介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

骨髓活检标本脱钙方法的比较

在病理外检制片和科研工作中,血液科送检较多的是骨髓活检标本,也是较难制片的组织之一。骨髓石蜡切片需经完全脱钙,才能制成理想的石蜡切片。如何合理有效地选择脱钙液,这对于制片的完整,保存骨髓细胞结构使ＨＥ染色清晰,提高骨髓制片质量是非常重要的。我科从１９９７年初开始采用混合脱钙液代替传统的５％硝酸用于骨髓活检标本脱钙,经实际应用效果良好。１　　材料与方法①　混合脱钙液［１］：甲醛１００　ｍｌ,甲酸８０　ｍｌ,盐酸７０　ｍｌ,三氯化铝６０　ｇ,冰醋酸２５　ｍｌ,生理盐水１００　ｍｌ。②　经１０％甲醛固…     

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法梁化印郭瑞峰杜双存刘颖成伟在常规病理切片中，骨组织的制片需在组织充分固定后，于脱水前用适宜的脱钙液脱钙。常规脱钙液品种较多，而脱钙方法并不多，且均耗时较长。特别是当被切制蜡块的软组织中有较大钙化灶时，极易损伤刀刃影响制片...     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

<正>骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实     

石蜡包埋中骨髓标准化脱钙的应用

骨髓活检是用一支特制的穿刺针在患者髂前上棘或髂后上棘处取出1.0～2.0 cm长、直径0.1～0.2 cm的圆柱形骨髓.骨髓富含钙盐、一定量的脂肪及少许纤维支架,具有组织小而硬、脆、松的特点,必须经过脱钙后才能进行石蜡包埋,制成骨髓切片.本实验经过长期实践,总结出一套骨髓标准化脱钙处理方法,操作安全简便,不仅制成了高质...     

表面脱钙法在骨髓组织病理诊断中的应用

<正>病理工作中常遇到骨或含骨的组织、伴大片钙化的组织,这些组织无法常规直接制片,传统方法是将这些组织固定后进行脱钙,使钙盐溶解组织变软后再脱水、透明、浸蜡、包埋制片。然而,常规脱钙处理往往导致组织染色效果欠佳、组织抗原丢失及DNA等核酸分子严重片段化等[1],有时     

骨和牙切片的甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法

骨和牙体组织非常坚硬,将其制成几微米薄切片难度较大。常用的方法是先脱钙,使组织变软后再切片,所以脱钙是非常关键的技术。脱钙不好切片破碎甚至切不成片,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,染色不佳甚至染不上色,无法进行观察和研究。脱钙液和脱钙方法虽然很多,但目前尚无公认的理想方法,为此我们在骨和口腔疾病诊断及在大骨节病、氟中毒骨病和很多口腔疾病实验研究中,证明甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法效果优良。     

盐酸脱钙法制作十二对脑神经标本

十二对脑神经的行程,分布较复杂,此种标本的剥制难度较大。本文就如何制作脑神经标本浅谈几点体会。１　材料准备采用经固定的尸体的头颈部,于第七颈椎高度切断,正中矢状剖开头颈,浸泡于１０％稀盐酸溶液中,半月后待骨质变软进行剥制。２　合理设计所用材料应保留大脑半球、间脑、小脑和脑干,锉开骨管时,要保留部分管壁以示脑神经的连脑部位。管内行程及出颅部位,还应尽可能在一侧头颈部显示脑神经。３　脑神经的显示方法３１　面神经的五个分支：剥去头面部皮肤后,在腮腺前缘沿颧弓下方１５厘米处找出颊支;沿下颌骨下缘寻…     

一种用于制作骨骼组织切片的新脱钙液

在日常病理工作中,对某些骨骼组织需作薄切片观察其细微结构,这就要对骨骼进行脱钙处理.通常使用的脱钙液有以硝酸、盐酸、甲酸为主配制的脱钙液、还有以铬酸和螯合剂配制的脱钙液.     

两种脱钙液对骨髓穿刺组织DNA质量的影响比较

<正>骨髓穿刺组织是病理科常见的标本,随着精准医学的发展和个体化治疗需求的增加,除了进行常规HE染色和免疫组化检测外,还需辅助分子生物学检测。良好的DNA质量是分子生物学检测的前提,脱钙液的选择对DNA质量有重要影响^[1],因此进行分子生物学检测前需要评估脱钙后骨髓穿刺组织DNA质量。混合酸脱钙液和EDTA脱钙液是本科室两种常用的骨髓穿刺组织脱钙液,在常规组织学染色方面已经取得良好的效果,但其对DNA质量的影响尚不清楚。本实验通过提取两种脱钙液脱钙骨髓穿刺组织的DNA,从浓度、纯度、片段长度及RT-PCR检测Ct值比较两种脱钙液对DNA质量的影响,取得较好效果,现报道如下。     

