甲状腺癌组织端粒酶激活与p16基因失活的关系

目的探讨甲状腺癌细胞增殖、分化与端粒酶激活及抑癌基因p16失活（缺失突变）之间可能存在的关系。方法应用TRAP、多重PCR、免疫组化法检测42例甲状腺癌与16例癌旁组织端粒酶活性、P16基因外显子2缺失、P16蛋白表达。结果甲状腺癌组端粒酶活性90．48％,高于癌旁组织（P〈0．01）;甲状腺癌p16基因外显子2纯合缺失率28．57％,相应癌旁组未检出（P〈0．01）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率40．48％,高于癌旁组（P〈0．05）;甲状腺癌P16蛋白表达缺失率高于p16基因外显子2缺失率。结论端粒酶激活与p16基因失活以及P16蛋白表达下调可能是甲状腺癌变过程中的重要分子事件,甲状腺癌中p16基因失活可能是端粒酶激活的一种途径。     

p16和E-cadherin基因在胃癌中的表达

目的 探讨原发胃癌组织P16和E-cadherin蛋白表达与肿瘤发生、发展关系。方法 应用免疫组织化学技术检测80例胃癌及20例胃良性病变组织中P16和E-cadherin蛋白的表达。结果 80例胃癌组织中P16蛋白阴性表达率为78．8％,E-cadherin蛋白减弱表达率为87．5％,和胃良性组织相比,蛋白表达均显著下调（Х^2=9．040、58．330,P〈0．01）。P16蛋白阴性表达率在淋巴结转移组高于未发生淋巴结转移组（Х^2=6．819,P〈0．01）,Ⅲ＋Ⅳ期胃癌高于Ⅰ＋Ⅱ期胃癌（Х^2=5．711,P〈0．05）。E-cadherin蛋白减弱表达率在淋巴结转移组高于未发生淋巴结转移组（Х^2=5．503,P〈0．05）,Ⅲ＋Ⅳ期胃癌高于Ⅰ＋Ⅱ期胃癌（Х^2=4．156,P〈0．05）,随浸润深度的加深,E-cadherin蛋白减弱表达率明显增高（Х^2=6．011,P〈0．05）。胃癌组织P16蛋白与E-cadherin蛋白表达呈正相关（Х^2=7．779,P〈0．01）。结论 P16、E-cadherin蛋白表达下调在胃癌的发生发展过程中均起重要作用,其蛋白状态可作为判断胃癌生物学行为的重要指标,两者均下调可能提示病人预后不良。     

Rb蛋白在滋养细胞疾病中的表达及其临床意义

目的探讨Rb基因蛋白在妊娠滋养细胞疾病时的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法。检测石蜡包埋的161例妊娠滋养细胞疾病和20例正常早孕绒毛组织Rb蛋白表达水平。结果Rb在部分滋养细胞和合体滋养细胞中表达。正常早孕绒毛组的Rb表达与非恶变葡萄胎组差异无显著性（P〉0．05）,但显著弱于恶变葡萄胎组（P〈0．01）。非恶变葡萄胎组Rb表达显著弱于恶变葡萄胎组（P〈0．05）。侵蚀性葡萄胎、绒癌Rb表达显著强于葡萄胎（P〈0．01,P〈0．01）。但侵蚀性葡萄胎与绒癌的Rb表达差异无显著性（P〉0．05）。滋养细胞重度增生者Rb表达显著强于滋养细胞轻度增生者（P〈0．05）。葡萄胎恶变与子宫大小、卵巢黄素化囊肿密切相关。结论Rb表达增强是导致滋养细胞恶变因素之一,Rb表达增强在葡萄胎恶变过程中可能有重要的生物学意义。     

