G—CSF和IL—6联合应用协同促进受照小鼠造血功能恢？…

目的 探讨Ｇ－ＣＳＦ和ＩＬ－６联合应用协同促进受辐射小鼠血血功能恢复的作用及机理。方法 采用Ｆ８００血细胞自动计数仪计数红细胞、白细胞、血小板和血红蛋白等指标。常规法进行骨髓集落培养,内生脾结节计数,琼脂糖电泳方法检测骨髓细胞程序性死亡。结果 Ｇ－ＣＳＦ和ＩＬ－６联合应用促进受辐射小鼠外周血细胞的恢复,促进脾脏内源性脾结节的形成,增加骨髓细胞含量和促进骨细胞ＧＭ－ＣＳＦ的形成,提高受辐射小鼠的生存     

南京“5.7”192Ir源放射事故患者造血系统的改变

目的 通过对南京¹⁹²Ir源放射事故中患者的血液系统进行观察研究,探讨造血系统损伤规律,为核与辐射事故医学应急的救治和随访提供临床资料和积累经验。方法 应用血细胞分析仪动态观察患者的白细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数及血红蛋白值的变化,取其双侧髂骨骨髓涂片观察骨髓象的改变,采用PCR-以测序为基础的分型技术(PCR-SBT)方法检测融合基因突变情况;分别采用流式细胞术和放射免疫分析法测定T淋巴细胞亚群百分率和血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)、补体(C3、C4)含量,评价细胞免疫和体液免疫功能。结果 患者骨髓造血轻度障碍,予以粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗后,短时间内恢复正常,受照后约40 d进入恢复期;受照侧骨髓增生低下;融合基因检测未检测到突变;局部感染导致淋巴细胞计数及免疫功能下降。结论 轻度骨髓型急性放射病造血系统损伤较小,病程分期不明显,造血功能恢复较快,尚未造成免疫抑制,但局部感染可导致免疫功能下降。临床医生需注意全身治疗与局部治疗的统一。     

细胞因子联合对4.5 Gy γ射线照射 比格犬的实验治疗作用

目的 观察细胞因子新的组合(rhG-CSF+rhIL-11+rhIL-2)对骨髓型急性放射病(ARS)比格犬的治疗作用。方法 以4.5 Gy  ⁶⁰Co γ射线照射比格犬制备骨髓型ARS动物模型,动物分为照射对照(5只)、综合对症(5只)和综合对症加细胞因子治疗3组(6只),通过观察动物体征、存活时间、存活数以及动物造血及胃肠道等脏器的恢复情况,分析细胞因子联合治疗效果。结果 4.5 Gy  ⁶⁰Co γ射线照射后,比格犬出现食欲下降、发热、精神状态差和柏油便等症状,照射对照组动物于照射后2周内全部死亡,平均存活(12.7±1.4)d;综合对症组呈现明显的急性放射病症状,并于照射后第33天死亡1只;而综合对症加细胞因子组动物在45 d观察期内不仅全部存活,临床症状明显改善,且其造血功能及胃、肠道等受损组织基本恢复。结论 在综合对症基础上给予rhG-CSF+rhIL-11+rhIL-2组合治疗可以有效地促进4.5 Gy ⁶⁰Co γ射线照射比格犬造血系统功能和胃肠道等重要脏器的恢复,提高受照动物存活数,并改善动物生存质量。     

γ射线全身照射后小鼠骨髓造血细胞IL-3基因表达的原位PCR检测及其意义

目的 探讨内源性IL-3基因表达在骨髓辐射损伤后修复中的作用。方法 5.5Gy<⁶⁰Coγ射线全身照射78只LACA小鼠, 于照射后4周内分批活杀, 将骨髓进行HE染色, 并进行内源性IL-3基因表达的免疫组化、原位杂交和原位反转录PCR检测。结果 照射后4周内小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象。免疫组化观察IL-3于修复期造血细胞浆内明显增多, 尤以照后21天其量达高峰, 而原位杂交则显示其mRNA于照射后10～21天为弱阳性, 尤以照射后15天明显。原位反转录PCR显示IL-3mRNA于修复期造血细胞浆内明显增多, 尤以照射后10～15天为甚。结论 原位反转录PCR能客观反映IL-3基因表达在骨髓辐射损伤后的变化规律, 且内源性IL-3基因表达在骨髓辐射损伤后造血功能重建中可能起明显促进作用。     

