单核细胞源性巨噬细胞MAC387对肝泡型包虫病患者肝脏炎症与纤维化的作用

目的 通过检测肝泡型包虫病（AE）患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法 收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织（CLT组）与远端对照肝组织（DLT组）。通过HE染色和天狼星红染色分别评估患者肝组织病理学炎症改变及胶原沉积,并对CLT组进行炎症分级评分和纤维化分期评分;用免疫组织化学实验分别检测CLT组和DLT组MAC387的阳性表达,并将AE患者分为MAC387高水平组和MAC387低水平组,分析临床主要肝功能生化指标的相关性及手术前后各指标的变化;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测两组肝组织MAC387mRNA的表达。结果 与DLT组相比,CLT组肝脏中MAC387显著增加（P <0.001）。此外,与炎症分级评分和纤维化分期评分较低的患者相比,炎症分级评分和纤维化分期评分较高的患者肝脏中MAC387浸润更多（P<0.001）,且MAC387高水平组与ALT、AST呈正相关（ALT:r=0.523,P=0.013;AST:r=0.503,P=0.017...     

泡状棘球蚴病宿主淋巴细胞的变化及意义

目的　为探讨泡状棘球蚴病宿主体内淋巴细胞在免疫调节和发病中的作用。方法　对泡球蚴感染BALB/c小鼠观察至 2 5周 ,在不同时间取脾制备细胞悬液 ,检测CD+ 4 ,CD+ 8细胞数量。对 2 5例泡球蚴病患者和 18例健康人群 ,用FCM分析了CD+ 3 ,CD+ 4 ,CD+ 8,CD+ 19,CD+ 3 8,CD+ 56和HLA -DR+ 细胞的变化。结果　泡球蚴感染BALB/c小鼠后 ,1～ 8周以CD+ 4 细胞为主 ,随后CD+ 4 细胞减少 ,CD+ 8细胞增加 ,2 0周后改变显著 (P <0 0 5 ) ,CD+ 4 /CD+ 8比值迅速倒置。泡状棘球蚴病患者CD+ 3细胞未发生改变 ,CD+ 4 细胞较正常对照组下降 (P <0 0 5 ) ,CD+ 8细胞上升 (P <0 0 5 ) ,使CD+ 4 /CD+ 8比值降低 (P <0 0 5 )。CD+ 56细胞较正常对照组显著性降低 (P <0 0 1) ,CD+ 19,CD+ 3 8和HLA -DR+ 细胞未发生改变 (P >0 0 5 )。结论　泡球蚴感染小鼠前 8周 ,以CD+ 4 细胞反应为主 ,具有保护性免疫。感染后期逐渐以CD+ 8细胞为主 ,使机体呈免疫抑制状态 ,有利于泡球蚴生存。泡状棘球蚴病患者机体呈免疫抑制状态 ,有利于泡状棘球蚴在体内的生长     

TIGIT、CD226、CD96和CD155在血小板糖蛋白自身抗体阳性的原发性免疫性血小板减少症的表达及临床意义

目的:探讨TIGIT、CD226、CD96和CD155在血小板糖蛋白自身抗体(platelet glycoprotein autoantibody, GPs)阳性的原发性免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患者外周血CD8⁺T细胞和树突状细胞(dendritic cell, DC)膜表面的表达,并分析其临床意义。方法:选取41例GPs阳性的ITP患者和20例健康对照者,采用流式细胞术检测CD8⁺T细胞表面TIGIT、CD226和CD96表达比例,并检测ITP患者外周血DC细胞的亚群变化及浆细胞样DC(plasma DC,pDC)上CD155的表达比例。结果:GPs阳性ITP组患者的pDC和CD155⁺pDC比例均明显高于对照组,且GPⅠb/Ⅸ⁺/Ⅱb/Ⅲa^+/-组均明显高于GPⅠb/Ⅸ^-/Ⅱb/Ⅲa⁺组(P<0.05,F=40.83;P<0.01,F=59.50)。GPs阳性ITP...     

