TF-1细胞凋亡相关基因19在桥本病甲状腺细胞中的表达

探讨新的凋亡相关蛋白TFAR19在桥本病 (HT )甲状腺组织中是否表达。结果显示TFAR19在正常甲状腺组织中几乎未见表达 ,而在HT患者甲状腺细胞中阳性表达 ,提示TFAR19凋亡通路激活可能在HT的发病机制中发挥重要作用。     

Ad-Gax转染对缺氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡及其相关基因表达的影响

目的观察Gax基因转染对缺氧性肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）凋亡及其相关基因表达的影响。方法腺病毒介导Gax转染体外原代培养的PASMCs。透射电镜观察细胞凋亡形态;原位细胞凋亡检测法观察Ad-Gax转染前后在常氧和缺氧处理2h,6h、12h、24h、48h大鼠PASMCs凋亡情况;免疫细胞化学法测PASMCsBcl-2、Bax蛋白表达。结果透射电镜观察到Ad-Gax转染后PASMCs产生凋亡现象。未转染缺氧刺激前后,均无或可见极少量的阳性细胞;Ad-Gax转染后,如无缺氧刺激,也无或仅可见少量的阳性细胞,予缺氧刺激后,阳性细胞显著增多,尤其在转染后24～48h更明显。转染组常氧、缺氧2h,6h、12h、24h、48h细胞凋亡百分率均显著高于未转染组（P〈0．01）。Ad-Gax转染前,与常氧时比较,缺氧刺激PASMCs后,Bax蛋白表达略为升高但无统计学意义;而Bcl-2蛋白表达显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。Ad-Gax转染PASMCs后,缺氧刺激使Bcl-2蛋白表达显著降低（P〈0．01）,Bax蛋白表达显著增高（P〈0．01）。转染组细胞凋亡率与Bcl-2／Bax比值呈负相关（r=-0．53,P〈0．01）。结论Ad-Gax转染可诱导缺氧性PASMCs凋亡,其机制可能是通过上调Bax蛋白和下调Bcl-2蛋白的表达,尤其是通过降低Bcl-2／Bax比值实现的。     

细胞凋亡相关基因与血液系统恶性肿瘤

细胞凋亡是一种基因控制下的主动程序化死亡过程.细胞凋亡相关基因很多,主要包括基因bcl-2家族、c-myc、抑癌基因P53等,膜上受体如Fas(APO-1/CD95)及细胞蛋白酶如ICE家族等,白血病特有基因如PML/RARα、bcr/abl等.多细胞生物体生长、发育及自我稳定,均通过细胞增生与细胞凋亡,即细胞增殖、分化和凋亡的动态平衡来实现.恶性肿瘤的发生、发展及预后与细胞凋亡相关基因密切相关.恶性肿瘤的过度无限增殖、分化障碍及凋亡受阻是其发病的主要病理学基础.细胞凋亡相关基因及其表达物的检测,在恶性肿瘤的诊断、治疗及预后观察中,已得到了广泛应用.     

肺癌细胞凋亡及相关基因与其预后关系的初步研究

目的 观察５７例肺癌石蜡包埋组织中细胞的凋亡现象，探讨该现象与相关基因及肺癌预后的关系。方法 采用原位末端ＤＮＡ片段标记法及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳观察肺癌细胞凋亡现象，应用ＡＢＣ免疫组化法检测ｋｉ－６７，ｂｃｌ－２以及Ｐ５３的表达。结果 ①凋亡细胞与ｋｉ－６７阳性细胞的数量变化呈高度相关（Ｐ＝０．００１）与患者的临床分期、年龄以及Ｐ５３表达等均无确切关系。②小细胞肺癌中ｂｃｌ－２的表达与凋亡细胞数呈     

