云南省澜沧江下游地区虫媒病毒研究状况

澜沧江下游地区位于我省南部，包括思茅和西双版纳两个地州。根据我国气候带划分，该地区属边缘热带和南亚热带，具有海拔低、气温高、湿度大、雨量多以及众多生物群落和虫媒传染病复杂的特点。由于澜沧江-湄公河次区域开发已列为我国与东南亚各国合作项目。掌握该地区虫媒病毒的分布情况和宿主媒介特点，为疾病防治提供科学依据，对搞好大湄公河次区域开发有重要意义。近10多年来，我们在该地区采集到节肢动物、患者和健康人血清，以及动物内脏组织、血清标本共59988份（只），其中雌性成蚊8属44种54211只，蠓类950只、蜱类402只，虱子402只，鼠肺881份，蝙蝠脑453份，壁虎375只。患脑炎的乳猪脑组织1份，发热和脑炎患者血清143份，健康人血清1250份，蝙蝠血清291份，猴血清204份，猪血清197份，鼠血清535份。现将这些标本的病毒学检测和流行病学调查分析结果综述如下。     

黑龙江省部分地区虫媒病毒调查

目的对黑龙江省部分地区的虫媒病毒进行调查,从吸血蚊虫中分离病毒,并对其进行鉴定。方法2002年在黑龙江省采集蚊虫标本,用BHK细胞分离病毒,并进行血清学和分子生物学鉴定。应用ClustalX(1.8)软件做碱基配对及进化分析,GENEDOS(3.2)软件完成氨基酸位点分析。结果4株病毒引起BHK细胞规律病变,病变时间为72h,乳鼠脑内接种病毒后72h死亡。与标准乙型脑炎病毒抗体呈阳性反应。扩增病毒PrM、E区段并进行基因分型分析,4株病毒属于基因Ⅲ型乙型脑炎病毒。以减毒活疫苗株SA14142为标准,采用以往黑龙江省分离的乙脑毒株(47、Ha3株)为参照对4株病毒的E基因区段进行分析,4株病毒之间核苷酸同源性在99.9%以上,氨基酸同源性在99.8%以上;新分离4株乙脑病毒与SA14142的核苷酸同源性为97.3%,氨基酸同源性在96.8%～97.0%,共存在7个位点的共同差异。结论在黑龙江省新分离到4株乙型脑炎病毒。在决定病毒毒力的8个重要位点上有6处差异。     

云南省虫媒病毒的分离鉴定

目的了解云南省部分地区虫媒病毒的存在及流行情况。方法2002年和2004年从云南省5个县市采集蚊虫,经研磨、细胞接种分离病毒,通过实时荧光PCR、免疫荧光试验等方法进行鉴定,并对病毒的分子生物学特性进行分析。结果采集到4810只蚊虫,分离到12株致BHK细胞病变的病毒,经实时荧光PCR、免疫荧光试验等鉴定为乙脑病毒。新分离病毒DL0437属于基因Ⅲ型乙脑病毒。结论2002年和2004年在云南5个县市采集4810只蚊虫中分离到12株乙脑病毒,是近年来在云南省首次分离到基因Ⅲ型乙脑病毒。     

新疆南部地区蜱传虫媒病毒分子生物学调查

目的了解新疆南部地区蜱传虫媒病毒的种类和分布情况。方法在新疆南部地区的23个采集地36个采集点,采集蜱标本5045只,分别建立蜱标本cDNA文库,用PCR方法检测标本可能携带的病毒。结果黄病毒属引物、加利福尼亚血清组病毒引物对34份cDNA文库检测结果均为阴性;内罗毕病毒属引物和新疆出血热病毒巢式引物在巴楚县蜱标本中检测到新疆出血热(XHF)病毒核酸序列,对检测到的XHF病毒L和S片段进行系统进化分析。结论对新疆南部地区5045只蜱进行四种六对引物的PCR检测,未检出黄病毒属和加利福尼亚血清组病毒核酸序列,获得新疆出血热病毒L和S片段的核酸序列,研究了其分子流行特征。     

2007年山西省部分地区虫媒病毒调查

目的 调查山西省部分地区的虫媒病毒,在当地采集蚊虫标本进行病毒的分离与鉴定.方法 2007年7月和8月在当地采集蚊虫标本,通过组织细胞培养进行病毒分离,利用分子生物学和生物信息学技术对病毒分离物进行鉴定与分析.结果 分离到10株病毒分离物,鉴定结果显示分离株SX0765、SX0766、SX0767、SX0771、SX0789、SX0790、SX0793、SX0794、SX0795、SX0796均为版纳病毒;此外,分离株SX0771和SX0794还同时存在辽宁病毒基因.进一步分析显示版纳病毒新分离株与此前在北京、云南和辽宁分离到的病毒株之间存在明显差异,同源性在89.7%～94.1%之间.结论 在山西省分离到10株版纳病毒和两株辽宁病毒,版纳病毒与我国其他地区分离株有明显差异,在进化上相对独立.     

