条件性敲除胰岛β细胞蛋白磷酸酶2Acα对小鼠糖代谢影响机制的探讨

目的探讨条件性敲除胰岛β细胞蛋白磷酸酶2Acα(PP2Acα)对小鼠血糖水平影响的机制。方法选取4月龄条件性敲除胰岛β细胞PP2Acα(KO组)及对照组(Con,与KO组同窝别、性别匹配)各24只。行腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT),测定0、30、60和120min小鼠血糖及胰岛素分泌水平;新鲜分离胰岛,用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验(GSIS)评价小鼠胰岛β细胞对葡萄糖反应性。结果IPGTT结果显示,KO组葡萄糖负荷后30min血糖[(23.1±5.1)vs(17.5±5.7)mmol/L]和60min血糖[(20.5±6.8)vs(13.5±5.1)mmol/L]高于Con组(P0.05);KO组葡萄糖负荷后30min血清胰岛素水平较Con组下降[(2.16±0.92)vs(1.07±0.42)μg/L](P0.05);GSIS显示高糖刺激下KO组胰岛素分泌较Con组减少[(0.82±0.15)vs(0.42±0.24)μIU/L](P0.05)。结论条件性失活胰岛β细胞PP2Acα小鼠糖耐量受损可能与胰岛素一相分泌受损相关。     

辛伐他汀抑制大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌的机制研究

目的 观察辛伐他汀对大鼠胰岛β细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)的抑制作用及其机制.方法 8周龄健康雄性Wistar大鼠60只,体重250～300 g,饲养1周内分批处死.采用胆管注射胶原酶法提取大鼠胰岛,将新鲜分离或经24 h培养的大鼠胰岛按体积大小分为对照组(胰岛数=60)和辛伐他汀组(胰岛数=60),对照组给予Kreb-Ringer碳酸氢盐缓冲液,辛伐他汀组以100μmol/L辛伐他汀水浴30 min或过夜培养24 h.两组经2.8、5.5、11.1、16.7、25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,采用37 ℃水浴法观测胰岛β细胞GSIS变化,选用生物化学发光法测定腺苷三磷酸(ATP)含量.两组间数据比较采用t检验.结果 100 μmol/L辛伐他汀水浴30 min后,在25.0 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显下降[(9.2±1.6)vs(12.1±1.9)pmol/胰岛,t=2.97,P＜0.05],GSIS较相应对照组明显减少(2.31±0.38 vs 3.19±0.41,t=3.154,P＜0.05).100μmol/L辛伐他汀过夜培养24 h后,在11.1 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛β细胞ATP含量较相应对照组明显降低[(9.2±1.4)vs(11.9±2.0)pmol/胰岛,t=2.514,P＜0.05];在2.8 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛素分泌即已明显受到抑制(0.28±0.03 vs 0.47±0.05,t=2.460,P＜0.05).辛伐他汀浓度超过30 μmol/L时,可剂量依赖性地抑制GSIS(2.49±0.21 vs 3.17±0.23,t=2.445,P＜0.05).结论 高浓度辛伐他汀可能通过抑制胰岛β细胞ATP生成而抑制GSIS.     

应用高葡萄糖钳夹技术评价高甘油三酯血症人群胰岛素分泌和胰岛素敏感性

目的评价高甘油三酯(甘油三酯≥2.3 mmol/L)、正常葡萄糖耐量人群的胰岛素分泌和胰岛素敏感性。方法筛选正常糖耐量的高甘油三酯血症患者12名(高甘油三酯组,HTG组)和性别、年龄、体重指数相匹配的正常糖耐量、正常血脂者12名(正常对照组,NC组),应用高葡萄糖钳夹技术评价胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性。结果HTG组和NC组在钳夹过程中胰岛素呈双相分泌,第一时相胰岛素分泌均于4 ~6 min达到高峰,在10 ~30 min下降,之后随钳夹时间延长逐渐升高,稳态期(120 ~150 min)达到最高。HTG组第一时相胰岛素分泌水平低于NC组[(224.7±133.2) mIU/Lvs(252.6±108.9 )mIU/L,P=0.58],但差别无统计学意义;第二时相胰岛素分泌[(98.6±37.7) mIU/Lvs(65.2±20.0 ) mIU/L,P<0.05]和最大胰岛素分泌率[(135.1±45.2) mIU/Lvs(84.5±29.8) mIU/L,P<0.01]均明显高于NC组,胰岛素敏感性指数则显著低于NC组[(9.89±4.05vs21.97±9.62,P<0.01)。结论正常糖耐量的高甘油三酯血症人群中已经出现明显胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,高葡萄糖钳夹试验中胰岛素分泌曲线异常。     

