焦磷酸解激活聚合反应在McCune-Albright综合征基因突变检测中的应用

目的 应用新一代核酸扩增技术“焦磷酸解激活聚合反应（PAP）”检测McCune-Albright综合征（MAS）致病基因GNAS1的已知热点突变,并探讨其在MAS诊断中的应用价值。方法 依据临床特征将2006年1月至2013年9月上海交通大学医学院附属瑞金医院儿内科36例疑诊MAS患儿分为典型组（非GnRH依赖型性早熟和骨纤维结构发育不良,伴或不伴皮肤牛奶咖啡斑）与非典型组（非GnRH依赖型性早熟,伴或不伴皮肤牛奶咖啡斑）;33例健康成年志愿者作为对照组。针对MAS致病基因（GNAS1）的已知突变热点（R201H/C/L）,分别采用实时荧光PAP技术与普通PCR技术进行检测比较。结果 在36例临床疑诊MAS患儿中,经实时荧光PAP技术发现9例（25%）存在GNAS1已知突变（4例R201H、5例R201C和0例R201L）,其中典型组突变发现率为63.64%（7/11）,非典型组为8.00%（2/25）;对照组均未发现已知突变。而由普通PCR技术亦未发现已知突变（检出率0）。实时荧光PAP技术的已知突变检测率明显高于普通PCR技术（P＜0.05）。结论 我国MAS患者存在GNAS1基因R201H和R201C突变热点,PAP技术可有助于临床对MAS的分子病理诊断。     

Barth综合征1例临床及基因突变分析

目的探讨Barth综合征(BTHS)的临床表现及遗传学特征。方法回顾分析1例BTHS患儿的临床资料。结果患儿,男,10月龄,以左室增大,爆发性心肌炎,心力衰竭,肌无力,单核细胞增多,低血糖,乳酸性酸中毒,腹泻,面部异常等为主要表现。基因测序显示TAZ基因存在一个错义突变(c.406CT,p.Cys136Arg),突变来自患儿母亲。结论扩充了中国BTHS的基因突变谱及临床特征。     

Barth综合征3例临床表现及基因突变分析

目的探讨Barth综合征(BTHS)的临床表现、诊断、治疗及转归。方法回顾性分析2013年6月至2014年10月经基因检测确诊的3例BTHS患儿的临床资料。结果 3例患儿均为男性,其中2例为双胞胎。3例患儿均以心肌病和心功能不全为主要表现,同时合并不同程度的左室心肌疏松,其中2例诊断为左室心肌致密化不全(LVNC);3例患儿均有运动发育迟缓和肌无力表现,生长发育落后;尿液3-甲基戊烯二酸(3-MGCA)水平显著增高,其中1例合并中性粒细胞减少;3例患儿均检测到TAZ基因突变,2例双胞胎患儿检测到1个新的错义突变c.527AG(p.H176R),另外1例患儿检测到1个已知的无义突变c.367CT(p.R123X),突变均来源于患儿母亲。随访过程中2例双胞胎分别于生后7个月和7个半月死亡,另1例目前存活。结论 BTHS是引起儿童心肌病的原因之一,对于合并有肌无力、中性粒细胞减少、3-甲基戊烯二酸尿症等表现的男性心肌病患儿,尤其是合并LVNC时,需要重视BTHS的筛查。     

McCune-Albright综合征患儿生活质量及其影响因素分析

目的调查McCune-Albright综合征(MAS)患儿的生活质量及影响因素, 为提高患儿生活质量提供科学依据。方法回顾性分析2015年6月至2021年12月在河南省儿童医院诊断及随访的31例MAS儿童(MAS组)的临床资料, 同时按照1∶1匹配同年龄、同性别健康儿童37例(健康对照组), 应用儿童生活质量普适性核心量表(PedsQL?4.0)进行调查及对比分析, 统计学方法采用独立样本t检验、χ2检验及多元回归分析。结果与健康对照组比较, MAS组患儿生理功能(t=2.092, P<0.05)、情感功能(t=2.373, P<0.05)、总分(t=2.360, P<0.05)均明显降低, 差异均有统计学意义。多元回归分析显示, 生理功能与每年阴道出血次数(t=-2.367, P<0.05)、首次骨折年龄呈负相关(t=-2.606, P<0.05)。社交功能与骨折次数呈负相关(t=-2.481, P<0.05)。结论 MAS儿童总体生活质量低, 以生理功能、情感功能较明显, 每年阴道出血次数、首次骨折年龄、骨折次数可能是患儿生活质量降低的影响因素。     

