Distinct Pattern of Human Vδ/51 γδ/5 T Cells Recognizing MICA

γδ T cells represent one unique recognition pattern, the limited recognition, which distinguishes from the specific recognition for αβ T cells and pattern recognition for macrophages. Vδ1 γδT cell is the major subset of human γδT cells, which predominates in mucosal tissue including the intestinal epithelia. Presently, a few antigens that human Vδ1TCR can recognize have been identified. Among them, MHC class I chain-related molecules A （MICA） have been studied most intensively. Besides Vδ1TCR, MICA is also the ligand of NKG2D, a C-type lectin-like activating immunoreceptor. In human, only Vδ1 cells can simultaneously express both types of receptors of MICA while NK cells, αβ T cells and other subsets of γδT cells likewise express NKG2D. Although the precise mechanisms are still enigmatic, this distinct pattern of Vδ1 cells recognizing MICA predicts unique biological significance of Vδ1 cells in immune defense. Recent years, some progresses have been made in this issue. In this review we summarize the related reports and put forward some novel views based on our group＇s studies.     

MICA在NK细胞杀伤胰腺癌PANC-1细胞中的作用

探讨MHC I类链相关分子A(MHC class I chain-related A,MICA)在NK细胞杀伤胰腺癌PANC-1细胞中的作用。应用NK细胞分选试剂盒从外周血中分选高纯度NK细胞用于实验,体外培养PANC-1细胞和NK细胞,应用抗体封闭法,观察NKG2D与膜型MICA识别在NK细胞杀伤PANC-1细胞中的作用。将健康志愿者NK细胞在含有sMICA阳性胰腺癌患者血清的培基液中培养,观察NK细胞对PANC-1细胞的杀伤作用。经MICA或NKG2D抗体封闭后,NK细胞的杀瘤活性较封闭前显著减弱(P0.01)。胰腺癌患者血清sMICA水平显著高于健康志愿者和慢性胰腺炎患者(P0.01),胰腺癌患者血清中的sMICA可以显著降低NK细胞对PANC-1细胞的杀伤活性。NKG2D与膜型MICA识别在NK细胞杀伤人胰腺癌PANC-1细胞中起重要作用;sMICA是造成胰腺癌免疫逃逸的重要分子机制之一。     

一种经济简单的方法扩增Vγ9Vδ2T细胞

目的体外以仲丁胺刺激健康人外周血PBMC中Vγ9Vδ2T细胞的增殖,为γδT细胞的过继免疫治疗建立效应细胞制备平台。方法淋巴细胞分离液分离健康人外周血的PBMC,以10~6/孔接种于24孔板,用含10%胎牛血清、1mmol/L仲丁烷和200U IL-2的1640完全培基连续培养2周。结果有效地扩增出了Vγ9Vδ2T细胞,其组成高达85%以上,所扩增出的Vγ9Vδ2T细胞能有效地杀伤Daudi细胞。结论使用小分子的胺基抗原能有效地扩增出有功能的Vγ9Vδ2T细胞,为γδT细胞的过继免疫治疗建立了效应细胞制备平台。     

免疫联合治疗增强Vγ9Vδ2 T细胞的抗肿瘤活性北大核心CSCD

细胞免疫疗法作为一种新型诊治手段在肿瘤治疗领域越发受到重视。γδT细胞具有良好的抗肿瘤特性,可识别恶性细胞、浸润肿瘤,在肿瘤细胞治疗和联合治疗中具有广阔应用前景。Vγ9Vδ2 T细胞是血液中最丰富的γδT细胞亚群,对卵巢癌、乳腺癌、白血病、肝癌等多种肿瘤细胞表现出良好杀伤能力。Vγ9Vδ2 T细胞虽然仅占外周血淋巴细胞少部分,但可由外周血单个核细胞大量扩增。免疫联合治疗的发展可提高基于Vγ9Vδ2 T细胞的联合治疗肿瘤杀伤效果。化疗药物、细胞因子、单克隆抗体等是诱导、扩增和干预Vγ9Vδ2 T细胞的有效药物。本文对Vγ9Vδ2 T细胞活化、肿瘤免疫杀伤作用和免疫联合治疗等进行综述。     

