CD3+CD56+NKT细胞在中晚期胃癌治疗中的临床疗效观察

目的：评估CD3^＋CD56^＋NKT细胞治疗73例中晚期胃癌的疗效及不良反应。方法．St细胞分离机采集患者外周血单个核细胞，加入细胞因子rhINF-γ、rhIL-2、rhIL-1及CD3McAb培养，10d后定向诱导成CD3^＋CD56^＋NKT细胞，分次回输给患者，每疗程回输细胞总数为（5～10）×10^9个。治疗4w后，用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群状态及细胞因子水平，以评价细胞免疫功能，结合临床指标综合评价疗效，同时观察不良反应。结果：在73例接受治疗的患者中，部分缓解（PR）＋微效（MR）为37例（50．68％），稳定（SD）21例（28．76％），进展（PD）15例（20．54％）；CD3^＋CD56^＋NKT细胞的百分比在治疗后均较治疗前显著增高（P〈O．05），且72．60％（53例）的患者CD4／CD8比例调整至正常；80．82％（59例）的患者治疗后Th1类细胞因子分泌增加，61.64％（45例）的患者Th1／T11=2细胞因子比例恢复平衡；治疗后42例食欲增加，51例体力及睡眠改善，23例体重回升大于治疗前体重的5％；输注后的副反应包括寒颤、发热、呕吐、兴奋失眠、皮疹、疲乏，经对症处理后短时缓解，无1例出现毛细血管渗漏综合征（SCLS）及实质脏器的损害。结论：过继性CD3^＋CD56^＋NKT细胞输注治疗能显著调整中晚期胃癌患者的免疫功能，改善临床症状，是一种安全、有效的辅助治疗手段。     

重症肌无力患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达

目的：观察免疫治疗对重症肌无力（MG）患者外周血CD4＋CD25^＋T淋巴细胞表达的影响。方法：应用四色流式细胞术对MG30例（观察组）治疗前后和30例健康者（对照组）外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋、CD25^＋ T淋巴细胞亚群等表达进行检测，以CD2。抗原荧光强度10的细胞定义为CD25^high细胞，分析其百分率和荧光强度，并结合临床资料进行相关分析。结果：观察组治疗前外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^high、CD25^＋占总淋巴细胞的比例与正常对照组无显著差异（P〉O．05），但CD4^＋＋细胞数较正常增高（P〈0．05）；经类固醇激素或经胸腺切除治疗后，外周血CD4^＋CD25^＋、CD／CD25^high与治疗前及对照组比较，差异显著（P〈0．05）。结论：经免疫治疗后的MG患者外周血中存在高比例的CD4^＋CD25^＋表达，可能与病情缓解有关。     

非小细胞肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1的相关性分析e

目的：探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF—β1（血清转化生长因子β1）的相关性及意义。方法：分别采用流式细胞技术和ELISA法检测40例非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量及TGF—β1的表达水平。结果：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞和TGF-β1的表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞与TGF—β1的表达成正相关。结论：非小细胞肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞数量的增多可能诱导TGF—β1表达水平的增高。     

99Tcm-抗CD20单克隆抗体的制备和动物实验研究

笔者用^99Tc^m标记抗CD20单克隆抗体（抗CD20 McAb），并探讨了其在荷瘤裸鼠体内的生物分布，现报道如下。     

男子举重运动员大负荷力量训练期间淋巴细胞亚群的变化分析

目的:探讨T、B淋巴细胞激活态(HLA-DR+)、NK细胞总数(CD56+)及其激活态(CD16+)、单核细胞(CD14+)在男子举重运动员大负荷力量训练期间的变化规律及其免疫机能监控意义。方法:25名男子举重运动员按规定负荷完成连续5周大负荷力量训练,训练结构为2个大负荷循环中间间隔1个调整周。第1个大负荷循环由第1、2周构成,第3周为调整周,第2个大负荷循环由第4、5周构成,其中第4周冲击最大负荷。于训练前及每周训练结束后测定运动员基础状态下血清CK、BUN以及外周血HLA-DR+、CD56+、CD16+、CD14+。结果:训练期间CK、BUN均显著升高,其中前期以CK升高为主,后期CK和BUN均显著升高。HLA-DR+在训练前期有所增加,后期显著下降。训练期间CD56+、CD16+总体上均显著增加;在训练负荷最大的第4周,CD56+呈下降趋势(P=0.06),而同时CD16+呈增加趋势,CD16+/CD56+呈较明显增加趋势。大负荷训练期间CD14+显著增加,并与训练负荷增加一致。结论:大负荷力量训练可导致HLA-DR+及CD56+下降,HLA-DR+和CD56+在运动员免疫机能评定中具有一定的意义;大负荷训练导致CD14+增加,CD14+在运动员炎症反应程度及单核/巨噬系统功能的评定中具有一定的意义。     

