基质金属蛋白酶在视网膜前膜的表达和意义

目的 研究增生性玻璃体视网膜病变（PVR）视网膜前膜中基质金属蛋白酶（MMPs)的表达。探讨MMPs在PVR病理过程中的作用。方法 经扁平部玻璃体切割术（PPV）和膜剥离术取得PVRC3-D3级视网膜前膜21例，免疫组织化学法分析MMP-2和MMP-9在PVR视网膜前膜的表达，同时进行视网膜色素上皮细胞（RPE）和巨噬细胞染色。结果 21例PVR视网膜前膜MMP-2阳性染色15例，MMP-9阳性8例，RPE细胞表达18例，巨噬细胞表达9例。结论 PVR视网膜前膜有MMP-2和MMP-9表达，可能主要由RPE细胞和巨噬细胞分泌，对PVR的发生和发展起重要作用。     

结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性" "、阳性"2 "和强阳性"3 "的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。     

姜黄素防治兔眼增生性玻璃体视网膜病变的实验研究

背景先前的系列研究表明,姜黄素可以诱导体外培养的兔视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡,抑制其RPE细胞的增生,且在玻璃体内应用后不良反应较小,具有防治增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的潜在价值。目的探讨姜黄素玻璃体内注射对RPE细胞诱导的兔眼PVR模型的防治效果。方法新西兰白兔20只40只眼,所有兔眼玻璃体注射前先抽取0．2ml玻璃体液,然后在兔眼玻璃体内注射0．1ml（2×10^6）同种RPE细胞,每只兔随机选取1只眼立即注入1mg／L的姜黄素0．1ml作为姜黄素组（20只眼）,对侧眼注入等量的含质量分数0．5‰DMSO的生理盐水作为对照组（20只眼）。注药后1、3、7、14、21、28d裂隙灯显微镜下观察角膜、房水、晶状体的透明度及眼前节炎症反应情况;使用间接检眼镜、眼底彩色照相和B型超声检查玻璃体视网膜情况。以视网膜脱离发生眼数作为检测指标,评价姜黄素对PVR的防治效果。结果玻璃体注药后1d、3d所有兔眼发生眼前节炎症反应,玻璃体轻中度混浊,但未见增生条带及视网膜脱离。玻璃体注药后7d,所有兔眼前节炎症反应基本消退,对照组14只眼（75％）玻璃体出现增生条带,姜黄素组2只眼（10％）玻璃体内出现增生条带,差异有统计学意义（P〈0．01）,但2组均未见视网膜脱离。注药后14d,对照组11只眼（55％）出现视网膜脱离,姜黄素组2只眼（10％）出现视网膜脱离,差异有统计学意义（P〈0．01）;注药后21d,对照组16只眼（80％）出现视网膜脱离,姜黄素组3只眼（15％）出现视网膜脱离;注药后28d,对照组19只眼（95％）出现视网膜脱离,姜黄素组3只眼（15％）出现视网膜脱离,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论姜黄素玻璃体腔内注射可以有效预防RPE细胞诱导的兔眼实验性PVR的发生发展。     

