荆防颗粒对糖尿病小鼠视网膜的保护作用

目的 探讨荆防颗粒对db/db小鼠血糖代谢的调控作用及对其视网膜病变（diabetic retinopaphy,DR）的保护作用。方法 将60只雄性db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍（120 mg/kg）组及荆防颗粒（1、2 g/kg）组,每组15只,另取15只雄性db/m小鼠作为对照组,每周检测小鼠体质量、空腹血糖、摄食量及饮水量等基础指标,并在实验结束后进行口服葡萄糖耐量试验（oral glucose tolerance test,OGTT）;采用ELISA检测小鼠视网膜组织白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平和过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性;采用PAS染色检测视网膜组织病理变化;采用Western blotting检测视网膜组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、紧密连接跨膜蛋白（Claudin-1）、胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate 1,IRS1）、磷酸化IRS1（phosphorylated IRS1,p-IRS1）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）、磷酸化PI3K（phosphorylated PI3K,p-PI3K）、蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）、磷酸化Akt（phosphorylated Akt,p-Akt）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3）蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠空腹血糖、摄食量、饮水量明显升高（P＜0.01）,OGTT中曲线下面积（AUC）显著升高（P＜0.01）;视网膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA含量显著升高（P＜0.01）,CAT、SOD活性显著下降（P＜0.01）;视网膜组织周细胞降低,新生血管增多（P＜0.01）,并且视网膜组织中Claudin-1、p-IRS1/IRS1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达下调（P＜0.01）,VEGF、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达上调（P＜0.01）。与模型组比较,荆防颗粒组小鼠体质量明显升高（P＜0.05、0.01）,空腹血糖、摄食量、饮水量均有不同程度下降（P＜0.05、0.01）;视网膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量显著下降（P＜0.05、0.01）,CAT、SOD活性显著上升（P＜0.05、0.01）;视网膜组织病理形态有所改善,视网膜组织中Claudin-1、p-IRS1/IRS1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达显著上调（P＜0.05、0.01）,VEGF、Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达显著下调（P＜0.05、0.01）。结论 荆防颗粒对db/db小鼠视网膜病变具有一定的改善作用,其作用机制可能为调节小鼠视网膜组织中VEGF及Claudin-1蛋白表达,进而激活胰岛素受体IRS-1/PI3K/Akt信号通路,启动Caspase级联反应,抑制视网膜上皮细胞的凋亡,从而对视网膜病变起到一定的保护作用。     

基于网络药理学和动物实验探究荆防颗粒对高尿酸血症的治疗作用及机制

目的 基于网络药理学方法和体内实验验证探讨荆防颗粒治疗高尿酸血症的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选荆防颗粒活性成分对应靶点,通过OMIM、GeneCards和TTD等数据库收集高尿酸血症相关靶点。将交集靶点上传至STRING数据平台构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络,再采用Metascape数据平台进行基因本体（gene ontology,GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。采用氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠模型和小鼠肾脏代谢组学对网络药理学结果进行验证。结果 网络药理学结果表明,荆防颗粒109个成分中含有500个相关靶点,高尿酸血症相关靶点801个,交集靶点87个。PPI网络分析结果显示,甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH）、肿瘤蛋白p53（tumor protein p53,TP53）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3,Caspase-3）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）可能是荆防颗粒治疗高尿酸血症的关键靶点。KEGG通路富集分析获得凋亡信号通路、坏死性凋亡、低氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1,HIF-1）信号通路等。通过氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠模型结果显示,荆防颗粒显著降低血清尿酸、尿素氮及血肌酐水平（P＜0.01、0.001）,显著抑制肾组织Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、cleaved Caspase-3蛋白表达（P＜0.01）,升高B细胞淋巴瘤（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）蛋白表达（P＜0.05、0.01）。肾脏代谢组学结果显示,荆防颗粒能够通过改善高尿酸血症小鼠丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢、糖酵解/糖异生途径、柠檬酸循环等途径改善代谢。结论 荆防颗粒能够基于多成分、多靶点、多通路的特点相互协同治疗高尿酸血症。     