CD3＋CD28抗体组诱导CD3AK细胞对肿瘤细胞杀伤效果的实验观察

CD3AK细胞是用于恶性肿瘤过继性免疫治疗的效应细胞之一,一般情况下即使小剂量的CD3抗体在白细胞介素-2（IL-2）的协同下也可诱导出具有杀伤活性的CD3AK细胞[1]。T细胞介导的细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的主要机制,随着对抗原的识别和递呈、T细胞激活等免疫应答机制认识的不断深入,发现有效的抗肿瘤免疫反应必须在共刺激信号的参与下,将肿瘤抗原多肽递呈给T细胞而激发T细胞的免疫应答[2]。     

子痫前期患者蜕膜中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的Foxp3表达

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在子痫前期患者胎盘附着处蜕膜中表达及其临床意义。方法选择子痫前期30例和正常晚期妊娠30例,采用免疫组化法检测蜕膜CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3的阳性表达率,分析比较两组检测结果。结果蜕膜中Foxp3在子痫病例组及正常对照组的阳性表达率分别为16．67％和66．67％,子痫病例组Foxp3阳性表达率明显低于正常对照组（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性转录因子Foxp3在子痫前期患者蜕膜组织中阳性表达率减低,其免疫抑制功能减弱,从而使母胎免疫耐受失衡、受损,免疫排斥作用增强,导致子痫前期的发生。     

抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞的影响

目的 评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞(CD4~+ CD25~(high)Treg)的影响.方法 2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例).其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg.在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml.应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4~+T细胞和CD4~+ CD25~(high)Treg比例的变化,半定量RTPCR检测CD25 mRNA的表达变化.结果 肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05).抗体组术后第17天CD4~+ CD25~(high)Treg占CD4~+ T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4~+ CD25~(high)Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05).抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05).对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4~+ CD25~(high)Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持.     

自身免疫相关疾病患者外周血淋巴细胞亚群检测及其意义

目的探讨自身免疫相关疾病患者淋巴细胞亚群的变化特点。方法采用流式细胞术检测23例自身免疫病患者及20例正常人的外周血中T淋巴细胞（CD3＋细胞）、辅助性T细胞（CD4＋细胞）、T抑制性细胞毒细胞（CD3＋/CD8＋）、NK细胞（CD3-/CD16＋56）和NKT细胞（CD3＋/CD16＋56）,对两者百分比进行比较分析。结果患者组中T抑制性细胞毒细胞（CD3＋/CD8＋）的百分比和绝对值高于正常对照组（P〈0.05）。而患者组中CD4/CD8数值上低于正常对照组,但无明显差异。NK细胞（CD3-/CD16＋56）的百分比和绝对值明显低于对照（P〈0.01）,有显著统计学差异。结论可通过对淋巴细胞亚群的检测了解自身免疫病在其发生发展的过程中免疫系统的变化,并为采用的相关治疗提供依据。     

