Polyene resistance in ergosterol producing strains of Candida albicans

Following nitrous acid mutagenesis, one nystatin- (nyl) and two amphotericin B (AB)-resistant (ab1 and ab2) mutants of Candida albicans were isolated and characterized. The three mutants plus a previously described cytochrome P450-deficient mutant (D10) of this organism were analyzed for polyene cross resistance. Cross resistance was noted for ny1 and D10 but not for ab1 and ab2. Sterol analysis indicated that ny1 was a delta 8-delta 7 isomerase mutant while ab1 and ab2 showed wild type sterol profiles. Fatty acid analysis showed no significant differences for ab1, ab2, and ny1 compared to wild type while D10 showed more pronounced differences. AB- and Triton X-100-induced potassium leakage studies indicated that ab1 and ab2 are resistant to low AB levels and ny1 is resistant to higher AB levels. In contrast, ab1 and ab2 were more resistant to detergent-induced potassium leakage than the wild type or mutants ny1 and D10. Significant differences in growth rate, ethanol sensitivity, and response to Tergitol were also noted among the resistant strains. The data indicate a different mechanism of action for the two polyenes and indicate a resistance mechanism for ab1 and ab2 based on subtle alterations of membrane structure rather than sterol substitution.     

Mycelium-Yeast Transition in Histoplasma capsulatum. Early Ultrastructural Changes: Frühe ultrastrukturelle Veränderungen beim MyzelHefe-Phasenwechsel von Histoplasma capsulatum

The ultrastructural changes which occur during the first 24 h of mycelium to yeast transition have been studied in the dimorphic fungus Histoplasma capsulatum. A temperature shift controls mycelial to yeast transition. During the first 24 h respiratory rate, ATP and cytochrome concentration fall to very low levels. Ultrastructural observations showed that the plasma membrane became undulated and the cell wall lost its characteristic fibrous outer layer. At 8 h the ordered lamellar structure of the mitochondria was no longer apparent. 24 h after the temperature shift 70% of the cells were lysed. The remaining cells contained many cytoplasmic membrane structures; mitochondria were rarely observed. These changes are considered to be the morphological expression of the physiological events characteristic of stage one in mycelial to yeast transition.     

Candida Albicans Strain Differentiation in Cancer Patients Undergoing Therapy: Zur Typisierung von Candida-albicans-Stämmen von Patienten unter Krebs-Therapie

Summary: The study indnded 44 isolates of Candida albicans from cancer patients and 10 isolates from controls. Strain differentiation was carried out by using the resistogram method of Warnock et al. 1979. The method is based on susceptibility tests against sodium selenite, boric acid, cetrimide, sodium periodate and silver nitrate. The results showed no particular association of certain strains with Candida infections in cancer patients.
Zusammenfassung. Die Untersuchungen warden an 44 Candida-albicans-Stämmen Ton Krebs-patieaten und 10 Stämmen von Kontrollen durchgefünrt. Zur Anwendung kam die Resistogram-methode nach Warnock et al. 1979, bei der die Empfindlichkeit der Stämme gegen Natriumseleuit, Borsänre, Cetrimid, Natrium perjodat nnd Silberuitrat untersucht wird. Die Ergebnisse zeigten kein bevorzugtes Auftreten bestimmter Stämme bei Krebspatienten.     

Structural alterations in Candida albicans by caffeine and caffeine salts

Cytological alterations of Candida albicans following exposure to subinhibitory concentrations of caffeine and caffeine salts were examined by light and transmission electron microscopy (TEM). The effect was different from that induced by ketoconazole. Caffeine and especially caffeine salts caused an increase in unusual modes of proliferation with signs of multiple budding in Candida albicans. Structurally, such yeast cells present some resemblance to Paracoccidioides brasiliensis.     