葛根素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与自噬及其分子机制研究

[目的] 探索葛根素（Puerarin）诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与自噬及其可能的分子机制。[方法] 以二甲基亚砜（DMSO，空白组）、葛根素（50、100、200 μg/mL）、顺铂20 μg/mL分别干预对数生长期人肝癌HepG2细胞。48 h后，CCK-8法检测细胞增殖抑制率，Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平，吖啶橙染色法观察细胞自噬状况，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、激活型半胱氨酸蛋白酶（Cleaved Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、酵母ATG6同源物（Beclin1）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）蛋白表达。[结果] 与空白组比较，葛根素100、200 μg/mL组和顺铂20 μg/mL组HepG2细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高（P<0.01），自噬溶酶体数量明显增多（P<0.01），p-Akt、p-mTOR、bcl-2表达明显下调而Cleaved Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3-I、LC3-Ⅱ表达明显上调（P<0.05或P<0.01），Akt磷酸化（p-Akt/Akt比值）降低且Bax/bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高（P<0.01）。与顺铂20 μg/mL组比较，葛根素200 μg/mL组细胞增殖抑制率和凋亡率显著升高（P<0.05或P<0.01），自噬溶酶体数量明显增多（P<0.05），p-Akt、p-mTOR表达下调而Cleaved Caspase-3、Bax、Beclin1、LC3-Ⅱ明显上调（P<0.05或P<0.01），Akt磷酸化降低且Bax/Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-I比值升高（P<0.01）。[结论] 葛根素具有诱导人肝癌HepG2细胞凋亡与自噬的作用，该作用具有一定的剂量依赖性；抑制Akt/mTOR/Beclin1通路进而诱导促凋亡、促自噬相关蛋白表达和活化可能是其重要的分子机制。     

基于Akt/mTOR通路研究地榆皂苷II诱导肝癌细胞凋亡和自噬作用机制

目的 探讨地榆皂苷II抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡和自噬的作用机制。方法 采用不同浓度（0、10、20、40 μmol/L）地榆皂苷II处理人肝癌HepG2细胞和小鼠肝癌Hepa1-6细胞,通过CCK-8和EdU实验观察地榆皂苷II对HepG2和Hepa1-6细胞增殖的影响;运用流式细胞术检测地榆皂苷II对细胞凋亡的影响;通过Western blotting检测地榆皂苷II对细胞凋亡和自噬相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cysteine-aspartic acid protease-3,Caspase-3）、Caspase-8、Caspase-9、B细胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）、cleaved Caspase-3、微管相关蛋白1A/1B-轻链3-II（microtubule-associated protein light chain3-II,LC3II）、微管相关蛋白1A/1B-轻链3-Ⅰ（microtubule-associated protein light chain3-Ⅰ,LC3Ⅰ）、自噬相关蛋白p62、Beclin1及蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）通路关键蛋白表达的影响。结果 地榆皂苷II显著抑制HepG2和Hepa1-6细胞活力,且呈现一定的剂量相关性;流式细胞检测发现地榆皂苷II给药后细胞凋亡率显著增加（P＜0.01、0.001）;Western blotting结果显示,与对照组比较,地榆皂苷II给药后Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2表达显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）,cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高（P＜0.05、0.01）,LC3Ⅱ/LC3I值显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）,Beclin1蛋白表达量显著升高（P＜0.05、0.01）,p62蛋白表达量显著下降（P＜0.05、0.01）,p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR值显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 地榆皂苷II通过Akt/mTOR通路诱导HepG2和Hepa1-6细胞自噬和凋亡实现对肝癌细胞增殖的抑制,为抗肝细胞癌新药发现提供药理学证据。     