rhIL-11和rhG-CSF对中子照射致小鼠骨髓损伤的治疗作用

目的 探讨rhIL-11和rhG-CSF对中子照射致小鼠骨髓损伤的治疗作用。方法 将BALB/c小鼠130只用随机数字表法分为对照组(30只)、照射组(40只)、rhIL-11治疗组(30只)、rhIL-11+rhG-CSF治疗组(30只),用3.0 Gy中子照射,并于照射后给予600 μg·kg^－1·d^－1 的rhIL-11和50 μg·kg^－1·d^－1的rhG-CSF,1次/d,共3 d;用血细胞自动分析仪、HE染色、AgNOR染色、流式细胞术、免疫组织化学染色和图像分析等,检测小鼠外周血细胞、骨髓病理形态变化、有核细胞计数、AgNOR含量、凋亡与坏死率和Bax蛋白含量的变化。结果 照射组和rhIL-11治疗组于照射后6 h～3 d,小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞计数和AgNOR含量进行性下降,Bax蛋白于造血细胞胞质内呈阳性至强阳性表达,含量进行性增加(F=0.003,P＜0.01);照射后6 h,照射组小鼠造血细胞凋亡与坏死率增加,以坏死为显著;照射后3 d,rhIL-11+rhG-CSF治疗组小鼠的骨髓有核细胞计数和AgNOR含量均增加(F=0.037、0.026,P＜0.05),Bax蛋白含量减少(F=0.018,P＜0.05);rhIL-11治疗组各指标较照射组差异无统计学意义。结论 3.0 Gy中子照射可使小鼠骨髓造血功能严重受损,rhIL-11和rhG-CSF对照射后小鼠的造血功能恢复有一定改善作用,联合使用效果优于单独使用。     

红景天苷对急性辐射损伤小鼠骨髓脂肪细胞生成的影响

目的：探讨红景天苷抑制辐射诱导小鼠骨髓脂肪化、促进辐射后造血恢复的情况,并研究其可能的机制。方法：取6~7周龄健康BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、单纯照射组、药物干预组,每组各20只。辐射对照组和实验组均给予6.0 Gy ⁶⁰Co γ射线辐射处理,实验组于辐射后12 h腹腔注射红景天苷（30 mg·kg^-1·d^-1）至照后8 d,辐射对照组腹腔注射等体积生理盐水。辐射后14 d观察小鼠的一般情况、体重变化、外周血象,并取股骨制作骨髓切片观察骨髓病理改变,测定脂肪细胞面积,分离骨髓单个核细胞后提取总RNA,荧光定量PCR（q-PCR）检测PPAR-γ和FABP4 mRNA的相对表达量。结果：单纯照射组小鼠在照射后均出现外周血白细胞降低、血小板减低,骨髓脂肪细胞过度增生,骨髓有核细胞减少等骨髓造血抑制改变。与单纯照射组小鼠比较,红景天苷能改善照射后小鼠一般情况,并通过抑制PPAR-γ、FABP4的表达（t=8.64、13.19,P<0.05）,抑制骨髓脂肪细胞的过度增生,减少脂肪空泡面积（t=13.31,P<0.05）;照后7 d,药物干预组小鼠外周血白细胞计数高于单纯照射组（t=5.80,P<0.05）;照后14 d,药物干预组小鼠外周血白细胞计数较单纯照射组及照后7 d药物干预组小鼠外周血白细胞计数均有增高（t=13.78、7.54,P<0.05）,同时血红蛋白较单纯照射组高（t=14.66,P<0.05）。结论：红景天苷能抑制急性辐射损伤小鼠骨髓脂肪细胞生成,调节骨髓微环境,从而促进辐射损伤后小鼠造血恢复。     

