干扰素对IL—60细胞与维甲酸耐药IL—60细胞作用的研究

目的：探讨干扰素α对ＨＬ－６０细胞增殖发化与凋亡的作用及特点。方法：ＭＴＴ法测定细胞增殖性变化。ＮＢＴ方法测定细胞分化程度。流式细胞仪测定凋亡的发生程度。浓度递增法诱导ＨＬ－６０细胞的维甲酸耐药性。结果：ＩＦＮα体外抑制ＨＬ－６０细胞增殖,并与维甲酸产生协同抑制作用,ＩＦＮα可单独诱导ＨＬ－６０细胞分化,又能增加维甲酸诱导分化作用。单独ＩＦＮα无明显的诱导ＨＬ－６０细胞凋亡作用。维甲酸耐药ＨＬ－６     

茶多酚在体外诱导HL-60细胞的凋亡

目的：寻找新的肿瘤细胞凋亡诱导剂。方法：选用茶的主要活性成分茶多酚,采用噻唑蓝（ＭＴＴ）还原法,ＤＮＡ凝胶电泳以及透射电镜技术,在体外观察了茶多酚对人急性早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）凋亡的影响。结果：被２５０ｍｇ／Ｌ茶多酚作用５ｈ后ＨＬ－６０细胞进行凝胶电泳呈现出典型的ＤＮＡ条带,透射电镜下看到凋亡小体,茶多酚对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导活性平行于它的细胞杀伤作用。结论：在体外培养条件下,茶多酚可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡     

雷公藤多甙诱导人前骨髓白血病细胞的凋亡

探讨雷公藤多甙诱导人前骨髓白血病细胞凋亡的作用。方法将ＨＬ－６０与雷公藤多甙、泼尼松共同培养,观察细胞的细胞凋亡形态学变化,如细胞膜泡样变、细胞浆及细胞核内染色质固缩、凋亡小体出现以及ＤＮＡ规律性断裂。（２）细胞周期分析提示作用首先影响增殖期细胞,并且呈剂量、时间依赖性。（３）雷公藤多甙诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用较泼尼松强;两种药物间无协同作用。结论体外实验发现雷公藤多甙具有诱导细胞凋亡的作用,     

病毒性肝炎肝细胞凋亡及与肝纤维化的关系

目的 研究病毒性肝炎肝细胞凋亡及与肝纤维化的关系。方法 以原位末端标记及免疫组化检测４０例慢性病毒性肝炎（ＣＨ）肝组织细胞调亡相关线状断裂ＤＮＡ以及Ｆａｓ抗原、转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）、Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）在肝组织中的表达;以酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测血清可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）及ＴＧＦ－β１。结果 ＣＨ肝细胞ＤＮＡ损伤与肝组织Ｆａｓ抗原、ＴＧＦ－β１表达及血清ｓＦａｓ、ＴＧＦ－     

人重组TFAR19蛋白对白血病细胞株HL-60的促凋亡效应

目的：对一种新发现的凋亡相关基因ＴＦＡＲ１９进行蛋白质水平的促凋亡效应研究,并对其作用机理进行初步的探讨。方法：利用离子交换层析对大肠杆菌表达的人重组ＴＦＡＲ１９蛋白进行纯化,将其加入到培养的白血病细胞株ＨＬ－６０,通过ＤＮＡ片段化,ＰＩ及Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ标记进行流式细胞仪分析,观察ＴＦＡＲ１９蛋白的促凋亡效应。利用ＦＩＴＣ标记ＴＦＡＲ１９蛋白,分析其与细胞的结合及定位。     

GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定

目的：表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体１（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　１，ｓＦＧＦＲ１），研究其对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）生物学活性的拮抗作用。方法：采用逆转录－ＰＣＲ（ＰＴ－ＰＣＲ）技术自人肺成纤维细胞获得ｓＦＧＦＲ１　ｃＤＮＡ，测序确证后，将其克隆人酵母细胞表达载体ｐＹＥＸ４Ｔ－１；重组质粒转化入酵母细胞（ＤＹ１５０）中进行诱导表达，表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及 Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ鉴定。利用 ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖抑制实验检测重组人 ｓＦＧＦＲ１的生物学活性。结果：经 ＣｕＳＯ４诱导，酵母细胞表达出重组谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白，此蛋白在凝胶上表现为 １条约 ６０ｋＤ的阳性区带，在 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ实验中可被ＧＳＴ特异性抗体识别。重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白的粗提物在体外能够桔抗ＦＧＦ介导的促ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖的活性。结论：重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白在酵母表达系统中得到有效表达，并具有很好的生物活性。     

