骨形态蛋白(BMP)-15对子宫内膜异位症患者IVF结局影响的临床研究

目的:探索卵丘颗粒细胞早期凋亡和骨形态蛋白-15(bone morphogenetic protein-15,BMP-15)对子宫内膜异位症(EMs)患者IVF结局的影响。方法:行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕患者,根据不孕指征分为EMs组及对照组。分别记录患者一般情况、获卵数、正常受精卵数、卵裂数、优质胚胎数、胚胎种植数和临床妊娠率。流式细胞仪测定所有对象卵丘颗粒细胞的早期凋亡率,Western blotting检测卵泡液中BMP-15蛋白的表达量。结果:获卵率、受精率、卵裂率、优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05);EMs组与对照组相比,获卵数分别为8.2±5.7个和12.0±5.8个,着床率分别为29.73%和47.31%,临床妊娠率分别43.37%和69.32%,差异均有统计学意义(P<0.05)。EMs组卵丘颗粒细胞的早期凋亡率为37.82±15.81%,对照组为8.85±5.58%,差异具有统计学意义(P<0.01)。卵泡液中BMP-15蛋白相对表达量EMs组为0.67±0.18,对照组0.94±0.33,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EMs患者IVF着床率及临床妊娠率降低,可能与卵母细胞分泌较少的BMP-15、颗粒细胞早期凋亡率增加,影响卵母细胞质量和胚胎的正常发育有关。     

多囊卵巢综合征患者卵泡液LIF、IL-1β及性激素水平与IVF-ET结局关系的研究

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液中白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素-1β(IL-1β)及性激素水平与IVF-ET结局的关系。方法:用酶联免疫双抗夹心法和时间分辨免疫荧光法前瞻性研究了行IVF-ET的11例PCOS患者、14例对照组患者卵泡液中IL-1β、LIF及雌二醇(E2)和孕酮(P)的定量表达。结果:PCOS组卵泡液中LIF为21.1±11.1pg/mL,P为191.9×103nmol/L,明显低于对照组(33.5±11.8pg/mL,305.9×103nmol/L,P<0.05);而PCOS组卵泡液IL-Iβ为39.9±11.5pg/mL,E2浓度为3334.00nmol/L,明显高于对照组(28.3±10.6pg/mL,2138.1nmol/L),P<0.05。PCOS组胚胎种植率为8.8%,临床妊娠率为18.2%,明显低于对照组(16.7%,42.9%),P<0.05;PCOS组OHSS发生率为27.3%,明显高于对照组(7.1%,P<0.05)。LIF与E2在两组患者呈负相关(r=-0.442,P=0.027)、LIF与LH/FSH比值在PCOS组呈负相关(r=-0.682,P=0.021);IL-Iβ与E2在PCOS组呈正相关(r=0.612,P=0.045);LH/FSH比值与P在PCOS组呈负相关(r=-0.780,P=0.005);LIF与IL-Iβ水平两者间无明显相关性。结论:LIF可能是PCOS患者低种植率的关键因子;IL-Iβ可能是PCOS患者在控制性超排卵过程中易发生OHSS的一个致病因子;卵泡液IL-Iβ、LIF受卵巢激素调控。     

颗粒细胞凋亡率联合卵泡液孕激素预测IVF-ET结局

目的:探讨颗粒细胞凋亡率联合卵泡液中孕激素水平检测对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的预测价值。方法:选取2011年3月～2012年6月在我院行IVF-ET患者34例,分离收集颗粒细胞及卵泡液,33258荧光染料着色,记录颗粒细胞凋亡率,放射免疫法测定外周血及卵泡液中雌孕激素水平。比较妊娠组与非妊娠组的年龄、基础FSH、Gn用量及持续时间、卵泡数、取卵数、颗粒细胞凋亡率、雌孕激素水平、受精率。对颗粒细胞凋亡率及卵泡液雌孕激素水平进行相关性分析。以丘颗粒细胞凋亡率≤4‰,卵泡液孕激素浓度≤5.0ng/ml为阳性标准,进行联合检测。结果:妊娠组与非妊娠组的年龄、基础FSH、Gn用量及持续时间、卵泡数、取卵数、受精率及雌激素水平均无显著差异(P>0.05),颗粒细胞凋亡率、外周血及卵泡液中孕激素水平差异显著(P<0.05)。相关性分析发现,颗粒细胞凋亡率随孕激素含量升高而升高,但无显著差异(P>0.05)。联合检测阳性组妊娠率为75.8%。结论:颗粒细胞凋亡率、外周血及卵泡液孕激素水平与IVF-ET结局有关。联合检测能较好提高对妊娠结局的预测。     