努南综合征PTPN11基因突变鉴定1例

1临床资料患儿男,17岁。2009-07-28以身高增长缓慢为主诉就诊于中国医科大学附属盛京医院发育儿科门诊。查体:身高142cm,体重41kg,高度近视,视力0.1,面部有雀斑,眼距宽,耳位低,眼睑八字形,双肺呼吸音清,无啰音,心脏听诊无明显杂音,患儿听力正常,外生殖器正常,四肢无畸形。由于经济条件有限,患者拒绝做任何生化及放射线检查,     

Wiskott-Aldrich综合征家系调查及基因突变分析

目的：对一个Wiskott-Aldrich综合征家系进行调查,并对候选突变基因WASP进行分析,探讨该病临床特点和发病机制。方法一例3代人Wiskott-Aldrich 综合征家系,调查家系14名成员病史,采集外周血样并提取DNA,采用PCR扩增、DNA直接测序技术进行WASP基因突变分析。结果 PCR-DNA直接测序证实先证者WASP基因2号外显子291号碱基G/A突变,导致该基因第86号氨基酸由精氨酸（R）变为组氨酸（H）,即WASP基因R86 H错义突变。家系中患者检出与先证者相同的突变,患者母亲均为突变携带者。结论 Wiskott-Aldrich综合征是X连锁隐性遗传病,X连锁血小板减少症是Wiskott-Aldrich综合征的一种轻型表现,WASP基因突变是该病的分子学发病机制。本研究发现的R86H突变是Wiskott-Aldrich综合征的热点突变位点。Wiskott-Aldrich综合征临床上缺乏特征性诊断依据,对该病认识的提高和基因诊断有助于早期识别和正确诊断。     

1例Bartter综合征的家系基因突变分析和产前诊断

目的对1例Bartter综合征的家系进行相关致病基因突变分析和产前诊断。方法应用高通量捕获测序技术、PCR-Sanger测序法从基因组水平对先证者进行Bartter综合征相关致病基因的检测及家系分析;明确遗传学病因后进一步对已妊娠5个月的先证者母亲抽取羊水进行产前诊断。结果先证者编码氯通道蛋白CLC-Kb的CLCNKB基因存在c.88CT(p.Arg30*)和c.968+2TA复合杂合突变,其中c.88CT(p.Arg30*)为已报道的致病突变,c.968+2TA为新突变。家系分析显示这两个突变分别源自其母亲和父亲。产前诊断结果显示胎儿未遗传其父母的突变,为两个位点均正常的健康个体,随诊显示出生的婴儿健康,证实了基因诊断及产前诊断的准确性。结论 CLCNKB基因的复合杂合突变c.88CT(p.Arg30*)和c.968+2TA为先证者的病因,产前诊断可以预防该家系Bartter综合征的再发风险。     

Lesch-Nyhan综合征8例临床特征及HPRT1基因变异分析

目的 分析Lesch-Nyhan综合征的临床特征及HPRT1基因变异特点,以提升对该病的认识。方法 回顾性分析2015年7月至2019年11月诊断并随访的8例患儿的临床表现、实验室检查及基因检测结果,总结患儿的临床特征及HPRT1基因变异特点。结果 8例患儿均为男性,于3月龄至11月龄起病,主因发育落后就诊,同时有锥体系及锥体外系症状,4例在就诊前已出现自残行为,4例目前尚未出现自残行为,血清尿酸不同程度增高。HPRT1基因检测出6种变异（c.609+5G>A、exon 2-3 del、c.131G>A、exon7-8 del、c.384+2T>A、c.212G>A）。经口服碳酸氢钠片、别嘌呤醇片、巴氯芬及家庭康复等治疗后,5例患儿脑损伤症状缓解,1例窒息死亡,1例死于肺部感染,1例未规律服药和复查,病情加重。结论 Lesch-Nyhan综合征患者的临床症状轻重不一,主要临床特征为神经系统功能障碍、自残行为、高尿酸血症,基因测序是确诊的关键,对症治疗可改善症状。     

