自然杀伤细胞活性T淋巴细胞亚群在乳腺癌中的分析研究

随着免疫学尤其是肿瘤免疫学的迅速发展,为探索肿瘤与机体免疫状况的关系,近年来测定肿瘤病人外周血中NK活性,T淋巴细胞亚群日渐增多。本文应用2项联合于术前、术后2周、6周3个时期进行测定,并行相关分析研究乳腺癌病人的免疫状况。     

难治性淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞亚群与自然杀伤细胞活性的检测及其临床意义

 目的　探讨外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞活性水平与难治性淋巴瘤的相关性。方法　采用流式细胞术（FCM）检测60例初治淋巴瘤患者化疗前外周血T淋巴细胞亚群水平与NK细胞的活性,化疗后随访分为难治组30例、有效组30例,以20名健康者为健康对照组。结果　淋巴瘤患者组化疗前外周血CD+4、CD+4／CD+8、NK细胞数比健康对照组低（30.17±8.63与46.52±1.39,t＝12.218,P＜0.05;0.86±0.45与1.64±0.05,t＝11.225,P＜0.05;12.39±7.08与19.29±0.84,t＝6.365,P＜0.05）,CD+3、CD+8细胞数比健康对照组高（76.14±10.71与70.48±1.44,t＝-3.439,P＜0.05;40.28±14.03与28.35±0.73,t＝-5.625,P＜0.05）。难治组化疗前外周血CD+4、CD+4／CD+8、NK细胞数比有效组低（27.70±7.81与33.13±8.82,t＝2.163,P＝0.036;0.67±0.27与1.10±0.52,t＝3.272,P＝0.003;9.87±6.60与15.40±6.58,t＝2.771,P＝0.008）,而CD+3、CD+8 细胞数比有效组高（79.67±8.18与71.91±12.00,t＝-2.540,P＝0.015;44.70±13.99与34.98±12.41,t＝-2.416,P＝0.020）。结论　淋巴瘤初治患者化疗前外周血T淋巴细胞亚群水平及NK细胞活性的检测,对判断、预测容易转归为难治的患者可能有一定的参考价值。     

低剂量分次照射脾脏提高食管癌放疗患者抗辐射作用的研究

目的探讨低剂量分次照射脾脏对食管癌放疗患者抗辐射能力及对机体正常组织的合理防护作用的影响.方法60例食管癌放疗患者随机分为联合组及对照组.联合组放疗配合低剂量辐射照射脾脏,对照组单纯放射治疗;采用乳酸脱氢酶释放法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标技术法检测患者治疗前后细胞免疫指标.同时观察两组急性放射性食管炎、放射性气管炎和放射性肺炎的发生率及出现时间.结果治疗后细胞免疫指标NK细胞活性及CD4+、CD4+/CD8+比值联合组明显高于对照组(P＜0.05).急性放射性食管炎、放射性气管炎和放射性肺炎的发生率联合组为40.0%、36.7%和6.7%明显低于对照组的100.0%、76.7%和27.6%(P＜0.05).出现并发症时的平均放疗剂量联合组分别为49.23 Gy、42.25 Gy和64.00 Gy明显晚于对照组的28.17 Gy、22.56 Gy和42.53 Gy(P＜0.05).结论低剂量分次照射脾脏配合放疗治疗食管癌,可提高食管癌放疗患者的免疫功能和抗辐射能力.     

康赛迪胶囊对食管癌放疗患者细胞免疫功能的影响

目的　观察中药复方制剂康赛迪胶囊对食管癌患者放疗前后细胞免疫功能的影响。方法　采用FACSCalibur流式细胞仪 ,SimulSETv3 1分析软件 ,分别检测 2 0例食管癌患者在放疗 6 0Gy前后 (对照组 )和口服康赛迪同时放疗 6 0Gy前后 (实验组 )患者外周血NK细胞活性、T淋巴细胞亚群 (CD3+、CD4 +、CD8+)、CD4 +/CD8+、B淋巴细胞 (CD19+)、NK淋巴细胞 (CD16 +,CD5 6 +)水平。结果　二组患者放疗前外周血NK细胞活性、CD3+、CD4 +、B淋巴细胞百分数、CD4 +/CD8+的平均值均低于健康人参考值 ,其中CD4 +细胞和B淋巴细胞明显下降 ,CD8+细胞明显升高。对照组患者放疗 6 0Gy后 ,除CD8+细胞和NK淋巴细胞百分数稍有升高外 ,其他细胞均略有下降 (P >0 0 5 )。实验组患者在治疗后CD3+、CD4 +、NK淋巴细胞百分数、CD4 +/CD8+明显升高 ,并明显高于对照组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　食管癌患者在放疗前后细胞免疫功能持续低下。放疗 6 0Gy后患者细胞免疫功能受到轻度抑制 ,康赛迪可以明显改善食管癌患者放疗后的细胞免疫功能状态。提示食管癌患者在放疗的同时应加强免疫治疗 ,以改善患者的免疫抑制状态。     