石蜡包埋组织块简易快速脱钙法

病理组织制片质量的优劣直接影响病理诊断，在临床病理活检和制片过程中，经常碰到骨组织脱钙不全或碎组织损伤刀口及病变软组织中夹带点状钙化灶，造成切片困难。笔者参考有关文献，在常规脱钙制片基础上不断改进，获得满意的效果，本法简便，快速易行，稳定可靠，有一定实用价值，现介绍如下。     

微波辐射下螯合剂脱钙技术在骨大切片制作中的应用

在骨病理技术中,去除骨组织中的钙盐即脱钙,是最关键的步骤,它直接影响到骨制片,特别是股骨头大切片的制作。为此我们对山羊股骨头组织用乙二胺四乙酸二钠(ＥＤＴＡ)作为脱钙液,在微波辐射下进行脱钙[1],经反复实验,将整个脱钙和制片过程在4ｈ内完成,做出高质量的骨组织大切片,取得了较为理想的效果。一、材料与方法1材料:本地山羊24只,雌、雄不限,体重≥20ｋｇ,出生时间≥10个月。实行手术通过不同程度的阻断血管后,观察股骨头在术后不同时期的病理变化。山羊处死后立即取出双侧的股骨头,用骨锯沿冠状切面锯开,取整个股骨头及干骺端切面,其…     

三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果的比较

<正>骨组织是一种致密的结缔组织,细胞基质含有大量钙盐沉积,质地坚硬^[1]。骨组织必须进行脱钙处理才能制片,而脱钙过度会导致骨组织的结构被破坏,相关细胞表面抗原丢失,严重影响HE染色制片和免疫组化制片效果,影响病理诊断^[2]。脱钙液种类繁多,且尚未有相关文献报道各种脱钙液表面脱钙效果的优劣。本实验拟采用临床工作中常用的三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果进行比较,为病理医师选用合适的表面脱钙液提供参考。     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

骨组织脱钙及其脱钙后染色的研究

近年来为配合白血病、淋巴瘤等疾病的诊断而开展了骨髓穿刺活体组织病理检查,特别是2003年以来,为了配合“非典”患者治疗后期相继出现股骨头坏死等病症的科研工作,我科先后为中国医学科学院实验动物研究所及中国人民解放军军事医学科学院等科研单位制作了大量实验动物的骨组织标本的病理学切片。在制作这些骨组织病理切片的“脱钙-染色过程中”遇到了一些问题：骨组织脱钙不足（脱钙液浓度过低、时间过短）造成组织太硬,不易切片且极易脱片;骨组织脱钙过度（脱钙液浓度过高,时间过长）严重影响骨髓组织细胞染色效果,造成细胞核无法正常着色,要么细胞核不着色或着色很浅亦或被伊红染成红色,从而影响对病变组织的病理诊断及实验动物的研究工作。为解决出现的上述问题,我们在工作中认真仔细地分析研究了骨组织的特点,经过反复实验,摸索总结出一套适用于骨穿组织及实验动物骨组织的“脱钙-染色方法”,并获得了满意的结果,现将将此方法作一简单介绍以供读者参考。     

微波辅助脱钙技术在猪脱钙骨基质制备中的应用研究

以猪后腿骨干骺端为对象,考察微波辅助脱钙技术在脱钙骨基质制备过程中的作用.以脱钙骨的脱钙率考察微波对脱钙效果的影响;利用Micro-CT和显微镜观察脱钙骨的大体三维结构;利用Micro-CT测量其孔隙率,利用显微镜及Digimizer3.1软件测量其孔径大小;利用物性测试仪测量脱钙骨的压缩模量以表征其力学性能.结果表明,脱钙骨脱钙率的测量结果显示,与传统脱钙法相比,微波制备法仅需2h就可使脱钙率达到100％,脱钙时间可缩短82％;且制备的脱钙骨具有良好的孔隙率和互相连通的孔径结构,孔隙率达到85％以上,孔径大小为( 345±76) μm,与传统制备方法无显著差异(P＞0.05);并具有良好的力学性能,在脱除90％以上的钙后脱钙骨的压缩模量仍可达到7.11 N/mm2.微波技术可以有效提高脱钙骨基质的制备效率,且制备效果良好,为微波技术在脱钙骨制备领域的应用提供了试验依据.     

微波快速脱钙及其脱钙液的选择

微波快速脱钙及其脱钙液的选择杨传红，赖晃文，唐赓云，姜秀英骨组织超薄切片的制备是进行骨组织超微结构研究的先决条件。常规脱钙方法时间太长且超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们选择不同脱钙液在微波条件下探讨快速脱钙的方法，以达到快速诊断的目的...     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程