非诺贝特对高甘油三酯血症人群胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能的影响

目的观察非诺贝特对高甘油三酯(TG)血症人群的胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能的影响。方法正常糖耐量、高TG血症(TG≥12．3 mmol/L)患者12例(HTG组),予非诺贝特200 mg/d治疗3个月,于治疗前后应用高葡萄糖钳夹技术评价胰岛素敏感性和胰岛β细胞功能。并与正常糖耐量、正常血脂志愿者12名(NC组)进行比较。结果HTG组胰岛素敏感性指数(ISI)显著低于NC组;第一时相胰岛素分泌(1PH)稍低于NC组;第二时相胰岛素分泌(2PH)和最大胰岛素分泌(INS120-150)均明显高于NC组。HTG组非诺贝特治疗后,ISI较治疗前显著升高(18．35±1．76 vs 9．40±1．76,P＜0．01);1PH变化无统计学意义[(247．7±32．9)mIU/L vs (225．7±36．7)mIU/L,P=0．94];2PH和INS120-150较治疗前降低[分别为(73．2±9．0)mIU/L vs (106．0±11．3)mlU/L,p=0．014;(89．2±8．9)mIU/L vs (141．6±13．8) mIU/L,P=0．005]。结论非诺贝特调脂治疗能显著改善高TG血症人群的胰岛素抵抗及高葡萄糖钳夹试验中的胰岛素分泌。     

游离脂肪酸对胰岛素瘤细胞系βTc6细胞葡萄糖激酶和葡萄糖转运蛋白2表达及胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨游离脂肪酸（FFA）对小鼠胰岛素瘤细胞系βTc6细胞葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）的表达及相应的胰岛素分泌功能变化的影响.方法用不同浓度FFA（0.25、0.50、1.00 mmol/L）干预βTc6细胞24 h,应用逆转录（RT）-PCR法和Western Blot法检测GK和GLUT2表达情况,并观察细胞形态及葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能（GSIS）的变化.应用单因素方差分析进行统计学分析.结果 （1）经过0.25 mmol/L FFA 作用24 h后,未见细胞形态学及GSIS 明显变化,细胞内GK和GLUT2 mRNA及其蛋白的表达水平与空白对照组（GK对照组0.80±0.12,GLUT2对照组0.72±0.11）比较亦未发生明显改变（均P〉0.05）;（2）0.50～1.00 mmol/L FFA 作用24 h之后,βTc6细胞内可见脂滴积聚,细胞团有崩解的趋势,随着浓度的增大,上述现象愈加明显.细胞GK（GKFFA0.500.32±0.05,GKFFA1.000.24±0.03）和GLUT2 （GLUT2FFA0.500.28±0.04,GLUT2FFA1.000.21±0.03）mRNA表达逐渐减低（均P〈0.05）,相应的蛋白表达水平亦逐步降低,胰岛素分泌也逐渐减少（均P〈0.05）.结论 低浓度FFA对胰岛β细胞生存和GK、GLUT2表达以及GSIS没有明显影响,但较高浓度的FFA将损害β细胞,并抑制GK和GLUT2表达以及GSIS.     

外源性胰岛素通过P糖蛋白调节INS-1 832/13细胞胰岛素分泌的研究

目的观察外源性胰岛素对胰岛β细胞(INS-1 832/13)P糖蛋白(P-gp)表达及胰岛素分泌功能的影响。方法 0.5μmol/L外源性胰岛素孵育832/13细胞30d,MTT检测细胞活性,定量RTPCR、Western blot分别检测细胞P-gp mRNA和蛋白的表达水平,RIA测定高糖刺激下胰岛素分泌(GSIS)的变化。结果与对照组比较,0.5μmol/L的胰岛素可以增加INS-1 832/13细胞活性[(102.00±12.99)vs(356.00±35.51),P0.05],并能增加P-gp转录水平[(107.50±17.08)vs(307.50±44.25)]及蛋白水平[(105.00±12.91)vs(192.50±35.94)]的表达(P0.05),GSIS与P-gp表达水平呈正相关,但对基础胰岛素分泌没有影响。结论外源性胰岛素可以促进INS-1 832/13细胞分泌,机制可能与P-gp表达相关。     

