血管性痴呆皮肤基底细胞微管的体视学定量研究

目的: 研究血管性痴呆(VD)皮肤基底细胞微管的生物学诊断意义。方法: 使用体视学方法对VD和正常健康老年人皮肤基底细胞微管进行测量, 用图象分析仪进行定量分析。结果: VD组的Vv=2.1926±1.1749、Lv=4.4531±2.4053、Na=2.2356±1.1980, 分别非常显著地高于正常老年组的Vv=1.3515±0.5376、Lv=2.7561±1.0963、Na=1.3781±0.5481; P<0.01。结论: 本研究提示VD患者基底细胞微管定量分析, 有可能为VD诊断提供一种非神经系统的生物学诊断指标。     

Cx43和Pax3蛋白在人胚胎胃发育过程中的表达及意义

目的： 探讨Cx43和Pax3蛋白在人胚胎发育早期胃体组织中的表达规律。方法：应用免疫组织化学SABC法检测第2、3、4月3个月龄段人胚胎胃体组织细胞中Cx43和Pax3蛋白阳性表达的积分吸光度（IA）。结果：2个月胎龄组胃体黏膜层组织中Cx43蛋白阳性细胞的IA值为154.2605±3.9513（n=5）, 3个月胎龄组IA值为150.3665±5.8285（n=6）,4个月胎龄组IA值为156.2175±2.0886（n=5）,可见IA值先降低再升高,差异显著（P＜0.01）。第2、3、4个月胎龄段,Pax3蛋白在人胚胎胃体肌层及黏膜层细胞均呈阳性表达。2个月胎龄组胃体组织中,Pax3蛋白阳性染色细胞的IA值为155.2775±4.0830（n=5）,3个月胎龄组IA值为155.9685±2.2745（n=6）,4个月胎龄组IA值为155.9275±1.9656（n=5）,差异无显著（P＞0.05）。结论：Cx43和Pax3蛋白在人胚胎早期胃组织的生长发育过程中起重要的调节作用。     

Alzheimer病和血管性痴呆患者血清β-AP的检测

目的：探讨血清中β淀粉样蛋白（β-amyloid protein,β-AP）的含量,对Alzheimer病（AD）和血管性痴呆（VD）的诊断价值。方法：采用放射免疫分析法,检测临床诊断为AD患者9例,VD患者16例,及68例缺血性脑血管病（ICVD）患者血清β－AP的含量,同时与对照组比较。结果：AD与VD患者β-AP含量明显高于ICVD组和对照组,且呈显著性差异（P＜0．01）,ICVD患者的β-AP含量也明显高于对照组（P＜0．05）,结论：β-AP含量增高是AD和VD病发病的危险因素,β-AP的检测为早期诊断和防治老年性痴呆有着重要的参考价值。     

慢性脑供血不足导致非痴呆性血管性认知功能障碍的临床研究进展

慢性脑供血不足（ chronic cerebral circulation in sufficiency ，CCCI）是国内外近10年提出的较新病名，被认为是多种疾病如血管性痴呆（vascular dementia ，VD）、Alzheimer 病（AD）和 Binswanger病等发展过程中的一个共同的病理学过程。发病早期以认知功能损害为主要表现，最终可能导致持久认知与神经功能障碍。严重者可导致痴呆和脑卒中。在痴呆的研究中，脑血流量减少在血管性认知功能损害进程中的作用日益引起重视，非痴呆性血管性认知功能障碍（non‐dementia vascular cogni‐tive impairment without dementia ，NVCI）是血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment ，VCI）中最常见的一个亚型，意大利一项研究显示 NVCI的发生率为9．6％，痴呆的转化率为认知功能正常人群的3倍［1］。而另一项追踪研究显示，146例受试对象，5年中有46％转化为血管性痴呆［2］。这些研究都提示了 NVCI转化为血管性痴呆的高风险性。早期发现CCCI所致的NVCI ，早期给予干预，对预防CCCI所致的 NVCI至关重要。现将CCCI导致NVCI的临床研究进展综述如下。     

