微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核诱导的Fos表达及其与NADPH-d的共存

目的：研究大鼠网状背侧亚核的功能传出通路及该通路上NADPH-d的分布。方法：将微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核，2h后灌注，脑片进行NADPH-d组织化学和Fos免疫组化染色。结果：Fos阳性细胞主要分布于中缝背核(DR)、中缝大核(NRM)、蓝斑(LC)、中脑导水管周围灰质腹外侧(vlPAG)和下丘脑室旁核。Fos／NADPH-d双标细胞主要分布于巨细胞网状核、下丘脑室旁核和中缝大核。结论：大鼠延髓网状背侧亚核与脊髓上中枢存在广泛的功能联系，而且在延髓网状背侧亚核的功能传出通路上有一氧化氮合酶的分布。     

皮下注射多聚甲醛诱导大鼠脊髓和三叉神经脊束核向延髓网状背侧亚核传入投射的fos表达

目的:研究外周伤害性刺激下大鼠脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中的Fos表达.方法:采用荧光金逆行追踪及Fos免疫组化染色相结合的方法.结果:脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核均有神经元投射到延髓网状背侧亚核.在颈髓背角浅层,FG/Fos双标神经元分别占FG阳性神经元和Fos阳性神经元的9.3%和7.5%;在三叉神经脊束核尾侧亚核浅层,FG/Fos双标神经元分别占FG阳性神经元和Fos阳性神经元的9.5%和14.2%.结论:在颈髓背角浅层和三叉神经脊束核尾侧亚核浅层向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中,部分神经元可能与伤害性刺激有关.     

皮下注射多聚甲醛诱导大鼠脊髓和三叉神经脊束核向延髓网状背侧亚核传入投射的fos表达

目的：研究外周伤害性刺激下大鼠脊髓和三叉神经脊束核向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中的Fos表达。方法：采用荧光金逆行追踪及Fos免疫组结合的方法。结果：脊髓和三叉神经脊束核尾侧亚核均有神经元投射延髓网状背侧亚核。在颈髓背角浅层FG／Fos双标神经元占FG阳性神经元和Fos双标神经元的9．3％和7．5％；在三叉神经脊束核尾侧亚核浅层，FG／Fos双标神经元分别占FG阳性神经元和Fos双标神经元的9．5％和14．2％，结论：在颈髓背角浅层和三叉神经脊束核尾侧亚核浅层向延髓网状背侧亚核传入投射的神经元中，部分神经元可能与伤害性刺激有关。     

延髓内脏带至杏仁核投射通路参与迷走神经刺激抑制癫痫发作的研究

目的 观察迷走神经→延髓内脏带(MVZ)→杏仁中央核的儿茶酚胺能通路是否参与了迷走神经刺激(vagus nerve stimulation,VNS)抑制癫痫的调节；是否存在由迷走神经→延髓内脏带→海马的直接投射参与抑痫。方法 将逆行追踪剂WGA—HRP注入大鼠—侧杏仁中央核或腹侧海马，48h后，给予迷走神经刺激，观察MVZ内WGA—HRP逆行标记的细胞、Fos蛋白、TH阳性神经元的表达及分布。结果 杏仁核注射组大鼠MVZ内可见HPR／Fos／TH二重标记的细胞；海马注射组MVZ内未见HRP逆标神经元，但HRP逆行标记与Fos阳性双重标记细胞出现存隔区和下丘脑室旁该。结论 提示迷走神经→延髓内脏带→杏仁中央核的投射通路直接参与VNS抑痫过程，而且与儿茶酚胺能神经元有关；迷走神经→延髓内脏带→隔区、下丘脑室旁核中继至海马的间接通路也参与了抑痫。     

模拟失重大鼠延髓内脏带向下丘脑室旁核投射的儿茶酚胺能神经元表达Fos

确定延髓内脏带向下丘脑室旁核（PVN）投射通路是否参与对模拟失重的反应,用HRP逆行追踪结合抗Fos和抗栈氨酸羟化酶（TH）的免疫组织化学三重标记技术。观察4周模拟失重大鼠延髓内脏带向PVN投射的儿茶酚胺能神元Fos表达情况。发现有7种不同的标记细胞：HRP,Fos,TH单标细胞;Fos/HRP,Fos/TH,HRP/TH双标细胞;Fos/HRP/TH三标细胞,主要分布于延髓内脏带即延髓中尾段的孤束核和腹外侧区以及两者之间的网状结构。向PVN投射的神经元中有15.3%为Fos阳性细胞,即对失重起反应,而这些神经元中有62.6%为儿茶酚胺能神经元。结果显示,延髓内脏带投射至PVN的儿茶酚胺能神经元有些参与对失重的心血管反应。     

