癌基因C-myc和抑癌基因 p16在大肠癌中的表达

目的 :探讨大肠癌中癌基因 C- myc和抑癌基因 p16的表达及相关性。方法 :采用免疫组织化学 SP法检测78例大肠癌组织、2 0例癌旁组织和 2 0例大肠腺瘤中 C- myc和 p16的表达 ,并分析它们之间的相关性。结果 :大肠癌中C- myc表达率最高 ,p16表达率最低 (P<0 .0 5 ) ;C- myc阳性表达和 p16阴性表达与大肠癌的临床分期、分化程度、淋巴结转移和远隔转移密切相关 (P<0 .0 5 ) ;C- myc和 p16之间存在明显的相关性 (P<0 .0 5 )。结论 :C- myc与 p16表达具有协同性 ,C- myc的表达上调与 p16失活在大肠癌发展中起关键作用。     

抑癌基因p16在喉癌中的表达及临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６与喉癌的生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学法检测３９例喉癌中ｐ１６基因表达情况。结果 喉癌组织ｐ１６阳必表达率６６．７％,ｐ１６蛋白的阳性率在鳞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中分别为１００％、６４．７％、５０％,显示ｐ１６蛋白表达阳性率随喉癌的病理分级的上升而降低,ｐ１６阳性与阴性组之间的１～５年的生存率则无明显差异．结论 抑癌基因ｐ１６的表达与肿瘤的类型有关,百喉癌预后好于其它肿瘤     

抑癌基因p53与p16及PCNA蛋白在皮肤增生期血管瘤中的表达及其对血管内皮细胞的干预

目的：应用免疫组化法检测抑癌基因p16，p53及DNA聚合酶8的辅助蛋白PCNA在增生期血管瘤中的表达，及其对血管内皮细胞的影响。方法：实验选取2001-01／2005-04北京世纪坛医院病理科收集的手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例作为增生期血管瘤组（患者术前均未经任何辅助性治疗），以痔静脉标本30例作为痔静脉对照组。患者均知情同意。①两组标本切片均采用DAKO Envisions二步法进行免疫组化处理。切片以体积分数为0．03的过氧化氢消除内源性过氧化物酶，微波法抗原修复，92-95℃于pH6．0枸盐酸缓冲液浸泡10min；室温冷却10min，双蒸水洗涤，pH7．2磷酸盐缓冲液浸泡5min；体积分数为0．1的山羊血清（磷酸盐缓冲液稀释）封闭，去血清。加入Ⅰ抗，37℃浸泡30min；pH7．2磷酸盐缓冲液冲洗；Envision孵育，37℃下放置30min；二氨基联苯胺显色，苏木精复染后，脱水、透明、封固。免疫组化阴性对照以磷酸盐缓冲液代替Ⅰ抗，其他步骤维持不变，以确认试剂质量及控制染色效果。②p16，p53阳性信号为棕黄色，以内皮细胞浆和／或核染成棕黄色为阳性细胞。阴性对照除细胞核染成蓝色外，无棕黄色反应物。血管内皮细胞核内见棕黄色颗粒者为PCNA蛋白染色阳性。采用CMIAS高清晰彩色病理图像分析系统分别对两组切片p53，P16及PCNA蛋白的表达进行图像检测，测定每个视野下p16和p53阳性细胞的平均吸光度以及PCNA蛋白阳性表达指数。结果：实验选取手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例，痔静脉标本30例，全部进入结果分析。①两组p53阳性表达检测及平均吸光度的比较：增生期血管瘤组内皮细胞核内有较多棕黄色颗粒，p53表达强；痔静脉对照组血管内皮细胞核内无棕黄色颗粒沉积，p53表达极弱。增生期血管瘤组p53阳性表达的平均吸光度明显强于痔静脉对照组（6．423&;#177;1.415，1．036&;#177;0．131，P〈0．05）。②两组p16阳性表达检测及平均吸光度的比较：两组切片组织中除细胞核着色外，部分细胞浆有着色。p16的阳性表达在增生期血管瘤组和痔静脉对照组中基本相同，平均吸光度分别为1．241&;#177;0．373和1．206&;#177;0．267。③两组PCNA蛋白阳性表达指数的比较：PCNA蛋白阳性表达的细胞光镜下可见核内弥漫分布细小的棕黄色颗粒，这些内皮细胞围成血管腔及团块状，核椭圆，体积较大。增生期血管瘤组PCNA蛋白阳性表达指数明显高于痔静脉对照组（67．40&;#177;8．79，38．41&;#177;9．89，P〈0．01）。结论：抑癌基因p53在增生期血管瘤组织中呈高表达，能够促进血管内皮细胞的增殖，但p16的表达与血管内皮细胞增殖的关系不明显。此外PCNA蛋白可作为增生期血管瘤的可靠标志物。     