Graves病患者甲状腺细胞凋亡的初步研究

目的　研究Graves病 (GD)甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas、可溶性Fas(sFas)及Fas配基 (Fas L)的表达特征 ,探讨Fas介导的细胞凋亡与GD发病机制之间的内在联系。方法甲状腺组织取自 7例GD手术患者和 3例意外死亡健康个体 ,采用原代甲状腺细胞 (TEC)培养技术、流式细胞术、ELISA及半定量RT PCR法检测TEC凋亡率及Fas、sFas和Fas L的表达情况。结果(1)GDTEC凋亡率为 (3.42± 0 .81) %,明显高于正常对照 (P <0 .0 1)。 (2 )GDTECFas表达率为 (8.3± 1.7) %,与正常对照相比差异无显著性。 (3)GDTEC培养上清液中sFas含量明显高于正常对照(P <0 .0 1)。 (4 )正常及GDTEC均表达Fas及sFasmRNA ,而Fas LmRNA仅在GDTEC表达。与正常对照相比 ,GDTECFasmRNA差异无显著性 ,sFasmRNA含量则明显升高 (P <0 .0 1)。结论GD患者甲状腺细胞存在细胞凋亡和Fas系统的异常表达 ,提示Fas介导的细胞凋亡参与GD的发病过程 ,sFas产生增加可能与甲状腺细胞增殖有关。     

姜黄素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对肝癌细胞（QGY）细胞增殖和细胞周期的调控及细胞凋亡的影响。方法 采用MTT法测定姜黄素在不同浓度，不同时间对QGY的抑制作用，流式细胞仪分析细胞周期分布，透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果 姜黄素可抑制QGY的抑制作用。流式细胞仪分析细胞周期分布，透射电镜观察细胞的超微结构变化。结果 姜黄素可抑制QGY细胞的生长，其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系，72h的中效浓度（IC50）为49.50μmol/L，流式细胞仪分析证实姜黄素能使QGY细胞聚积在S期，电镜观察发现姜黄素可导致细胞变性。坏死，诱导细胞凋亡。结论 姜黄素可干扰QGY细胞的周期分布，具有细胞毒作用。抗增殖，诱导细胞凋亡的作用。     

端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性和诱导细胞凋亡

目的 研究端粒酶逆转录酶（hTERT)基因反义寡核苷酸（ASODN）对肺癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法 实验分为ASODN组、正义寡核苷酸（SODN）组和空白对照组,所用ASODN和SODN的浓度分别为10μmol/L,脂质体为16mg/L,采用端粒重复扩增法、逆转录－聚合酶链反应、Western Blot及流式细胞术分别观察各组端粒酶活性、hTERP mRNA和蛋白质表达以及细胞凋亡。结果 ASODN组显著下调或抑制肺癌细胞端粒酶活性和hTERT表达,但直到第21天才出现细胞凋亡增多。结论 端粒酶活性与hTERT表达密切相关。     

转化生长因子-β1及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因多态性与结节性甲状腺疾病相关性研究