2012年云南省边境地区蚊虫及蚊传虫媒病毒调查CSCD

目的 了解云南省南部边境地区蚊虫中虫媒病毒的分布特点,为虫媒病毒病防治提供科学依据.方法 2012年7-8月在云南省西双版纳傣族自治州勐海县打洛镇和普洱市江城县整董镇采集蚊虫标本,用组织培养法分离病毒,使用蚊媒病毒种属特异性引物对阳性病毒分离物进行鉴定.结果 共采集蚊虫标本6属17种18714只.三带喙库蚊为当地优势蚊种,占蚊虫采集总数的59.74％（11 179/18 714只）.从采集的蚊虫标本中分离到23株病毒分离物,其中2株坦布苏病毒（Tembusu virus,TMUV）、3株乙脑病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）、2株盖塔病毒（Getah virus,GETV）、4株版纳病毒（Banna virus,BAV）、9株浓核病毒（Densovirus,DNV）和3株套式病毒（Nam Dinh virus,NDiV）.结论 云南省边境地区不仅蚊虫种类丰富,而且蚊虫携带多种虫媒病毒.     

虫媒病毒是我国亟待加强的研究领域

虫媒病毒不仅种类繁多而且可以引起多种人畜共患的急性传染病，因此备受关注。我国虫媒病毒研究与国外存在较大差距，亟待加强。本刊汇集了近20篇研究论文以专辑出版。本期首先发表10篇，其他文章将陆续发表。本专辑的发表必将对我国虫媒病毒研究起到极大的推动作用。     

云南省西部边境新分离蚊媒病毒分子生物学特征分析

目的 分析云南中缅边境地区新分离蚊媒病毒的分子生物学特征,以分析其遗传进化特征.方法 2010年1-12月在云南省德宏州芒市和瑞丽市监测点每月一次用诱蚊器采集蚊虫,用BHK-21和C6/36细胞分离病毒,阳性分离物用RT-PCR法进行鉴定及序列测定和分析.结果 从采获的7属42种69 209只蚊虫中分离到13株流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV),4株盖塔病毒(Getah virus,GETV),1株西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV),7株淡色库蚊浓核病毒(Culex pipiens pallens densovirus,CppDNV).JEV E基因进化分析证实,新分离的13株JEV均属基因Ⅰ型,与云南其它地区和邻近省份流行株亲缘关系较近,且抗原和毒力位点未发生明显改变.4株GETVE2基因与云南其它地区分离株同源性高,亲缘关系近.新分离环状病毒的VP1基因与TIBOV亲缘关系最近,而与云南环状病毒(Yunnan orbivirus)存在明显差异.7株CppDNV的NS1基因与以往云南及其他省区流行株具有较高的同源性和亲缘关系.结论 首次证实该地区存在基因Ⅰ型JEV、GETV、TIBOV和CppDNV流行,这些流行株均具有较为稳定的遗传特征和地域特征.     

从烟台地区蚊虫分离到披膜甲属虫媒病毒

目的　从烟台地区自然界捕捉的蚊虫中分离虫媒病毒。方法　对分离的 15株虫媒病毒中的 3株进行理化特性分析 ,电镜检查以及特异性免疫反应观察。结果　多次实验均显示该病毒对乙醚敏感 ,抵抗 5′ 碘脱氧尿苷 (5′ Idu) ,能在白蚊伊蚊C6 / 36传代细胞上生长繁殖 ,并能引起典型细胞病变 ,乳鼠脑内接种不引起规律发病和死亡。电镜观察 ,可见大小相同的球形病毒颗粒 ,毒粒直径约 (5 5± 2 3)nm。该病毒与乙脑病毒和布尼亚病毒科的组特异性免疫腹水均不反应 ,而与披膜病毒科甲属特异性免疫腹水有交叉反应。结论　本次分离到的病毒为披膜甲属虫媒病毒。     

首次在山西省虫媒病毒调查中检测并分离到南定病毒

目的明确山西省五个地区虫媒病毒种类及其分布特征, 对采集的蚊虫样本进行病毒的分离与鉴定。方法于2020年7～9月采集当地的蚊虫标本, 利用实时荧光定量PCR法检测蚊虫标本中的8种虫媒病毒, 通过细胞培养对其进行病毒分离, 使用分子生物学和生物信息学方法对病毒分离物进行鉴定和分析。结果在121批蚊虫样本中, 检测到1批乙型脑炎病毒阳性, 2批库蚊黄病毒阳性以及8批南定病毒阳性。分离到7株病毒分离物, 编号为:SX-YJ-Cxp-4、SX-YJ-Ars-2、SX-YJ-Cxp-1、SX-LY-Cxp-10、SX-GP-Ars-5、SX-GP-Cxp-2、SX-GP-Cxp-4, 鉴定均为南定病毒, 对其中一株进行全基因组测序, 结果显示:山西南定病毒分离株与云南南定病毒分离株属于同一进化分支。结论首次在山西省分离到南定病毒。     