HSP70刺激人Vγ9Vδ2 T细胞CCL5/RANTES的分泌

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)体外诱导人外周血单个核细胞(PBMCs)后CC型趋化因子CCL5/RANTES在Vγ9Vδ2 T细胞表达。方法人PBMCs在体外用重组HSP70诱导活化,在第1、4、7、10、14天分别收集细胞,流式细胞术胞内细胞因子分析技术检测表达CCL5/RANTES的Vγ9Vδ2 T细胞百分率,并设结核杆菌低相对分子质量抗原(Mtb-Ag)刺激组作为对照。结果HSP70诱导组分泌CCL5/RANTES的Vγ9Vδ2 T细胞百分率在第1、4、7、10、14天分别为5.9±1.7、16.2±2.5、22.8±3.7、32.4±3.6与57.8±7.2;Mtb-Ag诱导组分别为3.7±2.5、10.5±1.8、11.1±2.3、26.3±3.9与47±4.7;HSP诱导Vγ9Vδ2T分泌CCL5/RANTES的能力比Mtb-Ag强。结论HSP70特异性诱导Vγ9Vδ2 T细胞增殖并分泌CCL5/RANTES,表明二者协同作用,共同参与免疫应答并可能介导某些炎症反应。     

Vδ1T细胞和TINs细胞表达情况与宫颈癌患者临床分期及预后的关系

目的 探讨Vδ1 T细胞和肿瘤浸润性中性粒细胞(tumor infiltrating neutrophil,TINs)细胞表达情况及其与宫颈癌临床分期及预后关系.方法 选取我院2012年1月至2017年1月期间经组织病理学确诊的60例宫颈癌患者为研究组,根据临床分期分为Ⅰ～Ⅳ期,患者数22例、18例、12例、8例,并选...     

γδT淋巴细胞的抗肿瘤作用

粘膜免疫和固有免疫在对肿瘤的防御中起着重要作用。γδ型T细胞大量的分布于粘膜相关淋巴组织,其作用介于固有免疫和适应性免疫之间并且是MHC非限制性的。因此其在抗肿瘤免疫中的作用也是不可忽视的。以下将对其两个主要的功能亚群VγVδ2 T细胞和Vδ1 T细胞向肿瘤组织内浸润、对肿瘤细胞的识别及杀伤机制进行简要综述。     

Generation and Regulation of CD8＋ Regulatory T Cells

Research into the suppressive activity of CD4＋FoxP3＋ T regulatory cells （Treg） has defined a sublineage of CD4＋ cells that contribute to self-tolerance and resistance to autoimmune disease. Much less attention has been given to the potential contribution of regulatory sublineages of CD8＋ cells. Analysis of a small fraction of CD8＋ cells that target autoreactive CD4＋ cells through recognition of the MHC class Ib molecule Qa-1 in mouse and HLA-E in human has revitalized interest in CD8＋ Treg. Here we summarize recent progress and future directions of research into the role of this CD8＋ sublineage in resistance to autoimmune disease. Cellular ＆ Molecular Immunology. 2008; 5（6）：401-406.     

MutS同源蛋白2可介导Vγ9δ2T细胞对人宫颈癌细胞的杀伤北大核心CSCD

目的：探讨Vγ9δ2 T细胞识别的肿瘤相关新蛋白质配体人MutS同源蛋白2（hMSH2）在宫颈癌免疫中的作用与意义。方法通过特异性抗体阻断宫颈癌细胞表面异位表达的hMSH2分子,分析Vγ9δ2 T细胞杀伤功能变化及IFN-γ、TNF-α分泌情况;使用ELISA检测宫颈癌患者血清hMSH2水平;使用肿瘤组织芯片（ TMA）分析hMSH2在宫颈癌组织中的表达情况。结果 anti-hMSH2抗体封闭后,Vγ9δ2 T细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用显著降低,分泌IFN-γ减少,TNF-α分泌无明显变化;宫颈癌患者血清hMSH2水平略高于正常人;hMSH2在宫颈癌组织中存在异常的核浆分布。结论 hMSH2可促进Vγ9δ2 T细胞杀伤宫颈癌细胞及分泌IFN-γ,在宫颈癌固有免疫中具有重要意义。     