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1 +869T/C和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)+1525 G/A的基因多态性在结节性甲状腺疾病患者中的分布及其相关性.方法 选择2007年9月至2009年9月于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内分泌科确诊的结节性甲状腺疾病患者544例作为研究对象,其中包括136例结节性甲状腺肿患者(结甲组),132例甲状腺瘤患者(腺瘤组),146例Graves病患者(GD组),130例桥本甲状腺炎患者(HT组),同时另选择135例健康体检者作为对照组.所有对象清晨空腹采2ml静脉血,采用聚合酶链式反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)、聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TGF-β1+869 T/C和TRAIL+ 1525A/G基因多态性.结果 ①TGF-β1+869T/C:结甲组的CC基因型[47.0％ (64/136)]、C等位基因频率[63.2％(172/272)]均高于对照组[16.3％(22/135)、45.2％(122/270)],组间比较差异有统计学意义(x2=30.76、17.79,P均＜0.05).腺瘤组CC基因型[42.4％(56/132)]、C等位基因频率[59.1％(156/264)]均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(x2=24.40、10.34,P均＜0.05).携带C等位基因的人群患结节性甲状腺肿的风险是携带T等位基因的2.086倍[比值比(OR)=2.086;95％可信区间(CI):1.480～2.943];携带C等位基因的人群患腺瘤的风险是携带T等位基因的1.752倍(OR=1.752;95％CI:1.244～2.469).②TRAIL+1525G/A:结甲组GG基因型[40.4％(55/136)]、G等位基因频率[62.9％(171/272)]均高于对照组[11.9％(16/135)、48.5％(131/270)],组间比较差异有统计学意义(x2=9.176、11.307,P均＜0.05).腺瘤组GG基因型[53.0％(70/132)]及等位基因频率[73.1％(193/264)]均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(x2=9.806、33.82,P均＜0.05).携带G等位基因的人群患结节性甲状腺肿的风险是携带A等位基因的1.796倍(OR=1.796,95％CI:1.275～ 2.531);携带G等位基因的人群患腺瘤的风险是携带A等位基因的2.884倍(OR=2.884,95％CI:2.009 ～ 4.142).结论 TGF-β1+869T/C、TRAIL+1525G/A多态性可能与结节性甲状腺疾病的发病有关,TGF-β1的C等位基因和TRAIL的G等位基因可能是结节甲状腺疾病的易感基因.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因1525位点的多态性与结节性甲状腺疾病的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因(TRAIL)1525位点多态性与结节性甲状腺疾病的关系.方法 125例甲状腺疾病患者来自于内蒙古包头医学院第一附属医院内分泌科,其中结节性甲状腺肿(结甲)患者67例,甲状腺腺瘤患者58例.患者中男54例、女71例,平均年龄为(41.05±14.42)岁.结甲患者接毒性或非毒性进行分组,甲状腺腺瘤患者按高功能或非高功能分组.正常对照人群100例,来自本院同期体检者,其中男47例,女53例,平均年龄为(42.35±16.52)岁.根据知情同意的原则,采集两组人群的静脉血,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RLFP)方法进行TRAIL基因多态性测定,计算TRAIL基因的基因型(纯合子GG、杂合子GA、突变纯合子AA)和等位基因频率(G、A),比较相对风险度(比值比,OR).结果 结甲组TRAIL基因1525位点基因型(GG:40.3％,AG:44.8％,AA:14.9％)、等位基因频率(G:62.7％,A:37.3％)与对照组(GG:17.0％,AG:65.0％,AA:18.0％;G:49.5％,A:50.5％)比较,差异有统计学意义(x2值分别为11.376、5.633,P＜0.01或＜0.05);腺瘤组1525位点基因型(GG:44.8％,AG:38.0％,AA:17.2％)、等位基因频率(G:63.8％,A:36.2％)与对照组比较,差异有统计学意义(x2值分别为15.342、6.054,P＜0.01或＜ 0.05).结甲组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较,OR=1.714(P＜ 0.05),95％可信区间(CI):1.097 - 2.679;腺瘤组TRAIL基因1525位点等位基因频率风险度与对照组的比较,OR=1.797(P＜0.05),95％CI:1.124～2.874.毒性与非毒性结节组、高功能与非高功能腺瘤组TRAIL基因1525位点基因型、等位基因频率比较,差异无统计学意义(x2值分别为3.714,2.792;1.103,2.020;P均＞0.05).结论 TRAIL 基因1525位点多态性与结节性甲状腺疾病发生关系密切.     

大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义

目的：探讨大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义。方法：用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的TUNEL法缺口末端标记和免疫组化技术，检测45例大肠腺瘤组织细胞的原位凋亡（AI）、原位增殖（KI）及bcl-2、bax基因表达；并设立20例正常大肠粘膜和40例大肠癌为对照组，探讨细胞凋亡和细胞增殖在大肠癌早期发生中的作用。结果：正常结肠粘膜有少量的bcl-2、bax和ki－67（用KI表示）表达及少量凋亡细胞存在，但无异常表达。大肠腺瘤中bcl-2表达和KI明显增加，与正常组相比P均＜0.05；AI和bax表达轻度增加，与正常相比P＜0.05。bax与AI表达呈正相关（P＜0.01），bcl－2和bax及AI呈负相关。大肠癌中bcl-2表达和KI表达虽增加，但与腺瘤相比无统计学差异P＞0.05；大肠癌组织中AI和bax表达明显增加且与腺瘤组相比P＜0.05。结论：大肠癌发生早期即腺瘤中就有细胞凋亡调控基因及增殖基因的表达异常，且以抗凋亡基因bcl-2和增殖基因表达占主导地位。该基因的表达异常可能是大肠癌发生的一个较早期分子标志；细胞凋亡增加和bax表达异常可能是大肠癌发生的一个相对较早期分子生物学事件。早期检测抗细胞凋亡基因和增殖基因，有助于对大肠癌早期发生的评估。     