p21WAF1/CIP1在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变发生和发展中的抑制作用

背景 p21是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂,能阻止细胞从G1期进入S期,抑制细胞增生,研究认为内源性p21表达的动态变化可能与细胞增生性病变有关.外伤性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼部增生性反应相关性疾病,了解PVR过程中p21表达的动态变化可能为PVR的靶向治疗提供依据.目的 检测p21WAFl/CIP1在兔外伤性PVR中的动态变化,探讨其在外伤性PVR发病机制中的作用.方法 选取青紫蓝兔54只,采用随机数字表法将实验兔随机分为正常对照组(6只)和造模后7、14、21和28 d组(每组12只),每只兔任意选取一眼作为实验眼.各模型组兔眼玻璃体腔注射人富含血小板血浆(PRP)0.4 ml,同时于鼻上方角巩膜缘后5 mm处行巩膜外冷冻约5 s,以建立外伤性PVR模型.各组兔眼行眼部B型超声检查以评估建模情况.分别于造模后7、14、21和28 d以过量麻醉法处死实验兔并制备实验眼视网膜组织切片,采用苏木精-伊红染色法检测兔眼视网膜的形态表现,分别采用免疫组织化学染色、Western blot及逆转录PCR(RT-PCR)法检测兔视网膜中p21WAFl/CIP1蛋白及其mRNA的相对表达. 结果 正常对照组兔眼眼前后节均正常,模型组兔造模后1～7 d兔眼玻璃体中增生条索逐渐变粗,可见视网膜皱褶,造模后14d兔眼出现牵引性视网膜脱离,造模后28 d兔眼漏斗状视网膜脱离.视网膜病理组织学检查显示,造模后7d兔眼视网膜表面有增生膜和炎性细胞聚集,造模后28 d可见视网膜呈花瓣形固定皱褶,视网膜结构紊乱.免疫组织化学染色显示,p21WAF1/CIP1蛋白在正常对照组兔眼视网膜神经节细胞层及内核层的细胞核内呈强阳性表达,造模后7、14、21和28 d表达强度减弱,以造模后14d表达量最低.Western blot结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF1/CIP1蛋白相对表达量分别为0.74±0.08、0.60±0.05、0.56±0.03、0.74±0.02和0.65±0.04,组间总体比较差异有统计学意义(F=20.55,P=0.00),造模后7d和14d的表达量均明显低于正常对照组和造模后21 d和28 d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).RT-PCR结果显示,正常对照组和造模后7、14、21和28 d组兔眼视网膜中p21WAF/CIP1 mRNA的相对表达量分别为0.65±0.09、0.57±0.05、0.45±0.04、0.46±0.02和0.47±0.04,总体比较差异有统计学意义(F=18.06,P=0.00),造模后14、21和28 d P21WAF1/C1P1 mRNA的相对表达量均明显低于正常对照组和造模后7d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 p21WAF1/CIP1在外伤性PVR兔眼视网膜中的动态表达变化与PVR的病程发展过程相吻合,p21可能参与外伤性PVR发生和发展的病理过程,p21WAF1/C1P1表达量的下降与细胞增生的动态变化过程一致,可能促进了PVR的进展.     

玻璃体腔注射人PRP联合巩膜外冷冻建立PVR动物模型的研究

目的探讨玻璃体腔内注射人富含血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)联合巩膜外冷冻建立增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)动物模型的效果。方法选取青紫蓝兔52只,随机分成实验组及对照组,每组各26只,每只兔随机选取一眼作为实验眼。取健康体检者静脉血制备PRP。暴露实验眼颞上方巩膜,于角膜缘后3.5mm行巩膜切开,剪除玻璃体约0.5mL,实验组玻璃体腔注射PRP0.4mL,同时联合巩膜外冷冻;对照组单纯行玻璃体腔注射PRP0.4mL。分别于造模后1d、3d、7d、14d、28d行裂隙灯、间接眼底镜及B超观察玻璃体增殖及视网膜脱离情况,并进行PVR分级。分别于造模后7d、14d及28d每组随机选取2只兔摘除眼球行组织病理学检查。结果实验组和对照组造模后28d视网膜脱离的发生率分别为95%和65%,2组成模率比较,差异有统计学意义(χ2=3.906,P=0.048)。临床和B超观察:实验组造模后1d出现明显玻璃体混浊、3d出现玻璃体增殖条索、7d出现局限性视网膜脱离、14d广泛视网膜脱离、28d全视网膜脱离;对照组造模后1d玻璃体轻度混浊、3d出现明显玻璃体混浊、7d可见少量玻璃体增殖条索、14d出现局限性视网膜脱离、28d有广泛视网膜脱离发生。病理组织学观察:实验组造模后7d视网膜表面炎性细胞聚集、成纤维细胞增生,14d视网膜前增殖条索、视网膜皱褶,28d视网膜固定皱褶形成、呈花节样外观;对照组造模后7d视网膜表面见炎性细胞及渗出,14d视网膜表面增殖膜,28d视网膜表面增殖条索出现。结论玻璃体内注射人PRP联合巩膜外冷冻建立PVR动物模型简便有效、成模率高,可作为PVR相关基础研究的建模方法。     

