克隆人向我们起来—人体胚胎克隆研究的新进展（二）

(上接2000年12期) 澳大利亚科学家宣布他们在世界上第一个完成了在小白鼠身上进行的所谓"治疗性克隆(newshoo)"技术实验.在这项实验中,科学家们运用的技术是"制造"出可以"收割"某种特殊细胞的胚胎,这一技术对治疗如阿耳茨海默病和帕金森症等疾病具有革命性的意义.澳大利亚卫生部长伍尔德里奇博士说,尽管澳大利亚政府仍将禁止对人类进行克隆,但是治疗性克隆将是可能的.有科学家认为,伍尔德里奇将人体的复制性克隆与治疗性克隆相区别开来是非常有意义的.     

治疗性克隆研究进展

核移植来源的胚胎干细胞 (ES) 细胞在动物疾病模型上的成功治疗作用以及核移植来源的患者特异的ES细胞研究进展有望将这一技术即治疗性克隆应用于人类疾病治疗.本文对治疗性克隆的研究进展、治疗性克隆研究中存在的问题以及治疗性克隆的应用前景作一综述和讨论.     

治疗性克隆--面临的机遇与挑战

1 治疗性克隆概述 治疗性克隆(therapeutic cloning)是体细胞核移植技术和最新的人胚胎干细胞技术结合的产物,将成为人类医疗历史上革命性的技术. 该技术首先应用患者体细胞,如皮肤细胞、骨髓间充质干细胞,作为核供体,移植入去核的人卵母细胞,获得克隆胚胎;然后从克隆胚胎分离建立胚胎干细胞系;并将这些胚胎干细胞在一定条件下,诱导分化成所需要的各种类型的细胞用于治疗目的[1,2].     

基因转移试验首次用于人类

在一项划时代实验的第一步中,政府研究机构的研究人员将基因改变的攻击肿瘤的细胞注入癌症病人体内。这种基因处理并不是治疗性的,其目的是有助于研究一种有前途的新的癌症疗法。这一实验标志着科学家首次将人类基因工程细胞投入一项被批准的实验。许多科学家认为,这项试验预示着生物医学研究新纪元的开始。在这项研究中,科学家通过给病人嵌入治疗性基因,将开始治疗基因疾病。最终可以治疗镰状细胞性贫血、囊性纤维化及其它遗传性疾病。     

两性通用避孕药研究的新进展

澳大利亚悉尼消息:悉尼和墨尔本的澳大利亚科学家宣布,获得两项重大突破:两性避孕药的研究以及测定生育力的常规血液试验。这两项突破均与抑制素(inhibin)有关;机体通过抑制素调节精子和卵子的产生。悉尼的澳大利亚生物技术公司的科学家已克隆出人体产生抑制素的基因。与此同时,墨尔本Prince Henry氏医院和Monash大学的科学家在从事体外授精的研究中发现一种简便的     

澳大利亚动机谈话技术在糖尿病社区防治管理中的应用探索

目的 探讨澳大利亚"动机谈话技术"在糖尿病社区防治管理中的作用.方法 引入澳大利亚"动机谈话技术",建立"糖尿病快乐生活俱乐部".从北京市方庄5个社区卫生服务站选取50岁以上100例糖尿病患者作为"糖尿病快乐生活俱乐部"成员,将患者随机分为干预组和对照组,各50例.对两组患者进行社区糖尿病的防治干预,干预组患者在进行糖尿病社区防治时采用动机谈话技术.比较两组患者干预后的效果.结果 干预后干预组及对照组患者过去6个月在社区就诊的次数占同期所有就诊次数的比例(78.0%与68.2%)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);两组患者在最近1个月心理变化(感到紧张、无助、压抑及抑郁、自己没用)方面差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者遵医嘱行为(100.0%与84.0%)间差异亦有统计学意义(P＜0.05).干预组患者干预后三酰甘油水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);而两组的体质量、收缩压、空腹血糖、糖化血红蛋白水平间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在糖尿病患者的社区防治管理中,应用动机谈话技术可以使患者更多地利用社区卫生服务资源,提高社区糖尿病综合防治水平.     

一次性终身免疫的口服霍乱疫苗

悉尼消息:澳大利亚阿德莱(WHO)将在印度或孟加拉进行德的科学家发明了一种能消除霍现场试验。研究人员说,此疫苗乱、一次性终身免疫的口服疫将于1988年在世界市场出售,价苗,进行动物试验并获得成功.钱只有几美元. 一组澳大利亚科学家将于此项研究是获取一种细菌的1986年初开始在美国进行此疫苗。一些重要成分并将它们放在另一的人体试验,然后世界卫生组织种无害的细菌中。通过口服,细     

幽门螺杆菌与血液系统疾病的研究进展

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)于1982年由澳大利亚学者Warren和Marshall发现,并最终于2005年帮助两位科学家赢得了诺贝尔医学奖.1994年国际癌症研究中心将其归为Ⅰ类致癌因子.Hp是一种专性微需氧有鞭毛的螺杆状细菌,革兰染色阴性,多在粘液层下、粘膜上皮细胞表面.     