放疗对食管癌患者免疫功能及预后的影响

目的：观察食管癌患者放疗前后免疫功能的动态变化,探讨与其相关的临床预后因素。方法选取2010年1月至2013年12月在南通大学第二附属医院放疗科就诊的食管癌放疗患者90例,分别于放疗前、放疗结束及放疗后3个月使用流式细胞仪检测患者外周血 T 淋巴细胞亚群及 NK 细胞比例,以30例本院健康体检者外周血人群为对照观察其变化。分析患者放疗前后免疫功能变化与临床特征及预后的关系。结果食管癌患者放疗前外周血 CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋比值、NK 细胞百分比分别为28．23％±8．22％、31．79％±7．61％、0．93±0．34、11．37％±4．57％,与对照组（36．03％±9．71％、27．26％±7．70％、1．34±0．27、15．31％±5．13％）相比,差异均有统计学意义（t ＝4．292,P ＝0．000;t ＝2．811,P ＝0．006;t ＝5．894,P ＝0．000;t ＝3．965,P ＝0．000）;放疗前外周血 CD3＋细胞百分比为58．13％±9．46％,与对照组（60．06％±8．67％）相比,差异无统计学意义（t ＝0．998,P ＝0．325）。放疗后3个月免疫指标 CD3＋（59．27％±9．92％）、CD4＋（30．51％±9．04％）、CD8＋（29．79％±6．98％）、NK 细胞（10．62％±4．43％）逐渐恢复到放疗前水平（t ＝0．789,P ＝0．431;t ＝1．769,P ＝0．079;t ＝1．837,P ＝0．068;t ＝1．113,P ＝0．267）。放疗后免疫功能改变（CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋、NK 细胞）与是否存在骨髓抑制（t ＝4．050,P ＝0．001;t ＝2．180,P ＝0．015;t ＝2．130,P ＝0．020;t ＝3．520,P ＝0．003）及照射体积大小（t ＝5．170,P ＝0．000;t ＝3．350,P ＝0．026;t ＝8．750,P ＝0．000;t ＝2．490,P ＝0．043）有关。生存分析显示：放疗后3个月免疫功能恢复良好的患者其中位生存时间优于恢复不良者（23个月∶17个月,χ2＝6．820,P ＝0．009）。结论食管癌患者放疗前处于免疫功能抑制状态,放疗实施会进一步加重免疫抑制,其加重程度与骨髓抑制及照射体积相关;放疗后3个月患者免疫功能有所恢复,恢复良好者预后较好。     

免疫营养治疗对肺癌放疗患者T淋巴细胞亚群的影响

[目的]观察谷氨酰胺和精氨酸的免疫治疗对肺癌放疗患者T淋巴细胞亚群的影响。[方法]收集临床确诊的非小细胞肺癌病例36例,随机分为单独放疗组(18例)和联合治疗组(18例)。单独放疗组给予单独放疗,联合治疗组放疗同时第1～10d静脉滴注精氨酸和谷氨酰胺。比较两组不同放疗时段白蛋白、前白蛋白、淋巴细胞数及T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+的变化。[结果]单独放疗组CD3+、CD4+细胞百分比随放疗剂量增加而下降,CD8+细胞比例上升,而联合治疗组放疗第15d的CD3+、CD4+细胞比放疗前有升高,CD8+细胞较放疗前下降,CD4+/CD8+升高。与单独放疗组相比,联合治疗组放疗中和放疗后CD4+/CD8+均增高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]肺癌放疗中同步应用谷氨酰胺和精氨酸的免疫治疗可以升高CD4+/CD8+,从而提高放疗患者的细胞免疫功能。     

脐血T淋巴细胞亚群,LAK细胞表型和杀伤活性研究

应用单克隆抗体技术活细胞间接免疫荧光法及乳酸脱氢酶释放法分别检测了３０例脐血和３０例成人外周血Ｔ淋巴细胞亚群、ＬＡＫ细胞表型及杀伤活性，结果表明：脐血ＣＤ３、ＣＤ２及ＨＬＡ－ＤＲ的表达均明显低于成人外周血，而ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＣＤ５０的表达与成人外周血相似。经ＩＬ－２诱导后，脐血ＬＡＫ细胞表型较诱导前ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ２５及ＨＬＡ－ＤＲ表达均明显增加，脐血ＬＡ     

