聚合酶链反应快速检测结核杆菌的临床应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)又称体外 DNA 扩增技术或体外核酸克隆技术,自1985年初 Saiki 建立以来,在短短的几年内获得了很大发展。Hance 最先把 PCR 技术应用到结核杆菌的诊断后,国内外相继研究应用。参考国外文献,我们设计合成了一对引物。特异性地扩增结核菌 B 蛋白基     

聚合酶链反应在白血病诊疗中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程的体外基因扩增特异性DNA片段的新技术。它能高效扩增目的DNA片段,在数小时内完成20～50个循环,使目的DNA扩增数百万倍。该技术具有快速、敏感、特异性强等优点,目前已广泛用于传染病和遗传病的诊断,并在血液病的研究中取得了重大进展。本文就PCR在白血病诊疗中的应用概述如下。     

乙型肝炎病毒诊断技术的新进展

1990年4月,在美国休斯顿召开了第七届病素性肝炎和肝病国际讨论会,现将有关HBV 诊断技术进展综述如下:一、PCR 技术极大地推动了对HBV感染的研究1.有传染性的HBV 感染者比预料的多:PCR(聚合酶链反应)技术是新近发展起来的体外DNA 扩增技术,通过PCR 扩增,可以检测出甚至单拷贝的HBV DNA,是目前最敏感的检测方法。Baker 等,Shin 等通过PCR     

临床标本聚合酶链反应的影响因素探讨

聚合酶链反应是一种核酸体外扩增技术。近年来已广泛应用于病原性微生物检测、遗传及肿瘤的诊断等生物学领域。作为一种诊断工具，PCR具有超凡的敏感性，但是，由于PCR方法的结果受诸多因素的影响，如技术操作、标本前处理、试剂等，所以实际应用于临床诊断尚存在许多问题，为了保证PCR结果的可靠性和准确性，本文探讨了临床标本PCR技术检测的影响因素及控制方法。     

PCR检测乙肝病毒的体会

PCR技术即聚合酶链反应，是体外扩增基因，具有特异性强，快速，简便、灵敏度高等特点．目前广泛应用于微生物学、遗传基因检测以及肿瘤的诊断．现将二年来应用PCR诊断乙肝的体会小结如下。     

PCR检测结核杆菌标本前处理的体会

PCR即聚合酶链式反应，是80年代中期创建的一种体外基因扩增技术。自1989年被应用于结核病诊断以来已成为结核病学实验诊断领域中被世人关注的焦点，在短短数年中取得了巨大成绩。但在检测结核杆菌标本前处理时方法很多。标本前处理指行DNA扩增前的处理：包括标本处理和靶DNA的提取，它是PCR检测结核杆菌成败关键之一。目前经典的标本前处理法，步骤繁杂，不宜临床；现根据不同的标本进行简易前处理谈一点体会。     

不同种类的PCR技术及其应用

聚合酶链反应(PCR)是一种体外快速扩增特异DNA 片段的酶学方法。自1985年建立至今,已广泛应用于基因工程、临床检验、遗传病的基因诊断等各个领域。随着这一技术的不断发展以及满足不同研究目的的需要,近年,根据PCR 的基本原理,开发了PCR 技术的许多新用途。本文综述了这方面的新进展。     

定量PCR技术

聚合酶键反应（PCR）是模拟DNA体内复制过程,在体外将DNA片段加以人工扩增的技术。有许多因素都可以影响PCR的扩增效率,导致常规PCR的特异性不强,准确性不高,为此,大量学者设计了定量PCR技术,以克服各种因素对PCR扩增的干扰,从而提高PCR的特异性及准确性。本文对定量PCR技术进行了简要的综述。     

用聚合酶链反应检测乙肝患者HBV DNA

检测乙肝病毒HBV DNA 是诊断乙肝判断HBV复制的最重要的指标之一.用聚合酶链反应(PCR)在体外进行基因扩增可将体内极微量的HBV DNA扩增10~6倍,其灵敏度远远超过了目前常规应用的DNA 杂交技术.最近,我们用此方法对乙肝患者进     

PCR技术在临床诊断学中的应用

聚合酶链反应(PCR)是近年发展起来的生物高技术,它模拟天然DNA的复制过程,在体外迅速大量地扩增人工选定的一定长度的核酸序列,使微量生物样品中DNA的分析更加简洁、快速、敏感。广泛应用于医学及分子生物学等许多领域。本文扼要综述了PCR技术在遗传病DNA诊断、感染性疾病病原体检测以及肿瘤研究中的应用。     

PCR技术在临床检验中的质量保证

聚合酶链反应（PCR）是一种体外由引物介导的特异基因组或克隆序列的酶促扩增技术，由美国PE公司遗传部的卡里．B．穆里斯博士于1984年发明，1987年专利局授予PCR技术专利；获1993年瑞典皇家科学院诺贝尔化学奖，瑞典皇家科学院认为，穆里斯发明的“聚合酶链反应”法可使复杂的遗传物质单体脱氧核糖核酸（DNA）片段复制几百万倍，现在世界各地都在使用PCR技术，检测病人血液中的微量遗传物质。这一成就为精确诊断各科疾病，特别是以往认为那些诊断困难的病原铺平了道路。由于PCR技术简单得令人惊奇，而且还有高效的扩增特性，所以，…     

聚合酶链反应在病毒感染诊断中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是近年发展起来的新技术,即在体外用聚合酶倦化扩增核苷酸分子,故又称体外基因扩增。用PCR催化能使核酸分子按几何级数扩增,使样品中极微量或单拷贝的核苷酸分子迅速地扩增100万～1000万倍,然后通过核酸分子的检测,获得极其敏感的结果。该技术自1985年Saiki首次报道以来     