rhGM-CSF、rhEPO在3例急性放射病患者救治中的应用

目的 观察rhGM-CSF、rhEPO在3例急性放射病(ARS)救治中的疗效。方法 一例重度ARS患者使用了rhGM-CSF和rhEPO,另两例中度ARS患者仅用rhGMCSF.3例患者均在照后10d、79d检测血清GM-CSF、EPO浓度。结果 使用rhGMCSF后,外周血白细胞下降速度慢,低值持续时间短,回升速度快,骨髓恢复时间提前。使用rhEPO的患者,外周血网织红细胞为0的持续时间明显缩短,骨髓红系增殖池比例增加。3位患者照后10d血清GM-CSF、EPO浓度明显升高,并与受照剂量及骨髓损伤程度相关。结论 rhGM-CSF、rhEPO的应用促进了3例ARS患者造血功能恢复。     

间充质干细胞促进半相合骨髓移植治疗急性放射病小鼠的实验研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)促进半相合造血干细胞移植(haploid-SCT)治疗急性放射病小鼠的作用及机制。方法 ⁶⁰Co γ射线照射BALB/C(H-2^d)雌性小鼠8Gy,单独输注半相合CB6F1(H-2 bd) 雄性小鼠骨髓细胞1×10⁹/kg(I组),或联合CB6F1 雌性小鼠MSCs不同数量级1.5×10⁸/kg (a组)、5×10⁷/kg (b组)和2.5×10⁷/kg (c组)治疗,比较放射病小鼠的生存分析。同时,MSCs组小鼠尾静脉输注经cm-DiI膜染剂标记的CB6F1雌性小鼠MSCs和CB6F1雄性小鼠的骨髓细胞,与只输注CB6F1骨髓细胞的对照组比较,观察移植后不同时间供者细胞在受者骨髓的植入率、供者MSCs在受者体内发布、外周血象、T淋巴细胞亚群、胸骨骨髓病理和慢性移植物抗宿主病(GVHD)发生情况。结果 a组小鼠早期死亡率增加;b和c组存活率高于I组(P<0.05),但二组之间差异无统计学意义。移植后30 d,MSCs组受者骨髓的sry基因高于对照组。移植后MSCs主要集中在胸腺、骨髓、肝和小肠中,有形态改变。MSCs组的白细胞、血小板恢复较快。照射后15和30 d,MSCs组小鼠骨髓腔中的巨核细胞明显高于对照组。移植后7、14和30 d,MSCs组CD3高于对照组(P<0.05);移植后14和30 d,MSCs组CD4阳性细胞率和CD4/CD8值高于对照组(P<0.05)。MSC组慢性GVHD症状出现较对照组晚30 d。结论 MSCs通过促进干细胞植入,改善造血微环境,促进造血恢复,加快T淋巴细胞的恢复,延缓GVHD的发生时间和促进放射损伤的组织器官的修复,加强了半相合骨髓移植对急性放射病的治疗作用。     

重组人骨形成蛋白-2在造血损伤治疗中作用机制的探讨

目的 探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)在治疗造血损伤中的作用机制,构建探针并通过原位杂交技术观察rhBMP-2治疗小鼠急性造血损伤的作用。方法 将22只BALB/c雌性小鼠随机分为照射组和骨形成蛋白治疗组。把正常雄性小鼠的骨髓细胞移植给接受8.5 Gy ⁶⁰Coγ 射线照射的22只BALB/c雌性小鼠。14 d后,剩余存活的雌性小鼠左股骨再接受9 Gy的电子线照射。骨形成蛋白治疗组小鼠每天每只腹腔注射重组人骨形成蛋白-2 20 mg/kg,连续治疗6 d,照射对照组每天每只腹腔注射等量生理盐水。14 d后,处死小鼠并取股骨制成石蜡切片。用原位杂交技术检测雌性小鼠股骨中雄性供体小鼠的骨髓细胞。结果 原位杂交结果显示,照射组小鼠左股骨骨髓中的供体来源细胞数量明显比骨形成蛋白治疗组小鼠左股骨骨髓中多(T=155.0,P<0.05)。而照射组小鼠左股骨骨髓中供体来源细胞数量与2组小鼠右股骨骨髓中相比则无明显差异(T=92.0、78.5,P>0.05)。骨形成蛋白组小鼠左股骨骨髓中的供体来源细胞数量明显比两组小鼠右股骨骨髓中少(T=155.0、55.0,P<0.05)。结论 rhBMP-2促进了自身受损伤的骨髓细胞修复,故在骨形成蛋白组小鼠的左股骨骨髓中几乎检测不到供体雄性小鼠SRY基因的存在。推测rhBMP-2促进了自身骨髓间充质干细胞增殖或分化,并改善造血微环境,加快造血修复、重建的过程。     