HIV感染后CD8~+T细胞表面NK相关受体表达的变化

目的深入了解人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染后CD8+T细胞表面NK相关受体表达的变化。方法选取25例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV感染者、11例AIDS患者、15例进行高效抗逆转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)者和13例HIV抗体阴性健康对照,用流式细胞仪检测研究对象外周血CD8+T细胞表面NKG2D、NKG2A和KIR3DL1的表达。结果 HIV感染后CD8+T细胞表面NKG2D表达的百分比显著低于健康对照,NKG2D+NKG2A-表达的百分比随疾病进展逐渐下降,且NKG2D+NKG2A-表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈正相关。AIDS患者CD8+T细胞表达NKG2A显著高于其它各组,随着疾病的进展CD8+T细胞表达NKG2A+NKG2D-百分比逐渐上升,AIDS患者显著高于其它各组,经抗逆转录病毒治疗后下降至健康对照的水平,且NKG2A+NKG2D-表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关。HIV感染后CD8+T细胞KIR3DL1+表达的百分比较健康对照并无显著差异。结论 HIV感染机体后,CD8+T细胞NK相关受体表达变化与疾病进展相关,抗病毒治疗后可恢复其变化。     

HIV感染后CD4~+ T细胞表面NK相关受体表达的变化

目的研究人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染后CD4+T细胞表面NK相关受体表达的变化。方法选取25例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV感染者、11例AIDS患者、15例进行高效抗逆转录病毒治疗(highly activeantiretroviral therapy,HAART)者和13例HIV抗体阴性健康对照,用流式细胞仪检测研究对象外周血CD4+T细胞表面NKG2D、NKG2A和KIR3DL1的表达。结果 AIDS患者CD4+T细胞表面NKG2D表达的百分比显著高于其他各组,且NKG2D表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关(R=-0.352,P<0.05),与HIV病毒载量呈正相关(R=0.426,P<0.05)。AIDS患者CD4+T表面NKG2A表达的百分比显著高于其他各组,NKG2A+NKG2D-表达的百分比显著高于其他各组,且NKG2A表达的百分比与CD4+T细胞的绝对数量呈负相关(R=-0.432,P<0.01)。结论 HIV感染机体后,CD4+T细胞NK相关受体表达变化与疾病进展相关。     

慢性苯中毒患者外周血TCR Vδ亚家族T细胞分布和克隆性研究

目的:了解慢性苯中毒患者外周血T细胞的TCRV8基因谱系及其克隆性增殖情况.方法:利用RT-PCR方法扩增10例慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中8个TCR Vδ基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性.结果:8例健康人平均表达(6.63±0.52)个Vδ亚家族,外周血中未检测到Vδ4和Vδ5亚家族,慢性苯中毒患者工人表达(1.10±0.57)个Vδ亚家族(1例重度苯中毒工人8个Vδ亚家族均未表达),外周血中未检测到Vδ1、Vδ3、Vδ4和Vδ8亚家族,与健康人比较有显著性差异(P<0.01).6例慢性苯中毒患者存在1～2个Vδα亚家族T细胞出现克隆性增殖.结论:慢性苯中毒患者外周血出现TCR Vδ亚家族倾斜性分布和克隆性增殖T细胞,这可能是苯中毒后所引起的机体特异性免疫反应.     