Wachstum von Candida albicans in normaler und veränderter Fäkalflora im Modell der kontinuierlichen Kultur

Zusammenfassung. Zur Untersuchung des Candida -Wachstums in Mischkulturen wurde das Modell eines fäkalen Mikroflorasystems unter den Bedingungen der kontinuierlichen Kultur (cfc) eingesetzt. Bei hohen Keimzahlen von aeroben und anaeroben Bakterien wird das Wachstum, das heißt die Zunahme von Zahl und Masse, der Candida -Zellen stark begrenzt. Weder durch die kontinuierliche Zufuhr von cfc-Monokulturen noch durch die Eingabe von hochkonzentrierten C.-albicans -Suspensionen konnte ein Wachstum in der Fäkalflorakultur erreicht werden. Wird das Fäkalflora-system unter aeroben Bedingungen geführt, wächst Candida mit geringer Pseudomyzelbildung. Nach mehreren Tagen gewannen jedoch auch hier die Bakterien die Oberhand. Eine deutliche Vermehrung bzw. ein Overgrowth von C. albicans erfolgte nur bei Zerstörung der aeroben und anaeroben Mikroflora durch Antibiotika.
Summary. We used the model of fecal microflora under continuous flow culture (cfc) conditions to study the growth of Candida albicans in mixed cultures. The development of Candida is usually limited by the high germ counts of aerobic and anaerobic bacteria. Neither by the continuous inflow of C. albicans -cfc-monocultures nor by intermittent input of highly concentrated suspensions of C. albicans into the system a growth in fecal flora could be obtained. If the system was run under aerobic conditions a development of C. albicans with few hyphal growth could be observed. After some days, however, the fecal flora again suppressed a further development of the yeasts. Only a marked destruction of the aerobic and anaerobic microflora by antibiotics resulted in a growth or overgrowth of Candida albicans .     

Alterations Produced by Sertaconazole on the Morphology and Ultrastructure of Candida albicans: Sertaconazol-bedingte Veranderungen der Morphologie und Ultrastruktur von Candida albicans

We studied the changes produced in Candida albicans yeast cells after treatment in vitro with sertaconazole, with light microscopy, transmission and scanning electron microscopy. Four different concentrations were evaluated (10(-6) M, 10(-5) M, 10(-4) M, 10(-3) M) and two times of action (12 and 17 h) for each concentration. This new antimycotic agent shows a considerable destructive effect in C. albicans cells. The alterations produced by sertaconazole were already manifested after 12 h at the concentration of 10(-6) M and a strong fungicidal activity recorded at 10(-4) M.     

Differentiation of Candida albicans Biotypes by the Method of Odds and Abbott: Differenzierung von Candida albicans-Biotypen mit der Methode von Odds und Abbott

Summary: Biotype differentiation of 69 isolates of Candida albicans from 22 patients was done using the tests of group 1 from the method of Odds and Abbott (1980). In most of the patients only one biotype was found in repeated samplings from different sites. Two coexisting biotypes were found repeatedly in 3 patients with severe predisposing factors. In 2 patients, who received an antimycotic treatment between the samplings, a change of biotype was found.
Zusammenfassung: An 69 Isolaten von Candida (C.) albicans von 22 Patienten wurde eine Differenzierung des Biotyps mit der Gruppe 1 der Methode von Odds und Abbott (1980) durch-geführt. Bei den meisten Patienten wurden in wiederholten Proben von verschiedenen Körper- stellen nur ein Biotyp nachgewiesen. Zwei Biotypen wurden gleichzeitig an 3 Patienten mit schweren prädisponierenden Faktoren wiederholt ermittelt. Bei 2 Patienten, die eine antimyko- tische Behandlung zwischen der Entnahme der Proben erhielten, wurde ein Wechsel des Biotyps nachgewiesen.     

Ultrastructural characters defining the terms 'yeast cell', 'pseudomycelium' and 'true mycelium' in Candida albicans

The discrimination of the morphological elements, 'yeast cell', 'pseudomycelium' and 'true mycelium' is indispensable in the mycological and histopathological diagnostics of fungal infections caused by Candida albicans. However, precisely defined distinctive criteria are lacking in the medical mycological literature. Such criteria based upon electron microscopical studies of the cell wall, are described.     