恶性肿瘤患者T细胞亚群和NK活性及sIL-2R检测分析

目的：观察悬性肿瘤患者免疫功能治疗前后变化及血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)表述。方法：单克隆抗体法。结果：1)恶性肿瘤患者各项免疫活性细胞表达均低于对照组；2)恶性肿瘤患者血清sIL-2R表述显著高于对照组；3)免疫功能与临床治疗效果成正比；4)血清sIL-2R表达与临床治疗效果成反比。结论：恶性肿瘤患者T细胞群、NK细胞活性受到抑制，血清sIL-2R呈现高表达，对临床治疗及预后具有重要指导意义。     

微波消融治疗对晚期肝癌患者免疫功能的影响

目的 观察晚期肝癌患者在微波消融治疗前后机体抗肿瘤免疫指标的变化.方法 20例晚期肝癌患者给予超声引导下微波消融.分别于治疗前1天及治疗完成后2周采集患者外周静脉血,用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群以及NK表面抗原活性.结果 所有患者肝区胀痛症状均有缓解;治疗后Karnofsky评分较治疗前显著提高;微波消融治疗后患者外周血的NK活性及CD4、CD8、CD4/CD8百分比均显著高于治疗前(P<0.01).结论 微波消融治疗对不能手术切除的晚期肝癌患者能有效缓解症状,刺激宿主的抗肿瘤免疫功能,改善生活质量.     

热放疗、放化疗和单纯放疗治疗食管癌的临床对比观察

目的:比较热放疗、放化疗和单纯放疗治疗食管癌的近期疗效、不良反应及其对患者免疫功能的影响。方法:90例食管癌患者随机分为热放疗组、放化疗组和单纯放疗组,每组30例。放射治疗均采用常规放疗方法,总剂量为60Gy。放化疗组采用同步放化疗法,化疗方案为CF(顺铂+5-氟尿嘧啶),共化疗2个周期。热放疗组于放疗后2h内接受热疗,每次1h,每周2次。结果:放化疗组有2例患者因发生严重骨髓抑制而中止治疗。热放疗组、放化疗组和单纯放疗组的近期有效率分别为76.67%、85.71%和53.33%,放化疗组与单纯放疗组的差异有统计学意义(P<0.05)。放化疗组的恶心/呕吐、白细胞减少和血小板减少不良反应发生率均高于热放疗组和单纯放疗组(P<0.05),且Ⅲ~Ⅳ度不良反应更多。热放疗组的急性放射性食管炎发生率最低(30.00%)。治疗后热放疗组的CD4+/CD8+比值较治疗前明显增加,而放化疗组治疗后CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平均较治疗前有所降低;治疗后单纯放疗组的CD4+和CD4+/CD8+水平均明显低于热放疗组(P<0.05)。结论:放化疗治疗食管癌的近期疗效优于热放疗和单纯放疗,但不良反应较为严重。热放疗可增强机体的细胞免疫功能。     

592例食管癌3DRT的预后分析

目的 分析食管癌3DRT (3DCRT、IMRT)疗效和预后影响因素。方法 2002—2012年间本院接受3DRT食管癌患者592例,其中3DCRT者123例、IMRT 者469例,单纯放疗360例、放化疗232例。中位放疗剂量60 Gy。Kaplan-Meier法计算OS、PFS并Logrank法检验和单因素预后分析,Cox法多因素预后分析。结果 3、5年样本数分别为142、53例。1、3、5年OS和PFS率分别为65.3%、34.0%、23.5%和52.1%、28.0%、19.6%。中位OS时间20个月(95%CI为17.9~22.1个月),中位PFS时间14个月(95%CI为11.8~16.2个月)。单因素分析显示影响OS和PFS因素有性别、N分期、M分期、TNM分期、放疗剂量、治疗前体重下降、吸烟和饮酒(P=0.002和0.000、0.000和0.000、0.001和0.000、0.000和0.000、0.000和0.000、0.024和0.026、0.009和0.005、0.000和0.000)。多因素分析显示TNM分期、放疗剂量和性别是影响OS、PFS因素(P=0.000和0.000、0.000和0.001、0.036和0.027)。结论 食管癌3DRT的生存有所提高,临床TNM分期、放疗剂量和性别是影响生存的因素。     