糖尿病足伤口皮肤细胞凋亡情况及AGEs对人皮肤成纤维细胞凋亡的影响

 目的：检测糖尿病足伤口皮肤细胞凋亡情况,探讨晚期糖基化终产物（AGEs）对人皮肤成纤维细胞凋亡的影响。方法：选择36例足部伤口患者,糖尿病组18例,非糖尿病组18例。对2组临床和生化数据进行统计分析。采用免疫组化和TUNEL法检测伤口皮肤细胞凋亡情况。体外培养人原代皮肤成纤维细胞,分别给予正常浓度糖、持续高糖、波动高糖和AGEs干预72 h,采用蛋白质印迹法和流式细胞术测定细胞凋亡情况。结果：与非糖尿病组相比,糖尿病组血糖水平明显增高,伤口持续时间长（P<0.05）。Cleaved caspase-3在非糖尿病组和糖尿病组的免疫反应评分分别为1.04±0.23和3.04±0.31（P<0.05）;TUNEL检测非糖尿病组和糖尿病组的细胞凋亡指数分别为（3.8±0.8）%和（8.4±1.5）%（P<0.05）。人原代皮肤成纤维细胞在正常浓度糖、持续高糖、高糖波动、AGEs干预下,cleaved caspase-3蛋白表达水平分别为0.80±0.13、1.22±0.18、1.46±0.32和1.83±025,凋亡率分别为（2.43±0.19）%、（2.89±0.51）%、（3.99±0.24）%和（6.83±0.36）%。 AGEs组cleaved caspase-3蛋白表达水平和凋亡率均明显高于正常浓度糖组和持续高糖组（P<0.05）。结论：糖尿病皮肤创面细胞凋亡增加,可能是糖尿病皮肤伤口难愈的重要原因之一。与持续高糖、高糖波动组相比,AGEs促进人皮肤成纤维细胞凋亡的作用更强。     

血管性痴呆大鼠海马超微结构的变化及药物干预

目的：探讨血管性痴呆病理机制及黄精口服液的作用机制。方法：结扎双侧颈总动脉建立血管性痴呆模型,黄精口服液灌胃,应用透射电镜观测神经细胞、胶质细胞、微血管病理变化和突触结构参数的变化。结果：血管性痴呆大鼠海马CAI区神经组织线粒体肿胀、嵴断裂、模糊或消失,微管断裂、排列紊乱,神经毡中突起肿胀、变性,突触结构参数明显改变;毛细血管内皮细胞局部基膜和星形胶质细胞也有病理改变。黄精口服液干预的大鼠海马组织病理变化明显减轻;海马CAI突触界面曲率增大、突触后致密物增厚、突触活性区增长。结论：(1)突触结构变化是血管性痴呆的病理机制之一;(2)黄精口服液促进突触重建、改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。     

放射核素显像与脑电图对血管性痴呆的诊断价值

血管性痴呆是老年期常见的痴呆类型之一，及时治疗对其预后有一定的影响，因此早期诊断已成为重要的临床研究课题。我们根据临床表现、量表测定、放射性核素脑显象（ＳＰＥＣＴ）、脑电图（ＥＥＧ）、电子计算机Ｘ线断层扫描（ＣＴ）在血管性痴呆诊断中的价值作一探讨。１...     