Cervical lymphadenitis caused by Candida albicans

Cervical lymphadenitis caused by Candida albicans developed in an 8-year-old Chinese child. There was no evidence of disseminated infection. The infection apparently confined to a lymph node was interpreted as a stage of fungal invasion. The child showed lymphopenia with a proportionate decrease in T-helper and T-suppressor cells. The child was successfully treated intravenously with fluconazole.     

Morphological changes of Candida, albicans induced by saperconazole

The effects of a new triazole antifungal agent, saperconazole, on the morphology of Candida albicans were studied by scanning and transmission electron microscopy. An inoculum of 10(6) CFU ml-1 was exposed to saperconazole at 1 and 10 micrograms ml-1 and at different times up to 24 h samples were removed for microscopic observations. The antifungal agent caused the yeasts to become round and turgescent and to cluster; budding appeared to be affected also, as seen by scanning electron microscopy. Transmission electron microscopy showed a thickened wall, the presence of intraparietal electron-dense vesicles and of multilamellae near the plasma membrane.     

Temperaturresistenz pathogener Dermatophyten und von Candida albicans unter Sauna-ähnlichen Bedingungen

Zusammenfassung: Ausgehend von der großen Morbidität an Dermatomykosen und der ständigen Zunahme sowie der raschen Verbreitung öffentlicher und privater Saunen konnte aufgezeigt werden, daß trotz der in Saunen herrschenden hohen Temperaturen und Luftfeuchtigkeit eine Kontamination mit pathogenen Dermatophyten und Candida albicans möglich ist, da sie bei 30-minütiger Exposition in geringer Luftfeuchte Temperaturen von 80°-100° C tolerieren und unter entsprechenden Bedingungen bei hoher Luftfeuchte Temperaturen von 60°-80° C aushalten. Als zusätzlicher Faktor der erhöhten Temperaturresistenz läßt sich feststellen, daß die in Saunen verwendeten Baumaterialien (Holz) die Überlebensfähigkeit um 10°-20° C erhöhen.
Summary: In spite of the high temperature and high air moisture in saunas, contamination with pathogenic dermatophytes and Candida albicans is possible as the thermoresistance during an exposition time of 30 minutes proved to be 80°-100°C at low air moisture and 60°-80°C at high air moisture. Using wood as germ carrier increased the thermoresistance by 10°-20°C as compared with glass carriers. This is of practical importance as wood is the main construction material of saunas.     

Differences in patient risk factors and source of candidaemia caused by Candida albicans and Candida glabrata

There is an increasing frequency of candidaemia caused by Candida glabrata which has decreased in vitro susceptibility to fluconazole. Differences in risk factors for candidaemia caused by C. glabrata and C. albicans have not been formally evaluated in a diverse patient group. We performed a retrospective study of adult inpatients from January 1, 2003 to April 30, 2008 with C. glabrata and C. albicans candidaemia at a single tertiary care centre in Detroit, Michigan to evaluate for differences in risk factors and presumed source of infection in these groups. Patients’ underlying conditions, risk factors and source of infection (probable or definite) were compared. Among 119 patients, 80 (67.2%) were C. albicans and 39 (32.8%) C. glabrata. Using logistic regression analysis, patients with C. glabrata infection were more likely to have diabetes mellitus (OR 2.43; 95% CI, 1.06–5.54) and abdominal source of infection (OR 4.53, 95% CI, 1.72–11.92). Mortality rates in the two groups were similar. Patients with C. glabrata candidaemia are more likely to be diabetic and have an abdominal source of infection compared with patients with C. albicans.     