不同类型和病程视网膜前膜中结缔组织生长因子和纤维连接蛋白的差异表达

背景 视网膜前膜的形成和发展过程有多种细胞、细胞因子和细胞外基质等的调控和参与,结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白(FN)等参与其中,研究视网膜前膜的形态结构和病理学特征对于防治相关的视网膜病变具有重要意义. 目的 分析不同类型和病程眼底病变所致视网膜前膜的病理特点,研究CTGF和FN在视网膜前膜中的表达.方法 收集玻璃体切割术或硅油取出术中获得的视网膜前膜标本,其中孔源性视网膜脱离(RRD)组24例24眼,包括病程＜90 d者14眼及≥90 d者10眼;伴有玻璃体积血或牵拉性视网膜脱离(RD)的糖尿病视网膜病变(DR)组20例20眼,硅油填充眼组7眼,病程均≥90 d.各眼增生性玻璃体视网膜病变(PVR)分级均为C2级以上.对获取的视网膜标本进行常规组织病理学检查,采用免疫组织化学法检测视网膜前膜标本中CTGF和FN的表达,应用Fisher确切概率法对病程≥90 d不同组间和RRD组不同病程间视网膜前膜标本中CTGF和FN表达阳性率的差异进行比较. 结果 RRD组病程＜90 d的标本中以视网膜色素上皮(RPE)细胞和炎性细胞增多为主,而病程≥90 d的标本中以神经胶质细胞和成纤维细胞增多为主.RRD组和伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组以炎性细胞浸润为主要表现,而硅油填充眼组以纤维增生为主要表现.病程≥90 d的3个组视网膜前膜中,RRD组CTGF阳性表达者7眼,占70.0％,伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组18眼,占90.0％,硅油填充眼组2眼,占28.6％,3个组间视网膜前膜中CTGF表达阳性率的总体比较差异有统计学意义(P=0.037);RRD组FN阳性表达者9眼,占90.0％,伴有玻璃体积血或牵拉性RD的DR组18眼,占90.0％,硅油填充眼组7眼,占100.0％,3个组间FN表达阳性率的总体比较差异无统计学意义(P=0.379).RRD组中,病程≥90 d者视网膜前膜中CTGF阳性表达者7眼,占70.0％,病程＜90 d者13眼,占92.9％,差异有统计学意义(P=0.032);病程≥90 d者视网膜前膜中FN阳性者9眼,占90.0％,病程＜90 d者7眼,占50.0％,差异有统计学意义(P=0.019). 结论 CTGF和FN在不同眼底病所致的视网膜前膜中及不同阶段的视网膜前膜中均呈差异性表达.CTGF的表达变化与病程和疾病类型有关,而FN的表达变化仅与病程有关.     

增生性玻璃体视网膜病变的药物治疗

增生性玻璃体视网膜病变（PVR）常由于裂孔源性视网膜脱离、眼穿孔伤或眼内手术造成血-视网膜屏障受损,视网膜色素上皮（RPE）细胞进入玻璃体,继而引起RPE细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等在玻璃体内增生,形成以细胞为主的纤维膜。临床上治疗和预防PVR以手术为主,但效果不佳。近来有许多药物治疗PVR的研究报道,就PVR药物治疗研究进展进行综述。     

