EB病毒在鼻咽癌发生中的作用

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)组织及患者外周血白细胞和血清中EB病毒DNA的分布及其与NPC的关系。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)检测 39例NPC组织 (NPC组 1)中EB病毒DNA ,2 4例NPC患者 (NPC组 2 )外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ,2 0例慢性鼻咽炎组织 (对照组 1)中EB病毒DNA ,10例头颈部其他部位肿瘤患者 (对照组 2 )和 10例慢性鼻咽炎患者 (对照组 3)外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ;同时采用免疫酶法检测NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒VCA IgA抗体效价。 结果 :NPC组 1EB病毒DNA阳性率为 71.8% (2 8/ 39) ,对照组 1阳性率为 15 .0 % (3/ 2 0 ) ,其差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NPC组 2外周血白细胞中EB病毒DNA阳性率为 4 1.6 7% (10 / 2 4 ) ,对照组 2阳性率为 10 .0 0 % (1/ 10 ) ,对照组 3外周血白细胞中EB病毒DNA为阴性 ,NPC组 2分别与对照组 2和对照组 3比较 ,差异均有统计学意义 (均P <0 .0 5 ) ;NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒DNA均为阴性 ;NPC组 2血清中EB病毒VCA IgA抗体效价分别与对照组 2和对照组 3比较 ;差异均有统计学意义 (均P <0 .0 1)。结论 :NPC组织中检测出EB病毒DNA的阳性率较高 ,外周血白细胞中阳性率较低 ,血清中未能检测出EB病毒DNA ,说明EB病毒从癌组织—→外     

鼻咽癌细胞中MDM2基因的扩增与表达及其与p53的表达、EB病毒潜伏感染、细胞增生的关系(英文)

目的：明确鼻咽癌（NPC）细胞中小鼠双微粒体基因（MDM2）的扩增与表达情况及其作用。方法：应用斑点杂交、半定量逆转录一多聚酶链反应技术、原位杂交、免疫组化分别对NPC、慢性鼻咽炎症粘膜CINE）进行MDM2基因扩增与表达的检测；运用免疫组化、PCR分别对NPC、CINE中p53表达、PCNA和Ki67指数、EB病毒DNA进行检测；同时分析MDMZ的过表达与p53表达、PCNA和Ki67指数、EB病毒潜伏感染、NPC各临床病理参数的关系。结果：3．1％的NPC有MDM2基因的扩增，30.8％有MDM2mRNA高表达，30.4％有MDM2蛋白的过表达；MDM2的过表达与p53表达（p＜0.05）、NPC颈淋巴结转移相关（p＜O．05），而与EBV潜伏感染，PCNA和Ki67指数、NPC的T分期、NPC病人的年龄、性别、EBVCA-IgA滴度无关。结论：MDM2基因在NPC组织中的主要活化方式是过表达而不是扩增；MDM2基因可能通过与p53相互作用而NPC的发生和转移过程中起着重要作用。     

乙酰肝素酶、蛋白激酶CK2β与缺氧诱导因子-1α仪在鼻咽癌组织中的表达及其相关性研究

目的：检测乙酰肝素酶（HPA）、蛋白激酶CK2β（CK2β）、缺氧诱导因子-α（HIF-1α）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系;并分析三者在NPC组织中表达的相关性。方法：采用免疫组织化学染色技术Super-Vision法检测49例NPC组织标本及15例慢性鼻咽炎（CNT）组织标本中HPA、CK2β及HIF-1α的表达水平。结果：HPA、CK2β与HIF-1α在NPC组织中的表达水平均高于CNT组织中的表达,差异均有统计学意义（P〈O．05）;HPA、CK2β与HIF-β的表达与NPC临床分期、治疗后有无复发或转移相关（P〈0．05）,与患者的性别无关（P〉0．05）;HIF-1α的表达水平与NPC患者的年龄密切相关（P％0．01）,而HPA、CK2β的表达水平则与NPC患者的年龄无关（P〉0．05）;HPA、CK2β与HIF-1α任意两者间在NPC组织中的表达均呈正相关性（P〈O．05）。结论：HPA、CK2β和HIF-1α参与了NPC的发生和发展、浸润及转移;在NPC的发生发展过程中,HPA、CK2β和HIF-1α之间可能存在协同作用。     