慢性阻塞性肺疾病患者HO-1基因启动子微卫星多态性与凋亡的关系研究

目的 探讨HO-1基凶启动子微卫星多态性与COPD易感性的关系。方法 利用PCR基因扩增，聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色及原位缺口末端DNA碎片标记技术分析50例COPD患者和30例未合并COPD组肺组织（对照组）HO-1基因启动子5端（GT）n重复序列不同基因型与肺组织不同细胞凋亡的关系。结果 （1）COPD组肺组织细胞凋亡指数显著高于对照组（包括吸烟的对照组和不吸烟的对照组，P〈0．05，P〈0．01）。吸烟的对照组肺组织细胞凋亡指数亦高于不吸烟的对照组（P〈0．01）。（2）COPD组L型等位基因频率显著高于对照组（P〈0．05）。（3）含有L型等位基因的基因型的样本其肺组织细胞凋亡指数显著高于不含L型等位基因的基因型的样本（均P〈0．01）。结论 （1）吸烟可能是引起细胞凋亡的重要因素。（2）HO-1基因启动予5端大量（GT）n重复序列的个体可能抑制吸烟引起的氧化应激对HO-1基因的诱导性表达，使其肺组织凋亡细胞数目增加，导致肺组织破坏而与COPD的易感性相关。     

肺癌与甲状腺转录因子-1的研究进展

肺癌是目前全世界发病率最高的恶性肿瘤,其病死率也居于前列.因此,对肺癌的早期诊断及早期治疗对于降低肺癌患者的病死率以及改善患者生存质量至关重要.传统的肺癌诊断方法包括影像学检查以及病理学检查,现在仍然被临床所采用.但鉴于以上检查手段的敏感性、特异性、适用度等方面存在一定局限,近年来有关肺癌早期诊断、治疗及预后的分子标志物的研究愈来愈受到关注.本文就甲状腺转录因子-1的生物作用及其在肺癌诊断、治疗及预后方面的研究进展作一综述.     

凋亡抑制基因Bcl-2表达与支气管哮喘关系的研究

目的 支气管哮喘的发病机制非常复杂,至今尚未完全阐明.目前认为细胞凋亡与支气管哮喘发病相关.Bcl-2基因是近年来广泛重视的一种凋亡抑制基因,可抑制多种细胞凋亡,与多种疾病的发生存在密切的关系.本研究测定支气管哮喘患者外周血白细胞Bcl-2基因mRNA的表达量及其血清中蛋白的含量,研究Bcl-2在支气管哮喘中的表达及其相互关系,初步探讨Bcl-2基因在支气管哮喘的发生、发展中的生物学意义. 方法 20例支气管哮喘中重度发作患者为实验组,20例无支气管哮喘、变态反应性疾病的健康人为对照组.采取抗凝静脉血标本5ml,立即用Dextron-PBS分离出血白细胞,采用TristarTM试剂按试剂盒说明提取总RNA,-80°超低温冰箱保存,采用TaKaRa试剂盒检测Bcl-2基因mRNA表达量.两步法第一步用ExScriptTM反转录酶,对Bcl-2mRNA反转录成cDNA;第二步用Premix Ex TaqTM酶对反转录后的cDNA进行扩增,10倍梯度稀释cDNA模板,分别为100、10-1、10-2、10-3、10-4倍梯度.用美国PE公司5700型实时荧光定量PCR仪进行检测,以GAPDH基因为对照基因,用仪器附带SDS软件自动算出Bcl-2基因与对照基因比值,确定Bcl-2基因的相对含量.同时抽取抗凝静脉血2ml,伊红染色,行外周血嗜酸性粒细胞计数.抽取不抗凝静脉血2ml,分离血清,采用澳大利亚Bender Medsystems公司人Bcl-2蛋白检测试剂盒,按试剂盒说明操作,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测Bcl-2蛋白含量.应用SAS 6.12计算机软件对实验结果进行统计学分析. 结果 支气管哮喘患者外周血嗜酸性粒细胞计数较正常对照组比较有非常显著性增加(P＜0.01),20例支气管哮喘患者外周血细胞Bcl-2基因mRNA表达量高于正常对照组,两组有非常显著性差异(P＜0.01),外周血清Bcl-2蛋白含量与正常对照组差异无显著性(P＞0.05). 结论 本研究证实支气管哮喘患者外周血嗜酸性粒细胞显著增多.支气管哮喘患者外周血细胞Bcl-2基因mRNA表达显著增多,揭示Bcl-2基因在支气管哮喘发病中具有一定的作用和意义,Bcl-2基因与支气管哮喘密切相关.而外周血清中Bcl-2蛋白含量与支气管哮喘的发病无直接相关.     

