神经元GABA合成、分解和分泌与癫痫发病的研究

目的 研究神经元的γ－ 氨基丁酸（GABA）合成、分解和分泌与癫痫发病的关系。方法 用致痫剂马桑内酯（CL）和抗痫剂苯妥英钠（PHT）处理培养大鼠神经元，用高效液相色谱仪，紫外分光光度计分别检测培养神经元内外的GABA浓度和神经元内γ－ 氨基丁酸转氨酶（GABA－T）活性。结果 与对照组比较，CL使神经元内GABA－T活性显著增强（P＜0．05），对神经元内外GABA浓度没有影响。与CL处理相似100μmol/L CL培养神经元24h）比较，PHT使CL致痫神经元内GABA－T活性显著减弱（P＜0．05），基本恢复到对照组水平。但神经元内外GABA浓度仍相对稳定。结论 癫痫发病中，痫性神经元合成、分解GABA增强，分泌GABA相对稳定。     

神经元Glu合成、分解和分泌与癫痫发病的研究

目的:研究神经元谷氨酸(Glu)合成、分解和分泌与癫痫发病的关系。方法:用致病剂马桑内酯(CL)处理培养大鼠海马神经元,用高效液相色谱仪、液体闪烁仪分别检测培养神经元内外Glu含量和神经元内谷氨酸脱羧酶(GAD)活性。结果:与对照组比较,CL致痫神经元内Glu浓度没有显著差异,神经元外Glu浓度显著升高(P<0.05),神经元内GAD活性显著增高(P<0.05)。结论:癫病发病中,痫性神经元Glu合成、分解、分泌增强。     

中枢组胺对戊四氮点燃大鼠海马GABA能神经元的影响

目的:探讨中枢组胺抗癫痫的作用机制。方法:应用免疫组织化学方法研究中枢组胺对戊四氮(PTZ)致癫痫大鼠海马神经元GABA、GAD67表达的影响。结果:戊四氮致痫组大鼠海马神经元GABA、GAD67的表达量明显低于正常对照组,L-组胺酸干预组明显高于戊四氮致痫组,L-组胺酸干预组与正常对照组之间差异无显著性意义。结论:中枢组胺通过激活海马GABA能神经元来抑制癫痫的发生和发展。     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的测定

为了探讨氨基酸类神经递质在癫痫发病中的作用,我们采用高效液相色谱仪（HPLC）结合紫外分光光度仪分析检测了马桑内脂（CL）致病大鼠大脑皮层、海马Glu、Asp、Gly、GABA的含量变化。结果显示：CL致痫组与正常对照组相比,Glu、Asp、Gly含量增加（P<0.01,P<0.05）;GABA含量减少,但差异无显著性（P＞0．05）。这些结果提示兴奋性和抑制性氨基酸在癫痫发病中具有重要作用,可能参与了惊厥的发生、发展和惊厥后神经元损伤。     

贝美格致痫大鼠皮层、海马γ—氨基丁酸和谷氨酸免疫反应细胞的改变

目的 γ－氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）是脑内重要的抑制性和兴奋性神经递质，二者与癫痫发作密切相关，为了阐明癫痫发病的病理生理机制。方法 我们采用免疫细胞化学及PAP法，观察了贝美格（Bemegride,Be)腹腔致痫大鼠顶叶大脑皮层、海马CA1、CA3、齿状回Glu和GABA免疫反应细胞的改变。结果 图像分析结果显示：Be致痫组大脑皮层、海马Glu免疫反应平均阳性细胞数及光密度较正常对照组明显增加（P＜0．01）；GABA细胞数及光密度减少（P＜0．01）。结论 提示贝美格致痫作用与调节脑内GABA和Glu系统的兴奋性有关。     

致痫大鼠海马神经元氨基酸类物质含量变化的研究

目的 研究癫痫发病中海马神经元氨基酸类物质的合成，分泌情况，探索癫痫发病的可能机制。方法 用马桑内酯致痫培养大鼠海马神经元细胞，用高效液相色谱法测定培养神经元细胞内外谷氨酸（Glu) ,天门冬氨酸（Asp)，γ-氨基丁酸（GABA），甘氨酸（Gly）的含量。结果 致痫海马神经元细胞Glu合成相对增加，分泌显著性增加（P＜0．01）；Asp合成没有明显增加（P＞0．05），或相对养活，分泌显著性增加（P＜0．01）；GABA分泌显著性减少（P＜0．01），合成相对地减少；Gly合成分泌有显著性减少（P＜0．01）。结论 癫痫发病中，痫性神经元细胞合成和／或分泌异常是癫痫发病中氨基酸类神经递质平衡紊乱的基础。     