内毒素作用下淋巴细胞中CD4＋CD25＋调节性T细胞变化及连翘对其的影响

目的探讨不同时间点内毒素（LPS）对CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory T cell,Treg）的影响及连翘（forsythia suspensa,FS）干预后CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化。方法体外培养Wistar大鼠脾脏淋巴细胞,分为对照组、LPS（10ng/ml）组、LPS（10ng/ml）＋多黏菌素B组（10ng/ml）、LPS（10ng/ml）＋连翘（12．5、25、50mg／ml）组,分别于3、6、12h收集标本．流式细胞术检测CD4＋CD25＋调节性T细胞在淋巴细胞中的百分比,荧光定量RT—PCR法检测Foxp3mRNA表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测TNF—a、IL-10分泌水平。结果脾脏淋巴细胞中CD4＋CD25＋Treg的百分比和Foxp3mRNA的表达在12h较3、6h明显升高（P〈0．01）;TNF—a、IL-10的分泌随时间点的延长均显著升高（P〈0．01）;随连翘剂量增加,TNF-a、IL-10分泌水平,Foxp3mRNA表达和CD4＋CD25＋Treg百分比均明显降低（P〈0．05）。结论内毒素参与并诱导了CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的变化,其随内毒素作用时间延长呈上升趋势。连翘能显著降低CD4＋CD25＋Treg在淋巴细胞中的百分比。     

氩氦刀对肿瘤患者外周血T细胞亚群影响的临床对照研究

目的：观察 CT 引导经皮氩氦刀冷冻消融治疗后患者外周血 T 细胞亚群的变化。方法 CT 引导下对122例晚期肝癌、肾癌患者进行氩氦刀冷冻消融治疗,流式细胞仪检测治疗前2 h、治疗后20 h 患者外周血中 CD3+及 CD4+、CD8+ T 细胞亚群的变化;CD4+ T 细胞/CD8+ T 细胞比例变化。结果冷冻消融后患者外周血 CD3+、CD4+ T 细胞与 CD3+、CD8+ T 细胞的百分比均较治疗前明显升高,配对 t 检验显示二者变化均有统计学意义(P <0.05)。CD4+ T 细胞/CD8+ T 细胞的比值较治疗前平均升高0.130,但 P值为0.069,无统计学差异。结论 CT 引导下经皮氩氦刀冷冻消融治疗晚期肝癌、肾癌患者外周血 T 细胞亚群比例明显增高,患者肿瘤特异性细胞免疫增强。     

SLE患者外周血淋巴细胞亚群变化的临床意义

目的探讨淋巴细胞亚群在系统性红斑狼疮(SLE)病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了70例SLE患者(其中活动期38例,非活动期32例)以及30例健康体检者外周血CD3+/CD4+、CD3+/CD8+、CD3+/CD19+、NK(CD3+/CD16++CD56+)细胞的表达水平。结果与正常对照组相比,活动期SLE患者CD4+、NK细胞百分率明显降低(P<0.05),CD8+、B(CD19+)细胞百分率明显升高(P<0.05),CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.01)。SLE患者活动期与非活动期比较,CD4+细胞数低于稳定期,CD8+细胞数明显高于稳定期。结论 SLE患者外周血淋巴细胞亚群细胞数的变化与疾病的病程和临床表现相关联。     

肾细胞癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的通过检测外周血T淋巴细胞亚群的水平,观察肾细胞癌患者治疗前后免疫功能的变化规律,探讨其在诊断及疗效判断上的意义。方法选取2006～2009年肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）患者39例,应用流式细胞技术检测术前及术后外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋,并与健康对照组进行对比研究。结果肾细胞癌患者术前CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋低于健康对照组,术后患者CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋较术前明显升高。结论肾细胞癌患者术前细胞免疫功能受到不同程度的抑制,检测外周血T淋巴细胞亚群,对评估患者的细胞免疫功能状况、疾病的诊断和疗效观察具有积极的临床意义。     

