瘦素及瘦素受体与子宫内膜异位症关系研究

目的探讨瘦素与瘦素受体在子宫内膜异位组织中的表达。方法选取32例子宫内膜异位症患者作为内异组,并选取同期行输卵管结扎术的32例妇女作为对照组,分别采取两组患者的血清、腹腔液（PF）和腹膜组织（PI）。内异组患者切除子宫内膜异位囊肿,切取囊肿组织（OE）,并吸取囊肿液（EF）。采用Westernblot法测定PI和OE瘦素及瘦素受体表达水平。采用ELISA法测定血清、PF及EF中的瘦素水平。结果两组PI中瘦素和瘦素受体表达水平比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）,而内异组OE中瘦素和瘦素受体表达水平均较PI中瘦素及瘦素受体表达水平明显增高（均P＜0.05）。两组血清及PF中瘦素水平比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。但内异组EF中瘦素水平明显高于血清及PF中瘦素水平,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。内异组患者OE与EF、PI与PF、OE与PF的瘦素表达水平均呈正相关（均P＜0.05）。OE中瘦素与瘦素受体、EF瘦素与OE瘦素受体、PI中瘦素与瘦素受体、PF瘦素与PI瘦素受体均呈正相关（均P＜0.05）,而PF瘦素与OE瘦素受体表达水平无相关性（P＞0.05）。结论瘦素通过与瘦素受体之间的相互调节作用在子宫内膜异位囊肿的发病过程中扮演了非常重要的角色。     

GnRHa和孕三烯酮对异位子宫内膜细胞生长及凋亡的影响

目的探讨GnRHa及孕三烯酮对体外培养的异位子宫内膜间质(ES)细胞生长和凋亡的影响,及两种药物作用后基质金属蛋白酶 3(MMP 3)在ES细胞表达的变化。方法以不同浓度的GnRHa和孕三烯酮对体外培养的ES细胞分别进行处理,倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态,免疫组化法鉴定间质细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测药物作用0～60?h的细胞抑制情况,并绘制细胞生长曲线;采用流式细胞仪检测GnRHa和孕三烯酮作用48h后异位内膜间质细胞周期和凋亡率的变化。采用免疫组化法检测不同浓度GnRHa和孕三烯酮作用48h后MMP 3在异位内膜表达的变化。结果GnRHa和孕三烯酮可抑制细胞的生长增殖,并呈时间和剂量依赖方式。药物作用48?h后,各组细胞均发生细胞周期阻滞,G1期细胞增加,S期细胞减少,各组凋亡率明显升高(P<0.05);免疫组织化学表明,两种药物均可降低异位子宫内膜MMP 3的表达;且GnRHa诱导异位子宫内膜细胞的凋亡、降低其MMP 3表达的作用强于孕三烯酮(P<0.05)。结论GnRHa和孕三烯酮均可明显抑制体外培养的ES细胞的生长增殖,诱导其凋亡,同时降低MMP 3的表达,且GnRHa上述作用的效果更加明显。     

聚维酮碘溶液对子宫内膜细胞的灭活作用研究

目的探寻聚维酮碘溶液快速灭活子宫内膜细胞的最佳有效浓度和作用时间,并对聚维酮碘溶液诱导子宫内膜细胞凋亡作用进行研究。方法不同浓度（0.1%~2.0%）、不同时间（15~90s）的聚维酮碘溶液作用原代培养子宫内膜细胞,采用MTT染色实验检测聚维酮碘溶液对子宫内膜细胞的灭活作用,Hoechst33342染色实验和流式细胞术检测聚维酮碘溶液对子宫内膜细胞促凋亡作用。结果聚维酮碘溶液对子宫内膜细胞具有明显的灭活作用,呈浓度依赖和时间依赖,且随着聚维酮碘溶液浓度的增加,子宫内膜细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）。结论聚维酮碘溶液可有效灭活子宫内膜细胞,对预防腹壁子宫内膜异位症的发生有着重要的临床应用意义。     

人子宫内膜细胞的纯化和培养

目的：本研究旨在建立一套子宫内膜细胞体外培养和贮存传代的方法，为进一步对其进行抗原组分研究奠定基础。方法：用胶原酶消化和铜网过筛法分离子宫内膜基质细胞和上皮细胞，进行单层培养。结果：子宫内膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白单抗和波形蛋白单抗组化染色为阳性，腺细胞可持续培养4～6周，传代2～3次。结论：子宫内膜腺体细胞培养方法的建立为减少外科来源的子宫内膜抗原建立了基础。     