大鼠延髓内脏带与下丘脑室旁核、视上核往返投射通路参与高渗调节反应的研究

目的探讨延髓内脏带(MVZ)与下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)之间是否存在往返渗透压投射通路。方法通过给予大鼠饮用3%氯化钠的方法制作高渗刺激模型,并用WGA-HRP逆行追踪、抗Fos、抗酪氨酸羟化酶(TH)或加压素(VP)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学相结合的四重标记方法,观察MVZ、PVN和SON中WGA-HRP、Fos、TH、VP和GFAP阳性分布及表达状况。结果高渗刺激后MVZ、PVN和SON内Fos阳性细胞明显增多;GFAP阳性结构也明显增多,其分布与Fos阳性细胞分布基本一致,表现为胞体肥大、突起粗长。星形胶质细胞(AST)紧密包绕在神经元周围形成神经元-AST复合体(N-ASC)。结论神经元和AST以N-ASC的形式共同参与渗透压调节反应,体内存在MVZ和SON或PVN之间往返的渗透压调节通路。     

下丘脑前核:参与褪黑素对血压影响的中枢部位

在大鼠用微量注射技术研究褪黑素在下丘脑前核对心血管活动的作用,以及用辣根过氧化物酶神经传导通路追踪技术研究下丘脑前核参与心血管活动交感传出的纤维投射.结果表明,下丘脑前核微量注射褪黑素可使血压呈剂量依赖性降低,下丘脑前核有大量纤维投射到室旁核、正中隆起、下丘脑腹内侧核、弓状核、中脑导水管周围灰质,有少量纤维投射到延髓腹外侧区、中缝隐核.因此,褪黑素可能为一种降压因子,下丘脑前核是褪黑素调节心血管活动的重要中枢部位之一,而且下丘脑前核可能通过下丘脑腹内侧核、弓状核、中脑导水管周围灰质、延髓腹外侧区和中缝隐核来影响心血管交感传出活动.     

Merlin在大鼠脑的分布

目的:对正常成年大鼠脑中NF2基因表达产物Merlin的分布进行了观察.方法:运用免疫组化ABC法.结果:①Merlin阳性免疫反应较强的脑区和核团有大脑皮质、杏仁核、丘脑前核群、丘脑内侧核群、丘脑板内核群、丘脑中线核群、脑干前庭内侧核以及小脑皮质颗粒层等.②中等阳性免疫反应的结构有海马结构、隔外侧核、隔内侧核、下丘脑室周核、下丘脑室旁核、蜗神经背侧核、蜗神经腹侧核、前庭内侧核等.③阳性免疫反应较弱的脑区和核团有尾壳核、屏状核、苍白球、下丘脑外侧前核、下丘脑背侧核、三叉神经脊束核、巨细胞网状核等.结论:Merlin在大鼠脑中有广泛的表达,但在不同的脑区和核团其表达强度不同.     

下丘脑前核：参与褪黑素对血压影响的中枢部位

在大鼠用微量注射技术研究褪黑素在下丘脑前核对心血管活动的作用 ,以及用辣根过氧化物酶神经传导通路追踪技术研究下丘脑前核参与心血管活动交感传出的纤维投射。结果表明 ,下丘脑前核微量注射褪黑素可使血压呈剂量依赖性降低 ,下丘脑前核有大量纤维投射到室旁核、正中隆起、下丘脑腹内侧核、弓状核、中脑导水管周围灰质 ,有少量纤维投射到延髓腹外侧区、中缝隐核。因此 ,褪黑素可能为一种降压因子 ,下丘脑前核是褪黑素调节心血管活动的重要中枢部位之一 ,而且下丘脑前核可能通过下丘脑腹内侧核、弓状核、中脑导水管周围灰质、延髓腹外侧区和中缝隐核来影响心血管交感传出活动     