p16、Rb和rasp21蛋白在子宫内膜癌组织中的表达

①目的 研究p16、Rb和rasp21蛋白在子宫内膜癌中的表达及与雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达的关系,探讨子宫内膜癌发生、发展过程中存在着的多因素、多步骤、多阶段的癌变机制。②方法 应用免疫组化SABC法检测21例正常子宫内膜、19例子宫内膜上皮内瘤样病变（EIN）及45例子宫内膜癌组织中p16、Rb和rasp21蛋白表达,同时检测子宫内膜癌组织中ER和PR的表达情况。③结果 子宫内膜癌中p16和Rb蛋白的阳性表达率低于正常子宫内膜（χ^2=9．03、4．37,P〈0．01、0．05）,正常子宫内膜中rasp21蛋白阳性表达率低于子宫内膜癌和EIN（χ^2=10．99、3．87．P〈0．01、0．05）,其表达与子宫内膜癌的临床分期、肌层浸润及组织分级有关（P=0．015,χ^2=7．29、6．65,P〈0．01）。子宫内膜癌组织中,p16与Rb蛋白的表达呈正相关（r=0．42,P〈0．01）,rasp21蛋白与ER、PR的表达呈负相关（r=0．46、-0．42,P〈0．01）。④结论 p16、Rb和rasp21基因均参与子宫内膜癌的发生,rasp21基因的异常表达是子宫内膜癌发生的早期事件,并与ER和PR有协同作用,为子宫内膜癌恶性进展和预后的不利因素。     

Maspin蛋白在葡萄胎恶变中的作用

目的探讨Maspin（Mammary Serpin）基因在葡萄胎组织中的表达，了解Maspin基因在葡萄胎发生发展及恶变中的作用。方法对50例葡萄胎组织（其中8例发生恶变）及正常早孕绒毛20例（对照组）采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶连接（streptavidin-biotin peroxidase，SP）法，测定组织中Maspin的表达。结果Maspin阳性表达率分别为：葡萄胎组60％（其中未恶变葡萄胎组78．6％；恶变葡萄胎组37．5％）；对照组90％。葡萄胎组Maspin蛋白阳性表达率低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；恶变葡萄胎组Maspin蛋白阳性表达率低于未恶变葡萄胎纽，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Maspin的表达下调可能在葡萄胎的发生发展中起着重要的作用，Maspin的表达可能对葡萄胎的发生及恶性转化起抑制作用。     

大肠癌p53基因突变及p16基因缺失检测及临床意义

目的：探讨本地区散发性大肠癌p53、p16蛋白表达、临床病理因素的关系。方法：SSCP－PCR检测p53基因突变、p16基因缺失,免疫组化检测p53,p16蛋白表达,结果p16基因缺失率48％（19／40例）,未见突变,p16蛋白缺失率为55％（22／40）。p53基因突变率30％,p53蛋白阳性表达率为68％（27／40例）。组织学分组Ⅱ,Ⅲ级p16基因缺失率明显高于Ⅰ级（P＜0．01）,临床分期D期p53估变明显高于临床分期B,C期（P＜0．05）,结论p16基因缺失、53基因突变与大肠癌的发生、发展有关。     

宫颈癌组织中HPV和p53基因表达的检测

①目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染和p53基因异常在宫颈癌发生发展中的作用。②方法 用PCR技术检测12例宫颈原位癌、45例宫颈癌和20例正常宫颈组织中HPVl6／18DNA，RT-PCR检测HPV16／18阳性标本E6基因mRNA表达，聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术检测p53基因外显子5～8的突变，同时采用免疫组化技术检测P53蛋白的表达。③结果 宫颈原位癌、宫颈癌HPV16／18阳性率均为66．67％，明显高于正常宫颈组织（20．00％），差异有显著性（χ^2=5．12、12．09，P〈0．05、0．01）。宫颈癌组织中HPV16／18 E6基因mRNA阳性表达率明显高于正常宫颈组织，差异有显著性（P=0．039）。宫颈原位癌和正常宫颈组织间、宫颈原位癌和宫颈癌间HPV16／18 E6 mRNA阳性表达率差异均无显著性（P=0．141、0．272）。45例宫颈癌标本中测得exon5和exon7突变各1例，均发生在HPV阴性宫颈癌组织，未检测到exon6和exon8的突变。宫颈原位癌和正常宫颈组织中均未检测到p53基因突变。正常宫颈组织中未检测到P53蛋白表达，宫颈原位癌和宫颈癌组织中P53蛋白阳性表达率分别为25．00％和42．22％，明显高于正常宫颈组织（χ^2=10．81，P（0．01）。P53蛋白的表达与HPV16／18感染无明显相关性（P〉O．05）。④结论 HPV感染和p53基因异常与官颈癌的发生密切相关，官颈癌组织中p53基因的突变率较低，推测P53蛋白的异常累积可能并非p53基因突变所致。     