使用GnRH-a超促排卵时卵泡发育数与妊娠相关血浆蛋白-A的关系

目的:探讨超排卵周期卵泡发育数与卵泡颗粒细胞妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)的关系。方法:根据取卵时卵泡发育数不同,将卵巢对超排卵药物的反应分为低反应型(卵泡数≤3个,A组,n=5)、中反应型(卵泡数4-13个,B组,n=20)和高反应型(卵泡数≥14个,B组,n=14)。采用RT-PCR法和ELISA法测定卵泡颗粒细胞PAPP-A mRNA的表达量及其蛋白含量。结果:A组PAPP-A mRNA表达量显著低于B、C组(分别为0.368±0.084、0.572±0.187、0.605±0.188,P<0.05和P<0.01)。A组与B、C组相比,PAPP-A蛋白含量减少,差异有显著性(分别为0.371±0.111mIU/ml、0.531±0.181mIU/ml、0.503±0.154mIU/ml,P<0.05)。结论:颗粒细胞中的PAPP-A含量可能影响超排卵周期卵泡发育数。     

卵巢过度刺激综合征患者血管内皮生长因子的变化

目的:探讨卵巢过度刺激综合征(OHSS)发病过程中血管内皮生长因子(VEGF)的作用机理。方法:ELISA法测定hCG注射日、胚胎移植日血清及取卵日卵泡液VEGF浓度;半定量RT-PCR技术检测取卵日颗粒细胞VEGF mRNA的表达。结果:OHSS组与非OHSS组血清VEGF浓度相比,hCG注射日未见显著性差异(102.5±40.8比90.23±34.62 pg/mL,P>0.05),胚胎移植日则差异显著(150.93±59.91,104.18±20.76 pg/mL,P<0.01);两组卵泡液相比有显著性差异(782.86±136.87比362.5±231.85 pg/ml,p<0.05)。OHSS组hCG注射日与胚胎移植日血清VEGF浓度有显著性差异,而对照组则未见差异。半定量RT-PCR结果显示,两组VEGF/β-actin之比有显著差异(0.54±0.24比0.27±0.12,P<0.01),OHSS组VEGF mRNA表达明显增强。结论:VEGF在OHSS发病机理中起一定作用。卵泡液及胚胎移植日血清VEGF浓度与OHSS的发生有着密切的关系。     

米非司酮对体外大鼠卵巢颗粒细胞Fas表达影响的研究

目的:探讨米非司酮抑制卵泡发育的可能机制。方法:收集腹腔注射60 IU孕马血清促性腺激素(PMSG)的未成年SD雌性大鼠的卵巢颗粒细胞(GC)进行体外培养,采用电子显微镜对未处理的颗粒细胞进行鉴定,运用免疫细胞化学法观察不同浓度米非司酮(10-6 mol/L、10-5 mol/L、10-4 mol/L)对GC中Fas表达的影响。结果:原代培养大鼠卵巢GC活细胞数可达80%-85%;免疫细胞化学结果显示GC中Fas蛋白表达随米非司酮处理剂量的增加而增强,阳性表达率10-6 mol/L组(0.290±0.065)、10-5 mol/L组(0.364±0.075)和10-4 mol/L组(0.557±0.067)与对照组(0.194±0.082)之间均有统计学差异(P<0.01),各组间也均有差异(P<0.05)。结论:调节颗粒细胞表面凋亡因子Fas蛋白的表达可能是米非司酮诱导颗粒细胞凋亡、抑制卵泡发育的机制之一。     