大鼠束缚后脑内小胶质细胞的反应

目的　 探讨大鼠束缚后脑内小胶质细胞的反应及其时程变化。 方法　 将大鼠束缚于小的塑料桶内 1,3或 6h ,于解束后 30min被处死 ,脑组织进行抗OX4 2 (小胶质细胞的特异性标记物 )免疫组织化学染色。结果 　正常大鼠脑内的小胶质细胞一般为静息状态 (静息型 ) ,其特点是OX4 2为阴性或浅染 ,在切片上不易发现或细胞形态不清晰。束缚 1h后 ,小胶质细胞为轻度反应 ,OX4 2浅染 ,细胞形态隐约可见 ,仅于下丘脑的视上核、室旁核和弓状核有散在的表达。束缚 3h后 ,小胶质细胞的反应达到高峰 ,由静息状态变为早期反应状态 (早期反应型 ) ,OX4 2深染 ,细胞形态清楚 ,突起上可见到小棘。早期反应型小胶质细胞广泛分布于前脑 :扣带回、新皮质浅层、隔外侧核、海马CA3、齿状回、杏仁中央核 ;间脑 :下丘脑视前区、视上核、室旁核、第三脑室周区、弓状核、丘脑室旁核、外侧膝状体、内侧膝状体 ;脑干 :中脑的上丘视性层、中脑导水管周围灰质、下丘的皮质部 ;脑桥的外侧臂旁核、蓝斑、A5区 ;延髓的延髓内脏带 (MVZ)和三叉神经脊束核等处 ;束缚 6h后 ,小胶质细胞反应减弱 ,OX4 2浅染 ,分布范围减少 ,主要出现于扣带回、隔外侧核、海马、视上核、室旁核、中脑导水管周围灰质、脑桥的臂旁外侧核、蓝斑、延髓的延髓内脏带 (M     

BDNF,NT-3对体外培养的胚鼠脊髓AChE和NADPH-d阳性神经元生长发育的影响

利用AChE和NADPH-d酶组织化学染色法研究了脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)对离体培养的胚胎大鼠脊髓胆碱能神经元和一氧化氮能神经元生长发育的影响.结果显示:BDNF处理组和NT-3处理组AChE阳性神经元数和NADPH-d阳性神经元数均显著高于对照组(P＜0.05).BDNF组AChE阳性神经元和NADPH-d阳性神经元胞体平均直径、每细胞突起数和最长突起长度均显著高于对照组(P＜0.05).NT-3组NADPH-d阳性神经元的生长发育与对照组无明显差异,仅AChE阳性神经元的每细胞突起数和最长突起长度显著高于对照组(P＜0.05),对胞体发育无影响.结果提示:BDNF,NT-3促进脊髓神经元的存活和生长发育,二者的作用具有选择性和特异性.     

鞘内注射曲马多对手术致痛大鼠脊髓c-fos蛋白表达的影响

目的在大鼠手术致痛模型中研究鞘内注射曲马多对脊髓c-fos蛋白的影响,探讨曲马多的超前镇痛效应。方法选取鞘内置管成功的32只雄性大鼠随机分为4组,每组8只,分别为假手术组(S组),实验对照组(EC组),术前曲马多组(TP20组,20μg/10μl)以及术后曲马多组(PT20组,20μg/10μl)。按照Brennan法制成大鼠切口痛模型,致痛2 h后,深麻醉大鼠,灌注固定,取脊髓L4～L6节段做c-fos免疫组化染色,观察大鼠脊髓c-fos蛋白表达的变化情况。结果 3个实验组的IOD值与假手术组相比较,均有不同程度的升高,差异有统计学意义(P0.05);TP20组、PT20组的IOD值与EC组相比较,均弱于实验对照组,差异有统计学意义(P0.05);TP20组的IOD值与PT20组相比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论手术致痛前或后,鞘内注射曲马多均能抑制大鼠脊髓背角c-fos蛋白的表达;曲马多预先给药,抗伤害作用更好,具有超前镇痛效应。     