性腺激素释放激素激动剂对子宫内膜异位症在位及异位内膜细胞凋亡的影响

目的 分析子宫内膜异位症在位及异位内膜细胞凋亡受到性腺激素释放激素激动剂的影响.方法 以30例子宫内膜异位症患者为研究对象,均给予体外培养,并利用不同浓度的性腺激素释放激素激动剂处理在位细胞和异位细胞,观察细胞生长及细胞凋亡受到性腺激素释放激素激动剂的影响情况.结果 子宫内膜异位症在位细胞核异位细胞生长率与性腺激素释放激素激动剂浓度及作用时间呈反比.性腺激素释放激素激动剂作用24 h后,高浓度在位、异位细胞凋亡率均高于低浓度,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 子宫内膜异位症在位及异位内膜细胞在性腺激素释放激素激动剂作用下加速凋亡,可促进患者康复.     

瘦素及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的测定瘦素(leptin)及其受体在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨瘦素及其受体与子宫内膜异位症的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测21例手术后病理确诊的子宫内膜异位症患者的异位内膜及其诊刮的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达,同时以17例因功能性子宫出血而行全子宫切除手术的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达水平为对照。并采用放射免疫法(RIA)检测两组患者血清中瘦素水平。结果子宫内膜异位症患者与对照组血清瘦素水平比较差异无显著性(P>0.05)。异位子宫内膜组与自体子宫内膜及对照子宫内膜均有瘦素受体表达,而前者与后两者之间有显著性差异(P<0.05),后两者之间无显著性差异(P>0.05)。结论瘦素及其受体并非通过影响体内激素代谢而导致子宫内膜异位症的发生,可能参与腹腔内环境的改变而成为子宫内膜异位症发生的相关因素之一。     

子宫内膜异位症与内膜细胞凋亡的关系

子宫内膜异位症（endometriosis，EMs）具有转移、种植和侵犯临近组织等类似恶性肿瘤的生物学行为。EMs细胞的抗细胞凋亡能力增强，使子宫内膜细胞增生和死亡之间的平衡被破坏，细胞死亡少于增殖，生存时间延长，易导致这些细胞的种植、生长，促发EMs。本文拟通过检测EMs的异位和在位子宫内膜细胞凋亡率的变化，探讨细胞凋亡在EMs发病中的作用。[第一段]     

性腺激素释放激素激动剂对子宫内膜异位症在位及异位内膜细胞凋亡的影响

目的探讨性腺激素释放激素激动剂（GnRH．a）对子宫内膜异位症患者在位及异位内膜细胞凋亡和凋亡调控蛋白Bcl-2／bax比值变化的影响。方法以0、100、200ng／ml浓度的GnRH—a对体外培养的子宫内膜异位症患者在位及异位内膜细胞分别进行处理,采用MrIT比色法检测GnRH—a对体外培养细胞作用0～48h的生长抑制情况;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用细胞免疫组化的方法检测凋亡调控蛋白Bcl-2／bax的变化情况。结果随着GnRH—a浓度的升高及时间的延长,子宫内膜异位症患者在位及异位内膜细胞细胞生长率均呈下降趋势。100ng／mlGnRH—a作用24h后在位及异位内膜细胞凋亡率分别为9．51％、16．03％;200ng／ml时在位及异位内膜细胞调亡率分别为19．96％、27．37％,凋亡调控蛋白Bcl-2／bax比值随GnRH—a作用浓度增大及时间的延长呈下降趋势（P〈0．05）。结论GnRH—a对子宫内膜移位症的治疗作用机制可能是通过逆转其异常的Bcl-2／bax比值进而抑制内膜细胞的增殖并促进内膜细胞的凋亡。     

细胞凋亡与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)是指有生长功能的子宫内膜出现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位,并在局部生长、浸润、反复出血,从而引起疼痛、包块、不孕等临床表现的妇科常见疾病.这种性质良性而行为却类似恶性的疾病长期在病因及治疗上困扰着临床.目前,已有大量研究表明细胞凋亡与子宫内膜异位症的发生、发展有着密切关系.本文就细胞凋亡与子宫内膜异位症的关系作一综述.     