雌激素对胰腺大部分切除模型小鼠胰岛β细胞功能影响的研究

目的观察雌激素干预C57BL/6小鼠大部分胰腺切除后胰岛功能的变化,探讨雌激素对胰岛β细胞的影响。方法 60只小鼠随机分成4组:对照假手术组(Sham)、胰腺切除模型组(Px)、雌激素干预组(E2)和雌激素阻断剂组(E2+ICI),每组15只。ELISA检测血浆胰岛素水平;小鼠处死前进行葡萄糖耐量实验(GTT);处死后荧光染色胰岛,计算胰岛数量和体积,并进行葡萄糖刺激胰岛素分泌实验(GSIS);RT-PCR检测Ins-1、Ins-2和PDX-1基因的表达水平。结果胰腺切除手术后7 d,E2组血糖较Px组下降[(162±18)vs(225±11)mg/dl),P0.05]。GTT结果显示,服糖120 min后,E2组与Px组比较,血糖回落到基线水平[(145.5±24.5)vs(235.0±21.3)mg/dl,P0.05]。胰岛荧光染色结果表明,各手术组的胰岛体积明显增大(P0.05),尤其是E2组胰岛体积增大最为明显。GSIS结果发现,雌激素能显著增加胰岛素释放及胰岛素含量。RT-PCR结果提示,雌激素能增加胰岛Ins-2基因的表达。结论雌激素干预可降低糖尿病小鼠血糖水平,增加胰岛体积和胰岛素分泌,并对胰岛素基因的表达产生影响。     

游离脂肪酸诱导的胰岛βTC3细胞缺陷与线粒体功能改变的相关性研究

目的通过研究游离脂肪酸(FFA)慢性作用对胰岛细胞解偶联蛋白2(UCP2)mRNA和蛋白表达以及线粒体膜电位的影响,探讨FFA损害胰岛功能的机制。方法将不同浓度油酸作用于胰岛βTC3细胞72h,分别分析基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量(GSIS),线粒体膜电位,ATP敏感钾电流(IKATP)、UCP2mRNA和蛋白表达;再用油酸和PPARγ配体罗格列酮共同作用,观察UCP2mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,油酸明显增加2·8mmol/L葡萄糖时的基础胰岛素分泌量,减少16·7mmol/L葡萄糖时的GSIS(P均<0·01),并且呈剂量依赖性。油酸可明显降低线粒体膜电位平均荧光强度(MIF)值,使IKATP外流增加,增加UCP2mRNA和蛋白表达(P均<0·01),呈剂量依赖性;与油酸组相比,油酸 罗格列酮组增加了UCP2mRNA和蛋白表达(P<0·01)。结论在胰岛βTC3细胞中,FFA对胰岛功能的损害与线粒体功能改变有关。FFA可能通过上调PPARγ增加UCP2表达,UCP2的表达与作用增加可导致线粒体膜电位降低,使线粒体功能下降,引起胰岛素分泌减少,产生对胰岛功能的损害作用。     

曲格列酮对胰岛β细胞胰岛素分泌的影响及机制研究

研究曲格列酮对胰岛β细胞(MIN6细胞株)胰岛素分泌的影响,并探讨其机制.10μmol/L曲格列酮短期抑制大鼠胰岛和MIN6细胞的葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS,P<0.01),增加AMP活化的蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的磷酸化水平(均P<0.01),而AMPK抑制剂复合物C可使其AMPK、ACC的磷酸化水平以及胰岛素分泌完全恢复.     