鼻咽癌病人端粒酶表达的研究

目的：研究端粒酶（ＴＬＭＡ）在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达。方法：采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ法探讨１８例ＮＰＣ，２例放疗后ＮＰＣ，４例癌旁组织及４例慢性鼻咽炎鼻咽部活检组织中ＴＬＭＡ表达。结果：１８例ＮＰＣ ＴＬＭＡ阳性率为８８．９％。４例癌旁组织阳性率为７５．０％，慢性鼻咽炎全部为阴性。１例复发性ＮＰＣ为阳性，１例疗后未复发为阴性。ＴＬＭＡ表达与ＮＰＣ分期、颈淋巴结转移似无明显关系。结论：ＴＬ     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

癌-睾丸抗原SCP-1 mRNA在人鼻咽癌中的表达

目的：从基因水平了解癌-睾丸抗原SCP-1在人鼻咽癌（NPC）的表达情况。方法：用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测28例NPC组织和40例非癌鼻咽部组织SCP-1 mRNA的表达。随机抽取SCP-1表达阳性的PCR产物进行DNA测序并结合临床指标进行统计学处理。结果：SCP-1 mRNA在NPC的表达率为14．3％（4／28）,在非癌鼻咽部组织无表达;测序结果表明PCR扩增产物序列与目的基因序列相符;SCP-1 mRNA的表达率与NPC患者的年龄、性别和血清抗EB病毒水平无相关性（P〉0．05）。结论：SCP-1 mRNA在NPC组织中有表达,提示SCP-1可能是一种新的NPC肿瘤靶抗原。     

鼻咽癌患者EB病毒潜伏膜蛋白1抗体血清学检测及临床意义

目的:观察EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP1)抗体在鼻咽癌(NPC)患者血清中的水平,探讨LMP1抗体检测在NPC血清学诊断、预后判断及肿瘤靶向免疫治疗中的临床意义.方法:采用ELISA及Western blot方法,以LMP1融合蛋白检测61例NPC患者(NPC组)、30例鼻咽炎患者(鼻咽炎组)和55例正常人(对照组)血清中LMP1抗体水平.分析LMP1抗体水平与NPC临床病理特征的关系.结果:ELISA方法证实,NPC组LMP1抗体水平明显高于鼻咽炎组及对照组,鼻咽炎组LMP1抗体水平明显高于对照组,组间均差异有统计学意义(均P<0.05).NPC组LMP1抗体水平在NPC不同病理分级及有无淋巴结转移中均差异无统计学意义(均P>0.05).Western blot方法表明,NPC组LMP1抗体的表达均较鼻咽炎组及对照组高.结论:NPC组EBV LMP1抗体水平显著高于鼻咽炎组及对照组,LMP1融合蛋白可考虑作为肿瘤抗原标志物辅助NPC血清学诊断及肿瘤靶向免疫治疗.     

鼻咽癌组织EB病毒潜伏膜蛋白1检测及其临床意义

目的通过检测鼻咽癌组织中的EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)表达水平,探讨其与鼻咽癌发病的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测405例鼻咽癌患者鼻咽组织EB病毒EBV-LMP1表达情况,以105例鼻咽炎患者作为对照,分析EB病毒EBV-LMP1在不同鼻咽疾病及其在不同鼻咽癌病理类型、性别及年龄的表达情况。结果鼻咽癌患者EBV-LMP1阳性率为36.05%,而鼻咽炎患者阳性率为14.29%,EBV-LMP1在不同病理类型、性别及年龄的鼻咽癌患者中的表达无明显差异。结论鼻咽组织EBV-LMP1感染与鼻咽癌有一定的相关。     

实时荧光定量PCR法检测BARF1基因在鼻咽癌中的表达

目的通过检测EB病毒编码的BARF1基因在鼻咽癌组织中的表达水平,探讨BARF1基因与鼻咽癌之间的关系。方法应用实时荧光定量PCR法对BARF1基因在鼻咽癌、头颈部其他恶性肿瘤及慢性鼻咽炎病人组织中的表达进行检测。结果BARF1基因在鼻咽癌、头颈部其他恶性肿瘤及慢性鼻咽炎组织中的阳性表达率分别为100%、94.4%和80%,三者组间进行比较差异无统计学意义(P>0.05);鼻咽癌组织中BARF1基因的相对表达强度中位数为11.87,头颈部其他恶性肿瘤为0.07,慢性鼻咽炎组织为0.02。BARF1基因在鼻咽癌组织与头颈部其他恶性肿瘤及慢性鼻咽炎组织中的表达强度进行比较,均有统计学意义(P<0.05)。结论BARF1基因在各种组织中存在着普遍的表达,而在鼻咽癌组织中存在着较高的表达强度,提示BARF1基因在鼻咽癌细胞癌变过程中可能发挥重要作用。     