实验性视网膜脱离的病理改变及细胞增生

目的:探讨实验性视网膜脱离的病理变化和细胞增生。方法:成年白化病兔32眼在间接检眼镜直视下,先抽取玻璃体液0.5mL软化眼球,用50nm玻璃微管在下方6:00赤道部部位刺入视网膜造成裂孔并注射生理盐水0.5mL于视网膜下间隙。术后0.5,1,3,6,24h;3,7d和14d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学的方法检测视网膜下细胞增生。结果:32只兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围3:00～9:00(髓腺下方视网膜均脱离)。自发性复位的时间在3～14d,组织学切片显示,3d可见视网膜色素上皮细胞积聚团,7dRPE细胞增生肥大呈巨噬细胞样改变,14dRPE多层化改变,并见巨噬细胞样RPE来源于单层的RPE,游离RPE层后,吸附于脱离的光感受器细胞外节;3d增生细胞核抗原即表达阳性,增生细胞表达角蛋白阳性。结论:在此模型中,RPE细胞表现出细胞增生,巨噬细胞样细胞也来源于RPE。     

增生性玻璃体视网膜病变的动物模型

孔源性视网膜脱离并发的增生性玻璃体视网膜病变（PVR）为一系列的细胞活动导致的视网膜脱离手术失败的病变。其发生机制尚不完全清楚，药物治疗效果也不理想。为了研究PVR的发生、发展和治疗，需要首先建立PVR的动物模型。由于PVR的主要病理变化是细胞的过度增生，因而动物模型多以细胞增生模型为主，细胞种类有视网膜色素上皮（RPE）细胞、成纤维细胞、软骨细胞、血管内皮细胞等。其他的模型还包括炎症和细胞迁移模型。实验动物主要有兔、猴、猪和豚鼠等。文章就不同动物模型的制作方法和特点作一简要回顾。     

实验性外伤增生性玻璃体视网膜病变动物模型的改进

目的　建立一种简单的接近实际的实验性眼后节穿通伤增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)的动物模型。方法　在兔睫状体扁平部作一 8mm长切口 ,将脱出的玻璃体剪除 ,用 8 0尼龙线缝合切口。将兔自体富含血小板的血浆(血小板密度为 2 2 4× 10 8/ml) 0 4ml注入玻璃体。定期观察眼底情况并选择照相。结果　术后第 3d玻璃体内开始出现增殖 ,第 12d出现牵引性视网膜脱离 ,第 2 8d及 3 5d视网膜脱离的发生率分别是 78 1%及 81 3 %。结论　这种新的外伤性PVR动物模型 ,接近人眼外伤性PVR的实际情况 ,为进一步研究外伤性PVR及其防治奠定了基础     

增生性玻璃体视网膜病变增生膜中结缔组织生长因子与转化生长因子β受体和细胞外基质相关性的研究

目的 观察结缔组织生长因子（CTGF）在不同级别增生性玻璃体视网膜病变（PVR）增生膜中的表达及其与转化生长因子β受体（TGF-βR）和细胞外基质（ECM）出现的关系，探讨PVR发病过程中CTGF与TGF-βR和ECM产生的相关性。 方法 采用链霉亲和素生物素复合物（SABC）免疫组织化学方法，检测玻璃体切除手术获得的43例PVR增生膜中CTGF、TGF-βRⅡ、纤维连接蛋白（FN）和Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达，应用Spearman相关分析判断两样本之间有无相关性。 结果 PVR增生膜中CTGF、TGF-βRⅡ蛋白高表达，阳性表达的细胞主要是上皮样细胞。免疫组织化学显示C级膜中二者阳性表达率分别为70.6%和76.5%，D级膜中分别为73.9%和69.6%。统计学分析结果显示，CTGF、TGF-βRⅡ各级阳性表达率与膜分级间无相关性（P＞0.05）。PVR膜中FN、Ⅰ型和Ⅲ型胶原染色在实质细胞和细胞外间质均有表达;统计学分析结果显示，CTGF与TGF-βRⅡ、FN、Ⅰ型及Ⅲ型胶原的表达呈正相关(P＜0.01)。 结论 PVR增生膜中CTGF、TGF-βRⅡ蛋白表达上调，推测CTGF的产生与TGF-βR的激活有关，CTGF加重增生膜中RPE细胞合成FN和胶原等ECM，参与了PVR增生膜的形成和发展。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 192-195)     