肝纤维化相关性细胞因子研究进展

与肝纤维化相关的细胞因子有转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、白介素１（ＩＬ－１）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、干扰素γ（ＩＦＮ－γ）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）等。这些细胞因子及其网络的相互作用对肝脏细胞外基质的合成与降解起调控作用，在肝纤维化形成的不同阶段起重要作用     

高三尖杉酯碱通过激活Caspase-3诱导T-淋巴细胞白血病细胞Molt-3凋亡

目的：研究高三尖杉酯碱（ＨＨＴ）诱导Ｔ－淋巴细胞白血病细胞凋亡的作用机制。方法：采用流式细胞仪等技术对ＨＨＴ诱导Ｔ－淋巴细胞白血病细胞（Ｍｏｌｔ－３）的凋亡作用进行探讨。结果：ＨＨＴ诱导Ｍｏｌｔ－３凋亡,凋亡率与作用浓度和时间成正比;细胞被阻滞在Ｇ１期。ＨＨＴ作用２４ｈ后细胞内Ｃａｓｐａｓｅ－３活性增高,Ｃａｓｐａｓｅ－３抑制剂Ｚ－ＤＥＶＤ－ＦＭＫ能特异地阻断ＨＨＴ对Ｍｏｌｔ－３凋亡的诱导;Ｆａｓ     

转化生长因子α，β对人结肠腺癌细胞株HT_（29）细胞生长调节影响的研究

用生长曲线、３Ｈ－ＴｄＲ参入及细胞周期分析等方法，研究了ＴＧＦ－α，β在体外对人结肠腺癌细胞株ＨＴ（２９）细胞的生长调节作用，为进一步探讨ＴＧＦ－α，β对ＨＴ（２９）细胞的生长调节作用机制，采用Ｄｏｔ杂交分析探讨了ＴＧＦ－α，β对ＨＴ（２９）细胞ｃ－ｍｙｃ基因ｍＲＮＡ表达的影响。结果发现ＴＧＦ－α可促进ＨＴ（２９）细胞生长和增殖，而ＴＧＦ－β则抑制其生长和增殖，ＴＧＦ－α可增加其ｃ－ｍｙｃ基因表达，而ＴＧＦ－β则抑制其ｃ－ｍｙｃ基因表达。本研究还采用肿瘤细胞无血清培养技术以及分子生物学方法，观察了ＨＴ（２９）细胞自分泌生长以及在其自分泌生长调控中ＴＧＦ－α，β，βｍＲＮＡ表达。研究发现ＨＴ（２９）细胞具有自分泌调控生长能力，在无血清培养条件下ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达增加，而ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达则受到某种程度的抑制。上述研究结果表明ＴＧＦ－α，β分别作为正、负生长调节因子在ＨＴ（２９）细胞自分泌生长调节中可能具有重要作用。ＴＧＦ－α，β平衡失调同结、直肠癌发生、发展具有密切关系。     

前列腺癌组织中两种转化性生长因子β与肿瘤发生的关系

前列腺癌组织中两种转化性生长因子β与肿瘤发生的关系刘运初吴二平詹炳炎王玲珑石云松经体外实验发现前列腺癌细胞能合成和分泌转化性生长因子β（ＴＧＦ－β）。我们用免疫组化方法检查了ＴＧＦ－β１和ＴＧＦ－β２在前列腺癌组织的分布情况，以探讨这两种生长因子与前...     