鼻咽组织及脱落细胞中EB病毒对鼻咽癌诊断价值的对照研究

目的：探讨一种快速准确普查及诊断鼻咽癌（NPC）的方法。方法：应用聚合酶链反应（PCR）技术对临床怀疑NPC的144例患者的鼻咽组织和鼻咽脱落细胞中EB病毒（EBV）DNA进行检测,并与病理诊断对照。结果：PCR技术检测鼻咽组织中EBV DNA诊断NPC的敏感性和特异性分别为92．16％和80．95％;检测鼻咽脱落细胞中EBV DNA诊断NPC的敏感性和特异性分别为86．27％和71．43％,其差异均无统计学意义（均P〉0．05）。结论：检测鼻咽脱落细胞中EBV快速、简单,患者痛苦小,敏感性和特异性均较高,可用于NPC的诊断;对NPC的普查及流行病学调查尤其方便、实用,值得推广。对凡是EBV检测阳性的患者均应提高警惕,追踪观察。     

bcl-2、P 5 3基因及Epstein-Barr病毒在鼻咽癌中的表达

目的探讨鼻咽癌组织中p53、bcl-2、EBV表达情况及与主要临床指标间关系.方法免疫组化检测p53、bcl-2蛋白,多聚酶链反应(PCR)检测EBV.结果慢性炎性组织中p53、bcl-2及EBV阳性率分别为7.7%、23.1%和7.7%,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(分别为75.9%、88.9%和87.0%)(P<0.01).三者在鼻咽癌组织中共同阳性率为72.2%,p53、bcl-2明显正相关(r＝0.78,P<0.01).鼻咽癌伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.0%)明显高于无颈淋巴结转移组(58.3%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为92.9%、78.9%和100%)均明显高于临床I期(38.5%)(P<0.01),且表达强度有增加的趋势.结论p53、bcl-2及EBV可作为鼻咽癌早期诊断的辅助指标之一,p53阳性的鼻咽癌患者较易发生颈淋巴结转移,随着鼻咽癌病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,三者在鼻咽癌发生发展中起着重要作用.     

维甲酸诱导后CK13基因在鼻咽癌中的表达研究

目的探讨维甲酸(retinoic acids,RA)对鼻咽癌细胞株HNE1生长及表型的作用,同时观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后细胞角蛋白基因13(cytokeratin 13,CK13)表达情况。方法应用细胞培养的方法观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1细胞的生长状况,利用Northern杂交技术分析维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后CK13基因的表达。结果维甲酸能显著抑制鼻咽癌细胞的生长,抑制的强度取决于维甲酸的浓度和诱导持续时间,当维甲酸的浓度为1×10-4 M/L时,前4天下降约50％,第5天开始细胞停止增殖,细胞数逐渐减少,细胞逐渐老化死亡。维甲酸处理后的鼻咽癌细胞从典型的多边形变成扁平、细长,类似纤维细胞的形态。维甲酸诱导后的鼻咽癌细胞中CK13基因的表达明显上调,且与维甲酸的浓度有关。结论维甲酸能促进鼻咽癌细胞的分化,可能是通过上调CK13基因的表达而实现的。     

增殖细胞核抗原和p53基因在鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的:通过免疫组织化学方法检测鼻咽癌(NPC)患者增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因表达,分析其与主要临床指标间的关系。方法:免疫组织化学检测鼻咽活检组织中PCNA、p53蛋白表达,并比较与分析两者和NPC临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中p53阳性率为9.5%,明显低于NPC组织中的阳性率(76.3%)(P<0.01)。NPC伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.9%)明显高于无颈淋巴结转移组(57.7%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为93.3%、80.0%和100.0%)均明显高于临床Ⅰ期(40.0%)(均P<0.01),且表达强度有增加的趋势。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,NPC伴颈淋巴结转移组中PCNAPI之Ⅰ级所占比例较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义,NPC组织中PCNA表达与p53表达显著相关(P<0.01)。结论:p53蛋白可作为NPC较好的肿瘤标记物,p53阳性的NPC患者较易发生颈淋巴结转移,随着NPC病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,PCNAPI可反映NPC的增殖状况,可能与预后相关。     