TSHR基因突变与亚临床型毒性多结节性甲状腺肿的相关研究

目的 探讨TSH受体(THSR)基因突变在亚临床型毒性多结节性甲状腺肿(STMG)发病中的作用。方法 9例STMG患者和9例非毒性结节性甲状腺肿(nTMG)患者．手术切除肿大的甲状腺组织．用酚-氯仿-异戊醇法提取基因组DNA，对目的基因片段进行聚合酶链反应(PCR)及DNA测序。结果 在9例STMG患者中，发现3例单碱基插入性突变．在1950位和1951似核酸之间插入了一个胞嘧啶(C)．使616位以后氨基酸发生了移码突变，9例nTMG未发生基因突变。结论 TSHR基因突变可能在STMG形成中发挥重要作用。     

Inverse association between cyclin D1 overexpression and retinoblastoma gene mutation in thyroid carcinomas

Cyclin D1 plays a key role in the regulation of the G1/S transition through the cell cycle. Deregulation of cyclin D1, most often leading to overexpression of the gene, has been reported in many tumor types. It has been suggested that cyclin D1 overexpression could be an alternative mechanism for pRb inactivation. We have previously found Rb gene mutations in 55% of malignant thyroid tumors. In the present study, we examined the cyclin D1 gene expression and amplification in 24 tumor samples (two of them are benign goiters) randomly selected from the same series of thyroid tumors, to see whether cyclin D1 over-expression is present in those specimens without Rb gene mutations. We found a four- to fivefold increase in cyclin D1 expression in 7 of 22 thyroid carcinomas as compared with that in benign nodular goiters. Six of them were found in carcinomas without Rb gene mutations. Among the remaining 15 thyroid carcinoma samples, 11 were found previously to have Rb gene mutations. The association between increased cyclin D1 expression and absence of Rb mutation is statistically significant (p < 0.05). We found no evidence of the cyclin D1 gene amplification or rearrangement to account for such an increase in cyclin D1 expression. We conclude that cyclin D1 overexpression may be relevant to thyroid carcinogenesis. Two mechanisms may be involved in the inactivation of pRb: one is through Rb gene mutations, and the other is by cyclin D1 overexpression.     

伊立替康化学治疗的不良反应与UGT1A1＊28基因多态性的关系

目的：研究应用伊立替康化学治疗（化疗）的进展期消化道肿瘤患者不良反应的发生率及严重程度与UGT1A1基因启动子区多态性的关系。方法：选择66例汉族进展期消化道肿瘤患者,使用含伊立替康的方案化疗,观察并记录患者化疗中出现的不良反应、化疗前总胆红素水平和化疗后至Ⅲ度以上严重毒性时间（周）;外周血中抽提基因组DNA,测定UGT1A1基因启动子区TATA盒胸腺嘧啶-腺嘌呤（TA）序列重复次数,统计分析基因型与不良反应的关系,比较不同基因型患者化疗前总胆红素水平和至严重毒性时间的差异。结果：55例患者（83.3%）UGT1A1基因启动子区TA序列6次重复,为纯合野生型（TA）6/（TA）6（UGT1A1＊1/＊1）;11例患者（16.7%）基因型为TA序列6次和7次重复的杂合（TA）6/（TA）7（UGT1A1＊28/＊1）,未发现TA序列7次重复UGT1A1＊28/＊28的纯合突变。以上2组患者发生Ⅲ度以上白细胞或中性粒细胞减少者分别为26例和5例（47.3%比45.5%,P=1.000）,发生Ⅲ度以上腹泻者分别为5例和4例（9.1%比36.4%,P=0.036）。2组治疗前总胆红素水平分别为（15.1±1.1）μmol/L和（20.8±5.1）μmol/L（P=0.09）,至严重毒性时间2组分别为9周和3周（P=0.186）。结论：在应用伊立替康化疗的汉族患者中,UGT1A1启动子区TATA盒基因多态性（TA）6/（TA）7杂合状态可以增加患者发生Ⅲ度以上腹泻的风险,但不会增加患者发生Ⅲ度以上白细胞或中性粒细胞减少的风险。     