Versican在肝细胞癌中的表达

<正>肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,死亡率高。早期诊断、早期治疗、根据不同病情进行综合治疗是提高疗效的关键,但总体疗效不甚理想,治疗失败和死亡的主要原因是肝癌细胞具有转移的特性。其中survivin、cappase-3、NF-kB等参与了肝癌发生、发展的调控[1]。最近研究发现[2],细胞外基质蛋白聚糖(Versican)参与细胞黏附、迁移、细胞通讯、增殖、血管生成等多种功能,在肿瘤     

抑癌基因p53与p16及PCNA蛋白在皮肤增生期血管瘤中的表达及其对血管内皮细胞的干预

目的:应用免疫组化法检测抑癌基因p16,p53及DNA聚合酶δ的辅助蛋白PCNA在增生期血管瘤中的表达,及其对血管内皮细胞的影响。方法:实验选取2001-01/2005-04北京世纪坛医院病理科收集的手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例作为增生期血管瘤组(患者术前均未经任何辅助性治疗),以痔静脉标本30例作为痔静脉对照组。患者均知情同意。①两组标本切片均采用DAKOEnvisions二步法进行免疫组化处理。切片以体积分数为0.03的过氧化氢消除内源性过氧化物酶,微波法抗原修复,92～95℃于pH6.0枸盐酸缓冲液浸泡10min;室温冷却10min,双蒸水洗涤,pH7.2磷酸盐缓冲液浸泡5min;体积分数为0.1的山羊血清(磷酸盐缓冲液稀释)封闭,去血清,加入Ⅰ抗,37℃浸泡30min;pH7.2磷酸盐缓冲液冲洗;Envision孵育,37℃下放置30min;二氨基联苯胺显色,苏木精复染后,脱水、透明、封固。免疫组化阴性对照以磷酸盐缓冲液代替Ⅰ抗,其他步骤维持不变,以确认试剂质量及控制染色效果。②p16,p53阳性信号为棕黄色,以内皮细胞浆和/或核染成棕黄色为阳性细胞。阴性对照除细胞核染成蓝色外,无棕黄色反应物。血管内皮细胞核内见棕黄色颗粒者为PCNA蛋白染色阳性。采用CMIAS高清晰彩色病理图像分析系统分别对两组切片p53,p16及PCNA蛋白的表达进行图像检测,测定每个视野下p16和p53阳性细胞的平均吸光度以及PCNA蛋白阳性表达指数。结果:实验选取手术切除皮肤增生期血管瘤组织标本36例,痔静脉标本30例,全部进入结果分析。①两组p53阳性表达检测及平均吸光度的比较:增生期血管瘤组内皮细胞核内有较多棕黄色颗粒,p53表达强;痔静脉对照组血管内皮细胞核内无棕黄色颗粒沉积,p53表达极弱。增生期血管瘤组p53阳性表达的平均吸光度明显强于痔静脉对照组(6.423±1.415,1.036±0.131,P<0.05)。②两组p16阳性表达检测及平均吸光度的比较:两组切片组织中除细胞核着色外,部分细胞浆有着色。p16的阳性表达在增生期血管瘤组和痔静脉对照组中基本相同,平均吸光度分别为1.241±0.373和1.206±0.267。③两组PCNA蛋白阳性表达指数的比较:PCNA蛋白阳性表达的细胞光镜下可见核内弥漫分布细小的棕黄色颗粒,这些内皮细胞围成血管腔及团块状,核椭圆,体积较大。增生期血管瘤组PCNA蛋白阳性表达指数明显高于痔静脉对照组(67.40±8.79,38.41±9.89,P<0.01)。结论:抑癌基因p53在增生期血管瘤组织中呈高表达,能够促进血管内皮细胞的增殖,但p16的表达与血管内皮细胞增殖的关系不明显。此外PCNA蛋白可作为增生期血管瘤的可靠标志物。     