p16蛋白在成釉细胞瘤中的表达

目的：研究成釉细胞瘤（ameloblastoma,AB)星网状层细胞增殖与分化的特点，探讨其生物学意义。方法：应用p16蛋白单克隆抗体免疫组化S－P法检测40例AB，其中原发17例，复发16例，恶变7例，此外用口腔粘膜鳞癌4例，淋巴结转移癌2例，基底细胞癌7例作对照观察。结果：40例AB的p16蛋白的缺失率为52．5％，其中，原发AB29．4％，复发AB62．5％，恶变AB85．7％，3组间P＜0．05。p16蛋白在多已发生角化的上皮样细胞当中有弱表达，但在星网支中原始胚样细胞多表达为阴性。结论：AB的发生与p16蛋白的缺失有关。随着复发与恶变的变化，p16蛋白缺失率增加（P＜0．05）。具有显著性意义。p16蛋白的阳性表达与细胞的分化状态有关。     

p16基因甲基化及P16、Cyclin D1、pRb与皮肤鳞状细胞癌相关性研究

目的 探讨P16、CyclinD1和pRb蛋白在皮肤鳞状细胞癌（简称皮肤鳞癌）中的表达及他们的相互关系和意义；研究p16基因甲基化是否与原发性皮肤鳞癌的发生有关。方法 采用PCR为基础的限制性内切酶甲基化法及免疫组化S-P法检测40例原发性皮肤鳞癌组织中p16基因甲基化状态及P16、Cyclin D1和pRb蛋白的表达，并以10例正常皮肤组织作对照。结果 皮肤鳞癌组织P16蛋白iCyclin D1阳性表达率分别为37．5％和57．5％；P16蛋白表达与CyclinD1的表达呈显著负相关（r=-0．3162，P=0．008）。皮肤鳞癌中P16蛋白和pRb表达呈显著负相关（r=-0．4007，P〈0．05）。p16基因的甲基化阳性率为42．5％。2级皮肤鳞癌组织中P16蛋白及p16基因甲基化阳性表达率比1级鳞癌组织显著增高（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率表达则显著降低（P〈0．05）。在有淋巴结转移组中P16蛋白及p16基因甲基化阳性率与元淋巴结转移组相比显著降低（P〈0．05），而Cyclin D1和pRb阳性率则显著增加（P〈0．05）。结论 在原发性皮肤鳞状细胞癌中存在P16蛋白低表达、Cyclin D1高表达的异常表达现象，两者的表达相互抑制，呈显著负相关；P16蛋白和pRb蛋白的表达呈负相关；p16基因甲基化与皮肤鳞癌病理分级、淋巴结转移之间有显著关系。提示p16基因甲基化在皮肤鳞癌的发生发展过程中起重要作用。     

