利用耐热法测定血清LDH_1

乳酸脱氢酶同工酶I(以下简称LDH_1)是来自心肌的H_4型乳酸脱氢酶。分离LDH_1的方法很多,如电泳、层析和免疫技术等,其中利用电泳技术较有效,但需要扫描光密度计,基层医院由于受到设备的限制、难于开展。我们利用LDH_1在65C具有热稳定性的特点,用耐热法测定血清LDH_1,并应用此法对部份正常人与急性心肌梗塞患者血清LDH_1活性变化作了观察。此外,耐热法测定血清LDH_1的结果还与电泳法作了对比;利用动物离体心肌、肝脏组织匀浆按此法     

房水和血清乳酸脱氢酶及其同工酶测定的临床应用价值

本文对43例房水和血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶(LDH_i)进行了测定,视网膜母细胞瘤(Rb)组房水LDH 活性均值为6064.5u/dl。超过正常值者占87.5%,房水与血清比值为16.5,LDH_i 以LDH_3、LDH_4增高为主,与老年性白内障及其他眼病组不同.本法对诊断Rb 有较大的应用价值.     

LDH_5对胆囊炎的辅助诊断意义初探

乳酸脱氢酶催化反应是碳水化合物代谢中无氧糖酵解的最终反应,广泛存在于人体各种组织之中。以人体各种组织进行乳酸脱氢酶同功酶电泳可得5条同功酶的区带,分别称为:LDH_1;LDH_2;LDH_3;LDH_4;LDH_5(以下简称为LDH_(1～5))。因LDH_(1～5)     

乳酸脱氢酶同工酶电泳中的异常区带

乳酸脱氢酶(LDH)是由H和M两种亚基构成的四聚体。两种亚基构成了LDH同工酶的五种多体。根据电泳迁移率的不同可分为:LDH_1(H_4)、LDH_2(H_3M)、LDH_3(H_2M_2)、LDH_4(HM_3)和LDH_5(M_4)。LDH同工酶电泳被广泛用来诊断特定器官的损伤。LDH_1主要含在心肌中,LDH_5主要含在骨骼肌及肝中。另外,正常睾丸组织(精液)中还含有LDH-x,是一种线粒体特异酶。自从1959年Agress提出LDH作为诊断急性心肌梗塞的有用指标以来,对血清LDH和LDH同工酶的测定迅速开展起来。随着LDH同工酶的广泛临床应用,许多作     

乳酸脱氢酶同工酶与职业中毒性肝损害

乳酸脱氢酶(LDH)同工酶是由具有相同分子量(35000)的M亚基(LDH-A基因编码)和H亚基(LDH-B基因编码)非共价结合形成的5种四聚体。据其电泳迁移率的快慢依次命名为LDH_1(H_4),LDH_2(H_3M),LDH_3(H_2M_2)LDH_4(HM_3)和LDH_5(M_4)。Bruin认为血清中同工酶酶谱分布图象与受损器官的同工酶酶谱图象非常相似,从而为应用LDH同工酶检测某些器官的损害提供了科学依据。LDH同工酶与肝病的关系已有不少报道,与职业中毒性肝损害的关系也日益受到人们的重视。现将有关资料综述如下。     

血清乳酸脱氢酶同功酶测定在肝胆疾病中的诊断意义

本文应用醋纤薄膜电泳法测定正常人、肝胆疾病和急性病毒性心肌炎患者共244例的血清乳酸脱氢酶(LDH)同功酶。结果心肌炎时67%的病例LDH_1>LDH_2,无1例LDH_5>LDH_4;肝病患者则大部分LDH_5>LDH_4,在排除肌病的情况下,LDH_5升高提示肝病存在,且LDH_5的升高幅度和异常率与肝病的严重程度有关;胆系疾病很少LDH_5>LDH_4;肝癌多数病例LDH_5>LDH_4,且LDH总活力往往明显升高。作者认为分析LDH同功酶谱有助于肝胆疾病的诊断和鉴别诊断。     

血清肌红蛋白对急性心肌梗塞诊断的意义及免疫学检测方法

目前临床对急性心肌梗塞(AMI)的诊断,主要依据临床症状、心电图(ECG)及血清谷-草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)与其同功酶(LDH_1/LDH_2)、肌酸磷酸激酶(CPK)与其同功酶(CPK-MB)等酶学检查而进行。现尚缺少一种能早期、敏感、特异,并又能对梗塞灶的大小作出定量估价的实验室诊断方法。而目前普遍认为,早期测定梗塞灶的大小(梗塞     