SURF1基因突变导致Leigh综合征家系1例

Leigh综合征是一种由于线粒体氧化磷酸化障碍所导致的严重退行性脑病。常染色体SURF1基因突变所致细胞色素C氧化酶缺乏是导致Leigh综合征的常见原因,国外已报道多种突变类型。该研究回顾了1例SURF1基因604G>C杂合性错义突变所致中国人Leigh综合征患者及其家系的临床与遗传学特点。患者,女, 9个月起病,表现为喂养困难,营养不良,进行性运动倒退,肌张力低下,眼震。17个月时来院就诊, 23个月时死于呼吸衰竭。脑MRI显示双侧基底节对称性损害,脑干、小脑萎缩。聚合酶链式反应扩增SURF1基因的全部外显子,进行序列测定及限制性片断长度多态性分析均显示患者及其母亲、舅舅的SURF1基因的外显子7存在一个604G>C杂合性错义突变,其父亲及正常对照的相关外显子序列未发现异常。该研究首次报道了1例中国人群中由于SURF1基因604G>C杂合性错义突变导致的Leigh综合征及其家系,不仅明确了病因,亦将有助于今后对患者家系的遗传咨询。     

A Case of Neonatal McCune-Albright Syndrome with Cushing Syndrome and Hyperthyroidism

ABSTRACT. We describe a female newborn infant with McCune-Albright syndrome. In addition to the cutaneous pigmentation, she had apparent manifestations of hyperthyroidism and Cushing syndrome since birth. X-ray examinations showed many scattered lucencies in multiple bones. Endocrinological findings were as follows: serum T4 276 nmol/l; free T4 125 pmol/l; TSH <1 mU/l; serum cortisol >2210 nmol/l; plasma ACTH < 10 pg/ml; urinary free cortisol 865 nmol/day; estradiol 0.36 nmol/l. Regardless of treatment with antithyroid drugs and an inhibitor of 3β-hydroxysteroid dehydrogenase, the patient died of cardiac failure at the age of 4 months. Autopsy findings included a follicle cyst in the right ovary and multinodular hyperplasia in the thyroid and both adrenals. To our knowledge such a severe neonatal form of McCune-Albright syndrome has not been described in the literature.     

A Case of Atypical McCune-Albright Syndrome with Vaginal Bleeding

Background

McCune-Albright syndrome (MAS) is a rare non-inherited disorder characterized by the clinical triad of precocious puberty, cafe-au-lait skin lesions, and fibrous dysplasia of bone.

Case Presentation

We report a girl with MAS, presenting initially with vaginal bleeding at the age of 17 months. Ultrasonography revealed unilateral ovarian cysts and ureteral and ovarian enlargement. Considering the clinical and paraclinical findings, the patient diagnosed as a case of gonadotropin-independent precocious puberty was treated with medroxy-progestrone acetate (MPA) for three months. During the follow up, recurrent episodes of bleeding, ovarian activation and cyst formation, as well as breast size development were reported. At the age of 5.5 years, fibrous dysplasia was detected, which in coexistence with precocious puberty confirmed the diagnosis of MAS. The patient had no cafe-au-lait skin macles during follow up.

Conclusion

Considering that clinical manifestations of MAS appear later in the course of recurrent periods of ovarian activation and cyst formation, a careful clinical observation and follow up of patients is necessary and the diagnosis of MAS must be kept in mind in cases with gonadotropin-independent precocious puberty.     