癫痫状态大鼠海马HSP70mRNA及GAD67mRNA表达水平的研究

目的 研究癫痫演变过程中特定脑区选择性神经元损伤与修复机制。方法 采用分子杂交方法动态观察了马桑内酯（coriaria Lactone,CL)诱导的癫痫状态大鼠海马区早期神经元损伤标志物热休克蛋白（heat shock protein,HSP)70mRNA及谷氨酸脱羧酶（glutamin acid decarboxylase,GAD)67mRNA表达水平的变化,同时也观察了大鼠行为学及脑电图改变。结果 侧脑室注射CL后20分钟,大鼠出现连续发作的四肢抽搐伴有EEG持续性的棘慢波及尖波发放。注射CL后2小时组大鼠海马GAD67 mRNA表达水平有所降低,但HSP70mRNA变化不明显,注射CL后8小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平有所降低,但HSP70mRNA表达变化不明显,注射CL后8小时组大鼠海马GAD67mRNA表达水平明显低于对照组（P＜0．01）,HSP70mRNA表达水平较对照组明显增高（P＜0．01）。结论 癫痫状态期间大鼠海马区可能存在神经元损伤与修复过程,而且GABA能神经元受到不同程度的损伤。     

重复经颅磁刺激预处理对毛果芸香碱致痫作用及海马GAD65表达的影响

目的：观察0．5Hz经颅磁刺激预处理对毛果芸香碱致大鼠癫痫作用的影响及可能机制。方法：将大鼠随机分为0．5Hz重复颅磁刺激（rTMS）组和对照组,分别进行连续2周的相应预处理后腹腔注射毛果芸香碱,观察注药后90min内痫性发作潜伏期和痫性发作行为表现。应用免疫组化学方法观察两组大鼠海马区谷氨酸脱羧酶65（GAD65）的表达。结果：①与对照组相比,rTMS组癫痫发作潜伏期明显延长,发作程度显著减轻（均P〈0．05）;②与对照组相比,rTMS组大鼠海马区表达GAD65神经元的数量明显增多（P〈0．05）。结论：0．5HzrTMS预处理有明显抗癫痫作用,而海马区GAD65阳性表达神经元的增加可能是其抗瘸机制之一。     

青霉素对体外培养鼠脑γ－氨基丁酸能神经元及胶质细胞的影响

以免疫细胞化学方法观察了分离培养４天、１０天鼠大脑皮层、海马ＧＡＢＡ能神经元以及ＧＦＡＰ免疫反应阳性星形胶质细胞对大剂量致痫剂青霉素（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｎ，ＰＥＮ）的反应。结果大剂量ＰＥＮ（３００μ／ｍｌ培养液）可引起培养海马及皮层γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）能神经元数目明显减少，星形胶质细胞显著增生，且尤以海马胶质细胞增生明显。提示：（１）脑内尤其海马区星形胶质细胞增生与癫痫发生、发展有一定的关系；（２）传统致痫剂ＰＥＮ可能是通过抑制ＧＡＢＡ能神经元功能、刺激星形胶质细胞增生，从而导致癫痫发作     

点燃癫痫模型中颞区脑组织GAD基因表达的研究

目的：探索癫痫发生与谷氨酸脱羧酶（GAD）基因表达的关系。方法：采用印防己毒（PTX）腹腔注射致SD鼠慢性点燃模型，将SD鼠分为对照组、癫痫发作组、发作间期组和苯巴比妥钠干预组。RT－PCR半定量方法检测颞区脑组织GAD67和GAD65 mRNAs表达水平。结果：癫痫发作期和发作间期颞区脑组织GAD67和GAD65 mRNAs表达水平较对照组均明显升高（P＜0．05），以GAD65 mRNAs表达水平在发作期升高最明显（P＜0．01），而药物干预组颞区脑组织GAD mRNA表达水平无明显变化。结论：在该模型中，GAD基因表达水平改变与癫痫发作密切相关，提示GABA能神经元的抑制功能增强是顶体重要的内源性抗癫痫机制。苯巴比妥钠可以预防癫痫的发生，从而阻止脑组织GAD基因表达代偿性增强。