解偶联蛋白2基因表达对游离脂肪酸升高所致β细胞功能障碍的影响

目的观察血浆游离脂肪酸（FFA）水平短期升高对β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨线粒体氧化应激在其中的作用及机制。方法将24只8周龄体重160-170g雄性SD大鼠采用随机数字表法分为脂肪乳输注组（FFA组,12只）和生理盐水输注组（NS组,12只）。分别输注48h,检测以下指标：（1）采静脉血检测胰岛素和FFA水平;（2）静脉葡萄糖耐量实验,评价活体胰岛β细胞分泌功能;（3）胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;（4）实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测胰岛细胞胰岛素受体底物1和2（IRS-1、IRS-2）和解偶联蛋白-2（UCP-2）mRNA表达的变化。两组间差异比较采用独立样本t检验。结果FFA组血胰岛素水平较NS组增高[（25．2±2．3）比（18．6±1．7）mU／L,t=7．9,P〈0．05],FFA水平也显著高于Ns组[（1．39±0．18）比（0．64±0．10）mmol／L,t=12．8,P〈0．05]。FFA刺激后,FFA组活体和离体的胰岛β细胞分泌功能均较NS组增强[活体分别为（137±24）、（80±16）mU／L,t=6．8,P〈0．05;离体分别为（272±4）、（227±4）mU／L,t=28．6,P〈0．05]。与NS组相比,FFA组胰岛细胞IRS-1mRNA表达增加了29．3％4-2．6％（t=2．2,P〈0．05）,IRS-2mRNA及UCP-2mRNA表达分别增加了345．1％±4．7％、228．4％±4．2％（t=3．4、3．0,均P〈0．05）。结论血浆FFA水平短期升高对β细胞胰岛素分泌有刺激作用,但同时激活线粒体氧化应激,使UCP-2表达相应增加。     

酰基化Ghrelin在体外拮抗巨噬细胞介导的炎症反应对胰岛β细胞功能影响的研究

目的 采用Transwell小室构建的小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7共培养系统,探讨酰基化Ghrelin能否保护胰岛β细胞免遭巨噬细胞介导的炎症损伤. 方法 实验分为单独RAW264.7巨噬细胞组、单独MIN6胰岛细胞组、共培养组和Ghrelin干预组.RT-PCR和Western blot 检测巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β、TNF-α的浓度,以及葡萄糖刺激后MIN6细胞上清液的胰岛素浓度. 结果 (1)共培养系统中,巨噬细胞TLR4[mRNA及蛋白水平分别为(1.35±0.13),(0.93±0.03)],A-FABP[(1.99±0.10)vs(0.91±o.01)]的表达],细胞上清液IL-1β[(10.47±1.11) pg/ml]、TNF-α[(917.54±9.09) pg/ml]蛋白水平较单独RAW264.7巨噬细胞组高(P＜0.05);(2)高糖刺激下,共培养系统中胰岛β细胞的胰岛素分泌水平较单独MIN6胰岛细胞组低(P＜0.05);(3)与共培养组比较,酰基化Ghrelin干预后共培养,巨噬细胞TLR4表达水平和TNF-α均降低(P＜0.05),且呈剂量依赖性,但胰岛β细胞的胰岛素分泌水平与共培养组比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,炎症通路活化,炎症因子释放,胰岛β细胞的胰岛素分泌功能受损;酰基化Ghrelin可剂量依赖性削弱巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,但不能完全阻止胰岛β细胞胰岛素分泌功能的降低.     

糖毒性对TC1-6细胞胰升糖素分泌的影响

目的 探讨长期糖毒性对胰岛α细胞胰升糖素分泌的影响及其与α细胞胰岛素抵抗的关系.方法 TC1-6细胞(α细胞株)分别培养于含低浓度(5.5 mmoL/L)、中浓度(11.1 mmol/L)和高浓度(25 mmoL/L)葡萄糖的培养基中1～5天,检测胰升糖素分泌及其mRNA表达;加入不同浓度胰岛素6 h后,观察对培养5天的TC1-6细胞胰升糖素分泌的影响并以Western印迹检测高糖对TC1-6细胞Akt磷酸化的影响.结果 (1)与低糖培养相比,中、高浓度葡萄糖培养1天和3天的TC1-6细胞胰升糖素分泌无明显改变,而高糖培养5天时TC1-6细胞的胰升糖素分泌明显增高[(136.80±10.94 vs 78.62±4.72)ng/106细胞,P<0.05];另外,培养5天时胰升糖素mRNA的表达较1天时明显升高(P<0.05);(2)10-7mol/L胰岛素抑制低糖组TC1-6细胞胰升糖素的分泌[(21.59±1.30 vs 55.12±3.86)ng/106细胞],但仅能轻微抑制高糖组胰升糖素的分泌[(106.58±8.53 vs 117.18±10.55)ng/106细胞];当胰岛素增至10-5mol/L时,高糖组胰升糖素的分泌也受到抑制[(46.55±3.72 vs 118.61±10.68)ng/106细胞];(3)加入10-5mol/L胰岛素2h后,两组TC1-6细胞磷酸化Akt水平分别升高180%和70%,但高糖组明显低于低糖组,给予磷脂酰肌醇3激酶抑制剂后两组TC1-6细胞磷酸化Akt水平在低糖组抑制率明显高于高糖组.结论 高糖可增加TC1-6细胞胰升糖素的分泌,其可能的机制与TC1-6细胞胰岛素抵抗有关.     