辛伐他汀对急性放射损伤小鼠骨髓造血恢复的影响

目的 探讨小鼠受到照射后,辛伐他汀对骨髓造血功能恢复的影响。方法 将66只8周龄清洁级健康昆明小鼠随机分为3组。正常组不做任何处理;对照组和辛伐他汀组于6.0 Gy ⁶⁰Coγ线一次性全身均匀照射后, 分别胃饲等体积的生理盐水和辛伐他汀(16 mg/kg,1次/d),直至处死。于照射后第3、7、10、14 天检测小鼠外周血细胞数和骨髓有核细胞数,并用流式细胞仪检测骨髓有核细胞中CD34+细胞百分率,测量骨髓造血面积,观察照射后第10天小鼠脾集落形成单位(CFU-S)数及第28天骨小梁的变化。结果 照射后第3、7、10、14 天辛伐他汀组小鼠外周血白细胞数、血小板数、骨髓有核细胞数和骨髓CD34+细胞率均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),而外周血红细胞数无明显差异。照射后第28天辛伐他汀组小鼠骨小梁的数目明显多于对照组。辛伐他汀组小鼠CFU-S数(11±3)个显著高于对照组(4±3)个。2组小鼠骨髓造血面积随时间的变化差异有统计学意义(P<0.05)。结论 辛伐他汀能够促进急性放射病小鼠成骨细胞增生、增加骨髓CD34+细胞率并促进骨髓造血功能的恢复。     

Late Effects of X-irradiation on Haemopoietic Stem Cells in CBA/H Mice

Summary

CBA/H male mice have been used to study the recovery of haemopoietic stem cells following 3 Gy whole-body X-irradiation. Despite significant proliferation haemopoietic stem cells (measured as spleen colony-forming units or CFU-S) did not recover to control values and their numbers remained sub-optimal at 600 days post-irradiation. At this time there were significant increases in both proliferation and self-renewal characteristics of the CFU-S but no impairment of the capacity of bone marrow cells to rescue and repopulate lethally irradiated transplant recipients.     

Identification and Follow-up of Homologous and Heterologous Bone-marrow Transplants in Radiation-chimeras

Summary

Using differences in the electrophoretic pattern between host and donor haemoglobins, the proliferation of grafted erythropoietic cells has been studied in irradiated mice treated with homologous bone marrow. The results have been compared with observations made after the transplantation of rat bone marrow into irradiated mice.

A complete replacement of host erythrocytes by donor-type cells took 60–70 days in mice treated with rat bone marrow. In mice treated with homologous bone marrow, host-type haemoglobin could no longer be identified after about 50 days. In the latter case the complete replacement must have taken somewhat longer, since the method used to identify haemoglobins is not sensitive enough to detect small amounts of one type of haemoglobin in the presence of large amounts of the other.

In mice treated with rat bone marrow a considerable number of total and partial reversals occurred after 675–700 r. Only a few partial reversals were found after 800 r. Under similar conditions no reversals were observed after homologous bone-marrow transplantation.

It is concluded that the recovery of the host's haematopoietic system depends upon the dose of radiation as well as on the antigenic difference between the host and the donor.     