动物克隆技术的发展及临床应用展望

目前，动物克隆技术日益成熟，克隆人的实验正在进行。早在1938年，国外就有人提出用成年动物的细胞核植入卵子的方法克隆哺乳动物的设想。1960年和1962年，英国牛津大学的科学家先后用非洲一种有爪的蟾蜍(非洲蟾蜍)进行克隆实验。他们用紫外光照射爪赡的卵细胞，破坏其中的核，然后用显微技术从爪蟾蝌蚪     

用试验方法鉴定可能把遗传疾病传给子女的父母

悉尼消息:澳大利亚昆士兰技术大学的科学家们研制了一种技术可以早期查出的遗传疾病包括一些癌瘤。科学家们通过这种技术“读出”遗传信息,并判断父母是否具有向子女传递遗传疾病的可能性。科学家们以囊性纤维性变作为试验模型,通过人类毛发测定双亲是否可能将疾病传给下一代。     

HUGO伦理委员会关于克隆的声明

1999年 3月在布里斯班经ＨＵＧＯ理事会批准前言“克隆”这个术语在一般意义上用来指用无性生殖产生个体有机体或细胞的遗传拷贝 ,涉及一系列技术 ,包括胚胎分裂 ;将体细胞核转移到去核卵 ;以及用细胞培养建立来源于一个体细胞的细胞系。克隆的类型也可按照所说的有机体和该项技术用于的目的而加以区分。例如 ,人的克隆 (ｈｕｍａｎｃｌｏｎｉｎｇ)可按照克隆的目的再细分为生殖性克隆、基础性研究和治疗性克隆。ＨＵＧＯ伦理委员会致力于探讨人类基因组共同体和他们在其中工作的社会最关注的问题。应用于其他生命形态的克隆对人类基因组研…     

用基因工程方法治疗枯草热

澳大利亚黑尔本大学的研究人员已克隆出一种基因,可用于研究治疗枯草热及其他变态反应性疾病。此基因能产生Fc受体,Fc受体存在于白细胞表面,对调节免疫反应起着主要作用。这些Fc受体具有双重作用:清除灭活的病毒和细菌,调节抗体的产生。该大学癌症和移植研究中心的科学家克隆出小鼠的此受体基因,     

澳大利亚John Murtagh全科病案研究（二十）——全科医生诊包中的急诊用药

[编者按] John Murtagh是享誉澳大利亚和国际的全科医生.2005年被<澳大利亚医生>评选为最有影响的医生.本栏目特邀John Murtagh对其多年从事全科医学服务中所遇到的典型病例进行总结,采用循证医学观点指导全科医学的诊断和治疗服务,他的分析多是从"病人是否告诉了我什么"出发,阐述了在家庭和社区背景下完整地观察和治疗病人的思想.把"复杂问题简单化"的实用原则发挥到了极致.本栏目将就John Murtagh的系列临床病案以中英文对照的形式进行连续刊登,诚邀国内外同仁对病例中的处理方法与观点进行讨论和争鸣.     

酵母双杂交研究与RIG-G相互作用的蛋白

目的应用酵母双杂交技术研究能够与维甲酸诱导的G基因(RIG-G)发生作用的蛋白,以了解其功能. 方法应用酵母双杂交技术,以RIG-G为诱饵,筛选人类骨髓cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白.利用生物信息学,一对一酵母回复性杂交,β-GAL实验等提供的信息,筛除假阳性克隆,确定阳性克隆. 结果经过酵母双杂交共获得109个克隆,经过验证,有24个阳性克隆,它们分别是细胞的信号传导蛋白、细胞骨架蛋白、激酶等. 结论为了研究诸如RIG-G新基因的功能,酵母双杂交技术是可靠的分子生物学技术.     

治疗性克隆及人类胚胎管理伦理问题的调查和讨论

此次问卷调查是关于治疗性克隆及人胚管理伦理问题的认知状况,其目的是为制订治疗性克隆与人胚管理伦理准则提供依据.调查是在我国东西部上海、西安的12所三级医院和20所区县级妇幼保健院(所)妇幼和生殖医学专业人员中进行,采用随机抽样、自愿无记名填写咨询表方法调查,回收反馈表400份,结果91.25%的人认同治疗性克隆研究,多数人认同胚胎道德地位是随胚胎发育的不同阶段而发展变化的,本文还就为保护人类尊严和支持治疗性克隆研究,提出了加强治疗性克隆研究及人胚管理的若干建议.     