原发性肝细胞肝癌发生发展中p16基因的遗传学改变

目的研究人原发性肝细胞肝癌中pl6基因DNA水平上发生的遗传学改变。方法采用聚合酶链反应(PCR)和全自动序列分析的方法,研究84例肝癌和癌旁肝组织中pl6基因第1、2外显子纯合缺失和点突变的情况。结果84例肝癌标本中p16基因第1外显子缺失9例,第2外显子缺失23例,其中有3例第1、2外显子共同缺失,总缺失率为34.5%。未发生基因缺失的病例,经过全自动序列分析,未发现点突变。结论原发性肝细胞肝癌中p16基因失活的主要机制是基因纯合缺失,点突变发生率可能非常低。而未发生基因缺失和突变的肝癌,以及发生p16蛋白阴性表达的癌旁肝组织,p16基因失活的原因可能是包括基因甲基化在内的其他遗传学改变引起的。     

抑癌基因p16在成釉细胞瘤中的表达

1．1对象 成釉细胞瘤47例，来自山东省枣庄市立医院、枣庄市市中区医院病理科1990～2003年间的存档蜡块，其中良性成釉细胞瘤32例，恶性成釉细胞瘤15例；47例中，复发病例为11例．未复发36例。同时选取5例正常黏膜进行对照。     

抑癌基因p16在子宫颈癌中的检测研究

本通过幢测宫颈癌组织中的p16抑癌基因的突变，来探讨p16抑癌基因在宫颈癌发生、发展中的作用，选取20例正常宫颈组织、20列慢性宫炎组织、30例官颈癌组织，其中宫颈癌Ⅰ期7例、Ⅱ期11例、Ⅲ期8例、Ⅳ期4例．在细胞分化程度上Ⅰ级6例，Ⅱ级13例．Ⅲ级11例，应用PCR—SSCP技术检测抑癌基因p16外显因子α的突变。研究结果：正常宫颈组织和慢性宫颈炎组织均无p16基网突变．30倒原发宫颈癌组织有2例p16基困突变，分别为Ⅲ期1例．Ⅳ期1例，且细胞分化程度均为Ⅲ级。在宫颈癌中p16基因突变发生率为67％(2／30)。提示p16基因突变率可能随着宫颈癌的进展而增高与细胞分化程度呈负相关．说明P16抑癌基因失活在宫颈癌发展中起着一定的作用．     

p16基因表达在卵巢癌分化程度诊断及化疗疗效判断中的意义

目的:研究p16基因的表达在卵巢癌的生物学特性的诊断以及化疗预后的判断中的意义。方法:采用免疫组化检测78例上皮性卵巢癌患者p16的表达,其中52例予以4～6个疗程以铂类为主的TP联合化疗,26例予以4～6个疗程的拓扑替康单药治疗,分析p16的表达与癌细胞多种生物学特性之间的关系以及与化疗疗效之间的关系。结果:52.6%的卵巢癌p16阴性表达,并且与癌细胞的分化程度呈明显相关性。采用TP方案的铂类联合化疗,其疗效与癌细胞p16表达无相关性(P>0.05),而采用拓扑替康单药化疗,p16阳性表达的患者其疗效明显好于p16阴性组的疗效(P<0.05)。结论:卵巢癌中高频率的p16基因活性缺失与癌细胞的分化程度密切相关,检测p16基因表达有可能作为癌细胞分化及恶性度的判断指标。此外,p16基因表达可能影响肿瘤细胞对部分化疗药物的敏感性,这对于指导临床肿瘤化疗方案的选择具有重要的参考意义,并可能用于患者化疗预后的判断。     

抑癌基因p16与胃癌的研究进展

<正>现认为胃癌的发病是许多基因异常表达的结果,基因的表达异常包括基因序列,即遗传学(genetics)的改变和基因表型遗传学(epigenetics)改变[1],其中包括癌基因的激活和抑癌基因的失活。p16基因是一种重要的多种肿瘤抑制基因(MTS1),其编码产物p16蛋白在细胞增殖周期调控中发挥重要作用。p16基因的     

p16在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的 检测p16蛋白在正常宫颈、慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌中的表达状况及与临床病理指标的关系,为p16蛋白免疫细胞化学应用于筛查CIN和宫颈癌细胞奠定基础.方法 应用免疫组织化学法检测186例宫颈组织中P16的表达.结果 p16在正常宫颈、慢性宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ-CINⅢ、宫颈癌（鳞癌和腺鳞癌）中的阳性表达率依次增加,其阳性细胞数随病变细胞数增加而增加;p16在上述各组宫颈柱状上皮、间质成纤维细胞、淋巴细胞及相邻的子宫内膜上皮细胞中有一定程度的表达;p16在CINⅡ-CINⅢ级、宫颈癌阳性表达且伴细胞异型性.结论 p16蛋白染色可发现微小宫颈浸润癌;p16蛋白免疫细胞化学结合细胞的异型性可能在液基细胞筛查中有助于诊断来源于鳞状上皮的CIN和宫颈癌（鳞癌和腺鳞癌）细胞.     