抵当陷胸汤调控PI3K/Akt信号通路对糖尿病大鼠足细胞凋亡的影响

目的 观察抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路的调控作用与对足细胞凋亡的影响,探讨抵当陷胸汤改善糖尿病肾病的机制。方法 采用单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液55 mg·kg^-1的方法建立糖尿病模型,将模型复制成功的30只随机分为模型组、抵当陷胸汤组（8.10 g·kg^-1）、小陷胸汤组（4.05 g·kg^-1）、抵当汤组（4.05 g·kg^-1）、阿拉氯胺（ALT-711）组（3 mg·kg^-1）,每组6只,另设6只空白组大鼠。连续给药8周后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肾脏组织病理形态变化;马松（Masson）染色观察胶原沉积程度;高碘酸-席夫（PAS）染色观察基底膜病变;免疫组化法检测大鼠肾组织磷酸化（p）-PI3K、p-Akt蛋白表达;原位末端标记法（TUNEL）检测大鼠足细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠肾组织PI3K、Akt mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷酸化糖原合成酶激酶-3β（p-GSK-3β）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）的蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠肾小球代偿性膨胀,系膜细胞增殖,系膜间质大量胶原沉积,基底膜增厚,PI3K、Akt mRNA表达减少,PI3K、Akt蛋白磷酸化显著受到抑制（P<0.01）,足细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低（P<0.01）,Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,抵当陷胸汤组肾脏组织病理明显改善,PI3K、Akt mRNA表达显著升高（P<0.01）,PI3K、Akt蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.01）,Bcl-2表达显著升高（P<0.01）,Bax、p-GSK-3β、Caspase-3表达显著降低（P<0.01）,足细胞凋亡率显著降低（P<0.01）。结论 抵当陷胸汤可能通过促进PI3K/Akt信号通路活化,抑制足细胞凋亡,减缓糖尿病肾病的发展进程。     

桃红四物汤上调Nrf2/HO-1信号通路减轻去势小鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨桃红四物汤对去势（OVX）雌性小鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响及机制研究。方法 雌性小鼠建立去势模型后,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠的雌二醇（E₂）水平验证去势模型;对成功建立去势模型的小鼠抽取60只随机分为6组：假手术组、模型组、桃红四物汤低、中、高剂量组（9、18、36 g·kg^-1）、核因子E₂相关因子2（Nrf2）抑制剂组,每组10只;采用激光散斑血流仪验证MIRI模型;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法与苏木素-伊红（HE）染色法检测心肌组织病理变化;ELISA检测小鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌肌钙蛋白Ⅰ（CTnⅠ）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）水平;采用免疫荧光染色法观察Nrf2、血红素加氧酶-1（HO-1）的表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Nrf2、HO-1与凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、炎症因子白细胞介素-18（IL-18）、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达。结果 与假手术组比较,模型组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6水平升高（P<0.01）,SOD、IL-10水平降低（P<0.01）,心肌组织TTC染色、HE染色损伤评分增加（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达减少（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量减少,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量增加（P<0.01）;与模型组比较,桃红四物汤剂量组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6明显下降（P<0.05,P<0.01）,SOD、IL-10明显增加（P<0.05,P<0.01）,心肌组织的TTC染色、HE染色损伤评分显著降低（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达增加（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量明显增加（P<0.05,P<0.01）,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量明显减少（P<0.05,P<0.01）,其中以桃红四物汤高剂量组效果最为显著;Nrf2抑制剂组小鼠血清中CK-MB、CTnⅠ、MDA、IL-6水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,SOD、IL-10水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,心肌组织TTC染色、HE染色损伤评分显著增加（P<0.01）,心肌组织免疫荧光Nrf2、HO-1的表达显著减少（P<0.01）,心肌组织Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达量明显减少,Bax、IL-18、IL-1β蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论 桃红四物汤能够减轻去势小鼠心肌缺血再灌注损伤,减轻氧化应激反应,减少炎症因子释放并抑制组织凋亡,对去势MIRI小鼠发挥保护作用,并且该保护作用可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

槲皮素对黄药子致肝损伤小鼠的保护作用及其机制

目的 探究槲皮素对黄药子致肝损伤的保护作用及其机制。方法 将48只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、水飞蓟宾（100 mg/kg）组和槲皮素高、中、低剂量（80、50、20 mg/kg）组。对照组ig 0.5%羧甲基纤维素钠溶液,其余各组小鼠ig相应药物及黄药子醇提物（2 g/kg）,1次/d,连续30 d。实验结束后称定小鼠体质量和肝脏质量,计算肝脏指数;测定血浆中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及丙二醛（malonaldehyde,MDA）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-10（interleukin-10,IL-10）、IL-1β水平;苏木素-伊红（hematoxylin-eosin staining,HE）染色观察肝脏组织病理学变化;TUNEL染色法检测肝脏细胞凋亡情况;采用Western blotting检测肝脏核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、磷酸化核因子-κB p65（phosphorylated nuclear factor-κB p65,p-NF-κB p65）、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、多药耐药相关蛋白2（multidrug resistance-associated protein 2,MRP2）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1（uridine diphosphate-glucuronosyltransferase 1A1,Ugt1a1）、P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达;采用qRT-PCR检测肝脏MRP2、P-gp、Ugt1a1的mRNA表达。结果 与模型组比较,槲皮素显著降低小鼠肝脏指数及肝功能（P＜0.05、0.01）,减轻肝脏组织病理变化,降低血浆中MDA水平（P＜0.05、0.01）,升高SOD活性（P＜0.01）,降低TNF-α、IL-1β水平（P＜0.05、0.01）,升高IL-10水平（P＜0.01）,抑制肝脏p-NF-κB p65、Bax蛋白表达（P＜0.05、0.01）,促进Nrf2、HO-1及药物转运体蛋白表达（P＜0.05、0.01）,并上调MRP2、P-gp、Ugt1a1的mRNA表达（P＜0.01）。结论 槲皮素对黄药子诱导的肝损伤有一定保护作用,其作用机制可能与减轻炎症、抑制细胞凋亡、调控Nrf2及药物转运体的表达相关。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨白芷颗粒对糖尿病视网膜病变的影响