PCR技术在乙型肝炎病毒检测中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是新近建立的一种体外扩增特异性DNA的技术,具有快速、简便、敏感度高、特异性强等优点。近年来,国外应用PCR技术对乙型肝炎病毒(HBV)感染进行了大量的研究,并显示广泛的应用前景,国内处于开始研究阶段。现就PCR技术在HBV检测中的应用作一概述。一、发展诊断HBV感染的新方法现已证实,每毫升污染10~2个Dane颗粒的血清即能使黑猩猩发生HBV感染。过去采用的分子杂交法仅可检出0.1Pg/ml的HBVDNA,相当于10~5～10~6Dane颗粒,限制了对HBV感染的诊断。PCR技术可检出低至0.4f g/ml(130 Dane颗粒/ml)水平的     

PCR试剂盒保存方法的探讨

聚合酶链反应( polymerase chain reaction,PCR)又称体外基因扩增技术.1985 年美国PE公司人类基因研究室Muliss等人发明了该项技术,极大地推动了生命科学各个领域的发展并因此获得诺贝尔奖.近年来,PCR技术在临床应用越来越广泛,它已使临床检测水平跃上一个新台阶.但在临床检测过程中,发现PCR结果有时不太稳定,这与许多因素有关,如PCR试剂盒的保存条件、PCR操作环境、样品处理的手段等等.本文对乙型肝炎PCP试剂盒的保存条件问题做了一些研究.     

用多聚酶链反应(PCR)快速诊断白色念珠菌感染

由白色念球菌引起的院内感染日益增多。应用多聚酶链反应(PCR)体外扩增白色念珠菌DNA.为临床敏感、特异、快速诊断白色念珠菌感染提供了有用的工具。本文就PCR检测白色念珠菌DNA的引物,标本处理,扩增程序,扩增产物分析以及临床应用效果予以介绍。     

PCR技术在HLA配型中的应用

聚合酶链式反应（PolmeraseChainReaction，PCR）是一种特异性DNA片段体外快速酶扩增技术，它采用一对与靶序列两端互补的寡核苷酸引物，在DNA聚合酶作用下，经过变性、退火、延伸三个步骤约30个循环后，使少至1ng的DNA扩增至106～108倍。PCR技术目前已广泛应用于病源学检查，基因序列分析及遗传病的诊断等诸多方面。人类白细胞抗原（HLA）作为个体组织细胞的遗传标志，在抗原识别、提呈、免疫应答与调控、破坏外来抗原靶细胞等方面起重要作用，是导致移植排斥反应和移植物抗宿主反应（GVHR）的主要抗原。HLA基因位于人体第6号…     

荧光定量PCR技术及其临床应用

PCR技术是一种体外核酸扩增技术。通过 PCR技术可对待定基因进行扩增 ,其主要应用领域是基因检测和临床基因诊断。但其应用于临床基因诊断还存在许多局限性 ,主要表现在不能准确定量和因交叉污染而易产生假阳性等。荧光定量 PCR(Fluoresence Quantive Polymerase ChainReaction,FQ- PCR)的出现 ,解决了上述问题 ,是 PCR技术的革命性进展。它可以定量分析 DNA或 RNA样本的拷贝数 ,准确检测出样品中的基因数目 ,在临床实践中有着重要的意义和应用前景。FQ- PCR基于荧光共振能量转移 (Fluoresence Reso-nance Energy Transfer,…     

连接酶链反应(LCR)—一种DNA扩增和诊断的新技术

连接酶链反应(LCR)是在连接酶扩增反应中,引入热稳定的DNA 连接酶而建立的、类似PCR 技术的新方法。LCR 既可扩增、又可鉴定单个碱基突变。因此,与PCR 技术一样,LCR 可用于DNA 扩增和已知基因突变类型的遗传病诊断与普查。     

聚合酶链反应对结核性胸水的诊断价值

聚合酶链反应（PCR）是一种新兴的体外DNA扩增技术，目前已广泛应用于临床。由于结核性胸水涂片查找结核菌阳性率低，结核菌培养较难且耗时较长，因此对结核性胸水的诊断存在一定困难。PCR技术在基因水平上为结核病源学快速、敏感、特异诊断开辟了新的途经。我们对40例结核性胸膜炎及5例非结核性胸水进行TB－PCR检测，同时与直接涂片镜检比较，以探讨聚合酶链反应对结核性胸水的诊断价值。1对象与方法45例均为住院病人，根据临床表现、X线、实验室检查及经抗济治疗胸水吸收、临床症状缓解而确认为结核性脑水40例，经病理证实恶性胸水3…     

荧光定量PCR技术及其在临床上的应用

荧光定量PCR(FluorescenceQuantitivePolymeraseChainReactionFQ PCR)技术是在 90年代末期发展起来的一项全新技术。经过几年的实践及临床应用 ,已获得了较为稳定的检测效果。作为一种体外基因扩增技术 ,它能敏感地检测初始模板浓度及基因变异等情况。它的出现 ,克服了传统PCR技术普遍存在的假阳性及不能定量等问题 ,使得PCR技术更广泛地应用于临床 ,在监测患者病情、预后、指导用药等方面有着广阔的应用前景。本文概述了FQ PCR技术及其在临床上的应用 ,即常见病原体的检测[1,3 ] 及其在分子遗传学和法医学中的应用