云南省乙型脑炎病毒基因分型研究

目的 对近30年来云南省分离的19株乙脑病毒进行PrM基因核苷酸序列测定,以确定病毒基因分型.方法乙脑病毒接种3日龄乳鼠,取发病濒死的乳鼠脑组织经研磨制成上清液,提取核酸,通过RT-PCR扩增PrM-C基因片段,用病毒PrM-C(456～695)区核苷酸序列与国内外不同年代分离的72株各基因型乙脑病毒相应序列作比较,用Woan-Ru Chen建立的方法进行基因型分析.结果 云南省分离的乙脑病毒均可引起3日龄乳鼠在78 h之内死亡;核酸序列分析结果显示,19株乙脑病毒中,17株属基因Ⅲ型,2株属基因Ⅰ型,其中M28分离自1977年;两株Ⅰ型病毒与17株Ⅲ型病毒问核苷酸序列的差异大于15%.分离自不同地区、不同时间、不同宿主的Ⅲ型乙脑病毒核苷酸间仅存在3.8%～5.2%的差异.结论云南省广泛存在基因Ⅲ型和Ⅰ型乙型脑炎病毒流行,Ⅲ型为主要流行型.     

山东省新分离乙脑病毒(SD08-10株)全基因组序列特征

目的 对山东省新分离乙脑病毒SD08-10株进行全基因组序列测定和分析,全面了解其基因组特征.方法 设计乙脑病毒全基因组序列扩增引物,RT-PCR扩增片段,PCR产物直接测序,拼接后获得全基因组序列.采用Clestal X(1.8)、DNAStar、GENEDOC(3.2)、Mega(4.0)等生物学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析.结果 新分离乙脑病毒SD08-10株基因组全长10 965个核苷酸,从97位到10 392位,共10 296个核苷酸编码一个开放阅读框,编码3432个氨基酸.与GenBank登录的所有59株乙脑病毒全基因组序列比较发现,其核苷酸总体差异率为0.7%～18.9%,氨基酸总体差异率为0.1%～5.2%.与目前使用的减毒活疫苗株SA-14-14-2株相比较,全基因组共存在1253个核苷酸差异,82个氨基酸差异.全基因组序列系统进化分析显示SD08-10属于基因Ⅰ型乙脑病毒.结论 新分离的乙脑病毒SD08-10株属于基因Ⅰ型,与2007年中国分离株SH17M-07进化关系最接近.     

2008年甘肃省新分离乙脑病毒的分子生物学特征

目的 对2008年甘肃省新分离乙脑病毒的PrM和E基因区段进行序列测定和分析,明确新分离病毒的基因型别并对E基因序列的分子特征进行分析.方法 对新分离乙脑病毒的PrM和E基因区段进行PCR扩增并测定序列.使用ClustalX2.09、MegAlign和Mega4软件对核苷酸和氨基酸序列进行分析并绘制系统发生树.结果 系统进化分析结果显示6株病毒均为基因Ⅰ型乙脑病毒,并且与2001和2002年越南分离株、2004年日本分离株及2004年我国四川省分离株进化关系较近.新分离株与减毒活疫苗株SA14-14-2相比,E基因核苷酸同源性为87.5%～87.9%,氨基酸同源性为96.8%～97.2%.新分离株与疫苗株在E基因区段存在11处共同位点的氨基酸差异.结论 2008年甘肃省分离的乙脑病毒均为基因Ⅰ型乙脑病毒,新分离株E基因氨基酸序列与疫苗株相比有部分差异,但均不属于决定抗原性的关键位点.     

2006年山西省运城市成人流行性乙型脑炎临床特征与实验室检验

目的 研究2006年山西省运城市成人流行性乙型脑炎的临床及实验室检验特点,为我国乙脑预防控制提供基础资料.方法对2006年运城市第二人民医院收治的45例乙脑病例进行临床资料分析,对部分中老年患者血清和脑脊液标本进行血清学和分子生物学检测.结果收治入院的45例患者以中老年人为主,其中40岁以上病例占病例总数77.8%(35/45),重型和极重型占病例总数60.0%(27/45),大多数患者合并基础性疾病.研究结果显示,血清乙脑病毒IgM抗体检测为阳性,急性期和恢复期双份血清中和抗体存在4倍以上增高;部分患者脑脊液乙脑病毒核酸检测阳性.结论经实验室特异性检测确认山西省运城市2006年病毒性脑炎为乙型脑炎,病例呈现大年龄组发病特点.     