目的 研究白芷颗粒对早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）的保护作用。方法 采用ip链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）法制备糖尿病模型,设置对照组、模型组、白芷（1.25 g/kg）组及羟苯磺酸钙（135 mg/kg）组。连续给药12周后采用苏木素-伊红（HE）和高碘酸-席夫（PAS）染色观察大鼠视网膜病理学改变;采用TUNEL染色法检测视网膜细胞凋亡情况;采用Western blotting检测视网膜组织紧密连接蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）通路相关蛋白表达。人视网膜上皮细胞（adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19）分为对照组、高渗组、高糖组、白芷（150 μg/mL）组和羟苯磺酸钙（20 μmol/L）组,对照组在含5.5 mmol/L葡萄糖的培养基中培养;高渗组在含5.5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L甘露醇的培养基中培养;高糖组和各给药组在含30 mmol/L葡萄糖的培养基中培养,并给予相应药物。采用TUNEL染色、免疫荧光、Western blotting法观察细胞凋亡、紧密连接蛋白及PI3K/Akt通路相关蛋白表达。使用PI3K抑制剂LY294002后,观察其下游凋亡相关蛋白的变化。结果 HE染色结果显示,模型组大鼠视网膜组织排列紊乱,视网膜变薄,白芷干预后较模型组有所缓解。TUNEL染色显示视网膜组织中细胞凋亡率增加。Western blotting结果显示,与模型组比较,白芷组咬合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白1（Zonula occluden-1,ZO-1）、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）,Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）/ B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3）蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。体外实验结果显示,白芷干预后细胞凋亡率降低（P＜0.05）,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）,Occludin、ZO-1蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）;免疫荧光结果显示白芷干预后Occludin、ZO-1表达升高;此外,白芷能够促进高糖环境下PI3K/Akt的磷酸化,在使用PI3K抑制剂干预后抑制了Akt的磷酸化,Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）。结论 白芷颗粒能够通过抑制细胞凋亡保护血-视网膜屏障损伤,从而延缓早期DR的发展,其作用机制可能与调节PI3K/Akt信号通路有关。     

补肾养血方对卵巢早衰小鼠凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的：探讨补肾养血方对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠卵巢凋亡调节基因B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。方法：以小鼠透明带3（Zp3）为抗原,皮下多点注射免疫 BALB/c雌性小鼠,14 d后强化免疫,建立免疫性卵巢早衰模型。设补肾养血方低、中、高剂量（5.1,10.2,20.4 g·kg^-1）进行治疗,以补佳乐（戊酸雌二醇0.6 mg·kg^-1）为阳性对照,于造模后15 d开始灌胃给药1次/d,连续6周（每1周休息1 d）。放射免疫法检测小鼠血清激素水平,Western法检测卵巢组织 Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达减少,Bax蛋白表达增加,（P<0.05）,模型组小鼠卵巢Bcl-2/Bax下降（P<0.01）,提示模型组卵泡Bcl-2蛋白的低表达、Bax蛋白的高表达可能加速了卵泡的凋亡,导致卵巢早衰;与模型组相比,补肾养血方高、中、低剂量组及西药组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达明显增加（P<0.01,P<0.05）,卵巢Bax蛋白的表达均减少（P<0.05）,Bcl-2/Bax明显降低（P<0.05）。结论：卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,补肾养血方可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