血液“濒亡标志物”醇脱氢酶同工酶的鉴定

目的 鉴定血清乳酸脱氢酶（LDH；EC1.1.1.27)同工酶检测中出现的第6条带“LDH6”蛋白性质，探讨其活性升高时的临床意义。方法 将正常人肝组织匀浆，肝癌组织匀浆与血清作琼脂糖凝胶电泳分离，提纯“LDH6”，聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其相对分子质量。再经免疫印迹验证其抗原性。并检测37例患者中LDH6活性占LDH总活性有百分比。结果 肝级织匀浆，肝癌组织匀浆的“LDH6”与血清“LDH6”为同一物质，为醇脱氢酶同工酶Ⅱ（alcohol edhydro-genase,LDH:EC1.1.1.1)，相对分子质量为80kD，34例ADH活性≥LDH总活性7.9%的病人一周内即死亡，死亡率达91.9%(34/37)。结论 LDH6即为ADH，ADH活性在血清中上升可能是一种新的“濒亡标志物”。     

乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳测定法

本文介绍的琼脂糖凝胶电泳分离,测定乳酸脱氢酶同工酶方法,具有操作简单,试剂易配易存等优点,呈色区带清晰稳定而底板无色透明,适宜进行光密度计定量。文中另介绍了图谱的制板及制图纸的方法,适用于设备简单的实验室,为临床直观报告及玻片外送测定提供了方便。本方法重复性较好,血清用量极少并适用于胸、腹水等体液的测定。应用本法测得35名正常人血清中LDH_1为35.0±4.3,LDH_2为38.0±6.8,LDH_3为19.8±2.2,LDH_4为3.7±1.7,LDH_5为3.3±1.5。     

人体精液中乳酸脱氢酶同工酶的相对活力测定及其应用

乳酸脱氢酶(LDH)同工酶具有相对的组织特异性。1963年Blanco 和Goldlerg 在人精液中发现了LDHx 同工酶,该酶只存在于生精细胞和精子中,位于LDH_3与LDH_4之     

血清乳酸脱氢酶及其同工酶测定在冠心病中的应用

乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,简称:LDH;EC 1.1.1.27)是Meyerhof于1919年首先发现的.1954年血清LDH活力的测定被引入临床酶学领域之中,1959年开始采用LDH同工酶作为诊断急性心肌梗塞(AMI)的指标.三十多年的临床研究和应用业已证实,血清LDH总活性及LDH_1LDH_2比值测定是诊断AMI最有价值的酶学指标之一.近十余年来,LDH及其同工酶测定仍为国内外学者所关注,对其在冠心病的诊断,鉴别诊断及预后判断诸方面进行了广泛、深入的研究,现简介如下.     

小柱层析法分离测定血清乳酸脱氢酶同工酶

本文参照Meiyung氏方法,结合国内条件,建立小柱层析法分离血清LDH同工酶,各高峰部分经PAGE证明,所得LDH同工酶依次为LDH_5、LDH_4、LDH_3、LDH_2、LDH_1,分离效果良好。两份高低LDH 活力标本的回收率分别为111.2%和99.6%。LDH总活力、LDH_1和LDH_5的变异系数分别为2.75%、5.27%和7.16%。与醋纤膜电泳法同时测定30份血清LDH 同工酶活力,LDH_1平均值分别为80.8±10.6和79.97±9.76(p>0.01)r=0.8857;LDH_5平均值分别为19.84±5.58和10.77±3.01(p<0.01),r=0.9875。本法优于醋纤膜电泳法。     

血清中的巨酶与临床

血清中有时可出现分子量远大于正常酶分子的一些酶,通常称为巨分子酶或酶的大分子形式,简称为巨酶(Macroenzyme).近年来发现,血清中某些巨酶具有重要的诊断价值,某些巨酶却易导致临床疾病的误诊.现分述如下.巨乳酸脱氢酶(EC1.1.1.27,MLDH)LDH是一组由分子量为35000的两种亚基(H 肽键和M 肽链(组成的四聚体(H_4,H_3M,H_2M_2,HM_3和M_4),据其向阳极泳行的速率依次称为LDH_1,LDH_2     

在一例CK-BB同工酶增高的患者出现LDH_6带

作者最近发现一例77岁男性脑震荡患者血清出现 LDH_6带并伴有 CK-BB 同工酶增高。该患者 CK 总活性为368U/L(正常0～178U/L),LDH 总活性2010U/L(正常100～225)。醋纤膜电泳分析(Helena 系统)CK 同工酶的结果为:CK-MM 76%、CK-MB 6%、CK-BB 18%。LDH 同工酶电泳(Helena 法)显示出6个非常明晰的区带:LDH_1 10.4%、     