Konzentrations-Zeit-Beziehungen bei der Wirkung von Nystatin auf die Vermehrung von Candida albicans/Concentration-Time-Relations in the Growth Inhibitory Effect of Nystatin to Candida albicans

Zusammenfassung: Bei verschiedenen Nystatin-Konzentrationen wird untersucht, welchen Einfluß die Kontaktzeit zwischen Antimykotikum und Candida-Zellen auf das Ausmaß der Wachstumshemmung hat. Dazu wird eine 2-Phasen-Flüssigkultur entwickelt: In der ersten Phase werden die Hefezellen für 1…80 Minuten mit einer Nystatin-Konzentration von 1, 0…5, 0 μg/ml inkubiert, in der 2. Phase erfolgt dann die Messung der Zellvermehrung in anti-mykotikumfreiem Medium. Für die Zellzählung wird eine Blutkörperchenzählkanuner benutzt. Ergebnis: Das Wirkungsmaximum ist bei 1 μg/ml nach rund 40 Min. (? 50% Wachstumshemmung) und bei 5 μg/ml bereits nach rand 10 Min. (vollständige Hemmung) erreicht. Die übertragung dieser in-vitro-Befunde in die Therapie würde bedeuten, daß kurzzeitig hohe Nystatin-Konzentrationen wirksamer sind als mittlere Substanzkonzentrationen mit langer Einwirkungsdauer, bzw. daß der antimykotische Effekt einer mittleren Konzentration nicht durch eine Verlängerung der Einwirkungszeit gesteigert werden kann. Summary: The influence of the contact time on the inhibitory effect of nystatin on the growth of Candida albicans cells is studied. For this purpose, a two-phase liquid culture system was developed: During the first phase, Candida cells are exposed to nystatin concentrations of 1, 0 to 5, 0 μg/ml over a period of 1 to 80 min. In the second phase the proliferation of Candida cells is measured in a medium free of antifungals. The cells are counted in a counting chamber. Results: maximum effect was registered at a concentration of 1 μg/ml after about 40 min. (? 50% growth inhibition) and at 5 μg/ml after about 10 min. (complete inhibition). If these in vitro observations may be translated into therapeutical recommendations they would indicate that brief contact times of high concentrations of nystatin are more effective than medium concentrations with longer times of exposure, or, in other words, that the antifungal activity of medium concentrations cannot be enhanced by prolongation of the contact time.     

Evaluation of the Antifungal Activity of Fenticonazole on Strains of Candida albicans on Cellular Lines: Untersuchung der antimyzetischen Aktivität von Fenticonazol bei Candida albicans in Zellkulturen

Summary: Antifungal activity of a new imidazolic drag, fenticonazole, on strains of Candida albicans on HEp2 cellular line was studies.
The MIC (minimum inhibitory concentration) and MCIF (minimum concentration inhibiting fibunentation) results are similar to those obtained in our previous studies and confirm the good activity of Fenticonazole.
Inhibition of filamentation by fenticonazole at low concentration confirms validity of the use of fenticonazole in the treatment of surface candidosis and shows the effectiveness of this experimental model, HEp2 cell monostrate, which constitutes an "in vitro" situation of parasitism similar to that observed "in vivo".
Zusammenfassung: Die antimyzetische Aktivität eines neuen Imidazol-Antimykotikums, Fenticonazol, wurde an Candida albicans unter Züchtung auf Zellkulturen der Lime HEp2 untersucht.
Die minimale Hemmkonzentration (MIC) und die minimal Konzentration zur Unterdrükkung der Filamentation (MCIF) unterschieden sich kaum von denen, die in früheren Untersuchungen ermlttelt worden waren und bestätigen damit die gute Hemmwirkung des Fenticonazol. Durch die Unterdrückung der Filamentation bei niedrigen Wirkstoffkonzentrationen wird auch die klinische Anwendung bei oberflächlichen Candidosen gerechtfertigt Außerdem wird hierdurch die Brauchbarkeit des benutzten Zellkultur-Modells bestätigt, das in vitro eine Situation schafft, die den Verhältnissen in vivo gleicht.     