过表达TAP1上调人胶质瘤细胞株U251 HLA-I的表达

 目的：探讨抗原提呈相关转运蛋白1（TAP1）过表达对人胶质瘤细胞株U251人类白细胞抗原I(HLA-I)表达的影响。方法：培养 U251细胞,构建慢病毒载体并转染U251细胞,获得稳定高表达TAP1的细胞株并设立转染空载体对照组,分别收集U251细胞组、空载体对照组和TAP1基因转染细胞组细胞的蛋白和RNA,行real-time PCR 和Western blotting分析过表达的TAP1对U251细胞HLA-I表达的影响,并用流式细胞术分析U251细胞HLA-I表面呈现的变化。结果：成功建立TAP1高表达U251细胞株,TAP1 mRNA和蛋白分别升高（8.73±1.07）倍和（11.71±0.83）倍。高表达的TAP1促进U251细胞HLA-A、HLA-B、HLA-C（重链）和β2微球蛋白（轻链） mRNA表达上调,分别升高（3.51±0.36）倍、（4.78±0.85）倍、（2.94±0.28）倍和（3.23±0.24）倍, HLA-I蛋白表达升高（3.14±0.53）倍,同时U251细胞HLA-I的表面呈现明显增多,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论：过表达TAP1能促进U251细胞HLA-I表达及其在细胞表面呈现的提高。     

足第2~5跖板的影像测量研究

目的　研究跖板在MRI和超声中形态学特征,以提高对跖板临床诊断价值的认识与水平。 方法 采用新鲜足标本19足（76例跖板)以MRI及超声扫描,观察跖板的形态并测量跖板长、宽、中间及旁侧厚度。 结果 MRI显示中,跖板在质子密度（PD）像显示最为清晰,表现为光滑圆弧结构。超声在动态及灵活性更具优势,呈现等回声带。足第2~5跖板影像学各项数值中,MRI测量长度依次为（18.36±1.30）、（17.88±0.89）、（16.67±1.22）、（14.26±1.11）mm;宽度为（10.98±0.71）、（10.10±2.21）、（10.07±0.52）、（9.07±0.65）mm;旁侧厚度为（2.07±0.13）、（2.05±0.12）、（1.87±0.22）、（1.79±0.24）mm;中间厚度为（1.34±0.16）、（1.32±0.14）、（1.13±0.14）、（1.05±0.13）mm。超声测量长度依次为（17.24±1.25）、（16.98±1.12）、（15.77±1.80）、（12.18±1.38）mm;宽度为（12.19±0.74）、（11.63±0.79）、（11.08±0.77）、（10.44±0.86）mm;旁侧厚度为（1.83±0.17）、（1.76±0.21）、（1.61±0.27）、（1.48±0.21）mm;中间厚度为（1.14±0.14）、（1.06±0.15）、（1.04±0.15）、（0.94±0.12）mm。MRI的各项测量指标结果与超声扫描对比显示两者存在差异, 参数差异比较有统计学意义（P<0.05）。 结论 MRI与超声都可清晰地显示跖板,对跖板损伤的诊断有重要意义。     

蛋白磷酸酯酶在Alzheimer氏病tau蛋白异常磷酸化中的作用

用蛋白磷酸酯酸PP-2A、-2B和-1型分别处理的Alzheimer病（AD）异常磷酸化tau蛋白可不同程度恢复其促微管聚集和组装功能。PP－2A的恢复作用比PP－2B和PP－1更强．PP－2A,PP－2B和PP－1使异常tau蛋白水解释放磷酸的量分别为其总量的57％,36％和30％。tau蛋白Ser－235位的磷酸化不是决定其功能的关键位点,而Thr－231的磷酸化可能与微管组装早期的成核聚集作用有关。该研究证明：体内蛋白磷酸酯酶PP－2A,PP－2B和PP－1可能参与tau蛋白异常磷酸化过程,保持这些磷酸酯酶的活性有可能抑制AD神经原纤维退化．     

