长链非编码RNA LOC101927476抑制卵巢癌细胞侵袭迁移和增殖

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LOC101927476在卵巢癌细胞中的表达及其对卵巢癌生物学特征的影响。方法选取2018—2019年于中国医学科学院肿瘤医院手术治疗的卵巢癌患者。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测卵巢癌细胞系3AO、OVCA429、TOV21G、A2780、SKOV3以及22例卵巢癌原发瘤和转移瘤组织中LncRNA LOC101927476的表达水平, 采用TCGA数据库中卵巢癌转录组测序数据验证LncRNA LOC101927476和GATA4的表达, 采用慢病毒包装体系构建过表达LOC101927476(OE-LOC101927476组)和空载(OE-EV组)慢病毒并转染至3AO细胞。设计单链向导RNA(sgRNA), 利用CRISPR/Cas9构建LncRNA LOC101927476敲除细胞系。采用Transwell法和划痕实验检测LncRNA LOC101927476对卵巢癌细胞侵袭和转移能力的影响。采用细胞计数盒8(CCK-8)法检测细胞的增殖能力。结果 real-time PCR显示, 22例卵巢癌患者中, 20例转移灶中L...     

长链非编码RNA PCBP1-AS1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:研究多聚胞嘧啶结合蛋白1反义长链非编码RNA（lncRNA PCBP1-AS1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:选取2013年5月至2016年4月在本院进行手术治疗的105例乳腺癌患者作为研究对象,将切除的癌组织作为试验组,同时取同一患者的癌旁（距肿瘤边缘＞2 cm）组织作为对照组。用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测lncRNA PCBP1-AS1表达情况;分析lncRNA PCBP1-AS1与乳腺癌病理参数关系;分析lncRNA PCBP1-AS1表达情况对乳腺癌患者生存情况的影响;Cox回归分析影响乳腺癌的预后因素。结果:试验组lncRNA PCBP1-AS1表达明显低于对照组（P<0.05）;乳腺癌患者癌组织中lncRNA PCBP1-AS1表达水平与患者年龄、肿瘤直径、绝经情况和病理类型相关性不明显（P>0.05）,与淋巴结转移和TNM分期有关（P<0.05）;绘制乳腺癌患者术后36个月生存曲线,lncRNA PCBP1-AS1高表达患者的总生存率明显高于低表达患者（P<0.05）;对lncRNA PCBP1-AS1表达、淋巴结转移和TNM分期进行Cox回归分析,显示lncRNA PCBP1-AS1表达是影响乳腺癌患者预后的独立保护因素,TNM分期是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。结论:乳腺癌患者癌组织中lncRNA PCBP1-AS1呈低表达,其表达水平与淋巴结转移和TNM分期有关,lncRNA PCBP1-AS1表达是乳腺癌预后独立保护因素,可作为乳腺癌预后判断指标之一,有望成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

PGM5-AS1对食管癌细胞侵袭、迁移和Wnt信号通路的影响

目的探讨PGM5反义RNA 1(PGM5-AS1)对食管癌细胞侵袭、迁移和Wnt信号通路的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测人食管上皮细胞HET-1A和食管癌细胞(TE-1、KYSE150、KYSE450和EC-109)的PGM5-AS1水平;体外向EC-109细胞转染PGM5-AS1过表达载体(过表达组)或空载体pcDNA3.1(空载组),并设未转染的细胞为对照组。采用QPCR、MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测PGM5-AS1水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测Wnt1和β-连环蛋白(β-catenin)水平。结果食管癌细胞的PGM5-AS1水平低于HET-1A细胞(P<0.05);过表达组EC-109细胞的PGM5-AS1水平为19.772±1.980,高于对照组的1.067±0.059和空载组的0.923±0.087(P<0.05);过表达组转染48、72 h后的细胞增殖活力低于其余两组(P<0.05);过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(24.854±2.290)%和(60.539±26.577)个,低于对照组的(59.381±4.790)%和(165.421±22.082)个及空载组的(61.266±3.325)%和(157.758±22.462)个,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和空载组相比,过表达组的Wnt1和β-catenin水平降低(P<0.05)。对照组和空载组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌细胞中PGM5-AS1表达降低并发挥抑癌基因的作用,上调PGM5-AS1水平可抑制增殖、迁移和侵袭能力,可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路来发挥作用,有望成为食管癌治疗的潜在靶点。     

Long noncoding RNA TMEM147-AS1 serves as a microRNA-326 sponge to aggravate the malignancy of gastric cancer by upregulating SMAD5