Bericht über zwei Fälle von Unteridefer-Osteomyelitis durch Candida albicans: Report on two Cases of Mandibular Osteomyelitis Caused by Candida albicans

Zusammenfassung: Es wird über zwei Fälle von Unterkieferosteomyelitis berichtet, bei denen erst nach längerem therapierefraktärem Verlauf der Nachweis von Candida albicans gelang und die unter dreimonatiger Therapie mit Miconazol bzw. Ketoconazol zur Abheilung gebracht werden konnten. Osteomyelitiden durch Candida albicans sind extreme Raritäten. Bei weiterem z. T. kritiklosem Umgang mit Antibioth müssen solche Fälle zukünftig wohl häufiger erwartet werden. Erne Pilz-(super-)Infektion ist differentialdiagnostisch bei allen chronischen Osteomyelitiden in Betracht zu ziehen. Summary: Two cases of mandibular osteomyelitis caused by Candida albicans are described. In both the diagnosis was made after a long unsuccessful antibacterial and surgical therapy. Only the administration of Miconazole respectively Ketoconazole lead to healing. Osteomyelitis caused by fungi is an extremely rare disease, the partly uncritical use of antibiotics will probably provide increasing numbers of mycotic infections of bone. In all cases of chronic osteomyelitis (super-) infection by fungi has to be considered.     

Adherence of Candida Albicans to Vaginal Epithelia: Significance of Morphological Form and Effect of Ketoconazole:Adhärenz von Candida albicans an Viginalepithelien: Einfluß verschiedener Wuchsformen und von Ketokonazol.

Summary: Candida albicans yeast cells, germ tubes and hyphae of equivalent ages were tested for their ability to adhere to vaginal epithelia when the viable biomasses of the different morphological forms were standardized by ATP measurment. No significant differences were found between mean numbers of yeasts and germ tubes adhering per epithelial cell, but numbers of 6-hour-old hyphae per epithelial cell were significantly lower. However, in terms of fungal biomass attached per epithelial cell, the 6h hyphae attached significantly better than the other cell forms, and in terms of surfaces areas of fungi per epitehlial cell, yeast cells were more poorly attached than either germ tubes or hyphae. No differences were seen in adherence of C. albicans to epithelia from pregnant and nonpregnant females, but previous observations that ketoconazole can reduce attachment of C. albicans to vaginal epithelia were confirmed. Scanning electron microscopy of adherent yeast and hyphal forms showed that only the tips of germ tubes and hyphae were involved in penetration of epithelial surfaces, and in some instances the hyphal tip appeared to be the only point truly attached to the epithelial cells. Zusammenfassung: Sproßzellen, Keimschläuche und Hyphen gleichen Alters von Candida albicans wurden auf ihre Fähigkeit untersucht, an Vaginalzellen zu haften. Die Lebendmasse der verschiedenen Wuchsformen wurde dabei durcb ATP-Messungen standardisiert. Es bestand kein signifikanter Unterschied in der Adhärenz, wenn die Zahlen von Sproßzellen und Keimschläuchen miteinander verglichen wurden. Dagegen war die Zahl der pro Epithelzelle anhaftenden Hyphen deutlich geringer. Der Vedeich der Lebendmasse der Pilze zeigte, daß bezogen auf die einzehen Epithelzeilen 6 Stunden alte Hyphen signifikant besser hafteten als die anderen Zellformen. Bezog man den Vergleich auf das Maß der Zelloberfläche der Pilzelemente pro Epithelzelle, so war die Haftfäihigkeit der Sproßzellen geringer als die der beiden anderen Form-elemente. Kein Unterschied in der Adhärenz fand sich beim Vergleich von Vaginalepithelien schwangerer und nicht-whwangerer Frauen. Die Früen Die mere Beobachtung, daß Ketokonazol die Haftfägkeit von C. albicans an Vaginalepithelien verringert, konnte bestätigt werden. Rasterelektronenmikroskopie Aufnahmen ließen erkennen, daß nur die Spitzen von Keimschäiuchen und Hyphen epitheliale Oberflächen penetrieren. Bei einigen Befnnden schien es, daß ausscbließlich die Hyphenspitze emdentig an der Epitheloberfläche haftet.     