老年性痴呆患者血清β淀粉样蛋白与多肽生长因子的检测

目的:检测血清β淀粉样蛋白(β-AP)和多肽生长因子含量变化,探讨其在Alzheimer病(AD)和血管性痴呆(VD)发病机制中的可能作用。方法:采用放射免疫分析法(RIA)检测临床诊断为AD患者8例,VD患者15例及63例缺血性脑血管病(ICVD)患者血清β-AP、转化生长因子α(TGF-α)和类胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的水平,同时与健康对照组比较。结果:AD与VD患者β-AP、TGF-α和IGF-Ⅱ水平明显高于ICVD组和健康对照组,均具显著性差异。ICVD患者血清β-AP、TGF-α和IGF-Ⅱ水平亦明显高于对照组,其中以脑梗塞后遗症(SCI)和椎基底动脉供血不足(VBI)组增高十分明显,与对照组比较差异显著(P＜0.05)。AD与VD患者3项测定指标之间具有明显的正相关。结论:①β-AP可能是AD和VD发病的危险因素。②引起AD和VD神经元毒性作用进而导致痴呆,这可能与TGF-α和IGF-Ⅱ增多有关。③β-AP与TGF-α、IGF-Ⅱ密切相关,在老年斑形成过程中可能起重要作用。     

阿尔茨海默病与脑血管病痴呆患者的脑电图比较研究

目的：观察阿尔茨海默病(AD)与脑血管病痴呆的(VD)脑电图(EEC)特点。方法：AD20例，VD18例作脑电图检查，并进行简易智力状态检查(MMSE)评分比较。结果：AD组、VD组EEG示0波增多，6波出现，其中AD组异常率为45％、VD组为72％。结论：VD组较AD组EEG改变更严重。     

Quantitative EEG in early and differential diagnosis of mild dementia of different genesis

Quantitative EEG was used to reveal the specific features of its amplitude-frequency parameters and topography in patients with mild dementia of different genesis versus healthy elderly individuals. All four study groups of patients differ in EEC relative spectral density, they also differ from the healthy persons while alpharhythm was suppressed in Alzheimer's disease (AD) and vascular dementia (VD) and there was slower alpha-rhythm and higher theta-activity in senile AD (SAD). Patients with VD were characterized by desynchronized EEG. Factorial and stepwise discriminant analyses of EEG parameters showed that the control group greatly differed from patients with mild dementias. Patient groups mainly with atrophic atrophic AD and SAD or vascular (VD and mixed) dementia were also different whereas the mixed vascular-atrophic group is intermediate in EEC parameters between the VD group and the partially overlapped AD and SDA patient groups. Quantitative EEC data may be thus used for differential diagnosis to optimize therapy and prognosis even in mild dementia.     

阿尔采木病和血管性痴呆的临床比较

目的　探讨 AD、VD病人的认知障碍及精神病性症状出现率、特点以及 AD组 VD组的不同点。方法　 80例 AD病人、65例 VD病人 ,作 MMSE、HDS、HIS、ALD量表及 WAIS、WMS量表对精神病性症状进行分析。结果　 AD组的WAIS、MMSE、HDS量表分比 VD组低 ,有显著性差异。精神病性症状出现率 AD组 77.5 % ,VD组 84.61 %。两组无显著性差异。但情感脆弱出现率 VD组比 AD组高 ,两组有显著性差异。结论　认知损害是 AD病人的基本症状 ,较 VD病人严重 ,AD、VD的精神病性症状较为常见 ,情感脆弱多见于 VD病人     

Alzheimer病与脑血管性痴呆的P300比较研究

目的:探讨P_(300)对Alzheimer病(AD)和脑血管性痴呆(VD)的诊断和辅助鉴别价值。方法:应用美国Nicolet Spirit脑电生理仪以及“听觉oddball'’为诱发模式,检测了25例AD患者、24例VD患者和22名正常老年人(NC)的P_(300)°结果与NC相比,AD组和VD组P_(300)均有多指标多区域变异,且为同一方向即潜伏期延迟和波幅下降,但变异程度AD组更趋明显。与VD组相比,AD组在Cz区域,靶P_2、N_2潜伏期上延迟,靶P_2波幅下降,AD组在P_Z和F_z区域有类似的表现。在靶潜伏期延迟上,AD组的P_3(在Pz区域)和VD组的N2(在Fz区域),均与其认知功能评定(MMSE评分)相关。结论P_(300)对临床诊断AD病和VD患者有一定价值。P300可以辅助评定痴呆认知功能损害程度。分析P_(300)的不同成分可能对鉴别AD和VD类型有意义。     

