分显著高于假手术对照组;膝痹康组关节软骨及滑膜虽未能恢复到正常状态,但Mankin’s评分较模型组显著降低。结论:膝痹康可明显减轻膝骨性关节炎兔关节软骨及滑膜的病理损伤,对软骨及滑膜的退变有较好的延缓趋势。     

青藤碱对膝骨性关节炎兔关节液及血清白细胞介素1β含量的影响

目的：探讨关节腔内注射青藤碱对膝骨关节炎兔关节液及血清中白细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）含量的影响。方法：除正常对照组（n=4）外，36只免采用左后肢膝关节伸直位石膏管型制动法建立兔骨关节炎模型。造模6周后青藤碱组兔关节腔内注射青藤碱，1次／N，连续5周，透明质酸组关节腔内注射透明质酸，模型组关节腔内注射生理盐水，正常组不治疗。分别于治疗前及治疗后采用酶联免疫吸附测定法检测关节液及血清IL-1β含量，并对软骨组织进行Mankin评分。结果：与模型组比较，青藤碱组骨性关节炎兔血清及关节液中IL-1β含量下降（P〈0．01），且青藤碱组低于透明质酸组（P〈0．05）。青藤碱组的软骨Mankin评分明显低于透明质酸组（P〈0．05）。结论：青藤碱可能通过抑制关节液及血清中IL—1β表达降低兔骨性关节炎模型的关节退变程度。     

七叶亭对骨关节炎的修复作用

目的 :观察七叶亭对实验性骨关节炎关节液中一氧化氮 (NO)、前列腺素E2 (PGE2 )和软骨中基质金属蛋白酶 1(MMP 1)水平的影响 ,探讨七叶亭对骨关节炎的修复作用。方法 :2 4只日本大耳白兔随机分成对照组A、B和治疗组C、D。对照组A只行单侧膝关节切开术作假手术对照 ,对照组B及治疗组C、D均行单侧前交叉韧带切断术建立骨关节炎模型。治疗组C术后行小剂量 10 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,治疗组D术后行大剂量 2 0 0mg·kg-1七叶亭腹腔注射 ,对照组均给予生理盐水 ;8周处死 ,抽取关节液作NO、PGE2 测定 ,以免疫组织化学方法检测软骨中MMP 1的表达 ;对标本均行大体观察及光镜观察。结果 :治疗组软骨退变明显轻于对照组B ,MMP 1、NO、PGE2 含量明显低于对照组B ,治疗组D尤为明显。结论 :七叶亭能明显降低关节炎关节软骨中的MMP 1及关节液中的NO、PGE2 水平 ,减缓骨关节炎的发生。     

超微肿痛贴对兔膝骨关节炎模型的软骨中JNK/p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察超微肿痛贴对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型的JNK/p38 MAPK信号通路的mRNA及蛋白表达的影响.方法 将50只3月龄新西兰兔随机分为空白组、模型组、氟比洛芬凝胶贴膏组、超微肿痛贴组,每组各12只,除空白组外,其他3组均采用木瓜蛋白酶膝关节腔注射方式造模.造模成功后,...     

关节腔注射三氧对兔膝骨性关节炎病理改变的影响

目的通过建立兔膝骨性关节炎的模型,了解膝关节腔注射三氧对骨性关节炎软骨病理改变的影响。方法成年新西兰兔40只随机分为5组,每组8只,即正常对照组（A组）,模型对照组（B组）,20μg／ml三氧治疗组（c组）,40μg／ml三氧治疗组（D组）,60μg／ml三氧治疗组（E组）。采用Videman法对B、c、D、E组家兔进行兔膝骨关节炎模型复制。造模6周后将空气1ml注入B组家兔左膝关节腔内作为对照,将20、40、60μg／ml浓度的三氧1ml分别注入C、D、E组兔左膝关节腔内,每3d1次,治疗2次后,处死动物,观察兔膝关节软骨形态学变化及进行病理积分统计。结果B组肉眼外观及病理显示关节软骨有明显破坏,病理积分较A组明显升高（P〈0．01）,C、D两组病理改变较B组显示关节软骨有所修复,病理积分较B组降低（P〈0．05）,E组与B组比较病理改变无明显变化,病理积分的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论20、40μg／ml浓度的三氧关节腔注射可促进早期兔膝骨性关节炎关节软骨的修复,有利于减轻及阻止骨性关节炎的发展;而60μg／ml浓度三氧关节腔内注射对已损伤的软骨无修复作用。     

三联法治疗对膝骨性关节炎家兔关节软骨、滑膜和关节液一氧化氮水平的影响

目的探讨中药熏蒸、电极刺激、手法弹拨三联法对膝骨性关节炎家兔关节软骨、滑膜及关节液NO水平的影响,为临床推广应用三联法提供实验及理论依据。方法将32只6~10月龄的雄性新西兰大白兔随机分为正常组(8只)、模型组(8只)、扶他林组(8只)、三联法组(8只),后三组以结扎右侧股静脉的方法造模,造模10周后除正常组和模型组外其余两组分别给予相应治疗。于治疗4周后检测各组关节软骨、滑膜及关节液NO水平。结果模型组关节软骨、滑膜及关节液NO水平均高于正常组(P<0.05),经治疗后扶他林组较模型组低(P<0.05),但无三联法组降低明显。结论三联法能明显降低关节液和关节软骨NO水平,阻止OA病理过程的进一步发展。     

血清和关节液透明质酸含量的测定及其意义

目的：探讨骨性关节炎（OA）患者血清和关节液透明质酸（HA）含量与OA病变程度的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测膝关节疾病122例（128膝）患者的血清和关节液HA含量,并对软骨损伤及滑膜炎症程度进行评价。结果：OA组血清HA含量、软骨损伤评分及滑膜炎评分均高于非OA组（P〈0．01）,但关节液HA含量低于非OA组（P〈0．01）。OA组血清HA含量与年龄、软骨损伤评分及滑膜炎症程度评分均呈正相关（P〈0．05）,无性别差异（P〉0．05）;关节液HA含量与软骨损伤评分及滑膜炎症程度评分呈负相关（P〈0．05）,与年龄无相关性（P〉0．05）,但122例总体分析,关节液HA含量与年龄呈负相关关系且有性别差异（P〈0．05）。软骨损伤对血清HA和关节液HA含量的影响比滑膜炎大。结论：血清和关节液HA可作为生物学标志物反映软骨损伤程度和滑膜炎程度,血清HA含量升高及关节液HA含量降低提示软骨损伤及滑膜炎程度较重。     

栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨基质及IL-1表达的影响

目的：观察栀子浸膏对Hulth法复制兔膝骨关节炎模型中软骨基质的改变及软骨与滑膜中IL-1的影响。方法：36只大耳白兔随机分为给药组、模型组和对照组,每组12只。给药组、模型组行Hulth术法复制骨关节炎模型,术后第5周,给药组以栀子浸膏600mg/kg灌胃,模型组与对照组给予等量生理盐水灌胃,给药3周后解剖显微镜下行软骨PelletierJP评分,取股骨内侧髁关节软骨行Masson及甲苯胺蓝染色观察软骨中胶原纤维、蛋白多糖含量的变化,免疫组化检测软骨与滑膜中IL-1的表达情况。结果：栀子浸膏能延缓骨关节炎关节软骨基质的丢失,给药组软骨与滑膜中IL-1的表达明显低于模型组,P〈0.05。结论：栀子浸膏可减少骨关节炎模型软骨与滑膜中IL-1的表达和保护关节软骨基质,从而延缓病程的进展。