左金丸对DSS诱导的溃疡性结肠炎的作用及其机制

目的 基于网络药理学与实验验证探究左金丸（ZJW）治疗溃疡性结肠炎（UC）的作用及机制。方法 借助网络药理学与分子对接初步明确ZJW治疗UC的活性成分与潜在机制,将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺吡啶组（300 mg·kg^-1）和左金丸低、中、高剂量组（1.82、3.64、7.28 g·kg^-1）,采用葡聚糖硫酸钠（DSS）构建UC模型,造模第3天开始灌胃给药,连续7 d,每日观察小鼠一般状态并评估疾病活动指数（DAI）。苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理学变化,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6和IL-10水平,并以蛋白免疫印迹法（Western blot）验证分子机制。结果 网络药理学预测发现磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路可能是ZJW调节UC的关键途径。分子对接结果表明ZJW关键成分与核心靶点之间均有良好的结合能力。动物研究结果显示,与正常组比较,模型组小鼠结肠长度显著缩短（P<0.01）,DAI评分、脾脏指数、结肠组织病理学评分与血清中TNF-α、IL-6水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,结肠组织PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）与B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）表达明显增加（P<0.05,P<0.01）,血清IL-10水平与结肠组织Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,左金丸各给药组小鼠UC症状明显改善,结肠组织病理损伤减轻,血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6水平显著下调（P<0.01）,结肠组织PI3K、p-Akt与Bax蛋白表达明显抑制（P<0.05,P<0.01）,血清IL-10水平与结肠组织Bcl-2蛋白表达显著提高（P<0.01）,以高剂量组效果最佳。结论 ZJW可有效缓解DSS诱导的UC,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路、调节凋亡相关蛋白表达相关。     

恶性肿瘤患者甲床紫晕与舌下络脉变化的对比观察

甲床紫晕指甲半月远侧甲床上的紫色晕带,宽约2mm以上。伴指压反应延迟者,多见于肺癌、肺转移癌、肝癌、全身转移癌等重症肿瘤及肺心病、支气管哮喘及慢性支气管炎等阻塞性肺疾患,辨证均属血瘀证。铸型标本显示甲床有三级血管弓,第一级弓发出直行血管,血流为瀑布样直流,不易瘀滞;第二级弓发出的微血管互相交叉吻合形成网眼,血流变缓,其弓正当甲半月远侧,在气滞血瘀微循环障碍时易形成甲床紫晕。通过与吉下络脉同步观察,认为两者均可作血瘀证体征。     

中药外敷治疗恶性胸水50例

应用中药外敷治疗恶性肿瘤胸水５０例，取得胸水完全吸收１０例，部分减２１例的良好疗效，该方法对缓解临床症状，改善生存质量也有较好作用。     

更年安的抗氧化作用

更年安７ｇ、３．５ｇ／（ｋｇ．ｄ）灌服小鼠，连续３０ｄ，能抑制动物脑、心、肝组织内和血清中过氧化脂质及脑、心、肝组织内脂褐质的生成，并提高小鼠红细胞内超氧化物歧化酶的活性，对小鼠全血中谷胱甘让过氧化物酶活性也有升高作用。上述结果说明，更年安有抗氧化作用。     

心肌康临床应用及实验研究

一文报告应用心肌康治疗病毒性心肌炎，原发性扩张型心肌病，冠心病（心绞痛）气阴两虚证１１９例的临床结果，并随机设对照组８６例进行对照观察。结果表明，心肌康疗效满意，对３种病疗效优于对照组，尤其在治疗和改善心气阴两两虚证方面，疗效明显优于对照组（Ｐ＜０．００５）。通过心肌康的药效学实验，说明该药对大鼠实验性钴心肌病模型有一定的保护和治疗作用，通过急，慢毒安全性实验评实其无任何毒性，临床应用安全可靠。     

LC/MS/MS法鉴别神速宁胶囊中添加的盐酸氯丙嗪成分

目的:建立神速宁胶囊中非法添加盐酸氯丙嗪成分的鉴别方法。方法:采用色谱柱C18(250mm×2.0mm);乙腈-10mmol.L-1醋酸铵-三乙胺(65∶35∶0.5)(用醋酸调pH6.2)为流动相;流速:0.2mL.min-1;电喷雾离子化(ESI)扫描方式;二级质谱母离子m/z319,碰撞能量15V。结果:在高效液相色谱、紫外光谱、质谱中,样品出现与盐酸氯丙嗪成分一致的色谱峰、光谱图、质谱峰。结论:本方法简单可行,结果准确可靠,可用于神速宁胶囊中添加盐酸氯丙嗪成分的定性鉴别。     