长远航持续应激对潜艇艇员免疫功能及细胞因子表达的影响

目的:研究某型潜艇艇员长远航前后淋巴细胞亚群、调节T淋巴细胞及相关细胞因子的变化,探讨长远航中持续应激对艇员免疫功能的影响。方法:随机抽取长远航(70 d)潜艇61名艇员为研究对象,空腹抽取静脉血,利用流式细胞仪对艇员长远航前后淋巴细胞亚群[CD3 +、CD4 +、CD8 +、CD4 +/CD8 +、CD3 -CD19 +、CD3 -CD(16+56) +]及调节T淋巴细胞(CD4 +CD25 +)进行测定,采用液态芯片技术观察白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-8、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)含量的变化。 结果:与长远航前相比,长远航后CD3 +、CD4 +、CD8 +、CD3 -CD19 +、CD3 -CD(16+56) +淋巴细胞水平显著降低,差异均有统计学意义( P<0.05);CD4 +/CD8 +的比值以及CD4 +CD25 +水平显著升高,差异均有统计学意义( P<0.01);IL-2、IL-8含量降低,差异均有统计学意义( P<0.05);IL-4、IP-10含量升高,差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:在长远航持续应激作用下,艇员的免疫功能发生明显变化,表明长远航对艇员健康有一定的影响,有必要进一步阐明原因并采取必要的预防措施。     

脓毒症休克患者人类白细胞抗原动态观察

目的动态观察脓毒症休克患者CD14~+单核细胞人类白细胞抗原-DR(HLA-DR~+/CD14~+)的表达,评价脓毒症休克患者的免疫状态。方法选择2016年3—12月中国医科大学附属盛京医院重症监护病房收治的脓毒症休克患者40例为研究对象,根据患者最终结局是否病死分为存活组(n=27)与病死组(n=13)。分别抽取两组患者入院1、4、7 d外周静脉血,用流式细胞仪检测HLA-DR~+/CD14~+的表达情况,并进行脓毒症相关性器官衰竭(SOFA)评分。结果动态监测第1天,两组的HLA-DR~+/CD14~+及SOFA评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);但从动态监测第4天开始,存活组HLA-DR~+/CD14~+高于病死组(P<0.05),SOFA评分低于病死组(P<0.05);动态监测第7天,病死组HLA-DR~+/CD14~+较存活组明显下降(P<0.01),SOFA评分明显高于存活组(P<0.01)。两组SOFA评分与HLA-DR~+/CD14~+呈负相关(P<0.01)。结论 HLA-DR~+/CD14~+持续低表达,说明脓毒症休克患者可能处于免疫抑制状态,其可能是脓毒症休克患者病死的危险因素之一,对评价脓毒症休克患者的免疫状态有一定指导意义。     

耐多药肺结核患者T淋巴细胞亚群测定的临床意义

目的探讨肺结核-耐多药(MDR-TB)患者外周血中活化T细胞的水平,对治疗的意义。方法对2006年11月—2011年11月的MDR-TB患者72例,初治菌阳性患者102例临床资料进行回顾性分析。结果在治疗前A组患者的外周血中,其CD3+值与CD4+值,以及其CD4+/CD8+比值,同B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但两组CD8+比较,无统计学差异(P>0.05);A组予以2个月的抗结核强化治疗后,有66例患者病情好转,并且症状显著改善,有56例患者痰菌阴转,并且其中50例患者复查后显示,其CD3+以及CD4+/CD8+比值同治疗前比较,上升明显(P<0.01),CD4+/CD8+治疗前后比较,无统计学差异(P>0.05),其余6例患者出现病灶增多,并且CD3+、CD4+、CD8+值,包括CD4+/CD8+比值,均较前降低。结论掌握MDR-TB患者外周血中其活化T细胞的水平,有助于依据患者具体情况实施个性化的治疗方案,具有非常重要的临床意义。     

Effects of unaccustomed and accustomed exercise on the immune response in runners