Tumor necrosis factor alpha polymorphism C-850T is not associated with Alzheimer's disease and vascular dementia in an Italian population

A pathogenic role of inflammatory factors has been proposed both in Alzheimer's disease (AD) and vascular dementia (VD). A previous report indicated the presence of polymorphism C-850T of tumor necrosis factor (TNF) alpha as a genetic risk factor for VD and, associated with apolipoprotein E epsilon 4, for AD. We have assessed the association between TNF-alpha polymorphism and dementias in Italian populations of AD, VD and elderly controls. The influence of TNF-alpha polymorphism on dementia has not been confirmed in this segment of the Italian population.     

ATP介导的嘌呤能信号在阿尔茨海默病相关结肠运动障碍中的作用

目的:探讨ATP介导的嘌呤能信号在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)相关结肠运动障碍中的作用及其相关的分子机制。方法:(1)临床试验:收集我院20例AD患者进行研究,放射免疫法测定血浆中胃动素(motilin,MTL)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平;高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测血浆三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平,同时对患者进行神经心理学检查并积分。(2)动物实验:利用AD小鼠进行Morris水迷宫实验,评估空间学习记忆功能;放射免疫法测定血浆中MTL、CCK、VIP和NO水平,HPLC法检测血浆ATP水平;免疫组织化学法检测乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、VIP、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)和ATP合酶的变化;Western blot和免疫组化法检测P2Y受体表达水平的变化。(3)离体实验:离体器官浴槽系统观察P2Y受体激动剂α,β-亚甲基ATP(α,β-methylene ATP,α,β-MeATP)对自发性及电刺激诱导的结肠平滑肌收缩的影响,细胞内微电极技术观察α,β-MeATP对结肠平滑肌细胞膜电位的影响。结果:与对照组比较,AD患者血浆的MTL和CCK水平明显降低(P0.01),NO和ATP水平显著升高(P0.05或P0.01),VIP无明显变化。患者简明精神状态检查积分(MMSE)降低(P0.05),AD评定量表-认知分量表(ADAS-Cog)积分、神经精神问卷(NPI)积分和AD协作研究日常能力量表(ADCS-ADL)积分均明显高于对照组(P0.01)。AD小鼠4~6 d逃逸潜伏期明显延长(P0.05),空间探索能力明显降低(P0.05),AD小鼠血浆中MTL和CCK水平明显降低(P0.01),NO和ATP水平显著升高(P0.05或P0.01),VIP无明显变化,AD小鼠结肠表达ATP合酶的水平明显上调(P0.05),但ChAT、VIP和NOS无明显改变,同时P2Y受体表达水平升高(P0.01)。体外实验表明,α,β-MeATP呈浓度依赖性抑制对照组和AD组小鼠结肠平滑肌自发性收缩(P0.05或P0.01),且这种抑制作用可被Na+通道阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)逆转(P0.05或P0.01),α,β-MeATP在100μmol/L时对AD小鼠自发性收缩的抑制作用更明显(P0.05),AD小鼠与正常小鼠比较,TTX对100μmol/L的α,β-MeATP的拮抗作用差异也有统计学显著性(P0.05)。在10 Hz电刺激诱导的结肠平滑肌收缩中,α,β-MeATP抑制正常小鼠和AD组小鼠的收缩(P0.05或P0.01),且40μmol/L和100μmol/L时对AD小鼠的抑制作用比正常小鼠明显(P0.05或P0.01)。平滑肌细胞膜电位实验显示,α,β-MeATP不影响结肠平滑肌膜电位(P0.05)。结论:AD患者和AD小鼠血浆中促进胃肠运动的激素MTL和CCK水平降低,抑制胃肠运动的激素NO水平升高,胃肠总体运动功能被抑制;AD小鼠血浆ATP水平升高,同时ATP嘌呤能神经元增加,P2Y受体表达上调;在AD发病中,ATP介导的嘌呤能信号可能通过抑制结肠平滑肌收缩,从而导致结肠运动功能障碍。     