神经酰胺介导粒细胞凋亡机理初探

目的 观察神经酰胺对ＨＬ－６０及中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡产生的影响,探讨其在粒细胞发生过程中可能的调节作用。方法：采用ＤＮＡ凝胶电泳,流式细胞术,光镜及ＲＴ－ＰＣＲ等技术对细胞进行凋亡鉴定及相关基因ｂｃｌ－２,ｃ－ｍｙｃ,ｍＲＮＡ表达分析。结果 神经酰胺（ｃ２－ｃｅｒａｍｉｄｅ）肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）及长春新碱（Ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）均可不同程度地诱导ＨＬ－６０及成熟ＰＭＮ产生凋亡,ＣＰＫ激活     

环孢素A体外诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察环孢素Ａ是否有诱导白血病细胞凋亡的作用。方法：应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量，ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞术等方法观察细胞凋亡。结果：ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞４ｈ，ＤＮＡ片段率显著增高，达（２８．２±５．８）％，而对照组仅为（１２．５±１．７）％（Ｐ＜０．０１，ｎ＝１０）。光镜及电镜检查见细胞核固缩，碎裂，有凋亡小体形成。ＤＮＡ电泳显示典型的ＤＮＡｌａｄｄｅｒ。流式细胞术检测发现ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞６ｈ凋亡细胞率为４９．７％，而空白组仅为９．１％。ＣｓＡ诱导ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ片段化呈剂量和时间依赖性。结论：ＣｓＡ在体外能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。     

PAI—1在TGF—β1基因和反义TGF—β1基因转染人肝癌？…

目的：通过对人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）转染ＴＧＦ－β１基因及反义ＴＧＦ－β１基因,观察该细胞ＰＡＩ－１表达的变化。方法：采用电穿孔法进行基因转染,并用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法另以鉴定后,分别应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ观察该细胞表达ＰＡＩ－１ｍＲＮＡ的变化。结果：过表达的ＴＧＦ－β１细胞克隆ＰＡＩ－１ｍＲＮＡ表达均高于对照组,而低表达ＴＧＦ     

多发性硬化患者者血清TGF—β的检测及其临床意义

目的：探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）在多发性硬化（ＭＳ）发生、发展中的作用。方法：采用酶联免疫吸附ＥＬＩＳＡ方法,对４５例ＭＳ患者血清ＴＧＦ－β１的含量进行了测定。结果：与对照组和ＮＩＮＤ组相比,ＭＳ患者血清ＴＧＦ－β１含量明显下降（Ｐ〈０．０１）;与ＳｔａｂｌｅＭＳ组相比,ＲＲＭＳ组和ＣＰＭＳ组ＴＧＦ－β１含量亦明显下降（Ｐ〈０．０５）;动态观察显示,随着病性的好转,ＴＧＦ－β１含量亦逐     

转化生长因子β受体研究进展

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）是一种多功能的细胞因子，其信号结构独特，为丝氨酸／苏氨酸激酶。Ⅱ型受体被ＴＧＦ－β激活后进一步导致Ⅰ型受体的活化，ＴＧＦ－β的信号由Ⅱ型受体和Ⅰ型受体的受体复合物转导至细胞内，以上二者合称信号受体。Ⅲ型受体的大分子蛋白多聚糖本身不参与ＴＧＦ－β的信号转导，却能间接调节ＴＧＦ－β的作用。有关肿瘤和ＴＧＦ－β受体的研究表明细胞表面ＴＧＦ－β受体的丢失与肿瘤发生相关，转染正常的信号受体基因在体外可抑制肿瘤细胞的增殖。在其他相关的疾病中，ＴＧＦ－β作用机制以及各型受体对ＴＧＦ－β作用调节机制的研究正在进行中。     

可溶性syndecan-1 对人多发性骨髓瘤细胞体外的生物学作用

目的：研究可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１（ＣＤ１３８）分子对人多发性骨髓瘤（ＭＭ）细胞生长行为的影响及其机制。方法：用亲和层析法分离可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１;借助＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、间接免疫荧光、ＡＮＮＥＸＩＮ－Ｖ及ＰＩ标记分析ＭＭ细胞增殖、凋亡周期变化。结果：（１）从ＸＧ－２细胞培养上清中分离纯化得到分子量为６０ｋＤ左右的可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子;（２）可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子在体外能抑制ＸＧ－１增殖,阻滞细胞增殖停留在Ｇ２／Ｍ期。并介导其凋亡;ＦＧＦ、５％小牛血清、肝素酶Ⅲ可逆转一定浓度可溶性ｓｙｎ－ｄｅｃａｎ－１的作用,ＨＧＦ、ＶＥＧＦ和ＩＧＦ－１可部分逆转可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１分子对细胞的生长抑制作用;（３）ＩＬ－６及激发型抗ＩＬ－６Ｒ１３０（ｇｐ１３０）单抗对可溶性ｓｙｎｄｅｃａｎ－１ｗ     