Novel growth factors involved in the pathogenesis of proliferative vitreoretinopathy

AIMS: To determine whether hepatocyte growth factor (HGF) and connective tissue growth factor (CTGF) are expressed in human specimens of proliferative vitreoretinopathy (PVR) and to propose a model of PVR pathogenesis based upon the known activities of these growth factors.Methods Immunohistochemical methods (ABC Elite) were used to demonstrate the presence of HGF and CTGF in cryostat sections of five human PVR membranes. RESULTS: In each of the five PVR membranes, stromal cells were immunohistochemically positive for both HGF and CTGF. Based upon this information and the known actions of these growth factors, a model of PVR pathogenesis was developed. In this model, injury of the retina induces an inflammatory response that upregulates HGF expression inducing the formation of multilayered groups of migratory retinal pigment epithelial cells (RPE). These RPE, present in a provisional extracellular matrix, come in contact with vitreous containing TGF-beta. The TGF-beta is activated, upregulating expression of CTGF. Under the influence of TGF-beta and CTGF, RPE become myofibroblastic and fibrosis ensues. Retinal traction induces further detachment continuing the cycle of retinal injury. CONCLUSIONS: HGF and CTGF are expressed in PVR membranes and may play important roles in the pathogenesis of PVR. The expression and function of these growth factors should be critically examined in human PVR specimens, in in vitro cultures of RPE, and in animal models of PVR.     

Induction of proliferative vitreoretinopathy by a unique line of human retinal pigment epithelial cells

BACKGROUND: The most widely used models of proliferative vitreoretinopathy (PVR) rely on injection of cells into the vitreous of animals. Using retinal pigment epithelial (RPE) cells from human PVR membranes may produce a more accurate model of human PVR. We performed a study to determine whether human RPE cells derived from a single epiretinal membrane (ERM) are capable of inducing the same disease in the rabbit eye, and whether the induced ERMs had cellular components similar to those of human PVR membranes. METHODS: Cells were harvested from a human ERM obtained at surgery for PVR. RPE cells were cultured from the membrane and injected into the right eye of 24 New Zealand albino rabbits. The left eyes served as controls. The eyes were examined by indirect ophthalmoscopy over 4 weeks. The enucleated eyes were then examined by means of microscopy and histochemical analysis. RESULTS: By day 7, PVR had developed in all but 1 of the 24 experimental eyes, with 8 progressing to localized tractional retinal detachment. By day 21, localized tractional retinal detachment had developed in 17 eyes; 1 eye progressed to extensive tractional retinal detachment by day 28. Immunostaining showed that mostly RPE cells, but also myofibroblasts, glial cells and collagen, were present in the newly formed rabbit PVR membranes. INTERPRETATION: Human RPE cells cultured from a PVR membrane appear to be capable of inducing PVR in rabbits. The resultant ERMs are similar to those formed in human PVR and consist mainly of RPE cells.     

Stage specificity of novel growth factor expression during development of proliferative vitreoretinopathy