Pamidronate treatment of bone fibrous dysplasia in nine children with McCune-Albright syndrome

McCune-Albright syndrome is a rare genetic disorder consisting of skin and bone dysplasia and peripheral endocrinopathies. Little data have been collected regarding bisphosphonate treatment of bone fibrous dysplasia in paediatric patients with this syndrome. The aim of our study was to investigate the therapeutic efficacy of pamidronate in these patients. Nine patients with moderate to severe forms of bone fibrous dysplasia were treated with pamidronate intravenously (0.5-1 mg/kg/daily for 2-3 d) at 0.5-1-y intervals. Patients were treated over a time period of 0.5-3.5 y. During treatment no spontaneous fracture occurred. Bone pain and gait abnormality due to pain disappeared after 2-3 therapeutic cycles. Cranial asymmetry and limb length discrepancy remained unchanged. Elevated serum alkaline phosphatase and urine hydroxyproline values were reduced by the treatment, demonstrating drug activity at the lesional level. The effectiveness of pamidronate was also seen at the non-lesional level through an increase in bone density. Radiographic and scintigraphic evidence of lesion healing was not attained. Pamidronate treatment can ameliorate the course of bone fibrous dysplasia in children and adolescents with McCune-Albright syndrome.     

激素耐药型肾病综合征单卵孪生姐妹WT1基因突变

目的分析1个汉族激素耐药型肾病综合征(SRNS)家系WT1基因突变及其特点。方法研究对象为1个汉族SRNS家系先证者及其单卵孪生姐姐、父母和大姐;健康对照人群为50例尿检正常的汉族成年人。取所有研究对象外周静脉血3 mL,提取基因组DNA,PCR扩增WT1基因全部10个外显子及其周围的部分内含子序列,对PCR产物直接进行DNA序列测定。结果先证者患儿临床表型为不完全型Denys-Drash综合征,其孪生姐姐临床表型为孤立性SRNS。在该对单卵孪生姐妹中均检测到WT1基因1180C>T(R394W)杂合突变,在先证者父母及其大姐和50例健康对照人群未检测到该突变;此外,还在对该孪生姐妹检测到3个相同的WT1基因多态性——126C>T、903A>G和IVS7-32C>A。结论本研究在1个汉族SRNS家系临床表型不同的单卵孪生姐妹中发现了相同的WT1基因R394W杂合突变。     

Prolonged remission of severe Cushing syndrome without adrenalectomy in an infant with McCune-Albright syndrome

A 4 month-old girl presented with severe Cushing syndrome caused by McCune-Albright syndrome. After undergoing 19 months of pharmacologic suppression of cortisol production, she has been in clinical remission for more than 6 years. Adrenalectomy may be avoidable even in severe cases of Cushing syndrome associated with McCune-Albright syndrome.     

中国南方汉族散发性先天性肾病综合征NPHS1基因突变1例

目的 分析中国南方汉族1例散发性先天性肾病综合征(CNS)患儿NPHS1基因突变及其特点.方法 研究对象为1例中国南方汉族CNS患儿及其父母,对照人群为50例尿液检查正常的南方汉族成年人.取所有研究对象外周静脉血3 mL,提取基因组DNA,PCR扩增NPHS1全部29个外显子及其周围的部分内含子和启动子全长序列,对PCR产物直接进行DNA序列测定.结果 在CNS患儿检测出NPHS1基因3250insG(V1084fsX1095)纯合突变,其父母分别携带3250insG杂合突变.在CNS患儿及其父母还检测出3种已报道的NPHS1基因多态性--349G＞A、3315G＞A和IVS27+45C＞T.在50例对照人群中未发现NPHS1基因3250insG变异;但检测出349G＞A、3315G＞A和IVS27+45C＞T基因多态性.结论 首次在1例中国南方汉族CNS患儿发现了NPHS1基因纯合突变--3250insG(V1084fsX1095),表明中国南方汉族散发性CNS患儿存在NPHS1基因突变,提示对中国南方汉族散发性CNS患儿需进行NPHS1基因突变分析.     