低剂量照射对小鼠骨髓移植造血功能的影响

目的探讨低剂量照射促进小鼠骨髓移植后受体造血功能的重建。方法通过对小鼠体外骨髓细胞进行不同剂量的照射，用^3H-TdR掺入法确定产生最佳刺激增殖效应的照射剂量。在骨髓移植前，对供体小鼠骨髓细胞给予最佳刺激剂量的照射，然后将被照射的骨髓细胞输入受体小鼠内，最后动态监测受体小鼠的外周血细胞和骨髓单个核细胞数量。结果在离体情况下，经6和8cGy低剂量照射的小鼠骨髓细胞增殖能力明显增强。用低剂量照射的骨髓细胞进行骨髓移植后，受体小鼠骨髓单个核细胞数和外周血细胞计数普遍高于相应的对照组。结论低剂量照射可能促进小鼠骨髓移植后受体造血功能的重建。     

Retention of 241Am by Some Endocrine Organs of the Rat and Its Response to DPTA-treatment

Summary

The effect of chronic irradiation on T and B cell numbers and function was studied in mice. Cobalt 60 gamma radiation at 6 R/hour reduced the numbers of anti-SRBC PFC in the spleen, with minimal levels recorded after total exposures of 1000–2000 R. Recovery was incomplete after 1000 R, reaching only 40–50 per cent of normal in four months and remaining at that level for the animal's lifetime. The long-term deficiency in PFC formation was not due to a quantitative lack of T or B cells since normal cell numbers were observed in the spleen 60–144 days after 1000 R. Adoptive transfer studies with combinations of bone marrow and thymus cells, or of splenic T and B cells, from normal and irradiated mice, revealed functional defects in both cell compartments during the first two months. Normal and near normal function of T and B cells occurred 100 days postirradiation, a time when the splenic in vivo response was still only 50 per cent of the controls. The latter observation suggests that the microenvironment of the chronically irradiated spleen alters factors regulating T and B cell interactions in response to a T-dependent antigen.     

褪黑素对照射后小鼠血小板造血的保护作用

目的探讨褪黑素(melatonin,Mel)对照射后小鼠血小板和巨核细胞造血功能的影响。方法18只雌性BALB/c小白鼠随机分为3组正常组(N组),对照组(C组)和Mel组(M组),每组6只。其中N组不接受照射和药物注射,C组和M组小鼠予4Gy的60Coγ射线全身照射,照射后M组每天腹腔注射Mel10mg.kg-1.d-1,连续注射21d,C组注射生理盐水。于照射前及照射后的第7、14和21天采尾血,观察白细胞和血小板计数变化,在第21天采血后取骨髓行巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)和骨髓基质细胞集落形成单位(CFU-F)培养。另外观察正常小鼠体外骨髓CFU-MK在不同浓度的Mel(0～500nmol/L)作用下的生长情况。结果M组血小板计数回升明显高于C组(P<0.05),M组的CFU-MK和CFU-F集落生长明显优于C组(P<0.001)。体外小鼠骨髓CFU-MK的生长对Mel有浓度依赖性,Mel浓度为200nmol/L时,CFU-MK集落数目最多,且集落大小和MK成熟度较对照均有明显提高。结论Mel对照射后小鼠骨髓的血小板造血功能有保护作用,Mel可促进骨髓基质细胞和MK增殖分化,从而提升外周血血小板数量。     

白藜芦醇促进γ射线照射小鼠造血系统损伤修复的作用

目的观察白藜芦醇对60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤修复的影响。方法 ICR小鼠随机分成5组,即正常对照组、照射对照组以及白藜芦醇50、100、200 mg.kg-1照射组,照射前3 d灌服给药,每天1次。除正常对照组外,所有小鼠60Co射线全身5.5 Gy辐照1次,照射后第7天小鼠取骨髓细胞和脾脏,对骨髓单个核细胞和脾集落形成单位进行计数,测定骨髓细胞DNA含量和细胞周期。结果与正常对照组比较,照射对照组小鼠骨髓单个核细胞数和骨髓细胞DNA含量显著降低（P〈0.05）,脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）;与照射对照组比较,白藜芦醇100、200 mg.kg-1照射组小鼠照射骨髓单个核细胞数、骨髓细胞DNA含量、脾集落形成单位数和S和G2/M期细胞百分率显著增多（P〈0.05）,白藜芦醇50 mg.kg-1照射组有增多趋势。结论白藜芦醇可以促进60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤的恢复,防护效果与给药剂量相关。     