沙土鼠全脑适应性再灌注的脑保护机制研究

目的动态研究不同灌注时间和灌注量对全脑组织缺血损害的恢复程度和即早基因c- fos的表达,以探明适应性再灌注的脑保护作用机制.方法沙土鼠随机分7组,实验组夹闭两侧颈总动脉,造成沙土鼠全脑缺血模型,夹闭10 min后,不同开放时间段(4 min,8 min,10 min,15 min,30 min)开放不同脑血流量(1/4,1/2,一次性全开放)和单纯血液稀释后分别观察缺血海马CA区c-fos蛋白的表达,及缺血区大脑半球的改善状况.结果开放15 min,1/2脑血流量时c-fos蛋白表达最高(P<0.05),海马CA区缺血损害改善最明显,开放15 min,全脑血流量一次性开放时海马CA区损害最严重.结论①在适应性灌注流量中,脑缺血海马区c-fos的表达和神经元凋亡呈反相作用关系;②低流量灌注有明显改善脑缺血的作用;③夹闭10 min后,开放1/2脑血流量,持续15 min的效果比一次性再灌注开放效果要好.     

抗抑郁药诱导大鼠不同脑区的c-fos基因表达

采用免疫组织化学方法,结合计算机图形分析技术,研究一次或长期给予抗抑郁药后大鼠不同脑区C-FOS免疫反应性.结果显示:①一次给药后额叶皮质,扣带回,嗅结节岛,纹状体四个部位的免疫反应阳性细胞数显著增加;②长期给药组额叶皮质,乳头体核,杏仁核和纹状体四个部位的C-FOS免疫反应阳性细胞数显著增加;③不同抗抑郁药作用的部位有差异.不同抗抑郁药能使大鼠脑不同区域的c-fos表达增强,可能涉及抗抑郁药的分子作用机制.     

Nitric oxide as a putative messenger molecule in the crayfish olfactory midbrain

NADPH-d histochemistry was used to investigate presumptive nitric oxide synthase (NOS)-containing neurons in the crayfish olfactory midbrain. Three anatomically different types of local olfactory interneurons exhibiting NADPH-d activity were observed: two pairs of large interneurons as well as positively stained globuli cells. Branches derived from the large interneurons were confined to the ipsilateral olfactory lobe and accessory lobe, but only a few branches innervated the olfactory lobe glomeruli. Local field potential recordings on the olfactory lobe showed that administration of SNP or SIN-1 (10⁻⁴ M) into the brain had reversible inhibitory effects on electrically-evoked responses of unidentified neuronal cell populations.     

Nitric oxide synthase inhibition prevents neuronal death in the developing visual cortex

During postnatal development of the visual cortex of golden hamster, there is a transient increase in both the expression and the activity of nitric oxide synthase (NOS), which coincides temporally with the formation of ipsilateral retino-collicular and retino-geniculate projections and the functional differentiation of primary visual cortex, suggesting the involvement of NO in the maturation of the visual cortex. In the present study, an inhibitor of NOS, N-nitro-L-arginine (L-NNA) was used to block the NOS activity of newborn golden hamster, and effects on development were examined. L-NNA treatment caused an increase in mortality, and suppression of both body weight gain and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-diaphorase (NADPH-d) activity in the early phase of treatment (before postnatal day 14, PD14). The growth of NADPH-d-positive neurons in the visual cortex was also suppressed by the treatment. In control animals, significant numbers of apoptotic neurons were detected by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labelling assay on PD14, and this apoptosis mainly affected cells in cortical layers II and III. NOS inhibition largely rescued neurons from undergoing apoptosis, indicating that NO may serve as a signal triggering apoptosis and play a role in the maturation of the visual cortex.     

柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响

目的 观察柴胡疏肝汤对戊四氮致痫大鼠海马及额叶皮质c-fos表达的影响.方法 选取经戊四氮诱导制作的癫痫模型大鼠48只,按随机数字表法分成6组:癫痫模型组、德巴金组、定痫丸组、柴胡疏肝汤低剂量组、柴胡疏肝汤中剂量组和柴胡疏肝汤高剂量组,每组各8只;另设正常对照组8只.正常对照组和癫痫模型组常规饲养,其他各组给予药物德巴金,定痫丸,低、中、高剂量柴胡疏肝汤处理,均连续灌胃治疗5周.免疫组化染色检测各组大鼠海马及额叶皮质c-fos的表达情况.结果 戊四氮致痫后大鼠海马及额叶皮质c-fos表达明显增强,而应用中、高剂量的柴胡疏肝汤,德巴金和定痫丸治疗后,大鼠海马及额叶皮质c-fos表达均明显减弱,与癫痫模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而柴胡疏肝汤低剂量组大鼠海马及额叶皮质c-fos表达无明显减弱.结论 柴胡疏肝汤的抗癫痫作用机制可能与其含有柴胡皂甙及其他多种有效的抗癫痫成份多靶点干预海马及额叶皮质c-fos表达水平有关.