非霍奇金淋巴瘤患者外周血T细胞亚群及NK细胞检测的临床意义

目的 探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者外周血T细胞亚群及NK细胞检测的临床意义.方法 收集病理确诊的初治NHL患者62例,采集静脉血经流式细胞术检测T细胞亚群及NK细胞水平,与30名健康对照者进行比较;并比较不同年龄、性别、病理类型患者之间的表达差异,分析其与临床分期、国际预后指数(IPI)、有无B症状等因素的相关性.结果 NHL组外周血CD3、CD4、NK细胞比例[(64.13±19.83)％、(27.10±8.20)％、(13.51±10.59)％]低于健康对照组[(65.78±10.69)％、(31.95±12.74)％、(18.76±7.36)％](P＜0.05);CD8、调节性T细胞(Treg细胞)比例[(32.15±13.83)％、(10.44±3.00)％]高于健康对照组[(29.25±12.35)％、(7.51±4.36)％](P＜0.05).NHL患者≤60岁组CD3、NKT细胞比例[(67.06±19.24)％、(4.91±3.69)％]明显高于＞60岁组[(59.18±20.33)％、(4.89±3.05)％](P＜0.05),T细胞NHL组Treg细胞比例明显高于B细胞NHL组[(8.17±6.41)％比(7.11±2.53)％](P＜0.05).NHL患者外周血CD3、CD4、NK、NKT细胞比例与临床分期相关(均P＜ 0.05);CD8细胞比例与IPI相关(P=0.000);Treg细胞比例与IPI、B症状相关(均P＜ 0.05).结论 NHL患者存在细胞免疫抑制,其外周血T细胞亚群及NK细胞比例在不同性别、年龄、病理亚型之间存在不同,与临床分期、IPI、有无B症状等的相关性尚需进一步探讨.     

食管癌患者自然杀伤细胞活化性受体NKG2D及其分泌性配体sMICA的检测

目的 探讨宿主自然杀伤(NK)细胞受体NKG2D在抗食管癌中的作用及其与肿瘤免疫逃逸的关系.方法 用流式细胞术检测50例食管癌、26名健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达状况,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血中可溶性MHC-1类链相关分子A(sMICA)的含量表达.结果 食管癌患者手术前后及健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达水平分别为(87.25±3.06)%、(88.38±4.24)%、(92.46±1.46)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).相应配体sMICA在食管癌患者血清中的表达较健康人中增高,但差异无统计学意义(P0.05);在食管癌患者中不同肿瘤大小、分化程度、手术分期及是否有淋巴结转移等中表达差异无统计学意义(P0.05);但在晚期患者(Ⅲ、Ⅳ期)和有淋巴结转移者中较健康对照明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 食管癌患者外周血NK细胞活性降低,其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一.食管癌患者免疫逃逸可能与NKG2D表达下凋及其配体sMICA的表达升高有关.     

食管癌同步放化疗的临床研究

目的评价同步放化疗在食管癌中的价值。方法回顾性分析55例接受同步放化疗的食管癌患者,与同期接受单纯放疗的162例患者进行对比研究。结果单纯放疗组的1、3、5年生存率分别为83.3%、55.7%和36.2%,同步放化组的1、3、5年生存率分别为92.0%、73.8%和53.5%。中位总生存时间分别为45个月和87个月,差异有统计学意义(P=0.034)。结论同步放化疗能够显著改善食管癌患者的生存时间。     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性的临床意义。方法:采用流式细胞仪测定乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,以正常人作对照。结果:乳腺癌患者外周血CD3 ,CD4 ,NK细胞数量及CD4 /CD8 比值较正常对照组均明显下降(P<0.05),而CD8 细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与乳腺癌临床病理指标有关,分期越晚,CD3 细胞、CD4 细胞、CD4 /CD8 细胞比值及NK细胞数量越低,CD8 细胞水平越高;I、II期乳腺癌患者与III、IV期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论:乳腺癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于乳腺癌患者的免疫监测。     

弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞检测的临床意义

 【摘要】　目的　探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者化疗前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞的变化与治疗效果的关系。方法　收集经病理确诊且治疗有效的DLBCL患者47例,分别于化疗前及化疗第2个周期、第4个周期结束后第3天采集静脉血,经流式细胞术测定T淋巴细胞亚群及NK细胞,比较化疗前与化疗后T淋巴细胞亚群、NK细胞水平的差异,并与同期健康体检者50名进行比较。结果　DLBCL患者组化疗前外周血CD+3、CD+4、CD+4／CD+8、NK细胞表达水平[（70.04±8.87）%、（42.79±6.06）%、（1.68±0.59）%、（14.40±6.02）%]较健康对照组[（63.89±6.67）%、（32.72±5.77）%、（0.85±0.25）%、（9.95±5.24）%]低（P＜0.05）,而CD+8细胞表达水平较健康对照组高[（27.21±6.54）%比（39.92±7.11）%]（P＜0.05）。DLBCL患者组化疗第4个周期外周血CD+3、CD+4、CD+4／CD+8表达水平与化疗第2个周期相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）,该组患者化疗第4个周期CD+3、CD+4、CD+8、CD+4／CD+8、NK细胞表达水平与治疗前相比差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论　初治DLBCL患者体内存在着免疫抑制,外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞可作为反映DLBCL患者机体细胞免疫功能的较好参数,在临床上可用于免疫功能的监测,为DLBCL治疗方案的选择提供指导意义。     

乳腺癌患者可溶性MICA对自然杀伤细胞受体的影响

目的观察乳腺癌患者外周血自然杀伤（NK）细胞杀伤活性及受体的变化,探讨可溶性MICA（sMICA）对NK细胞受体及杀伤活性的影响。方法ELISA法检测外周血血清sMICA的含量。流式细胞术（FCM）检测NK细胞百分比、NK细胞活化性受体NKG2D、抑制性受体KIR（CD158b）表达。MTT法检测NK细胞对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤活性。结果与健康人比较,乳腺癌患者中81．6％表达sMICA,含量为（205．36±71．27）ng／L,且sMICA含量与TNM分期呈正相关。乳腺癌患者外周血NK细胞所占百分比无明显差异,但血清sMICA阳性的乳腺癌患者中NK细胞杀伤活性明显降低,NKG2D表达下降,CD158b表达增高。当NK细胞培养体系中加入sMICA阳性的乳腺癌血清时,其杀瘤活性明显降低【（76．2±6．7）％与（48．4±4．1）％】,NKG2D的表达明显下调[（92．5±7．1）％与（62．5±6．4）％],而CD158b的表达明显上升【（10．6±3．2）％与（43．6±3．4）％】。sMICA阳性的乳腺癌患者NK细胞与细胞因子IL-15共培养,NK细胞的杀瘤活性、NKG2D的表达明显升高,KIR（CD158b）的表达明显下降。结论乳腺癌外周血血清中sMICA可通过下调NK细胞NKG2D表达以及上调KIR表达,降低NK细胞杀瘤活性。IL-15可逆转sMICA对NK细胞的免疫下调作用。     

外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞检测在肺癌诊断及治疗中的意义

 目的　通过研究肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞的表达及动态变化,分析其与肺癌发生、发展的关系及其临床意义。方法　运用流式细胞术检测66例肺癌患者（肺癌组）、60例肺结核患者（肺结核组）和60名健康人（健康对照组）外周血中CD+3、CD+3 CD+8、CD+3 CD+4、Th／Ts、CD+16 CD+56的表达;肺癌组还检测了化疗前后第3、7和20天外周血CD+3、CD+3 CD+8、CD+3 CD+4、Th／Ts、CD+16 CD+56 的表达。结果　肺癌组CD+3、CD+3 CD+4、Th／Ts、CD+16 CD+56表达明显降低[（54.23±10.37）%、（34.23±8.03）%、1.35±0.20、（25.18±4.34）%],与肺结核组[（63.09±9.19）%、（39.46±12.74）%、1.51±0.41、（26.45±3.96）%]和健康对照组[（69.68±8.31）%、（42.31±13.29）%、1.89±0.48、（29.44±2.51）%]比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）;CD+3 CD+8 表达三组间差异均无统计学意义（均P＞0.05）。在化疗组中,化疗缓解组化疗后第3天CD+3、CD+3 CD+4、Th／Ts和CD+16 CD+56 表达较化疗前均显著降低（均P＜0.01）,而CD+3 CD+8表达显著升高（P＜0.01）;第7天各项指标基本恢复到化疗前水平;第20天CD+3、CD+3 CD+4、Th／Ts和CD+16 CD+56 表达较化疗前均显著升高（均P＜0.05）,而CD+3 CD+8表达显著降低（P＜0.05）。化疗未缓解组化疗前后各项指标的表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）。在肺癌组中,ⅢA期、ⅢB期与ⅠA期比较、淋巴结转移N3组与N0组比较,CD+3、CD+3 CD+4、CD+3 CD+8、Th／Ts和CD+16 CD+56 表达差异均有统计学意义（均P＜0.05）;不同病理分型间各项指标表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论　动态监测肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞可指导临床诊断和治疗,并有助于评估患者免疫功能状态。