Vγ1+γδ T淋巴细胞对气道变应性炎症和气道高反应性的调节

目的:探讨消除Vγ1+γδ T淋巴细胞的哮喘C57BL/6小鼠中观察气道高反应性和支气管灌洗液中细胞因子浓度变化、肺组织中CD4+ CD25+ T淋巴细胞变化.方法:T淋巴细胞消除是以OVA首次致敏和第二次致敏1周前注射anti-Vγ1 mAbs、anti-Vγ4 mAbs、nonspecific hanmster IgG来完成.对C57BL/6小鼠测定气道高反应性后留取支气管灌洗液,分离肺组织.采用ELISA法测定支气管灌洗液中IL-10和TGF-β的浓度,利用FACS分析肺组织中提取的CD4+ CD25+ T淋巴细胞.结果:(1)诱导哮喘时消除Vγ1+γδ T淋巴细胞的C57BL/6小鼠气道高反应性比注射hanmster IgG的对照组减弱.但是消除Vγ4+γδ T淋巴细胞的C57BL/6小鼠气道高反应性与对照组相比无差别.(2)消除Vγ1+γδ T淋巴细胞的C57BL/6小鼠支气管灌洗液中IL-10和TGF-β浓度比对照组增加.(3)消除Vγ1+γδ T淋巴细胞的C57BL/6小鼠肺组织中CD4+ CD25+ T淋巴细胞比对照组明显增加.结论:消除Vγ1+γδ T淋巴细胞的哮喘C57BL/6小鼠气道高反应性减弱与支气管灌洗液中细胞因子IL-10和TGF-β的增加有关,并且与肺组织中的调节T淋巴细胞CD4+ CD25+ T淋巴细胞增加有关.     

尼美舒利提高γδT细胞杀伤胃癌细胞的机制探讨

目的:探讨尼美舒利对人γδT细胞功能影响。方法:按常规方法培养γδT细胞,收集培养第9天的γδT细胞用不同浓度的尼美舒利(分别为0.25、0.5、1、2、4μmol/L)诱导24 h后收集培养上清液检测细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-12,沉淀细胞流式细胞测定穿孔素、粒酶B和NKG2D,LDH法检测γδT细胞杀伤胃癌细胞活性。结果:经尼美舒利诱导后γδT细胞穿孔素、粒酶B表达量(分别为62.8%和72.7%)明显高于对照组(分别为51.4%和60.9%)P0.05,尤其尼美舒利浓度在1μmol/L时最显著;经尼美舒利诱导后γδT细胞分泌IFN-γ和TNF-α浓度(分别为262.3 ng/L和177.5 ng/L)明显高于对照组(分别为196.1 ng/L和158.5 ng/L)P0.05;分泌的IL-12浓度与对照组比较无明显差异(P0.05)。γδT细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901和BCG-823的活性在1μmol/L时最高(分别为73%和70%),明显高于对照组(分别为54%和53%)P0.05。结论:经尼美舒利诱导后γδT细胞的穿孔素、粒酶B含量和γδT细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901、BCG-823活性明显高于对照组。其培养上清液中IFN-γ和TNF-α浓度也明显高于对照组。这一结果为临床尼美舒利预防和治疗消化道肿瘤提供了实验依据。     

血清骨钙素、TP1NP、25(OH)D3水平在绝经后女性T2DM患者并发DKD中的应用价值探讨

目的 分析血清骨钙素(OC)、总I型前胶原N端前肽(TP1NP)、25-羟维生素D₃[25(OH)D₃]水平在绝经后女性2型糖尿病(T2DM)并发糖尿病肾病(DKD)患者中的应用价值。方法 收集122例绝经后女性T2DM患者临床资料，其中合并DKD 41例(DKD组),无DKD 81例(对照组),比较两组血清OC、TP1NP、25(OH)D₃水平，使用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清OC、TP1NP、25(OH)D₃对绝经后女性T2DM患者合并DKD的诊断价值；并比较不同尿白蛋白/肌酐比值(UACR)的DKD患者血清OC、TP1NP、25(OH)D₃水平差异。结果 DKD组血清OC、TP1NP、25(OH)D₃水平均低于对照组(P<0.05)。OC、TP1NP、25(OH)D₃对绝经后女性T2DM患者合并DKD均有较高诊断价值(P<0.05),且3项联合诊断价值更高(P<0.05)。绝经后女性DKD患者中，UAC...