Regulation of the Direct Fungicidal Action of Miconazole against Candida albicans ATCC 26790/Die Regulation der direkten fungiziden Wirkung von Miconazol auf Candida albicans ATCC 26790

Summary: The direct lethal action of ł 10⁻⁵ M miconazole against Candida albicans ATCC 11651 depends upon, and is therefore regulated by, growth phase, pH, and whether any miconazole is present during lag phase when susceptibility develops. Certain of these studies were recently extended to C. albicans ATCC 26790 with nearly identical results, suggesting that such regulation is a general phenomenon.
Zusammenfassung: Die direkte letale Wirkung von ≥ 10⁻⁵ M Miconazol gegen Candida albicans ATCC 11651 hängt ab und wird daher reguliert von der Wachstumsphase, dem pH-Wert und davon, ob überhaupt Miconazol während der lag-Phase anwesend ist, in der sich die Suszeptibilität entwickelt Einige dieser Untersuchungen wurden jüngst auf Candida albicans ATCC 26790 erweitert mit fast identischen Resultaten, was zu der Vorstellung führt, daß diese Regulation ein allgemeines Phänomen ist.     

Zur Korrelation von Biotyp und Antimykotika-sensibilität bei Candida albicans. On the Correlation of Biotype and Antimicrobial Susceptibility in Candida albicans

Zusammenfassung: 54 rezente Candida albicans-isolate von Haut und angrenzenden Schleimhäuten wurden zunächst auf Grand der von Odds und Abbott 1983 (23) angegebenen Eigenschaften biotypisiert. Anschließend wurde ihre Antimykotikaempfindlichkeit nüt Hilfe von Agardilutions- und Mikrodilutionstest untersucht. Insgesamt fanden sich 42 verschiedene Biotypen, die im häufigsten Falle viermal vertreten waren. Die minimalen Hemmkonzentrationen (MHK) von 5-Fluorcytosin (5FC) schwankten zwischen 0,016 und mehr als 128 mg/l. Die IC₃₀-Werte nach Johnson et al. 1984 (17) reichten von 0,25 bis mehr als 64 mg/l. Bei Ketoconazol lagen die MHK-Werte zwischen 32 und 128 mg/l. Wie angesichts dieser geringen Bandbreite nicht anders zu erwarten, fand sich bei diesem Antimykotikum keine klare Korrelation zwischen Biotyp und minimalen Hemmkonzentrationen. Bei 5FC ließ sich demgegenüber eine derartige Korrelation innerhalb der Biotypengruppen 1 und 3 nachweisen: Innerhalb der Gruppe 1 erwiesen sich die mit den Kodenummern 4 und 5 als besonders resistent. Innerhalb der Gruppe 3 bestand ein entsprechender Zusammenhang mit der Kodenummer 7. Summary: 54 recent clinical mucocutaneous isolates of Candida albicans were differentiated using several different characteristics as described 1983 by Odds and Abbott (23). In addition antimicrobial susceptibility testing was performed using both the agardilution and microdilution method. 42 different biotypes were found, the most frequent one turning up four times. The minimum inhibitory concentrations (MIC) of 5-fluorocytosine (5FC) ranged from 0.016 to more than 128 mg/l. The IC₃₀ values according to Johnson et al. 1984 (17) lay between 0.25 and more than 64 mg/l. With ketoconazole the MICs ranged from 32 to 128 mg/l. As could be exspected from this small range no clear correlation could be demonstrated between biotype and MIC with this antimycotic. With 5FC, however, there was a correlation within the biotype groups 1 and 3: within group 1 the strains carrying the code numbers 4 and 5 were especially resistent to 5FC. Within group 3 this especially was the case with code number 7.