他汀类调脂药对大鼠胰岛胰岛素分泌的影响及机制研究

目的 观察不同他汀类药物对大鼠胰岛葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)的抑制作用及机制.方法 新鲜分离或经24 h培养的胰岛均匀分为对照组、阿托伐他汀组、氟伐他汀组和普伐他汀组,对照组给予Kreb-Ringer碳酸氢盐缓冲液,他汀类药物组分别给予100μmol/L阿托伐他汀、氟伐他汀和普伐他汀,水浴30 min或过夜培养24 h.各组经2.8、5.5、11.1、16.7、25.0 mmol/L葡萄糖刺激后,37℃水浴法测定胰岛GSIS变化,生物化学发光法测定三磷酸腺苷(ATP)含量.结果 100μmol/L阿托伐他汀水浴30 min后,在16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,与相应对照组比较,ATP含量[(9.54±1.64)pmol/胰岛比(12.33±1.89)pmol/胰岛]及胰岛素分泌(1.60±0.21比2.39±0.30)均下降(P＜0.05);100 μmol/L氟伐他汀过夜培养24 h后,在16.7 mmol/L葡萄糖刺激下,与相应对照组比较,ATP含量[(10.24±2.01)pmol/胰岛比(12.31±2.16)pmol/胰岛]及胰岛素分泌(3.12±0.32比4.17±0.37)也均下降(P＜0.05).结论 阿托伐他汀、氟伐他汀通过抑制胰岛ATP的生成而抑制GSIS,抑制程度与其脂溶性强弱有关.

Abstract：

Objective To evaluate the inhibitory effect of statins on glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) of pancreatic islet in rat and to explore its mechanisms. Methods According to the average volume, freshly isolated or 24-hour cultured pancreatic islets were randomly divided into control group( incubated with Kreb-Ringer bicarbonate buffer), the atorvastatin group( incubated with 100 μ mol/L atorvastatin), the fluvastatin group (incubated with 100 μ mol/L fluvastatin)and the pravastatin group (incubated with 100 μ mol/L pravastatin). Stimulated by 2. 8,5. 5,11.1,16. 7 mmol/L and 25.0 mmol/L glucose respectively, the effect of 100 μ mol/L statins on ATP content and GSIS was compared in the four groups. GSIS was performed by the 37℃ bath incubation method and ATP content was measured by chemiluminescence method. Results Incubated with 100 μ mol/L atorvastatin for 30 minutes, in the presence of 16. 7 mmol/L glucose, the ATP content [(9. 54 ± 1. 64) pmol/islet vs ( 12. 33 ± 1.89) pmol/islet] and GSIS (1.60 ± 0. 21 vs 2. 39 ± 0. 30) were significantly reduced in comparison with the control group (P＜0. 05). Cultured with 100 μmol/L fluvastatin for 24 hours, the ATP content [( 10. 24 ±2.01 )pmol/islet vs (12. 31 ±2. 16) pmol/islet] and GSIS (3. 12 ± 0. 32 vs 4. 17 ±0. 37 ) were all significantly decreased at the higher glucose concentration of 16. 7 mmol/L ( P ＜ 0. 05). Conclusion Atorvastatin and fluvastatin may inhibit GSIS by decreasing ATP content in pancreatic islet and the inhibitory effect is related to the strength of its lipophilicity.     

游离脂肪酸对大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌及磺脲受体1基因表达的影响

目的 研究游离脂肪酸（FFA）对体外培养的大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌及磺脲受体1（SUR1）基因表达的影响和机制。方法 分离纯化胰岛细胞后分别与0．25mmol／L软脂酸（PA）和0．125mmol／L油酸（OA）温育48小时，放免法检测胰岛素，RT—PCR检测SUR1基因表达。结果 与对照组比较，PA使基础胰岛素分泌增加110％（P〈0．01），葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）降低43％（P〈0．01）；OA使基础胰岛素分泌增加80％（P〈0．01），GSIS降低32％（P〈0．05）。RT—PCR示OA显著抑制了SUR1基因的mRNA表达，比对照组降低64％（P〈0．01），而PA组的表达较对照组降低15％（P〉0．05）。结论 FFA抑制GSIS可能与其对胰岛β细胞SUR1基因表达的调节有关。     