增殖细胞核抗原及Bcl-2蛋白在鼻咽癌中的表达

目的:探讨鼻咽癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2表达情况及与主要临床指标间的关系。方法:以免疫组化检测鼻咽活检组织中PCNA、Bcl-2蛋白表达,并比较与分析两者和鼻咽癌临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中Bcl-2阳性率为9.5％,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(83.1％)(P<0.01)。PCNA、Bcl-2在鼻咽癌中的表达呈明显负相关(r_s=-0.41,P<0.01)。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,鼻咽癌伴颈淋巴结转移组中PI之Ⅰ级所占比例,较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义。结论:PCNA PI可反映鼻咽癌的增殖状况,可能与预后相关,Bcl-2蛋白可作为鼻咽癌较好的肿瘤标记物,在鼻咽癌的发生上可能起重要作用。     

细胞连接蛋白基因在鼻咽癌中的表达

目的：为了解细胞连接蛋白（Ｃｏｎｎｅｘｉｎ,Ｃｘ）基因在鼻咽癌组织中的表达,探讨Ｃｘ基因表达与鼻咽癌组织的相关性。方法：采用定量逆转录－聚合酶链反应（ｑＲＴ－ＰＣＲ）及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹检测方法。系统研究了２８例鼻咽癌活检组织、６例慢性鼻咽炎组织中Ｃｘ２６、Ｃｘ３２、Ｃｘ３７、Ｃｘ４０、Ｃｘ４３、Ｃｘ４６６种Ｃｘ基因的表达情况,并进行了相对定量研究。结果：人类慢性鼻咽炎组织和鼻咽癌组织中均有Ｃｘ３７和Ｃｘ４３表达,且表达水平未见有明显差异,Ｃｘ２６、Ｃｘ３２、Ｃｘ４０和Ｃｘ４６未见可检出的表达。结论：鼻咽癌的发生和发展与Ｃｘ基因的表达水平可能无明显关系。说明细胞间隙连接通讯功能的缺陷并不一定是鼻咽癌形成及恶性转变的共同事件。     

鼻咽癌组织中bcl-2基因断裂和bcl-2蛋白表达的检测及意义

为探讨ｂｌｃ－２基因与鼻咽癌发生的关系，采用分子原位杂交和免疫组化技术，检测４１例鼻咽癌组织中ｂｃｌ－２基因的两个断裂热点和蛋白表达。结果：４１例鼻咽癌发生ｂｃｌ－２基因表裂者４例，阳性率为９．８％，３４例出现ｂｃｌ－２蛋白阳性表达，阳性率为８２．９％；鼻咽良性病变阴性。ｂｃｌ－２基因断裂和蛋白表达与鼻咽癌组织学分级间无明显关系；ｂｃｌ－２蛋白表达与ｂｃｌ－２基因断裂间无相对应关系。提示：ｂｃｌ－     

鼻咽癌组织中程序性死亡配体-1的表达及其临床意义

目的:探讨程序性死亡配体-1(PD-L1)在鼻咽癌(NPC)中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学染色法检测59例NPC患者的癌组织和10例正常鼻咽黏膜组织中PD-L1的表达,RT-PCR技术检测30例NPC患者的癌组织及其中10例距离肿瘤组织3 cm以外的正常鼻咽黏膜组织中PD-L1mRNA的表达,并对其表达水平与临床病理组织学参数之间的关系进行相关性分析.结果:正常鼻咽黏膜组织中不表达PD-L1分子,而NPC癌组织中免疫组织化学PD-L1阳性表达率为67.8%(40/59),RT-PCR检测PD-L1mRNA的阳性表达率为66.7%(20/30).PD-L1的表达与肿瘤分期及淋巴结转移明显相关(P<0.05),但与患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05).结论:PD-L1 NPC组织中的高表达,可能在肿瘤的发生、发展中起到一定的作用,有希望成为NPC免疫治疗的一个新靶点.