原发胃癌中p15、p16基因蛋白的表达及临床意义

目的检测原发胃癌原发灶及癌旁正常组织中p15、p16基因蛋白表达情况,探讨p15、p16基因失活与胃癌发生发展及临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学方法检测32例进展期胃癌石蜡标本中p15、p16的表达,并探讨其表达与临床病理特征之间的关系。结果p16、p15在原发灶与癌旁正常组织中阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）,p15、p16基因表达在有无淋巴结转移和,下同TNM分期的病例之间差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论p15、p16蛋白袁达可能与胃癌癌变过程相关．并可以作为临床治疗提供理论依据。     

p53基因突变和p16基因缺失与肝癌的相关性

目的:检测肝癌患者血浆中p53基因突变和细胞核中p16基因缺失的机率,研究与疾病发生、发展的相关性并探讨其意义.方法:实验采用聚合酶联链式反应(PCR)扩增p53基因外显子5～8和免疫组织化学方法SP-p16,对其突变和缺失进行分析.结合临床患者有无肝组织以外转移来对比差异性.结果:33例肝癌患者中,有17例结果显示血浆循环核酸p53基因突变;有转移病灶组18例的突变率高于无转移病灶组15例.结论:血浆p53基因突变和p16基因缺失与肝癌的发生、与疾病的轻重及病灶转移有相关性,突变机率在临床鉴别诊断和治疗预后中有参考价值.     

p15在食管癌中的表达及生物学意义

目的探讨p15 mRNA及其蛋白在食管癌中的表达与食管癌发生的关系.方法采用原位杂交(in suit hybridyzation)技术和链霉卵白素-过氧化物酶(streptavidin-horseradish peroxidase, SP)免疫组织化学染色法检测48例食管鳞状细胞癌组织,18例癌旁不典型增生组织和10例切缘正常组织中p15 mRNA及其蛋白的表达水平.结果 p15 mRNA及其蛋白在食管癌组织中的阳性表达率分别为 56.3 % 和 47.9 %,二者表达呈明显正相关(χ2=22,P<0.05),均明显低于在正常组织和不典型增生组织中的表达(P<0.05); 且p15 mRNA及其蛋白的表达与肿瘤的分化程度相关(P<0.05).结论 p15低表达可能与食管癌的发生有关,p15表达对食管癌恶性程度的评估有一定的参考价值.     

胃癌组织中PTEN和p53基因的表达

①目的　探讨抑癌基因PTEN和p5 3在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。②方法　应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测PTEN和突变型p5 3基因在 6 5例胃癌组织、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。③结果　胃癌组织中PTEN、突变型p5 3基因的阳性表达率分别为 4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中PTEN、突变型p5 3基因的阳性表达率为 85 %、31% ,突变型p5 3基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中PTEN基因、p5 3基因的表达与其在正常胃黏膜组织、不典型增生胃黏膜、浅表性胃炎组织中的表达差别有显著性 (uc=2 .6 1～ 4 .5 2 ,P <0 .0 5 ) ;随临床分期、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型p5 3基因的阳性表达率逐渐上升 (χ2 =4 .388～ 8.76 4 ,P <0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (χ2 =5 .4 91～ 8.0 2 0 ,P <0 .0 5 ) ;PTEN基因表达阳性的胃癌组织中突变型p5 3基因的阳性表达率显著低于PTEN基因表达阴性的胃癌组织 (χ2 =9.81,P <0 .0 5 )。④结论　PTEN和p5 3基因的异常表达与胃癌的发生有关 ;PTEN和p5 3基因可以作为判断胃癌生     

重组pAd/CMV/V5-DEST-p16质粒的构建

目的构建并鉴定pAd／CMV／V5-DEST-p16重组腺病毒质粒。方法合成人p16-INK4表达基因,构建pENTR1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16cDNA,取代目的质粒pAd／CMV／V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd／CMV／V5-DEST-p16,测序证实质粒含有目的基因。结果构建了p16重组腺病毒质粒,为研究p16-INK4的作用创造了条件。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒质粒稳定、可靠、方便。     

p53基因在乳腺肿瘤中的表达及其意义

[目的]探讨乳腺肿瘤组织中p 53基因的表达情况及其意义.[方法]利用免疫组织化学技术观察62例乳腺癌及14例乳腺纤维腺瘤中突变型p 53基因的表达情况.[结果]乳腺癌组织中的p53基因表达率明显高于乳腺纤维腺瘤;Ⅲ期乳腺癌组织中p53基因的表达率高于I期及Ⅱ期,且Ⅲ期与I期及Ⅱ期之间均各有显著性差异,与TNM分期呈正相关;p53基因的表达与乳腺肿瘤的组织学类型、组织学分级、淋巴结转移、ER及PR状况、年龄及家族史之间均无相关关系;朝鲜族与汉族之间亦无显著性差异.[结论]p 53基因的表达可作为判断乳腺癌及TNM分期的指标.     