PURPOSE: To test the hypothesis that long-term immunological response may be different after accustomed concentric and unaccustomed eccentric exercise in endurance-trained men. METHODS: Fourteen highly endurance-trained male runners performed two bouts of high-intensity exercise with at least 2-wk intervals between bouts. Concentric exercise consisted of a 60-min level run with a targeted heart rate of 80% VO2 peak. Eccentric exercise was conducted lying on a specially designed exercise rack, eliciting eccentric action of the musculus quadriceps femoris. Blood samples were taken before and 1, 6, 24, 72, and 144 h after exercise to determine creatine kinase (CK), C-reactive protein (CRP), and interleukin-6 (IL-6). Lymphocyte subset distribution was assessed using flow cytometry. RESULTS: We found a significant (P < 0.05) increase of CD4 (eccentric: 17%; concentric: 20%), CD3+/CD4+ (16 vs 19%), CD25+ (45 vs 29%), CD25+/CD4+ (27 vs 50%), HLA-DR+ (20 vs 15%), HLA-DR+/CD4+ (16 vs 67%), and CD19+/CD45+ (52 vs 103%) positive lymphocytes 1 h after both exercise bouts. However, eccentric exercise resulted in a significantly higher and longer (6 h) increase of CD25+/CD4+ and HLA-DR+/CD8+ lymphocytes and a peak increase of CK at 72 h. IL-6 and CRP increased only after concentric exercise within the first 24 h. Both exercises resulted in a decrease of monocyte activation (LFA-1: CD18+/CD11a+) after 6 h, with an increase for the eccentric exercise part after 24 h (P < 0.05). CONCLUSION: Accustomed concentric exercise mainly induced an acute-phase response, with increased CRP, IL-6, and activation of CD4 lymphocyte subsets. Unaccustomed eccentric exercise provided a delayed increase in CK and activation of monocytes and CD4+ and CD8+ subsets. Therefore, the immunological reaction depends not only on the type of contraction but also on the adaptation to the exercise.     

血液透析患者外周血淋巴细胞Fas/FasL的表达及其意义

为探讨外周血淋巴细胞Fas/FasL的表达与血液透析(血透 )患者免疫功能损伤的关系 ,用酶联免疫夹心法检测 4 0例血透患者血浆可溶性Fas、FasL(sFas、sFasL) ,用流式细胞术检测CD3+ 细胞Fas抗原的表达。结果发现 ,血透患者CD3+ Fas表达率显著高于正常对照 (P <0 0 1) ;透析后Fas表达明显降低 (P <0 0 1) ,但FasL表达率仍高于正常对照(P <0 0 5 ) ;血浆sFas水平比对照组明显减低 (P<0 0 1) ,透析后虽有所增加 ,但仍低于对照组 (P <0 0 5 )。相关分析发现sFas与CD3+ Fas细胞百分比以及尿素氮、肌酐呈显著负相关。提示Fas/FasL表达率增高可促使外周血淋巴细胞凋亡 ,并与血透患者免疫功能低下的发生、发展相关。     

临床Ⅲ期食管癌患者放疗前后免疫功能及外周血炎症指标对预后的影响分析

目的探讨临床Ⅲ期食管癌患者放疗前后免疫功能指标及外周血炎症指标与预后的关系。方法回顾性分析2010年5月至2012年4月河北医科大学第四医院接受根治性放疗的临床Ⅲ期(T4N1M0)食管癌患者84例,通过检测患者放疗前、后外周血T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、CD56免疫指标及外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),监测并随访观察其近期疗效、复发及死亡原因等。所有患者均采用调强放疗,处方剂量56~66 Gy,1.8~2.0 Gy/次,5次/周。检测放疗前后免疫指标变化并进行单因素和多因素预后分析。结果84例患者1年、3年、5年总生存率分别为78.57%、34.52%、19.59%,中位生存时间22.60个月;1年、3年、5年无进展生存率分别为69.05%、27.38%、12.09%,中位无进展生存时间21.20个月。近期疗效评价:完全缓解(CR)11例,部分缓解(PR)41例,疾病稳定(SD)24例,疾病进展(PD)8例,客观缓解率为61.90%(52/84)。单因素预后分析:放疗前NLR水平、免疫指标放疗后CD3、CD4、CD4/CD8水平与总生存及无进展生存预后均显著相关(总生存:χ^2=7.851、4.443、8.381、5.972,P<0.05;无进展生存:χ^2=7.475、6.290、9.659、8.738,P<0.05)。多因素预后分析:放疗前NLR、放疗后CD4和CD4/CD8水平为影响患者总生存预后的独立因素(χ^2=10.464、4.292、5.507,P<0.05);放疗前NLR、放疗后CD4/CD8水平均为影响患者无进展生存的独立因素(χ^2=10.835、8.548,P<0.05)。结论放射治疗可影响食管癌患者的免疫功能,放疗前NLR水平及放疗后CD4/CD8水平是评估食管癌患者预后方面的重要指标。