子宫内膜异位症与细胞凋亡

子宫内膜异位症(endometriosis,EM)是正常的子宫内膜腺体和间质存在于子宫外的部位而引起的一种妇科常见病。本病多发生在30~40岁的妇女,发病率占一般人群的1%~7%,占不孕妇女的30%~40%。近年来关于EM的发病机制备受关注,尤其细胞凋亡在EM发生、发展中的作用日益受到重视,现仅就     

玉竹提取物C对子宫内膜异位症在位细胞增生的作用

目的对比研究玉竹提取物C（Extraction of poly—gonaturm Odoratum,EC—PAOA）对正常妇女子宫内膜细胞（Normal Endometrium,NE）和子宫内膜异位症患者在位内膜细胞（Eutopic Endometrium,EE）增生的作用。方法对NE细胞和EE细胞进行体外分离培养,细胞免疫组化鉴定细胞类型及纯度;加入10μg／ml、100μg／ml、1000μg／ml三种浓度的EC—PAOA连续培养24h、48h和72h,应用MTT比色法观察EC—PAOA对NE和EE子宫内膜细胞增生的作用。结果EC—PAOA对NE细胞无作用（P〉0．05）,EC—PAOA对EE细胞作用48h、72h浓度为100μg/ml 1000μg/ml均能抑制细胞增生。结论由此得出ECPAOA对EM患者的子宫内膜细胞增生有抑制作用。     

子宫内膜异位症细胞雌激素与芳香化酶表达的研究

目的检测芳香化酶与雌激素在子宫内膜异位症(简称内异症)细胞中的表达及其作用。方法建立体外原代培养内异症子宫内膜细胞系13份,异位病灶基质细胞系5份,非内异症内膜细胞系6份。采用化学发光法检测细胞上清液中雌二醇的表达水平,应用蛋白印迹法和RT-PCR的方法观察在原代培养子宫内膜异位症内膜细胞、异位病灶细胞以及对照组内膜细胞中的芳香化酶表达情况,以及生理药物浓度的雌二醇刺激原代培养子宫内膜异位症子宫内膜细胞、异位病灶细胞时芳香化酶的表达。结果统计分析显示三组培养细胞上清液的雌二醇表达无显著差异。内异症子宫内膜与异位基质细胞全部表达芳香化酶,而非内异症子宫内膜细胞很少或极低水平表达(P<0.001)。芳香化酶mRNA的表达在培养内异症子宫内膜低于异位基质细胞,但显著高于非内异症子宫内膜细胞(P<0.001)。雌二醇可以显著增加培养内异症细胞芳香化酶及其转录刺激因子SF-1蛋白与mRNA表达。结论子宫内膜细胞异常表达芳香化酶可以认为是内异症发生、发展的根源之一;雌激素能促进体外培养内异症内膜细胞与异位基质细胞芳香化酶的表达。     

瘦素对细胞免疫的影响

目的探讨高瘦素水平在不同免疫状态下对免疫系统的影响。方法选用8周龄的清洁级BALB／c雄性小鼠40只,采用抽签法随机分为5组,分别注射外源性鼠瘦素和阻断瘦素抗体人为造成小鼠的不同瘦素水平状态,分别注射环孢素A（CsA）将小鼠分为正常免疫状态和免疫抑制状态两类,并设立相应的对照组。利用TUNEL技术,经流式细胞仪检测胸腺细胞中CD4^＋、CD8^＋细胞的凋亡情况。结果胸腺CD4^＋、CD8^＋细胞的凋亡结果一致。正常免疫状态下,注射瘦素组细胞凋亡率与其对照组的差异无显著性,注射瘦素抗体组细胞凋亡率较其对照组增高;免疫抑制状态下,注射瘦素组细胞凋亡率低于其对照组。结论瘦素可起正向免疫调节作用,减少胸腺细胞的凋亡,缺乏瘦素可增加胸腺CD4^＋、CD8^＋细胞凋亡。正常免疫状态下,瘦素水平升高不能显示其对免疫系统的调节作用;免疫抑制状态下,这种调节作用得以体现。该现象的存在为长期存活肾移植患者免疫状态的评估提供了一个新视角。     

莪棱胶囊对子宫内膜异位症抗子宫内膜抗体的影响

为探讨抗子宫内膜抗体在子宫内膜异位症诊断和治疗中的作用以及活血化瘀消醀中药对其的影响,将经病检、腹腔镜或临床确诊为子宫内膜异位症(EMT)的97例患者随机分为治疗组65例,对照组32例,分别用理气活血、化瘀消醀的莪棱胶囊和西药丹那唑治疗两个疗程,观察运用ELISA法检测血清抗子宫内膜抗体(EmAb)的阳性率和治疗后的阴转率.结果:①EmAb的阳性率、阴转率都与病情程度相关.轻、中度者阳性率较高,分别为66.67%和76.19%,重度者仅为57.45%;轻度者阴转率较高为85.71%,中、重度者分别为41.67%和50.0%;②治疗组的患者阴转率为51.85%,对照组为56.25%,两组患者阴转率相当(P＞0.05).提示:EmAb的阳性率不随病情严重程度而上升,它对病情较轻者有更好的辅助诊断价值,且治疗后易阴转,推测可能与重度者抗体移至盆、腹腔致检出率低,轻度者血清中免疫反应易受到抑制有关;莪棱胶囊具有较强的免疫调节作用,能抑制血清中EmAb水平.     