云南景洪市蚊虫季节消长与乙型脑炎流行关系研究

为掌握云南景洪市蚊虫季节消长特点及其与乙型脑炎流行的关系,为该疾病防控提供有效依据,2007年10月至2008年9月本研究在云南景洪市普文镇畜圈和人房每月采用诱蚊灯方法通宵捕蚊,对采获的蚊虫使用白纹伊蚊C6/36细胞培养法分离乙脑病毒,并对分离到的病毒进行分子生物学鉴定.收集2007～2008年景洪市乙脑疫情资料进行乙...     

中国云南省五个民族DYS287位点多态性的调查

目的　对中国云南的汉族、傣族、拉祜族、佤族、藏族5 个群体的DYS287 位点多态性进行筛查。方法　利用PCR法对此位点进行扩增,经过琼脂糖凝胶电泳检测结果。结果　汉、傣、拉祜、佤族均为YAP- ,扩增片段均为 150bp,而 30 个藏族人中有11 个为 YAP ,扩增片段为 455bp,YAP 频率达36.7% 。结论　DYS287 位点可以作为一种重要、稳定的遗传标记对遗传多样性研究提供可靠的证据。     

云南宁蒗地区摩梭人体脂肪参数对肺通气功能的影响

目的：探究云南宁蒗地区摩梭人的身体脂肪参数对肺通气功能的影响,为改善摩梭人身体素质提供依据。 方法：随机抽取云南宁蒗地区摩梭人365 名（ 男性139 名,女性226 名）为研究对象,采用生物电阻抗法对所有 受试者进行人体成分的测量,分析体脂肪参数（BFP）与肺活量（VC）、用力肺活量（FVC）、第1 秒用力呼气量（FEV １）、第1 秒用力呼气量占用力肺活量比值（FEV1/FVC）等肺通气功能指标的关系。所得数据经SPSS20.0 统计软 件包进行统计学处理。结果：云南宁蒗地区摩梭人的体脂分布大多处于正常范围,尤其是女性;BFP过高的以男 性居多;不同BFP组间的男、女性摩梭人的VC差异有统计学意义,但FVC、FEV1、FEV1/FVC 差异均无统计学意义; 肺活量体质量指数均随着BFP的增加呈下降趋势,差异有统计学意义。但不分高低的BFP除与肺活量体质量指数 呈负相关,与其余肺通气功能主要指标之间均无相关;在男性摩梭人中,BFP过轻组的肺活量体质量指数与身体 各部位脂肪参数无相关性,其他2 组肺活量体质量指数与身体各部位脂肪参数呈负相关。女性摩梭人BFP过低组、 标准组和过高组的肺活量体质量指数与身体各部位脂肪参数均呈负相关。结论：云南宁蒗地区摩梭人BFP升高是 肺通气功能下降损伤的危险因素,肺活量体质量指数随BFP的增加而减低。     

山东城市学龄儿童行为问题及危险因素研究

应用Ａｃｈｅｎｂａｃｈ儿童行为量表调查了山东省６个城市２９４１名６－１１岁的儿童。研究发现行为问题的现患率为１３．８１％，９５％可信区间为１２．５６～１５．０６％，性别间及各年龄组间行为问题的现患率无显著性差异。Ｉｏｇｉｓｔｉｃ回归分析揭示男童行为问题的主要危险因素依次为疾病、母孕期不利因素，亲子关系差、学习成绩差和父母管教方式不当。女童的危险因素则依次为母孕期不利因素、父亲疾病、儿童疾病、学习成绩差。     

The epidemic investigation of serum 25-hydroxy vitamin D levels in the adults in Qujing area of Yunnan province in China

Objective: To investigate the levels of serum 25-hydroxy vitamin D(25-OHD) and its related influence factors in the adults in Qujing area of Yunnan Province in China. Method: 25-OHD levels in the sera were detected with a 25-hydroxy vitamin D kit and read with LIAISON XL chemiluminescence analyzer. Data was statistically analyzed with software SPSS17.0. Results: The serum 25-OHD levels of the subjects were 12.08±5.92 ng/ml. Although the sera levels of 25-OHD were significantly higher in urban residents, men and young subjects than in rural residents, women, and old subjects, the 25-OHD levels were significantly lower compared to international standard values in almost all populations in Qujing area. Conclusion: Qujing is plateau area with affluent sunlight, however, serum 25-OHD levels of majority populations are low. The serum 25-OHD levels are affected by many factors. In order to avoid excessive diagnosis and treatment, the adjusted local standard values of serum 25-OHD are needed.