抗乙醇脱氢酶抗体ELISA法的建立及其对自身免疫性肝炎诊断的价值

目的 建立血清抗乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)抗体ELISA法,并评价抗.ADH在诊断自身免疫性肝炎(AIH)中的价值.方法 用免疫印迹试验对酵母ADH与人血清抗.ADH之间的反应性进行验证.用酵母ADH建立检测血清抗-ADH的ELISA法.以67例AIH、94例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、199例慢性乙型肝炎(CHB)、132例慢性丙型肝炎(CHC)、24例酒精性肝病(ALD)和99例结缔组织病(CTD)患者及31名健康对照者为研究对象,对其血清中的抗-ADH进行检测并统计其阳性率,阳性率的比较用χ2检验.结果 建立了一种检测人血清抗-ADH的ELISA法,并确定了最佳反应条件;免疫印迹试验证实酵母ADH与人血清抗-ADH有良好反应性.AIH患者血清抗-ADH阳性率为59.7%(40/67),高于健康对照组(0,χ2=31.271,P<0.05)、PBC组(6.4%,χ2=54.492,P<0.05)、CHB组(14.1%,χ2=54.848,P<0.05)、CHC组(21.2%,χ2=29.269,P<0.05)、ALD组(25.0%,χ2=8.512,P<0.05)和CTD组(43.4%,χ2=4.229.P<0.05).结论 AIH患者血清中抗-ADH阳性率高于其他肝病和某些自身免疫性疾病患者,可能对AIH有一定辅助诊断价值.     

己二醇抑制法直接测定血清LDH_1活性

本文采用1,6一已二醇具有抑制LDH 分子中M 亚基的特点,介绍了直接测定LDH_1同工酶的方法。1,6一己二醇最终浓度0.7mol/L 时可完全抑制LDH_2～LDH_5活性。应用生化分析仪,自配LDH 试剂,分别测定血清中LDH 活性及用已二醇处理后的血清中LDH_1 同工酶活性。本文测定了健康人40例,LDH 为191±27.62U/L,LDH_151.89±13.33U/L,LDH_1占LDH27.17±5.91%。12例急性心肌梗塞患者,LDH706.33±436.76U/L,LDH_1395.83±175.45,LDH_1占LDH56.04±28.67%。变异系数为4.40～6.06%,平均回收率为96.97%。用本法和常规电泳法分别测定了50例血清LDH_1同工酶,r=0.929,y=0.867x+7.1。本文对自配LDH 试剂,在GEMSTAR生化分析仪上的应用进行了评价。     

心梗和肝病血清乳酸脱氢酶同工酶图型变化的分析

作者测定了68例心梗(AMI)及172例肝脏疾病的血清LDH总活力和LDH同工酶图型并与90名正常人的图型进行了比较分析。68例AMI的图型为LDH_1↑、LDH_2↓、LDH_1/LDH_2比值>1.8;52例肝癌的典型图型倾向于LDH_1↓、LDH_2↓、LDH_3↑、LDH_5↑;54例急性肝炎的典型图型为LDH_1↓、LDH_2↓、LDH_5↑。66例肝硬化的典型图型为LDH_2↓、LDH_5↑。各同工酶仍保持正常的百分率、称为同型性图型。     

自配LDH1试剂在自动生化分析仪上的应用

乳酸脱氢酶同功酶1(LDH_1)的测定对诊断心肌梗塞等疾病具有重要价值。Pettersson T等提出心肌梗塞患者发病后24～48小时内测定LDH_1的特异性和灵敏度分别为97～98%和94～95。现在我国使用的LDH_1试剂均由国外进口,价格昂贵,针对这个问题,我室根据Tanishima K等介绍的方法,自配试剂,现将自配试剂的应用情况报道如下。     

连续监测法测定乙醇脱氢酶及其对肝脏疾病的诊断意义

目的探讨用改良方法测定乙醇脱氢酶(ADH)诊断肝脏疾病的意义。方法用生化自动分析仪、酶速率法测定各类肝损坏患者的血清ADH变化。结果用空白吸光度A:340nm<0.5,精密度(正常水平4.2U/L)CV:4.68%,线形0~100U/L,对临床各类肝病176例作测定,其中急性病毒性肝炎阳性率100%,一氧化碳中毒性肝坏死阳性率100%。ADH与肝细胞损坏之间有高度的相关性。结论改良后的酶速率法检测ADH临床试验效果理想。     

血清乙醇脱氢酶活性测定及其临床意义

本文建立一种用自动生化分析仪双试剂法检测血清乙醇脱氢酶（ADH）活性的方法。同时对100例肝功正常者与9例原发性肝癌、10例肝硬化、40例肝炎患者测定血清该酶活性。在反应体系中，NAD 和乙醇浓度分别为10．0mmol／L和25．0mmol／L，缓冲液为pH9．00的0．1mol／L甘氨酸-NaOH溶液。ADH对NAD 和乙醇的Km值分别为1．67mmol／L和3．03mmol／L。批内CV为0．7％～5.4％。肝功正常者血清ADH活性为1．4±1．2U／L。原发性肝癌为11．4±2．5U／L，肝硬化为4．6±1．5U／L和肝炎为5．5±1．6U／L。这些患者血清ADH活性显著高于肝功正常者。原发性肝癌患者血清ADH活性显著高于肝硬化和肝炎患者。这种简便、准确、灵敏的测定ADH活性方法可用于临床常规分析。