p16基因mRNA及其编码蛋白在人乳腺癌中的表达

目的 探讨人乳腺癌中ｐ１６基因ｍＲＮＡ及其编码蛋白的表达水平与肿瘤发生和预后的相关性。方法 采用免疫组化和原位杂交方法分别对１１例乳腺良性肿瘤和５９例乳腺癌中的ｐ１６基因及其编码蛋白进行检测。结果 ｐ１６基因蛋白表达水平与乳腺肿瘤的良、恶性显著相关（Ｐ〈０．０５）;ｐ１６基因ｍＲＮＡ及其蛋白表达水平与乳腺癌的腋窝淋巴结转移呈显著负相关（Ｐ〈０．０５）;而与乳腺癌的术后生存期呈显著正相关（Ｐ〈０．０     

鼻咽癌及癌前病变组织CDK4和p16蛋白的表达

目的：观察CDK4和p16蛋白在鼻咽癌组织中的表达,探讨其与鼻咽癌发生发展的关键。方法：应用S－P法检测CDK4和p16蛋白在80例鼻咽癌、30例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达。结果：80例鼻咽癌CDK4和p16表达率分别为78．8％和20．0％。CDK4表达率在鼻咽癌与中－重度异型增生黏膜间差异不显著,二者与轻度异型增生黏膜相比均差异非常显著（P＜0．01）。角化性鳞癌p16的表达率明显高于分化型非角化性癌和未分化癌（P＜0．01）。淋巴结转移组中p16表达率明显低于无转移组（P＜0．01）,而CDK4表达率高于无转移组（P＜0．05）。结论：CDK4过表达与p16低表达可能涉及鼻咽癌的发生发展过程,CDK4基因的扩展或过表达可能是鼻咽黏膜上皮细胞癌变的早期事件。p16的表达缺失与鼻咽癌的转移、组织学分型有关。CDK4的过表达与鼻咽癌的转移有关。     

p16和bcl-2基因蛋白在大肠癌的表达及临床意义

目的探讨p16、bcl-2基因在大肠癌发生、发展中的作用以及临床中的意义。方法运用免疫组化技术检测大肠癌及腺瘤中p16、bcl-2基因蛋白的表达。结果p16基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为35．90％、77．27％（P〈0．01）；bcl-2基因蛋白阳性表达率在大肠癌及腺瘤中分别为61．53％、72．72％（P〉0．05）。p16与bcl-2基因蛋白表达在大肠癌中有相关关系，并与肿瘤分化程度、浆膜侵润、淋巴结转移有明显相关性，与年龄、性别、Dukes分期无相关性。结论p16基因的失活与bcl-2基因的过表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用；大肠腺瘤是一种重要的癌前病变；对大肠癌及腺瘤进行p16、bcl-2基因检测有助于大肠癌的早期诊断及预后评估。     

ZIC1、cyclinD1和p16在脂肪肉瘤中的表达及临床意义

目的 探讨ZIC1、cyclinD1和p16蛋白在脂肪肉瘤(LPS)中的表达及临床意义.方法 运用免疫组化MaxVision快捷法检测52例LPS、20例脂肪瘤、15例正常脂肪组织中ZIC1、cyclinD1和p16蛋白的表达.结果 ZIC1、cyclinD1和p16在LPS中过表达率分别为76.9％ (40/52)、67.3％ (35/52)和80.8％(42/52),表达水平明显高于脂肪瘤和正常脂肪组织(P＜0.01).ZIC1和cyclinD1的表达与LPS浸润或转移有关(P＜0.05),而与肿瘤的发生部位、不同分化程度、原发与复发无关(P＞0.05).p16过表达与各项临床病理参数无关(P＞0.05).LPS中ZIC1过表达与cyclinD1高表达呈正相关(P＜0.05),与p16过表达无关(P＞0.05).结论 ZIC1、cyclinD1和p16蛋白在LPS中高表达,表明三者在LPS的发生、发展过程中具有重要作用.三者在LPS中过表达对脂肪肿瘤的鉴别诊断有一定的意义.     