阿尔茨海默病、阿尔茨海默病混合型及血管性痴呆患者心理及行为症状的比较

目的 比较阿尔茨海默病(Alzheimer Disease，AD)、AD混合型痴呆(Mixed dementia，MD)、血管性痴呆(Vascular dementia，VD)心理和行为症状(Psychological and behavioral symptoms of dementia，PBSD)的特征。方法 AD、MD及VD患者各30名参加本研究。采用Alzheimer病行为症状评定量表(The Begavioral Pathlolgy in Alzheiner Disease Rating Scale，BEHAVE—AD)、Cohen—Masfield激惹性问卷(The Cohen Mansfield Agitation Inventory，CMAI)评定痴呆患者BPSD。结果 AD患者激惹、焦虑与恐惧发生率较高，VD患者无目的游荡发生率、严重程度较低，MD患者BPSD症状无特异性。结论 AD、VD患者BPSD症状有特异性，MD患者BPSD表现无特异性。     

糖基化终产物对培养的人脐静脉内皮细胞巨噬细胞炎性蛋白-1α表达的影响

目的: 探讨糖基化终产物(AGEs)对人脐静脉内皮细胞巨噬细胞炎性蛋白-1α mRNA及蛋白表达的影响。方法: 将培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)用不同浓度(100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L)的AGEs孵育24 h及同一浓度(400 mg/L)AGEs孵育0 h、12 h、 24 h及36 h。采用原位杂交方法及Western blot检测巨噬细胞炎性蛋白-1α mRNA及蛋白的表达水平。结果: BSA组内皮细胞内巨噬细胞炎性蛋白-1α呈弱表达;100 mg/L、200 mg/L及400 mg/L AGEs孵育24 h后,各组内皮细胞内巨噬细胞炎性蛋白-1α mRNA 表达的平均积分吸光度值分别为18.76±3.17、26.58±1.61及34.23±2.25(BSA组为13.83±1.24,P<0.05);400 mg/L AGEs孵育12 h、24 h 及36 h后,各组内皮细胞内巨噬细胞炎性蛋白-1α mRNA表达的平均积分吸光度值分别为22.67±1.46、34.23±2.25及42.28±3.14(0 h组为12.56±1.24,P<0.05)。100 mg/L、200 mg/L及400 mg/L AGEs孵育24 h后,各组内皮细胞内巨噬细胞炎性蛋白-1α蛋白的表达量分别为BSA组的1.34倍、1.87倍及2.46倍(P<0.05);400 mg/L AGEs孵育12 h、24 h 及36 h后,各组内皮细胞内巨噬细胞炎性蛋白-1α蛋白的表达量分别为0 h组的1.82倍、2.71倍及3.34倍(P<0.05)。结论: 糖基化终产物以时间及剂量依赖的方式促进内皮细胞巨噬细胞炎性蛋-1α mRNA及蛋白的表达。     

Buccal micronucleus cytome biomarkers may be associated with Alzheimer's disease

Alzheimer's disease (AD) is a progressive degenerative disorder of the brain and is the commonest form of dementia. A buccal cytome assay was used to measure ratios of buccal cell populations and micronuclei in clinically diagnosed Alzheimer's patients compared to age and gender-matched controls. Frequencies of basal cells (P < 0.0001), condensed chromatin cells (P < 0.0001) and karyorrhectic cells (P < 0.0001) were found to be significantly lower in Alzheimer's patients. These changes may reflect alterations in the cellular kinetics or structural profile of the buccal mucosa, and may be useful as potential biomarkers in identifying individuals with a high risk of developing AD. The odds ratio of being diagnosed with AD for those individuals with a basal cell plus karyorrhectic cell frequency <41 per 1000 cells is 140, with a specificity of 97% and sensitivity of 82%. These promising results need to be replicated in larger studies and in cohorts of other neurodegenerative disorders to determine specificity of changes to Alzheimer's patients.