NFG和TGF—β1的表达与滋养细胞肿瘤相关性的免疫组化研究

为了探讨非分蚀性葡萄胎（ＨＭ）转化为侵蚀性葡萄胎（ＩＨＭ）的细胞生物学机制，本研究采用免疫组织化学法观察了ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１在ＨＭ和ＩＨＭ中的分布。结果显示：在ＨＭ绒毛中，合体滋养细胞（ＳＴ）和新生基质细胞ＮＧＦ和ＴＧＦ－β１呈阳性和阳性；老年基质细胞和细胞滋养细胞（ＣＴ）呈阴性；在ＨＭ的中间型滋养细胞，ＮＧＦ呈阳强性着色，ＴＧＦ－β１阴性；在ＨＭ绒毛干中，ＳＴ的ＮＧＦ呈强性阳，ＮＧＦ和ＴＧＦ－     

转化生长因子β的提取,纯化及其促进骨生长作用的实验观察

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）具有广泛的生物学作用，其在血小板中的含量相对较高。本实验从新鲜牛血小板中利用酸／醇抽提，离子交换色谱和凝胶色谱纯化获得分子量为２５ｋＤ的ＴＧＦ－β，并观察了其诱导肉芽组织形成和促进骨生长的作用。结果发现，皮下注射ＴＧＦ－β可以诱导局限性肉芽组织形成。另外，ＴＧＦ－β还可刺激骨膜内间充质细胞的增殖、分化，软骨形成和软骨化骨，表明ＴＧＦ－β在软组织修复以及骨折愈合过程中发挥着重要的作用     

生长因子对培养的肺泡Ⅱ型细胞分泌功能及形态的影响

目的：探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）、转化生长因子α和β１（ＴＧＦα，ＴＧＦβ１） 对肺泡Ⅱ型细胞（ＡＴⅡ） 磷脂分泌功能及细胞形态（ 肥大） 的影响。方法：原代培养的成年大鼠ＡＴⅡ中，加入生长因子作用４８ ｈ，应用化学测定法测定培养介质中总磷脂含量，采用图像分析技术测量细胞体积参数。结果：ＥＧＦ、ＴＧＦα均可使总磷脂含量增加，而ＴＧＦβ１ 则使总磷脂含量降低；随ＥＧＦ、ＴＧＦα浓度增加，ＡＴⅡ平均直径（ＤＱ） 、体积（ＶＱ） 和表面积（ＳＱ） 均逐渐增大，ＴＧＦβ１ 对细胞体积变化无明显影响；ＴＧＦα和ＴＧＦβ１ 同时加入培养体系中，总磷脂含量及细胞体积均无明显改变。结论：ＥＧＦ、ＴＧＦα能促进ＡＴⅡ磷脂分泌和细胞肥大；ＴＧＦβ１ 对ＴＧＦα的作用有抑制效应。     

γ射线诱导HL—60和K562细胞凋亡和G2期阻滞的关系

应用形态学、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法观察γ射线诱导辐射敏感细胞ＨＬ－６０和辐射耐受细胞Ｋ５６２细胞凋亡和细胞周期改变的关系。结果：ＨＬ－６０细胞受照后出现Ｇ２期阻滞,１２ｈ达高峰,凋亡细胞比例随作用时间和照射剂量的增加而增加,凋亡特有的梯状图谱１、５、１０Ｇｙ照后７２、２４、１２ｈ出现。Ｋ５６２细胞受照后出现Ｇ２期阻滞、５、１０、２０Ｇｙ组分别在２４、４８、７２ｈ达高峰,末观察到细胞凋亡的