细胞凋亡与胎膜早破的相关性研究

目的:探讨细胞凋亡增加是否为胎膜早破的一个发病机理或危险因素。方法:随机采集临产前剖宫产分娩的初产妇肘静脉血、羊水及胎膜,其中胎膜早破者34例,正常完好胎膜17例。①用ELISA测定各组血清、羊水中TNF-α的浓度:②用TUNEL原位标记术精确测定各组胎膜细胞凋亡指数;③用免疫组化法检测各组胎膜组织中Bax、Bcl-2、Fas、Caspase-3表达情况。结果:①胎膜早破组血清、羊水中TNF-α浓度明显高于正常对照组水平(P<0.001);且血清、羊水中TNF-α浓度有相关性,r=0.386。胎膜感染组血清、羊水中TNF-α浓度较无感染组高(P<0.001)。②胎膜早破组胎膜感染发生率高于对照组(P<0.05)。③胎膜早破组细胞凋亡指数明显高于正常组(P<0.001);感染组细胞凋亡指数较无感染组高(P<0.001)。④胎膜早破组促凋亡蛋白Bax、Fas、Caspase-3阳性表达率高于对照组(P<0.05),但抑凋亡蛋白Bcl-2阳性表达率两组间无统计学差异(P>0.05);胎膜感染组Bax、Bcl-2、Caspase-3阳性表达率与无感染组比较无统计学差异(P>0.05),但感染组Fas阳性表达率高于无感染组(P<0.05)。结论:基因、环境因素相互作用下的细胞凋亡增加可能是胎膜早破的一个重要发病机制,可独立致病,亦或与其他相关危险因素(如感染)协同致病。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与肿瘤坏死因子-α在重度子(癎)前期发病中相互作用的探讨

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptorgamma,PPAR-γ)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在重度子(癎)前期发病中的作用及相互关系.方法 采用免疫组织化学SP法,检测68例不同发病时间的重度子(癎)前期伴或不伴肝损害者胎盘组织PPAR-γ与TNF-α的表达,并与54例早、中、晚孕期正常妊娠绒毛或胎盘组织比较.结果 两组孕妇胎盘组织均有PPAR-γ与TNF-α的表达.正常妊娠中期和妊娠28～32周胎盘PPAR-γ表达明显低于妊娠早期(12.03±6.38,11.17±3.57和18.46±5.27,P＜0.05);TNF-α在正常妊娠早期胎盘表达强度高于中期和晚期各组(P＜0.05).PPAR-γ/TNF-α比值在正常妊娠各不同孕期组间差异无统计学意义.不同发病孕周的重度子(癎)前期组与正常妊娠组比较,TNF-α表达明显升高(P均＜0.05);发病孕周＜32周的重度子(癎)前期组与正常妊娠组比较,PPAR-γ/TNF-α比值差异无统计学意义(P＜0.05),发病孕周为32一周和＞34周两组中,伴或不伴肝损害者PPAR-γ/TNF-α比值均明显低于正常妊娠者(P＜0.05).正常妊娠和重度子(癎)前期组内PPAR-7与TNF-a之间未见直线相关性(正常妊娠组r=0.227,P=0.125;重度子(癎)前期组r=0.142,P=0.267).结论 晚发型重度子(癎)前期孕妇胎盘PPAR-γ/TNF-α比值下降可能与较晚发生的子(癎)前期病理变化有关,其在重度子(癎)前期发生发展中复杂的相互作用及调节机制还有待深入研究.     

促排卵周期围着床期宫腔分泌物细胞因子表达与妊娠结局的关系初探

目的:探索体外受精促排卵周期围着床期宫腔分泌物细胞因子表达与妊娠结局的关系。方法:促排卵周期胚胎移植前宫腔分泌物63例(试验组),同时选取同年促排卵后直接行胚胎移植的171例作为对照组,以排除胚胎移植前取宫腔分泌物对妊娠结局的影响。采用多重免疫分析方法检测宫腔分泌物中与胚胎种植有关17种调节因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、IL-12(p70)、IL-13、Il-17、G-CSF、GM-CSF、IFN-γ、MCP-1、MIP-1β、TNF-α)的表达。试验组再根据妊娠结局进行分组,比较妊娠组和非妊娠组17种调节因子的表达谱。结果:患者的一般情况、促排卵数据及妊娠结局,试验组和对照组间均无统计学差异(P>0.05)。妊娠组IL-13(9.76±5.04 pg/ml)、IFN-γ(7.50±2.62 pg/ml)、MCP-1(17.5±9.63 pg/ml)水平均低于未妊娠组(分别为18.37±17.82 pg/ml、8.87±2.39 pg/ml和49.97±85.95 pg/ml),差异具有统计学意义(P<0.05),余各因子妊娠组与非妊娠组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:胚胎移植前微量取样宫腔分泌物不影响临床结局;围种植窗期宫腔分泌物IL-13、IFN-γ以及MCP-1表达水平升高可能不利于妊娠。     