Abstract：

Objective To observe the effect of chaihushugantang on the expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of pentylenetetrazole (PTZ)-induced epileptic rats. Methods Forty-eight PTZ-induced epileptic rats were randomly divided into 6 groups: epileptic model group,Valproate treatment group, Dingxianwan treatment group, and lower-dose, medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups (n=8). Normal control group was also employed (n=8). The epileptic rats in the normal control group and epileptic model group were fed normally. Rats of the treatment groups were performed intragastric administration of medicines (Valproate, Dingxianwan and chaihushugantang) for 5 weeks in succession respectively. The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of all the rats was observed. Results The expression of c-fos in the hippocampus and frontal lobe cortex of rats in the epileptic model group was significantly increased, while the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the medium-dose and high-dose chaihushugantang treatment groups and Valproate treatment group and Dingxianwan treatment group was significantly decreased as compared with that in epileptic model group (P<0.05). But the c-fos expression in the hippocampus and the frontal lobe cortex of rats in the low-dose chaihushugantang treatment group showed no obvious decrease. Conclusion Chaihushugantang has good antiepileptic effect, might through affecting the c-fos expression in the epileptic rats. The antiepileptic mechanism of chaihushugantang can be related to saikosaponins and other antiepileptic constituents in it.     

多氯联苯对大鼠海马c-fos表达的研究

多氯联苯 (polychlorinated biphenyl,PCB)结构类似于甾体类激素能竞争该类激素的受体发挥一定生物功能。此研究通过 PCB是否对大鼠海马结构和功能产生影响 ,以了解 PCB对学习、记忆功能的影响。1　材料和方法　选用 Wistar雌性大鼠 2 4只 ,随机分为 4组。分别饲喂含质量分数 1× 1 0 1 2 、1× 1 0 1 1 、1× 1 0 1 0 PCB饲料及正常饲料。1个后进行交配、受孕、分娩。断乳后的仔鼠分别选取体重近似的雄性大鼠 1 0只 ,对应饲喂相应的饲料 ,3个月后断头处死 ,分离海马并以 4g/ L多聚甲醛固定待测。海马标本常规 HE染色 ,免疫组化 ABC…     

慢性应激抑郁模型大鼠强迫游泳后海马中c-fos的表达

目的 研究慢性应激对强迫游泳大鼠海马神经元c-fos表达的影响。方法 采用特异性抗体的免疫组织化学方法,在大鼠慢性应激抑郁模型基础上,观察急性强迫游泳应激后海马神经元c-fos的表达情况。结果 抑郁模型大鼠接受急性强迫游泳应激后,海马CA3区和齿状回(DG)内FOS蛋白的表达在各主要时点均比对照组降低,图像分析提示,上述两区域的FOS阳性神经元对应切面面积比明显降低(P<0.05),平均目标灰度值显著增加(P<0.05)。结论 慢性应激使大鼠在急性强迫游泳应激后海马CA3区和DG内c-fos的表达降低。     

C-fos在癫痫研究中的应用

c -fos基因编码的FOS蛋白是一种核蛋白 ,各种致痫刺激均可使c-fos迅速表达。因此c -fos作为神经功能活动的代谢性标志物 ,在癫痫研究中被大量应用。根据c -fosmRNA或FOS蛋白在致痫刺激后的表达顺序 ,可以对不同癫痫模型的癫痫起源和传播进行定位和示踪。通过定性、半定量或定量分析c -fos表达程度的高低 ,可以判断某药物或其他相关因素在治疗或致痫作用中的大小。应用c -fos时还需注意c-fosmRNA和FOS蛋白的表达有可能不一致 ,不同的实验方法和试剂对实验结果也有一定的影响