p53,p21表达与直肠癌放疗敏感性的关系

目的：寻找直肠癌放疗敏感性与抑癌基因ｐ５３和ｐ２１的关系。方法：应用ＡＢＣ免疫组织化学方法检测６５例直肠癌口才放疗前肿瘤组织ｐ５３和ｐ２１的表达,并与放疗后肿瘤组织病理学变化进行比较。其中男性４４例,女性２１例,平均年龄５４．３岁。在６５例肿瘤中,高分化腺癌３４例,中分化腺癌１８例,粘液腺癌６例,低分化腺癌７例。依据术后切除标本分类,ＤｕｋｅｓＡ５例,ＤｕｋｅｓＢ３８例,ＤｕｋｅｓＣ１７例,Ｄｕｋ     

p16和p53抑癌基因在肾母细胞瘤中的表达及与预后关系

目的 探讨p16、p53抑癌基因在肾母细胞瘤中的表达及与临床预后的关系。方法 应用免疫组织化学方法S-P和ABC法检测p16和p53基因的表达。结果 20例肾母细胞瘤标本p16蛋白染色阳性7例，阳性率为35％；其中上皮型10例，阳性4例(占40％)；间叶型5例，阳性1例(占20％)；胚胎型3例，阳性1例(占33％)；混合型2例，阳性l例(占50％)。p53蛋白阳性染色5例，阳性率为25％。其中上皮型及混合型12例中，p53阳性2例(占16．7％)；而间叶型及胚胎型8例中，阳性3例(占37．5％)。结论对肾母细胞瘤患同时进行p16和p53检测更能准确地判断其病理性质和预后。     

胃癌组织中p53与Ki67蛋白的表达意义

目的:探讨p53与Ki67在胃癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测25例胃癌组织中p53与 Ki67的表达水平.结果:25例胃癌中乳头状腺癌 - 管状腺癌(分化较好)14例,低分化腺癌 - 印戒细胞癌(分化较差)11例. p53与Ki67随胃癌的分化程度降低和分期的增加,阳性表达率递增(P＜0.05).结论:胃癌组织中p53高表达与胃癌组织细胞增殖密切相关,且p53与Ki67在胃癌中存在相关差异,通过检测p53与Ki67的表达,有助于胃癌预后的评估.     

p16和p15基因在子宫内膜癌中的表达

目的：探讨抑癌基因p16及p15在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜组织中的表达及其与子宫内膜癌的关系。 方法：应用免疫组化技术检测57例子宫内膜癌、8例子宫内膜不典型增生、7例子宫内膜增生过长及7例正常增生期子宫内膜组织中抑癌基因p16、p15的表达。 结果：p16在子宫内膜癌组织及非癌子宫内膜组织中表达率分别为40.4%和77.3%,二者表达率差异有显著性(P<0.05),在子宫内膜癌中p16表达与病理类型、病理分级及手术-病理分期有关,与肌层浸润无关;p15在子宫内膜癌及非癌子宫内膜组织中表达率分别为47.4%和86.3%,二者比较差异有显著性(P<0.05),在子宫内膜癌组织中p15的表达与病理分级有关,与病理类型、肌层浸润及手术-病理分期无关,子宫内膜癌组织中p16与p15表达呈正相关（r=0.91,P<0.05）。 结论：p16和p15表达缺失在子宫内膜癌的发生发展过程中发挥一定作用,其中以p16更为显著;p16和p15的表达具有一致性,功能上有一定的互补作用。