年龄与颗粒细胞卵泡刺激素受体表达的关系

目的:探讨卵巢正常反应型妇女中,年龄与颗粒细胞卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的关系。方法:根据年龄将90例卵巢正常反应型妇女分为A组:>37岁(30例),B组:35～37岁(30例),C组:<35岁(30例)。采用蛋白印迹法测定颗粒细胞FSHR蛋白的水平。电化学发光法测定卵泡液(follicularfluid,FF)中的FSH浓度。比较各组成熟卵泡数、重组FSH(rFSH)使用剂量的差异。结果:3组之间rFSH使用剂量(A组:3494.0±1086.9IU,B组:3000.8±902.9IU,C组:2510.0±726.8IU)、卵泡液FSH浓度(A组:8.6±0.6pmol/L,B组:8.2±0.7pmol/L,C组:7.2±0.6pmol/L)和成熟卵泡数(A组:6.9±1.9,B组:7.9±1.9,C组:9.1±1.6)有显著差异(P均<0.01)。随着年龄增长,FSHR蛋白相对表达量显著降低(A组:20.28±0.08,B组:0.32±0.08,C组:0.36±0.06),P<0.01。结论:年龄与颗粒细胞FSHR蛋白表达有关。临床上对大龄妇女采取增加rFSH剂量的方法并不能增加成熟卵泡数的原因可能与FSHR表达下降有关。     

氯化镉(CdCl_2)对大鼠卵泡颗粒细胞中分拣蛋白1(Sort1)表达的影响

目的:探讨镉(Cd)引起卵泡细胞凋亡与分拣蛋白(Sort1)表达的关系。方法:利用流式细胞仪检测大鼠卵泡颗粒细胞的凋亡;利用免疫组织化学技术检测大鼠卵巢中Sort1的表达部位,在此基础上利用实时荧光定量PCR技术和蛋白免疫印迹技术检测CdCl2处理后大鼠卵泡中Sort1表达量的变化。结果:5μmol/L、20μmol/L和50μmol/L 3个浓度的CdCl2染毒处理均可引起大鼠卵泡颗粒细胞的凋亡;Sort1主要表达于大鼠卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞中;3个浓度的CdCl2均可使大鼠卵巢中Sort1的表达量显著增加(P<0.05)。结论:Sort1可能参与Cd诱导的卵泡颗粒细胞的凋亡过程。     

妊娠肝内胆汁淤积症患者血浆TNF-α的变化与意义

目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在妊娠肝内胆汁淤积症(intrahepatic choletasis of pregnancy,ICP)发生、发展中的作用。方法：分别抽取ICP患者(ICP组22例)、正常妊娠孕妇(48例)的空腹肘静脉血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法),检测血浆中TNF-α的浓度,进行组间比较。结果：ICP组TNF-α的浓度(10．02±3．67ng/L)与正常晚孕组(7．84±2．23 ng/L)相比明显升高(P＜0．01)。正常妊娠早孕组(6．62±1．43 ng/L,n=16)、中孕组(6．76±1．54 ng/L,n=16)、晚孕组(7．84±2．23ng/L,n=16)组间两两比较无差异(P＞0．05)。结论：正常妊娠TNF-α不随孕龄而变化,但ICP患者体内的浓度明显高于正常妊娠晚孕者,说明TNF-α对ICP的发生、发展中可能起促进作用。     

移动抑制因子与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性研究

目的:探讨人卵泡液中是否存在移动抑制因子(MIF)及其卵泡液和血液中的浓度对IVF-ET 妊娠结局的影响。方法:选择2004．08-2005．08行IVF-ET助孕的不孕妇女共37例,按妊娠结局分 为妊娠和非妊娠两组。收集取卵时的血液及卵泡液,定量酶联免疫法(ELISA)分别测定血及卵泡液 中MIF的浓度。并检测取卵前血中LH、P、E2值。结果:两组在获卵数、受精率、卵裂率、移植 胚胎数和激素水平无显著差异。妊娠组血清及卵泡液中MIF浓度分别为1．79±0．98 ng／ml和 22．97±10．62 ng／ml;非妊娠组分别为1．91±1．71 ng／ml和13．44±8．5ng/ml。两组卵泡液中 MIF浓度比较有显著差异(P<0．05);血清中浓度差异不明显(P>0．05)。卵泡液MIF浓度与优质胚 胎率呈正相关(r=0．3277,P<0．05),优质胚胎率在两组间差异显著(P<0．02)。结论:卵泡液中MIF可 能与卵泡发育及卵细胞质量有关,进而影响IVF-ET的结局。     