三羟异黄酮对照射小鼠造血系统损伤的防护作用

目的　探讨三羟异黄酮 (Genistein)对辐射损伤小鼠造血系统的防护作用。方法　 6 0Gyγ射线全身照射BALB c雄性小鼠 ,分 4组 ,照射前 2 4h给予genistein灌胃 ,观察小鼠照射后 30d存活情况及不同时相点有关造血指标的变化 ,同时HE染色观察骨髓病理学改变。结果　Genistein处理组小鼠骨髓照后损伤较R组轻 ,外周血WBC、骨髓有核细胞数和CFU S下降幅度小且恢复较快(P <0 .0 5 ) ,同时genistein能明显延长辐射损伤小鼠的平均存活天数、提高小鼠 30d存活率 (P <0 0 5 ) ,以上结果均与已烯雌酚处理组相似 ,而且genistein对小鼠脾重系数的恢复也有一定的促进作用 (P <0 0 5 )。结论　Genistein能降低辐射对小鼠造血系统的损伤 ,具有一定的辐射保护作用。     

基质细胞支持的体外扩增造血细胞对致死剂量照射小鼠造血恢复的促进作用

目的 研究基质细胞支持条件下体外扩增的造血细胞回输体内后，促进经致死剂量照射小鼠造血功能恢复的作用。方法 在培养的小鼠骨髓基质细胞层存在的条件下，加入或不加入几种细胞因子组合，分别在小鼠骨髓单个核细胞液体培养体系中进行造血细胞体外扩增。将不同条件下扩增的细胞经尾静脉回输至经致死剂量照射的小鼠体内，并与单纯细胞因子存在条件下的扩增及末扩增造血细胞进行比较，动态观察小鼠的外周血象变化及其一般状况和生存宰。结果 ①单纯细胞因子介导小鼠骨髓单个核细胞(BMMNC)体外扩增后并不能增进这些细胞促进造血恢复的能力；②含有骨髓基质细胞底层的体外扩增，无论是否加入细胞因子，均有明显的促进移植受体造血功能迅速恢复的作用。     

Effects of IL-4 on pulmonary fibrosis and the accumulation and phenotype of macrophage subpopulations following thoracic irradiation

Purpose: Thoracic irradiation injures lung parenchyma, triggering inflammation and immune cell activation, leading to pneumonitis and fibrosis. Macrophage polarization contributes to these processes. Since IL-4 promotes pro-fibrotic macrophage activation, its role in radiation-induced lung injury was investigated.

Materials and methods: Lung macrophage subpopulations were characterized from 3–26 weeks following exposure of WT and IL-4?/? mice to 0 or 12.5 Gray single dose thoracic irradiation.

Results: Loss of IL-4 did not prevent fibrosis, but blunted macrophage accumulation within the parenchyma. At 3 weeks following exposure, cell numbers and expression of F4/80 and CD206, an alternative activation marker, decreased in alveolar macrophages but increased in infiltrating macrophages in WT mice. Loss of IL-4 impaired recovery of these markers in alveolar macrophages and blunted expansion of these populations in infiltrating macrophages. CD206+ cells were evident in fibrotic regions of WT mice only, however Arg-1+ cells increased in fibrotic regions in IL-4?/? mice only. Radiation-induced proinflammatory Ly6C expression was more apparent in alveolar and interstitial macrophages from IL-4?/? mice.

Conclusions: IL-4 loss did not prevent alternative macrophage activation and fibrosis in irradiated mice. Instead, a role is indicated for IL-4 in maintenance of macrophage populations in the lung following high single dose thoracic irradiation.