OBJECTIVE: To compare the relative levels of connective tissue growth factor (CTGF), platelet-derived growth factor alpha (PDGF-AA), and hepatocyte growth factor (HGF) in glial and retinal pigment epithelial (RPE) cells of epiretinal membranes from proliferative vitreoretinopathy (PVR). METHODS: A total of 37 PVR membranes, of various stages, underwent fluorescent immunohistochemisty and confocal laser scanning microscopy to localize CTGF, HGF, and PDGF-AA in RPE and glial cells. RESULTS: Numerous RPE, and relatively fewer glial cells, were found in all stages of PVR. CTGF immunoreactivity increased from early to late stage PVR and was principally expressed by RPE cells in early stage, and by glial cells in late stage PVR. HGF, expressed by both RPE and glial cells, was principally expressed in mid-stage PVR. PDGF-AA, expressed by both cell types, demonstrated a uniform level of staining throughout all stages of PVR. CONCLUSIONS: RPE and glial cells contribute to the expression of CTGF, HGF, and PDGF-AA during PVR, but with specific developmental patterns. PDGF-AA is expressed uniformly throughout all stages of PVR, while HGF expression peaks during mid stage, and CTGF expression is highest during late stage PVR. These results allow for the development of stage-specific therapeutics for PVR that may allow targeting of the early proliferative and/or the late tractional stages of PVR.     

激肽原-激肽系统参与增生性玻璃体视网膜病变形成的实验研究

背景前期研究发现,激肽原1是增生性玻璃体视网膜病变（PVR）患者玻璃体中的特异蛋白质,是在质谱鉴定中得到的肽段匹配和MASCOT得分最高的蛋白质,且与PVR的严重程度呈正相关。目的探讨激肽原一激肽系统（KKS）是否参与PVR的发生过程。方法大鼠视网膜色素上皮（RPE）细胞系RPE-J细胞复苏培养后用PBS配制成2．5X10^8／ml的细胞悬液,大鼠下腔静脉采血4ml经枸橼酸二钠处理和离心后用PBS制备成血小板密度为2．5×10^8／ml的血浆。用随机数字表法将60只Wistar大鼠随机分为实验组和生理盐水组,每组各30只。实验组大鼠左眼玻璃体腔内注射RPE细胞悬液4ill＋富含血小板血浆6仙l建立PVR模型,生理盐水组左眼玻璃体腔以同样的方法注射生理盐水10μl,各组大鼠的右眼作为自身对照组。术后1、3、7、14、21、28d行裂隙灯及间接检眼镜检查,按Francine的标准进行PVR分级。玻璃体腔注射后28d收集实验动物的玻璃体、血清和视网膜标本,应用Westernblot法检测缓激肽的表达,视网膜标本行组织病理学检查。结果术后28d,实验组有25只眼出现不同程度的PVR表现,建模成功率为89．3％（25／28）。术后7、14、28d裂隙灯下证实实验组大鼠形成1、2、3级PVR。视网膜组织病理学检查表明视网膜组织中炎性细胞浸润及RPE细胞移行并转化为成纤维细胞,出现视网膜脱离。Westernblot分析显示在所有PVR大鼠血清、玻璃体和视网膜中均可检测到缓激肽的表达,但实验组大鼠的表达强度明显高于生理盐水组大鼠。结论玻璃体腔注射RPE细胞联合富含血小板血浆的方法可以成功建立PVR大鼠模型,KKS可能参与PvR的发生。     

增生性玻璃体视网膜病变增生膜再塑型机制的研究

目的 观察不同病程增生性玻璃体视网膜病变（PVR）增生膜中不同细胞成分、细胞外基质（ECM）、基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制剂（TIMPs）随病程变化的规律，探讨PVR增生膜的再塑型机制。 方法 病程2个月至8年的孔源性视网膜脱离伴PVR患者的增生膜手术标本16例，用免疫组织化学方法标记增生膜中视网膜色素上皮（RPE）细胞、胶质细胞等不同的细胞成分，纤维连接蛋白（FN）、层粘连蛋白（l aminin）、Ⅰ～Ⅳ型胶原等不同ECM成分，以及MMPs（MMP2、MMP9）和TIMP1，分析不同病程PVR增生膜中各标记成分的变化以及与病程的相关性。 结果 随PVR病程延长，增生膜中RPE细胞、MMP2、FN表达逐渐减少(P=0.014，P=0.001，P=0.008)， 胶质细胞、Ⅰ、Ⅲ型胶原逐渐增多（P=0.022，P=0.001，P=0.008)，层粘连蛋白和Ⅱ、Ⅳ型胶原均有表达，但不随病程变化。RPE细胞、MMP2、纤维连接蛋白的表达与病程呈负相关，胶质细胞、Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达与病程呈正相关；MMP2与FN变化呈正相关。MMP9、TIMP1始终都有表达，但不随病程变化。 结论 在PVR增生膜形成和发展的过程中，增生膜中的RPE细胞、胶质细胞、FN、Ⅰ、Ⅲ型胶原、MMP2参与了PVR的再塑型过程。 (中华眼底病杂志， 2006， 22： 308-312）     