基质金属蛋白酶-2和-9在食管鳞状细胞癌中的过表达

目的 探讨人食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、-9的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法,检测57例食管鳞癌及10例食管正常黏膜石蜡标本中MMP-2、-9蛋白的表达情况.结果 食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达率(40.3%,61.4%)显著高于正常组织(0.0%,10.0%)(P＜0.05).食管鳞癌组织中MMP-2及MMP-9阳性表达与淋巴结转移和癌组织浸润深度有显著相关性(P＜0.05),而与患者的性别、年龄和组织分化程度无显著相关性(P＞0.05).结论 MMP-2和MMP-9在食管癌中显著高表达,与食管癌的转移及侵袭有关,其异常表达可能共同参与食管癌的发生、发展过程,检测MMP-2、-9可作为食管癌病理学特点的参考指标.     

不同碘摄入水平对大鼠甲状腺功能影响的实验研究

目的研究不同碘摄入水平对大鼠甲状腺功能的影响。方法将Wistar大鼠分为低碘(LI)组、正常碘(NI)组、5倍、10倍、50倍、100倍高碘(5HI、10HI、50HI、100HI)组,在喂养3、6、12个月后处死,分别检测血清总T4(TT4)、总T3(TT3)、游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、反T3(rT3)水平,以及甲状腺组织中T4、T3、rT3水平。结果3个月时血清TT4、FT4、TT3、FT3、rT3以及甲状腺组织中T4、T3、rT3水平,组间比较差异均有统计学意义(F值分别为54．07、67．80、15．51、27．71、19．73、61．51、40．67、53．86,P<0．01);6个月时上述指标组间比较差异均有统计学意义(F值分别为58．80、58．75、19．64、17．22、47．21、46．01、47．22、126．87,P<0．01);12个月时甲状腺组织中T4、T3、rT3水平组间比较差异均有统计学意义(F值分别为20．44、17．69、29．23,P<0．01)。与NI组相比较,LI组血清和甲状腺组织内各激素水平明显降低,而高碘组随着时间的延长和摄入碘量的增加,血清各激素和甲状腺组织内T3水平出现逐渐降低趋势。结论碘缺乏和碘过量均可导致大鼠甲状腺功能低下,而碘缺乏的作用更明显;大鼠对长期高碘摄入比碘缺乏具有更强的耐受性,只有在长期补充过量碘(>50倍正常需要量)才发生甲状腺功能低下。     

甲状腺激素反应蛋白1基因-一个新的鼠脑甲状腺激素反应基因的克隆、表达分布及其功能预测

目的 克隆新的大鼠脑甲状腺激素反应基因，研究其表达特征并初步预测其功能。方法 建立先天性甲状腺功能减退(甲减)新生大鼠模型，用荧光标记的差异显示PCR(DD-PCR)技术、亚克隆、测序及相似性检索获得未知的大鼠脑甲状腺激素反应基因的cDNA片段。采用电子克隆、RT-PCR、测序并克隆其cDNA全长。经Northem印迹法证实其表达受到甲状腺激素的调节，并用半定量RT-PCR方法和生物信息学技术观察其分布转录水平和预测其功能。结果克隆了甲状腺激素反应蛋白1(thyroid hormoneresponse protein-1，TRP-1)基因全长cDNA，共973bp(基因登录号为AF348365)，在甲减新生大鼠的脑中，该基因的转录增强。该基因表达广泛，以脑组织中的表达水平最高；其在大鼠不同脑区的表达含量亦不同，以嗅脑最高。该基因的编码产物具有一些重要的结构域和功能基序。结论 TRP-1基因是新发现的甲状腺激素反应基因，它在正常的脑发育中可能具有重要的作用，其异常表达可能是甲减性脑发育障碍发生的分子机制之一。