醛固酮与依普利酮在自发性高血压大鼠胰腺损伤中的作用

目的 观察醛固酮与依普利酮在自发性高血压大鼠(SHR)胰腺损伤中的作用.方法 将SHR分为依普利酮治疗组及未治疗组,WKY大鼠作为对照,分别检测血清葡萄糖、胰岛素和钾离子,血浆及胰腺组织醛固酮水平,胰腺病理标本行masson染色及TUNEL+胰岛素免疫组化双重染色.结果 治疗组和未治疗组血糖均高于对照组(P<0.05),治疗组与未治疗组无差异;未治疗组血胰岛素高于治疗组和对照组(14.38±2.68 vs 11.42±2.02与11.23±2.42 μIU/ml,P<0.01),治疗组与对照组无差异;未治疗组HOMA-IR高于对照组(4.16±0.99 vs 2.94±0.75,P<0.01)和治疗组(3.28±0.61,P<0.05),治疗组与对照组无差异;治疗组血醛固酮高于未治疗组和对照组(799.84±67.30 vs 554.56±89.26和480.40±90.21 pg/ml,P<0.01),未治疗组高于对照组(P<0.05);治疗组胰腺醛固酮高于未治疗组(135.77±34.34 vs 90.29±15.53 pg/ml,P<0.05)和对照组(75.28±10.82 pg/ml,P<0.01),未治疗组高于对照组(P<0.05);未治疗组胰岛纤维化面积比和胰岛β细胞凋亡指数高于治疗组和对照组(P<0.01),治疗组高于对照组(P<0.01).结论 26周龄SHR存在胰腺损伤;胰腺醛固酮在胰岛β细胞凋亡和纤维化中发挥重要促进作用;依普利酮可改善SHR胰岛素抵抗,抑制胰腺纤维化,降低胰岛β细胞凋亡指数,对SHR大鼠胰腺损伤具有保护作用.     

Roux-en-Y吻合重建对胃癌合并糖尿病患者血胰岛功能的影响

目的探讨Roux-en-Y吻合重建对胃癌合并T2DM患者血糖水平、胰岛功能及并发症的影响。方法根据手术方式将120例Ⅰ~Ⅱ期胃癌合并T2DM患者随机分为观察组62例及对照组58例,对照组行胃食管吻合术,观察组行Roux-en-Y吻合重建术,比较两组治疗前后血糖及胰岛素的变化。结果术后6个月,观察组BMI[(23.36±2.44)vs(25.33±2.92)kg/m2]、FPG[(5.58±2.02)vs(8.96±1.75)mmol/L]、2hPG[(10.36±3.22)vs(13.82±2.77)mmol/L]、HbA1c[(4.28±1.36)%vs(9.22±1.25)%]、HOMA-IR[(2.12±0.85)vs(4.02±1.22)mIU/L]、HOMA-β[(3.89±0.82)vs(4.58±0.79)mmol/L]均低于对照组(P0.05)。观察组术后6个月FIns[(14.28±1.33)vs(10.78±2.36)mIU/L]、FC-P[(3.98±1.02)vs(1.39±0.45)μg/L]、2hIns[(38.12±3.98)vs(33.28±4.15)mIU/L]、2hC-P[(9.86±2.12)vs(5.18±1.52)μg/L]较术前升高(P0.05)。观察组近期并发症发生率和远期并发症发生率均低于对照组[3.22%vs 17.20%;4.84%vs 18.96%,P0.05]。结论 Roux-en-Y吻合术能有效改善胃癌合并T2DM患者胰岛β细胞功能,降低血糖水平,术后并发症发生率低,安全有效。     