膀胱移行细胞癌组织中p53和PCNA表达的关系及其临床意义

目的　研究同一膀胱移行细胞癌组织中p5 3蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的关系及其临床意义。方法　应用免疫组化LDP法检测 86例膀胱癌组织中p5 3蛋白及PCNA的表达。结果　 86例膀胱癌组织中p5 3、PCNA的阳性表达率分别为 4 6 . 5 1%及 5 1 .16 % ,p5 3和PCNA的表达与肿瘤的病理分级、临床分期和患者术后生存率均呈正相关。PCNA表达强度受p5 3表达强度的影响。结论　p5 3基因与PCNA可能通过对细胞增殖周期的调控 ,参与膀胱癌的发生与发展 ,二者的异常表达对估计膀胱癌的恶性程度、推测预后、术后随访及治疗均有一定的指导意义。     

p16和cyclin D_1蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的　探讨鼻咽癌组织中p16和cyclinD1蛋白的表达及其意义。方法　应用免疫组化S P法检测p16和cyclinD1蛋白在 85例鼻咽癌和 18例鼻咽部炎性黏膜组织中的表达。结果　 85例鼻咽癌中p16的表达率为 41 2 %(35 / 85 ) ;cyclinD1的过表达率为 6 3 5 % (5 4/ 85 )。 18例鼻咽部炎性黏膜中 ,p16的表达率为 10 0 % ;cyclinD1的表达全部为阴性。高分化鳞癌p16的表达率为 75 0 % (6 / 8) ,低分化鳞癌为 38 2 % (2 6 / 6 8) ,两者差异显著 (P <0 0 5 )。有淋巴结转移的p16表达率为 2 8 6 % (14/ 49) ,无淋巴结转移的为 5 8 3% (2 1/ 36 ) ,两者差异非常显著 (P <0 0 1)。 35例p16 ( )的癌组织中有 2 8例cyclinD1呈过表达 ;5 0例p16 (- )的癌组织中有 2 6例cyclinD1呈过表达。结论　p16的缺失表达和cyclinD1的过表达两者可能单独或共同参与了鼻咽癌的发生发展过程。p16的缺失可能还与鼻咽癌细胞的分化、转移有关     

p16和细胞周期蛋白D1蛋白在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的　研究口腔鳞癌组织中p16及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达以及与临床生物学特性和细胞增殖的关系。方法　采用免疫组化方法检测49例原发性口腔鳞癌组织及20例正常口腔黏膜组织中p16及cyclin D1蛋白的表达水平，Ki-67作为细胞增殖活性的指标也被检测。结果　p16在口腔鳞癌中阳性表达率显著低于正常口腔黏膜组织(P<0.05)，cyclin D1蛋白和Ki-67在口腔鳞癌中阳性表达率显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05) ；cyclin D1蛋白过表达与临床分级及淋巴结转移有关(P值分别<0.05)，p16缺失表达与淋巴结转移有关(P<0.05)；p16负表达和cyclin D1过表达与细胞增殖评价因子Ki-67呈负相关(r=-0.598和-0.658, P<0.05)。结论　在鳞癌的发生发展过程中，p16的缺失表达和cyclinD1的过表达两者可能单独或共同参与。p16的缺失可能还与口腔鳞癌细胞的分化、转移及增值和预后有关。     

肺癌p16蛋白表达及其临床意义

目的探讨ｐ１６蛋白在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用ＳＡＢＣ法，对５５例肺癌常规石蜡标本进行ｐ１６蛋白的免疫组化测定。结果ｐ１６蛋白的表达广泛存在于正常肺组织和部分肺癌组织中，阳性定位主要在细胞浆，少部分在细胞核内。ｐ１６蛋白在肺癌表达的阳性率为５６．４％，其表达与肺癌分化程度及患者预后有关（Ｐ＜０．０５），而与其组织实型及有无局部淋巴结转移无明显关系（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ１６蛋白表达缺失与肺癌的分化不良有关。可作为临床判断肺癌分化程度及预测患者预后的一个重要参考指标。     

人骨肉瘤p16基因表达及临床意义

目的:用免疫组织化学LSAB法研究抑癌基因p16在人骨肉瘤中的表达与骨肉瘤预后、分级的关系.方法:30例骨肉瘤新鲜标本,按刘氏分级法分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级;三年随访结果死亡13例,存活17例.15例正常对照骨组织.结果:①15例骨组织中阳性率73.33%(11/15);30例骨肉瘤组织中阳性率36.67%(11/30),骨肉瘤组较正常骨组p16蛋白染色阳性率和染色强度低(P＜0.05);②13例死亡组中阳性率6.67%(1/13),17例存活组中阳性率58.82%(10/17).存活组较死亡组p16蛋白染色阳性率和染色强度高(P＜0.01);③p16蛋白的染色阳性率和染色强度与病理分级无关.结论:骨肉瘤的发生与p16基因表达的异常有关;其表达阳性率和强度与病理分级无关,与预后相关,提示p16可作为骨肉瘤的预后判定指标之一.