The abnormal expression of long noncoding RNAs (lncRNAs) is frequently observed in gastric cancer (GC) and considered an important driving force in GC progression. However, little is known regarding the involvement of TMEM147-AS1 in GC. Therefore, we examined TMEM147-AS1 expression in GC and determined its prognostic value. In addition, TMEM147-AS1 expression was depleted to identify the functional changes in response to TMEM147-AS1 deficiency. Using the cancer genome atlas dataset and our own cohort, we identified a strong expression of TMEM147-AS1 in GC. Increased TMEM147-AS1 levels in GC showed a significant association with poor prognosis. TMEM147-AS1 interference resulted in the inhibition of GC cell proliferation, colony-forming, migration, and invasion in vitro. Additionally, depletion of TMEM147-AS1 restricted the growth of GC cells in vivo. Mechanistically, TMEM147-AS1 functioned as a microRNA-326 (miR-326) sponge. Furthermore, SMAD family member 5 (SMAD5) was experimentally validated as the functional effector of miR-326. TMEM147-AS1 was demonstrated to sequester miR-326 away from SMAD5; consequently, knocking down TMEM147-AS1 downregulated SMAD5 levels in GC cells. The functional suppression of miR-326 or reintroduction of SMAD5 effectively reversed the attenuated behavior of GC cells caused by TMEM147-AS1 downregulation. In summary, TMEM147-AS1 exhibits tumorigenic activities in GC, which is likely the result of an altered miR-326/SMAD5 axis. Therefore, targeting TMEM147-AS1/miR-326/SMAD5 may represent a target for the treatment of GC.     

非小细胞肺癌中长链非编码RNA AFAP1-AS1的表达特征及其与患者预后的关系

目的观察长链非编码RNAAFAP1-AS1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,探讨AAFAP1-AS1与NSCLC患者预后的关系。方法选取82例病理学确诊为NSCLC患者的癌组织及癌旁组织,制作组织芯片,检测AFAP1-AS1在癌组织及癌旁组织中的表达。通过Cox单因素和多因素回归模型分析AFAP1-AS1与NSCLC预后的关系。结果 AFAP1-AS1在NSCLC肿瘤组织中的表达高于癌旁组织,并且AFAP1-AS1高表达的患者预后明显差于AFAP1-AS1低表达患者(P0.05)。结论 AFAP1-AS1在NSCLC肿瘤组织中表达上调,可作为判断NSCLC预后的重要指标。     

沉默长链非编码RNA POU5F1B抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA POU5F1B在食管癌细胞中的表达及临床意义。方法:采用实时定量PCR法比较POU5F1B在食管癌患者血浆和正常人血浆中的表达,检测POU5F1B在细胞系中的表达。敲除POU5F1B后,采用CCK-8和克隆形成试验评价沉默POU5F1B对细胞增殖的影响。采用Transwell和划痕实验检测POU5F1B对食管癌细胞侵袭和迁移的影响。结果:本研究中,我们发现POU5F1B在食管癌患者血浆中和细胞系中高表达。si-POU5F1B在体外能显著降低细胞增殖、侵袭和迁移能力。结论:本研究表明POU5F1B在食管癌中充当癌基因作用,为抗食管癌治疗提供了新的策略。     

长链非编码RNA ARAP1-AS1在肾透明细胞癌中的表达及作用研究

背景与目的：长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）ARAP1-AS1在多种肿瘤中异常表达,但其在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的作用尚不清楚。探讨ARAP1-AS1在ccRCC中的生物学作用。方法：通过GEPIA数据库分析ARAP1-AS1在ccRCC组织中的表达及其与临床病理学特征及患者生存率的关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测ccRCC组织及邻近的非肿瘤组织中ARAP1-AS1的表达水平。将患者分为ARAP1-AS1高表达组和低表达组,分析ARAP1-AS1的表达水平与患者临床病理学特征之间的关系,并进行生存分析。通过细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8,CCK-8）实验、transwell迁移实验及侵袭实验检测ARAP1-AS1对ccRCC细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达变化。采用BALB/c裸小鼠移植瘤模型分析ARAP1-AS1对ccRCC细胞体内成瘤能力的影响。结果：GEPIA数据库分析结果显示,ARAP1-AS1在ccRCC中高表达,且与患者肿瘤高分期及较差的生存率相关（P均<0.05）。RTFQ-PCR显示,ARAP1-AS1在ccRCC组织及细胞系中高表达,ARAP1-AS1的高表达与肿瘤大小和分期相关（P均<0.05）。ARAP1-AS1高表达患者的总生存率较差（P<0.05）。沉默ARAP1-AS1的表达可以抑制ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭（P均<0.05）。沉默ARAP1-AS1可以降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平（P均<0.05）。沉默ARAP1-AS1可使ccRCC细胞体内成瘤能力减弱,并使Ki-67增殖指数降低。结论：ARAP1-AS1可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进ccRCC的进展。     

长链非编码RNA AFAP1-AS1在癌症中作用及其机制的研究进展

癌症一直是全球非感染性疾病死亡的主要原因之一,癌症的有效筛查和早期诊断、早期治疗一直以来是临床的一大难点,鉴定新的生物标志物或分子靶标以改善癌症患者的诊断和治疗刻不容缓.近年来研究发现,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一系列生物行为和包括肿瘤在内的疾病发生、发展的主要调节因子,...