密花石斛与马鞭石斛不同药用部位的色谱指纹图谱研究

目的:研究并比较密花石斛、马鞭石斛药材不同部位的指纹图谱.方法:采用HPLC/UV与HPLC/MS技术对二药的不同部位(茎、根、苗)进行色谱指纹图谱研究.结果:建立了密花石斛茎、根、苗与马鞭石斛茎、苗的HPLC/UV指纹图谱,并用HPLC/MS对其色谱峰进行了初步归属.结论:所建立的方法可用于密花石斛、马鞭石斛茎、根、苗指纹图谱的测定,并为其全面质量控制及化学成分研究提供参考.     

大叶紫薇叶和果实中三萜酸的HPLC/UV/MS指纹图谱比较

目的:采用HPLC/UV/MS对大叶紫薇叶和果实中三萜酸类成分指纹图谱进行了比较.方法:采用LunaC18柱(2.6mm×250 mm,5μ);乙腈与0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min-1.结果:大叶紫薇叶和果实中都含有2α-羟基熊果酸和2α-羟基齐墩果酸,大叶紫薇叶中含有熊果酸,而果实中含有齐墩果酸.结论:本方法可用于大叶紫薇叶和果实的质量控制.     

芍药甘草汤配伍意义的药动学研究

目的：通过检测给予芍药、甘草单方或合剂芍药甘草汤后,动物血浆中芍药苷、甘草次酸的药动学参数,探索芍药甘草汤配伍的合理性。方法：将芍药、甘草及芍药甘草汤制成水煎液,分别灌胃给予SD大鼠,采用HPLC／MS／MS法测定大鼠血浆中芍药苷、甘草次酸的血药浓度,并计算主要药动学参数。结果：与单方相比,给予芍药甘草汤后大鼠血浆中甘草次酸的达峰时间提前,峰浓度增加;芍药苷达峰浓度提高、相对生物利用度增加;两成分均出现半衰期缩短现象。结论：臣药甘草促进了君药芍药中芍药苷的吸收,提高了它的体内浓度与含量,这可能是复方芍药甘草汤解痉、镇痛、镇静等功效强劲有力的体内药动学依据。君药芍药提前助燃了臣药甘草中甘草次酸在体内出现的时间和数量,这也可能是复方芍药甘草汤抗溃疡、解痉、抗炎等功效迅速高效的体内药动学依据。本实验从药动学角度证明了芍药甘草汤配伍的合理性。     

LC/MS/MS测定龙胆苦苷的尿药浓度

目的建立龙胆苦苷尿药浓度的液质联用测定方法(LC/MS/MS).方法以咖啡因作内标,固相萃取法处理尿样.色谱柱:RESCEK C8柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH=6.5)-乙腈(50:40:10),流速为0.2 mL·min-1.样品经电喷雾离子源(ESI)正离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子监测方式测定龙胆苦苷(m/z 374.1→195.2)和咖啡因(m/z 195.2→138.2)浓度.结果尿液中龙胆苦苷在30～9000 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9980),方法回收率为91.10%～96.21%,提取回收率为100.52%～103.83%,日内、日间精密度均＜10%.结论该方法灵敏、准确、快速、特异性强.     

泻热通瘀、逐水扶正法对ARDS大鼠Bax和Bcl-2表达的影响

目的:观察泻热通瘀、逐水扶正法对实验性急性呼吸窘迫综合征的作用,并探讨其机制.方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)造成大鼠急性呼吸窘迫综合征模型,分别以生理盐水、加减陷胸桃承汤、加减陷胸桃承汤合参麦注射液预处理动物,观察各组动物血气分析、肺组织Bax和Bcl-2表达.结果:模型组大鼠PaCO2明显升高,PaO2明显降低,Bax/Bcl-2比值显著升高,与假手术组有显著性差异;参麦组、桃承组、合方组Bax/Bcl-2比值水平较模型组显著降低,其中以合方组和参脉组最明显.结论:泻热通瘀、逐水扶正法对实验性大鼠急性呼吸窘迫综合征有一定的防治作用,其作用机制可能与降低促细胞凋亡因子Bax和升高抗凋亡因子Bcl-2及抑制肺组织细胞凋亡有关.