中药补肾调经方对体外受精-胚胎移植超排卵周期妊娠结局及骨形成蛋白(BMP)-15的影响

目的:探讨中药补肾调经方对提高IVF-ET超排卵周期所获卵和胚胎质量的作用及其机制。方法:将70例因输卵管因素行IVF-ET的患者随机分为中药+控制性超排卵(实验组,n=35)和单纯控制性超排卵组(对照组,n=35),应用Western blotting法测定取卵日成熟卵泡卵泡液中骨形成蛋白-15(bone morphogenetic protein-15,BMP-15)的含量;用RT-PCR法检测颗粒细胞中BMP-15 mRNA的表达;并比较组间的获卵数、受精率、优质胚胎率及妊娠率等。结果:实验组卵泡液中BMP-15mRNA水平及颗粒细胞中BMP-15 mRNA的表达均显著高于对照组(P<0.05);实验组的临床妊娠率(71.42%)显著高于对照组(48.57%)(P<0.05)。结论:补肾调经方可以提高IVF-ET妊娠率,其作用机制可能与调控卵泡液和颗粒细胞BMP-15水平有关。     

TRAIL及其受体DR4、DCR1在多囊卵巢综合征大鼠卵泡发育中的作用

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)及其受体——死亡受体4(death receptor 4,DR4)、诱骗受体1(decoy receptor 1,DcR1)在PCOS大鼠卵泡发育中的作用。方法:采用硫酸普拉睾酮钠诱导大鼠PCOS模型,免疫组织化学染色、RT-PCR分析观察TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果:①免疫组织化学结果显示,TRAIL蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显增强(P<0.05),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。DR4蛋白在两组大鼠窦前卵泡和窦状卵泡的表达无显著性差异(P>0.05)。DcR1蛋白在PCOS组大鼠卵巢窦状卵泡颗粒细胞的表达较对照组明显减弱(P<0.01),在窦前卵泡颗粒细胞的表达两组无显著性差异(P>0.05)。②RT-PCR分析显示,PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞TRAIL mRNA的表达较对照组明显增强(P>0.01),DR4mRNA的表达两组无显著性差异(P>0.05),DcR1 mRNA的表达较对照组明显减弱(P<0.01)。结论:TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS大鼠卵泡发育颗粒细胞凋亡中发挥了调控作用。TRAIL及其受体DR4、DcR1在PCOS颗粒细胞的表达异常可能是导致PCOS卵泡发育障碍的机制之一。     

深部浸润型与表浅型子宫内膜异位症者腹腔液Th1、Th2细胞因子变化

目的:研究深部浸润型与表浅型子宫内膜异位症(EMs)临床特征以及腹腔液Th1、Th2细胞因子的表达差异。方法:收集术后病理证实诊断为EMs患者的临床资料及其腹腔液,根据术中诊断分为:表浅型(腹膜型,n=30)、深部浸润型(n=16);以同期因输卵管因素不孕症行腹腔镜探查的妇女(n=16)为对照组。用ELISA法测定3组腹腔液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ的表达差异性。结果:表浅型EMs患者年龄较轻、不孕率高、腹水发生率高,而性交痛则是深部浸润型EMs患者的典型临床特征。与对照组相比,EMs组腹腔液中IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α表达均升高,IFN-γ在EMs组表达均降低。IL-2仅在深部浸润型EMs组升高;深部浸润型EMs组与表浅型EMs组之间对比,IL-6在表浅型EMs的升高明显(P<0.01),IL-10与TNF-α则在深部浸润型EMs组升高明显(P<0.01),IFN-γ在深部浸润型EMs组下降更为明显(P<0.01),IL-4在2个EMs组间表达无差异。结论:在表浅型与深部浸润型EMs的发病机制中,两者具有不同的免疫学改变。     

人卵丘颗粒细胞凋亡与卵子发育潜能的关系

目的:探讨人卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡状态与相应卵子发育潜能的关系。方法:收集卵泡浆内单精子注射(ICSI)患者每个卵子周围的卵丘颗粒细胞,流式细胞仪检测卵丘颗粒细胞的凋亡率,研究其凋亡率与卵子的成熟度、受精率及相应胚胎质量的关系。结果:MⅡ期卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率明显低于GV期、MⅠ期及退变死亡的卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率(P<0.05);MⅡ期受精卵子的卵丘颗粒细胞凋亡率显著低于未受精的卵子(P<0.01);发育成优质胚胎的MⅡ期卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡率低于发育成评分较低胚胎的卵子的卵丘颗粒细胞(P<0.05)。结论:卵巢刺激周期获取的卵子的成熟状态和发育潜能与相应卵丘颗粒细胞的凋亡程度相关。     