胰岛素治疗对高脂喂养的糖尿病大鼠胰腺内脂质及葡萄糖刺激后胰岛素分泌的影响

目的 观察胰岛素治疗对高脂喂养的糖尿病（DM）大鼠胰腺内脂质及葡萄糖刺激后胰岛素分泌（GSIS）的影响。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC），DM高脂饲养组（DH）及DM高脂饲养胰岛素治疗组（DHI）。测定血糖、胰岛素、FFA、TG、胰腺内TG和FFA、胰岛素蛋白表达和相对β细胞数量、计算△I30／△G30及β细胞胰岛素分泌指数（MBCI）。结果 与DH相比，DHI血TG和FFA下降虽无统计学意义，但胰腺内TG和FFA含量明显下降（P〈0．01），△I30／△G30、MBCI、胰岛素表达和相对β细胞数量得到明显改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论 长期高脂喂养DM大鼠可导致脂质异位沉积于胰腺，并进一步损伤GSIS。GSIS受损可能与胰岛素合成降低，β细胞数量减少有关。胰岛素治疗对高脂所致的上述改变有一定的改善作用。     

不同糖化血红蛋白水平的新诊断2型糖尿病患者胰岛功能的临床观察

目的比较不同HbA1c水平的新诊断T2DM患者胰岛功能的变化。方法将165例新诊断T2DM患者根据HbA1c水平分为A、B、C组,A组54例,6.0%≤HbA1c7.0%;B组53例,7.0%≤HbA1c9.0%;C组58例,HbA1c≥9.0%。采用标准餐试验联合胰岛素释放试验检测0、30、60、120min血糖和胰岛素,胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)、ΔI30/ΔG30、AUCI60~120/G60~120评估胰岛功能,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评估IR,Matsuda指数(ISIM)评估IS,处置指数(DI30、DI60~120)评价校正IS后的胰岛功能。结果随HbA1c升高,A、B、C组FPG[(7.7±0.8)vs(9.0±1.9)vs(13.4±3.2)mmol/L]、2hPG[(12.03±1.23)vs(16.08±2.67)vs(23.58±3.99)mmol/L]、G0[(7.10±0.86)vs(8.93±1.59)vs(13.80±3.35)mmol/L]、G30[(10.16±1.86)vs(12.19±2.50)vs(16.98±3.78)mmol/L]、G60[(12.57±1.81)vs(15.03±2.72)vs(20.11±4.08)mmol/L]和G120[(11.49±2.48)vs(14.78±3.53)vs(21.05±4.43)mmol/L]逐渐升高;I0[(20.09±12.76)vs(18.74±7.88)vs(15.30±11.71)mIU/L]、I30[(38.92±12.59)vs(34.27±20.56)vs(23.95±16.55)mIU/L]、I60[(72.80±39.38)vs(52.96±32.48)vs(36.16±27.22)mIU/L]、I120[(106.62±61.09)vs(64.57±40.75)vs(43.09±23.08)mIU/L]、HOMA-β[(130.58±107.33)vs(74.68±38.34)vs(42.66±35.70)]、AUCI60~120/G60~120[(58.06±33.85)vs(28.90±18.90)vs(14.31±9.78)]和DI60~120[(458.22±174.30)vs(239.27±113.05)vs(89.91±49.93)]逐渐降低(P0.05)。C组TG[(3.40±1.44)vs(1.89±0.88),(2.29±1.23)mmol/L]、HOMA-IR[(11.66±7.13)vs(6.30±3.66),(7.47±3.58)]较A、B组高,年龄[(45.10±9.30)vs(51.40±7.80),(49.70±8.80)岁]、ΔI30/ΔG30[(2.44±1.50)vs(8.27±6.33),(6.77±5.16)]和DI30[(13.86±7.23)vs(58.21±18.14),(45.31±17.99)]较A、B组低(P0.05)。Spearman相关性分析结果显示,HbA1c与HOMA-IR呈正相关,与HOMA-β、ΔI30/ΔG30、AUCI60~120/G60~120、DI30和DI60~120呈负相关。多元线性回归分析结果显示,DI60~120、HOMA-IR、HOMA-β为HbA1c的影响因素。结论随HbA1c水平升高,新诊断T2DM患者糖代谢紊乱加重,胰岛素分泌功能逐步减退,在HbA1c≥9.0%患者中尤为明显。     