RPE-mediated collagen gel contraction. Inhibition by colchicine and stimulation by TGF-beta

Retinal detachment secondary to proliferative vitreoretinopathy (PVR) is often precipitated by traction on the retina from preretinal membranes and traction on the vitreous base. Contraction and proliferation of retinal pigment epithelial (RPE) cells appear to play an important role in the pathogenesis of PVR. Contraction of collagen gels by human RPE cells was evaluated as a model of tractional forces on the vitreous gel. The area of collagen gels with admixed RPE cells in 15-mm wells was measured daily. The collagen gels contracted to less than 50% of original area in 89% of wells. Colchicine (0.01-1 microM) inhibited RPE-induced collagen gel contraction, whereas 1 ng/ml of transforming growth factor-beta enhanced it. Potential stimulators or inhibitors of RPE-mediated gel contraction can be tested using this model.     

Evaluation of drug treatments for proliferative vitreoretinopathy using vitreous microtensiometry.

The effectiveness of antimetabolic and anticollagen agents against proliferative vitreoretinopathy (PVR) was assessed by vitreous microtensiometry, a new technique that measures in situ the tensile strength of vitreous membranes. Two PVR models were produced in rabbits by intravitreal injection of bovine retinal pigment epithelial (RPE) or fibroblast cells, and the animals subsequently were treated with 5-fluorouracil (5-FU) and beta-aminopropionitrile (BAPN), administered alone or in combination. The fibroblast PVR model produced high-strength membranes that did not respond significantly to these therapies. The RPE model gave lower-strength membranes that showed marginally significant decreases in strength with intravitreal 5-FU and systemic BAPN treatments. However, combination therapy showed a highly significant decrease in membrane strength and a clinically encouraging reduction in retinal detachment.     

增生性玻璃体视网膜病变中组织型转谷氨酰胺酶的表达

目的:检测增生性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜和视网膜色素上皮(RPE)细胞中组织型转谷氨酰胺酶(tTG)的表达情况,探讨tTG是否参与PVR的发病过程.方法:PVR患者21例,收集视网膜前膜,C级8例,D级13例,行tTG免疫组织化学染色.另对培养3-5代的人RPE细胞分别用含有1 00mL/L PVR玻璃体液、正常玻璃体液和PBS的DMEM培养液进行孵育24h后行tTG免疫细胞化学染色.光镜下观察,比较C级和D级膜的表达阳性率,显微图像分析测量3组RPE细胞染色的平均灰度值.结果:在PVR视网膜前膜中tTG呈阳性表达(81%),C级和D级膜表达阳性率无差异 (C级88%,D级77%,P＞0.05).培养的人RPE细胞表达tTG,在PVR患者的玻璃体液作用下,tTG表达的平均灰度值为137.0±2.6,与正常玻璃体液组(143.5±2.9)及PBS对照组(143.6±3.0)相比,表达水平升高(P＜0.05).结论:PVR视网膜前膜和培养的人RPE细胞tTG表达阳性,在PVR患者的玻璃体液作用下,RPE细胞的tTG表达水平升高,这表明tTG参与了PVR的发病过程,在PVR视网膜前膜的形成过程中可能有重要作用.