上调stathmin基因表达对食管鳞癌EC9706细胞的作用

目的 构建stathmin基因真核表达载体,研究上调stathmin基因表达对食管癌细胞EC9706的作用.方法 采用RT-PCR扩增stathmin cDNA,克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体.重组载体经脂质体转染EC9706细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株.显微镜观察转染细胞形态学变化,Western印迹法检测转染细胞stathmin蛋白的表达.选取稳定转染的细胞株,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验观察细胞克隆形成,流式细胞仪分析细胞周期,裸鼠移植瘤实验研究转染细胞的成瘤性.结果 RT-PCR扩增获得450 bp的cDNA编码序列;克隆至pcDNA3.1(+)载体,获得pcDNA3.1-stathmin重组表达载体.Western印迹法证实重组载体上调EC9706细胞stathmin蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组细胞比较,pcDNA3.1-stathmin转染细胞形态变大、多核、有丝分裂障碍;pcDNA3.1-stathmin转染细胞倍增时间延长(25～28 h)、增殖活性降低、细胞克隆形成率下降(34.5%±6.9%),细胞分裂阻滞于G2/M期(21.7%±3.4%),裸鼠体内致瘤性降低,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 重组质粒pcDNA3.1-stathmin上调stathmin基因表达能够抑制食管鳞癌EC9706细胞的增殖和致瘤性,stathmin可能成为食管鳞癌患者治疗的理想靶点.     

B细胞单克隆形成与幽门螺杆菌感染

为探讨淋巴细胞性胃炎是否有 B细胞单克隆形成 ,以及该克隆形成的意义及其与幽门螺杆菌(HP)感染的关系。采用 Giem sa染色 ,免疫组化染色以及半巢式 PCR技术对 2 6例淋巴细胞性胃炎及 11例对照标本进行 HP检查和 B细胞单克隆性检测。结果显示 :在 2 6例淋巴细胞性胃炎中有 l4例查见 HP,其检出率为5 3.8% ,但与对照组比较无差异 (P>0 .0 5 )。免疫组化发现 2 6例淋巴细胞性胃炎均为多克隆性 ,但 PCR技术却发现有 7例存在 B细胞单克隆性重排 (2 6 .9% ) ,且 HP阳性组其单克隆性重排检出率明显高于 HP阴性组 (P <0 .0 5 )。结果提示 ,组织学及免疫组化显示良性的淋巴细胞性胃炎中确有 B细胞单克隆形成 ,该单克隆的形成可能是肿瘤早期病变的潜在标志 ,且与 HP感染有关 ,但并非仅与 HP感染有关。     

利用基因工程制造麻风疫苗

目前有五个国家的科学家用基因工程制造麻风疫苗。荷兰、英国、挪威、澳大利亚和美国的科学家鉴定了麻风分枝杆菌表面抗原,由对感染产生细胞免疫应答的T细胞所识别。这些科学家已在大肠杆菌中克隆了一些抗原,现正鉴定疫苗所需的抗原。现有的麻风疫苗是从南美犰狳体内培养的细菌制造的。麻风杆菌除在人体生长外,仅     

Endoglin特异性结合短肽筛选及功能分析

目的:对噬菌体随机12肽库进行筛选,寻求可与Endoglin结合的小分子短肽并测定其亲和常数.方法:经过3轮"吸附-洗脱-扩增"后,随机挑取16个克隆,双夹心ELISA法鉴定其亲和性,测定阳性克隆的DNA序列,竞争抑制实验检测优势克隆的特异性,非竞争法ELISA固相法计算阳性噬菌体融合肽的亲和常数.结果:三轮生物筛选,噬菌体得到有效富集,竞争性ELISA显示6个阳性噬菌体克隆与rhEndoglin有较强的结合活性,测序获得5种多肽序列,优势序列为:AHKHVHHVPVRL,竞争抑制实验显示阳性噬菌体克隆与Endoglin有良好的亲和性,其亲和常数为:(1.431±0.293)×107 mol/L.结论:利用噬菌体肽库技术可以获得亲和力较强的Endoglin的结合肽,为今后进一步研究Endoglin在卵巢癌的早期诊断方面的作用奠定基础.     

关于PNH克隆演变的研究进展

随着阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)发病机制研究的深入,很多学者都发现PNH细胞克隆的演变与疾病进展密切相关,可能是PNH发病的关键环节.与正常造血干/祖细胞相比,PNH缺陷细胞克隆可能存在增殖优势,而且PNH克隆的演变与PNH患者的临床病程有很大的关系.PIG-A基因突变本身并不能赋予PNH缺陷细胞的增殖优势,而免疫和凋亡机制可能参与了PNH克隆的选择.这些认识对PNH克隆演变机制的研究、PNH发病机制的阐明以及为临床提供更有效的诊断和治疗手段具有重要意义.