冠心病患者胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能检测临床意义的研究

目的:通过口服葡萄糖耐量试验研究空腹血糖正常的冠心病患者胰岛素抵抗状态、胰岛β细胞分泌功能及其临床意义。方法:对冠心病组(35例)及对照组(30例)按空腹及服糖后30、60、120和180min进行糖耐量、胰岛素释放实验,测量各时点血糖值及胰岛素值。同时测量其血压、身高、体重、总胆固醇、甘油三酯,并计算出体重指数(BMI)=体重(kg)/身高2(m2)。按照稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=空腹胰岛素(FINS)×空腹血糖(FPG)/22.5;胰岛β细胞分泌指数(HBCI)=20×空腹胰岛素/(空腹血糖-3.5);早期胰岛素分泌指数(△I30/△G30)=口服葡萄糖耐量试验30min胰岛素增量与葡萄糖增量的比值;李氏β细胞胰岛素分泌指数(MBCI)=(空腹胰岛素×空腹血糖)/(血糖2h 血糖1h-2×空腹血糖)公式计算稳态模型胰岛素抵抗指数、胰岛β细胞分泌指数、△I30/△G30及李氏β细胞胰岛素分泌指数值。结果:空腹血糖正常的冠心病患者糖代谢异常(120min血糖≥7.8mmol/L)的发生率为43%,明显高于对照组23%,仅用空腹血糖这些患者将不能被诊断;冠心病组空腹及服糖后120min、180min胰岛素水平、稳态模型胰岛素抵抗指数显著高于对照组[(11.4±9.4)vs(5.3±3.1)mU/L,(71.6±48.5)vs(31.2±22.0)mU/L,(42.7±35.4)vs(8.6±6.9)mU/L,(0.62±0.32)vs(0.47±0.21),P<0.01],△I30/△G30、李氏β细胞胰岛素分泌指数低于对照组[(1.13±0.65)vs(1.42±0.57),(1.03±0.35)vs(1.36±0.37),P<0.01],差异有显著性;Logistic回归分析显示稳态模型胰岛素抵抗指数、120min胰岛素水平、总胆固醇与冠心病的发生显著相关(OR值分别为1.432、0.644、1.116,P<0.05)。结论:空腹血糖正常的冠心病患者糖代谢异常发病率明显高于对照组,简易口服葡萄糖耐量试验可揭示血糖代谢状态,应常规用于冠心病患者血糖代谢异常的诊断。冠心病患者存在胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌功能缺陷。     

不同糖耐量状态孕妇血清成纤维细胞生长因子21水平与胰岛β细胞功能的相关性研究

目的探讨不同糖耐量状态孕妇血清成纤维细胞生长因子21(FGF21)水平与胰岛β细胞功能的关系。方法选取妊娠24~28周于我院接受50 g糖负荷试验(GCT)阳性的孕妇441例,1周后再行75 g OGTT,根据结果分为GDM组228例、妊娠期IGT(GIGT)组122例及妊娠期NGT(GNGT)组91名。ELISA检测血清FGF21水平,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),胰岛素敏感指数(Matsuda指数),胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),第1、2时相胰岛素分泌指数及胰岛β细胞代偿胰岛素抵抗的分泌能力(ISSI)评估胰岛β细胞功能。FGF21与胰岛β细胞功能的相关性采用Pearson相关分析。结果 (1)GDM组和GIGT组BMI,0、1、2、3hPG及1、2、3 hIns均高于GNGT组和GIGT组(P0.05或P0.01)。GDM组SBP、DBP、0 hIns和HbA_1c高于GNGT组和GIGT组(P0.05或P0.01);(2)GNGT组、GIGT组及GDM组FGF21水平[(101.74±20.40)vs(137.93±25.52)vs(185.69±31.61)ng/L]和HOMA-IR依次升高[1.74(0.91,2.85)vs2.39(1.31,4.87)vs3.38(2.19,6.75)],Matsuda指数[(58.74±15.68)vs(41.62±15.65)vs(39.73±18.98)]和HOMA-β[(157.69±88.41)vs(144.35±78.98)vs(107.30±87.23)]及ISSI[(72253.55±15167.53)vs(42313.91±7112.47)vs(30032.50±11500.24)]依次降低(P0.05或P0.01)。GDM组第1、2时相胰岛素分泌指数低于GNGT组和GIGT组(P0.01),但GNGT组与GIGT组比较,差异无统计学意义(P0.05);(3)Pearson相关分析显示,FGF21与HOMA-IR呈正相关(r=0.255,P=0.030),与Matsuda指数、HOMA-β、第1、2时相胰岛素分泌指数及ISSI呈负相关(r=0.289、-0.256、-0.224、-0.230、-0.277,P=0.019、0.037、0.045、0.040、0.023)。结论随着糖代谢受损逐渐加重,FGF21水平升高,且与胰岛β细胞功能相关,可能与GDM的发生发展有关。