瘦素及其受体蛋白在肝癌细胞中的表达及意义

目的:研究瘦素及其受体在人肝细胞癌细胞株中的表达情况,探讨其在肝癌发生过程中的可能作用。方法:制备人正常肝细胞株L02及人肝细胞癌细胞株HepG2、SMMC7721的细胞爬片,采用免疫组织化学染色法检测上述细胞株中瘦素和瘦素受体蛋白的表达,以医学图文分析系统进行定量分析。结果:人正常肝细胞株L02及人肝细胞癌细胞株HepG2、SMMC7721中均存在瘦素及其受体蛋白的阳性表达,并且瘦素及其受体蛋白的表达水平均是人肝癌细胞株高于人正常肝细胞株,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:瘦素及其受体以双重表达方式存在于人肝细胞癌细胞中,可能在肝癌的发生中起到一定作用。     

特发性血小板减少性紫癜患者血清瘦素及可溶性瘦素受体水平的变化

目的:观察特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中瘦素(Lp)和可溶性瘦素受体(sLR)水平的变化,探讨Lp和sLR的临床意义。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测26例ITP患者及24名健康献血员的血清Lp和sLR的水平。结果:①ITP患者平均血清Lp水平为(20.8±8.2)μg/L,明显高于健康对照者的(6.2±2.9)μg/L,P<0.05;②ITP患者平均血清sLR水平为(13.5±6.4)μg/L,与正常对照组(22.7±5.4)μg/L相比较明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ITP患者血清Lp及sLR水平存在异常,可能在ITP的发病机制中发挥了一定的作用,值得进一步探讨。     

子宫内膜癌合并子宫内膜异位症或子宫肌瘤的临床分析

目的:分析子宫内膜癌合并子宫内膜异位症、或子宫肌瘤患者的临床病理特征,探讨可能存在的内在关系。方法:回顾性分析1998-2007年间温州医学院附属第一医院132例子宫内膜癌患者中合并子宫内膜异位症13例(A组、9.8%)、或合并子宫肌瘤21例(B组、15.9%)的临床资料,随机抽取同期单纯性子宫内膜癌患者20例做对照(C组)。结果:A、B组的手术-病理分期、肿瘤组织病理分级分别与C组比较,有非常显著性差异(P<0.005),而A、B组间的比较则无差异(P>0.05)。结论:子宫内膜癌合并子宫内膜异位症/子宫肌瘤多属雌激素依赖性肿瘤,组织分化好,肌层浸润浅,预后较好。单纯性子宫内膜癌多为非雌激素依赖性肿瘤,预后较差。     

维甲酸诱导颅咽管瘤原代细胞凋亡的实验研究

目的探究维甲酸对颅咽管瘤存化细胞凋亡诱导作用.方法获得临床颅咽管瘤手术切除新鲜组织,通过原代培养技术获得实验细胞,体外维甲酸处理后应用Annexin V,DAPI染色和DNA ladder检测细胞凋亡.结果维甲酸处理组比对照组（为处理组）明显体现出更多的细胞磷脂外翻Annexin V强染,表现为早期凋亡状态.同时实验组相比对照组DAPI强染,明亮,DNA ladder实验阳性,呈中晚期凋亡状态.结论 20μmol维甲酸处理原代颅咽管瘤细胞能有效诱导其进入早期凋亡,对颅咽管瘤细胞有杀伤作用.     

重度子宫内膜异位症患者腹腔镜术后应用不同药物的疗效比较

目的:分析并探究重度子宫内膜异位症患者腹腔镜术后应用不同药物的临床疗效。方法:将150例子宫内膜异位症患者随机分为米非司酮组(50例)、孕三烯酮组(50例)和对照组(50例)。对照组给予腹腔镜手术治疗,在其基础上米非司酮组给予米非司酮药物,孕三烯酮组给予孕三烯酮药物。比较三组疗效及副反应。结果:米非司酮组、孕三烯酮组的总有效率分别为92.0%、96.0%,均明显高于对照组的76.0%;两组复发率分别为8.0%、4.0%,均显著低于对照组的24.0%,差异有统计学意义(P<0.05);米非司酮组副反应发生及肝功能损害发生率均明显低于孕三烯酮组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重度子宫内膜异位症腹腔镜术后应用药物治疗,能降低术后的复发率,提高总有效率,其中米非司酮不良反应较少。