复发性流产患者宫腔微环境对早期妊娠的影响

目的：初步探讨复发性流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）患者宫腔微环境对早期妊娠的影响。方法：采集2021年10月—2022年1月就诊于我院拟行清宫术的RSA患者和同期拟行人工流产术的正常早孕女性的宫腔灌洗液,检测其脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）浓度,并用宫腔灌洗液分别干预子宫内膜细胞和绒毛外滋养细胞,检测子宫内膜细胞TNF-α、IL-2、IFN-γ mRNA的表达,以及绒毛外滋养细胞的侵袭迁移能力。结果：RSA患者宫腔灌洗液中LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ的浓度均高于正常早孕女性,差异有统计学意义（均P<0.05）。RSA患者的宫腔灌洗液干预子宫内膜细胞后,TNF-α、IL-2、IFN-γ mRNA的表达均较正常早孕女性宫腔灌洗液干预组升高,差异有统计学意义（均P<0.05）。RSA患者宫腔灌洗液干预后的绒毛外滋养细...     

子宫内膜轻创对着床相关因子及IVF妊娠结局影响的研究

目的:探讨子宫内膜轻创术对提高子宫内膜容受性的价值及分子机理。方法:对120例不孕症患者行IVF140周期,随机分为行子宫内膜搔刮轻创术组60例(A组)及对照组60例(B组),采用内膜微活检的方法,在扫描电镜下观察胞饮突,免疫组化定位及半定量检测白血病抑制因子(LIF)、骨桥蛋白(OPN)。再将对照组未孕患者中的20例行轻创术(B2组),重复IVF,并进行相关因子测定。结果:A组和B组相关因子分别为:胞饮突丰富占63.33%和36.67%、LIF6.07±1.33和4.94±2.26、OPN6.36±1.49和5.28±2.06、单胚种植率27.8%和14.3%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。B2组行轻创术前后比,分别为:胞饮突丰富10%vs50%,LIF4.50±0.82vs6.33±1.25,OPN5.06±0.98vs6.83±1.46,轻创术前后差异均有统计学意义(P<0.05)。按妊娠与否分组后,妊娠组(n=62)与非妊娠组(n=78)相关因子分别为:胞饮突丰富54.84%和25.64%,LIF6.94±1.03和4.24±1.84,OPN7.31±0.85和4.52±1.65,差异有统计学意义(P<0.05),且LIF与OPN间呈正相关。结论:胞饮突、LIF、OPN是子宫内膜着床期重要的相关因子,它们的高表达与子宫内膜容受性紧密相关。而轻创术可增强3者的表达,从而提高胚胎种植率,改善IVF妊娠结局。     

血红素氧合酶对肿瘤坏死因子-α诱导胎盘组织损伤的保护作用

目的:探讨血红素氧合酶(HO)两种同工酶HO-1和HO-2对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导胎盘组织损伤的保护作用。方法:用胎盘组织块培养(n=6)方法,以乳酸脱氢酶(LDH)释放至培养基质中的量作为毒性指数,用免疫印迹法对HO的诱导表达进行半定量分析。分7组,分别加入10μl DMEM液(对照组);底物5μmol/L血红素(Hemin组);TNF-α,终浓度为50ng/ml(TNF-α组);血红素加TNF-α(H+T组);加入HO的特异性抑制剂SnPP 20μmol/L(SnPP组);SnPP+TNF-α(S+T组);SnPP+血红素+TNF-α(S+H+T组)。各组组织块均培养12h后进行分析。结果:(1)TNFα组细胞毒指数明显增加(0.78±0.23),与对照组(0.44±0.12)相比有显著差异(P<0.01);H+T组细胞毒指数(0.53±0.13)比TNF-α组明显降低(P<0.05)。单独加入底物血红素和加入SnPP对细胞毒指数无明显影响(P>0.05)。T+S组和T+S+H组的细胞毒指数与TNF-α组无显著差异(P>0.05);(2)免疫印迹分析显示,TNF-α组导致HO-1表达下调(0.37±0.21),与对照组(0.83±0.27)的差异有显著性(P<0.05);而H+T组HO-1表达上调(0.92±0.34),与TNF-α组的差异有显著性(P<0.05);HO-2的表达无明显变化。结论:血红素诱导的HO-1表达能对抗TNF-α导致的胎盘组织损伤,HO抑制剂SnPP可阻断其作用。血红素诱导对HO-2表达无明显影响。