X-连锁肾上腺脑白质营养不良ABCD1基因突变分析

目的对5例X-连锁肾上腺脑白质营养不良（X-ALD）患儿及其中2例的母亲进行ABCD1基因突变分析。方法聚合酶链反应（PCR）扩增5例X-ALD患儿ABCD1基因的10个外显子及其侧翼序列,直接进行测序。将测序结果与正常ABCD1基因序列比对,确定突变位点和突变形式。同时测定30例健康儿童ABCD1基因序列以明确突变位点是否为基因多态性。结果伴ABCD1基因突变3例,1例为外显子6上518位氨基酸的点突变,为Arg518Gly（CGG→GGG）;2例为外显子1上8个碱基缺失（134del8）。同时在外显子7上发现4个位点的基因多态性,分别为Gly551X（GGC→GGT）、Arg554His（CGT→CAT）、Gln567Arg（CAA→CGA）和Val582Ile（GTC→ATC）。2例患儿的母亲均未检测到突变。结论3例X-ALD患儿证实存在ABCD1基因突变,其中外显子1的8个碱基的缺失（134del8）为新发现的突变;新发现中国人外显子7的4个位点基因多态性,分别为Gly551X、Arg554His、Gln567Arg和Val582Ile。     

线粒体细胞病1例临床和基因突变分析

目的分析线粒体细胞病的临床表现、遗传学特点及其基因突变特点,从基因水平了解线粒体细胞病致病因素,并达到基因诊断和遗传咨询的目的。方法对1例线粒体细胞病患儿临床表现及实验室检查结果进行分析。提取患儿外周血基因组DNA,运用聚合酶链式反应先扩增患儿外周血线粒体基因3243、8344、8993三个热点突变所在片段,对扩增片段进行正反向序列测定,以检测突变。然后扩增已知的62个常见突变位点所在片段,对扩增片段同样进行正反向序列测定以检测突变。随机选择55例无血缘关系的健康成年人作为健康对照。结果男性患儿,出生2 d出现持续高乳酸血症、反复严重代谢性酸中毒、黄疸、肝功能异常、抽搐,头颅CT平扫示双侧大脑实质弥散性对称性低密度灶,2个月龄时死亡。线粒体3243、8344、8993三个位点均未发现突变,但细胞色素B基因存在15765 G→A突变,导致氨基酸序列340位由甘氨酸(G)转变为谷氨酸(E)。患儿母亲身体健康,外周血中亦同样存在该突变,患儿父亲及55例健康对照者皆无此突变。结论线粒体细胞病可表现为高乳酸血症、代谢性酸中毒、肝功能异常、神经系统疾病等多脏器功能损伤。线粒体细胞色素B基因15765 G→A突变可能是线粒体细胞病的一个致病突变。     

Prenatal Diagnosis and Management of Fetal Long QT Syndrome

This report describes a fetus presenting with second-degree atrioventricular block, sinus bradycardia, and transient ventricular tachycardia with ventriculoatrial dissociation. Long QT syndrome (LQTS) was suspected due to the association of heart rhythm disturbances and very short transmitral early deceleration time. This impaired relaxation of the left ventricle was explained by the extreme prolongation of the refractory period caused by the prolonged relaxation time. The infant was treated successfully with beta-blockers and implantation of a pacemaker. The prognosis is poor when LQTS presents utero or during the first week of life. To date, only a few case reports of a fetus with LQTS have been published.     

Menkes病患儿ATP7A基因突变分析

目的分析并确定2例Menkes病（MD）患儿的ATP7A基因突变及遗传特征。方法收集并分析2例Menkes病患儿的临床资料，提取其外周静脉血DNA，采用PCR法扩增ATPTA基因的23个外显子及其与内含子的连接区，并行DNA直接测序，异常者用DNA限制性内切酶酶切PCR扩增片段方法进行验证。结果发现2个半合子突变，1例在第12外显子检测到不连续的多处碱基缺失c．2589delTGAAGGA＋c．2598delTT＋c．2601delT＋c．2603delT＋c．2605delGTAGATGA（P．E864fsX883），导致移码突变。另1例在第15外显子检测到单个碱基缺失c．3045delT（p．T1016fsX1018），并发现移码突变。2例患儿的母亲均为相应突变但表型正常的携带者。结论发现2个国际上尚未见报道的新ATPTA基因突变（p．E864fsX883与p．T1016fsX1018），首次在国内明确了2例Menkes病患儿的基因诊断。