泡球蚴感染C57BL/6小鼠肝脏CD34表达的动态变化

目的 观察泡球蚴(Em)感染C57BL/6小鼠肝脏CD34微血管密度(MVD)的动态变化。方法 将40只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,实验组通过肉眼肝叶穿刺感染泡球蚴(Em),对照组通过注射等量PBS。分别于感染后30 d、60 d、90 d及120 d后取小鼠肝脏组织,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏的病理组织学改变,免疫组织化学染色观察泡球蚴感染后CD34-MVD的动态改变。结果 实验组泡球蚴组织各时间点中CD34-MVD分别为(39.10±11.84)/HP、(66.80±11.08)/HP、(111.20±8.00)/HP和(56.14±7.12)/HP,实验组泡球蚴周围肝组织分别为 (1.14±0.82)/HP、(1.56±0.92)/HP、(2.32±1.43)/HP和(1.38±0.82)/HP ;对照组分别为(1.00±0.94)/HP、(1.30±1.06)/HP、(2.00±1.15)/HP和(1.10±0.87)/HP。实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);实验组泡球蚴组织内比较,差异有统计学意义(F=94.63,P<0.001);实验组泡球蚴周围肝组织内比较,差异无统计学意义(F=3.24,P>0.05);对照组内比较,差异无统计学意义(F=1.98,P>0.05)。结论 泡球蚴浸润性生长过程中可能伴随着血管新生,血管新生可能为其生长重要的机制之一。     

泡型包虫病免疫发病机制研究进展

泡型包虫病(Alveolar Echinococcosis, AE)是由多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis, Em)幼虫主要寄生在人体肝脏引起的一种严重危害人体健康的人畜共患寄生虫病.泡球蚴多以外生性出芽生殖,如恶性肿瘤生长,泡球蚴还可通过血循环、淋巴等途径转移至肺脑等器官,危害极大,被视为最致命的蠕虫感染之一.泡球蚴对人体来说是感染性外源性物质,具有抗原性,可诱发宿主的体液免疫和细胞免疫[1],人们发现宿主腹腔巨噬细胞和肝枯否细胞均可杀伤Em原头节,Playford等发现缺乏功能性T、B细胞的重症联合免疫鼠(SCID)非常容易感染Em原头节,当用正常鼠淋巴细胞重建其免疫功能则抑制泡球蚴生长[2],表明宿主在防御泡球蚴感染过程中不仅有非特异性免疫反应参与,而且有特异性免疫反应参与.另外泡球蚴通过免疫逃避而在体内发育、繁殖、生存.本文就近年来国内外对泡球蚴病免疫发病机制的研究现状综述如下.     

肺结核患者外周血免疫细胞水平与临床意义分析

目的 探讨肺结核患者外周血免疫细胞的表达水平及其临床意义。方法 回顾性分析2016年1月至2017年5月徐州市传染病医院收治的676例肺结核患者和体检中心的40例健康对照者。采用贝克曼库尔特公司FC500型流式细胞仪,以荧光微球为参照,分别检测外周血CD4⁺、CD8⁺、B和NK细胞的绝对数。结果 肺结核患者免疫细胞CD4⁺、CD8⁺、B和NK细胞数量低于健康对照者(t=6.25,5.12,5.05,4.37;P值均为0.00);痰菌阳性的肺结核患者免疫细胞CD4⁺、CD8⁺、B、NK细胞数量低于痰菌阴性的肺结核患者(t=4.07,3.70,2.75,2.71;P=0.00,0.00,0.01,0.01);老年肺结核患者免疫细胞CD4⁺、CD8⁺、B细胞数量低于年轻患者(t=4.04,2.60,5.25;P=0.00,0.01,0.00),554例初治肺结核患者经过2个月化疗后,其中510例单纯采用标准化抗结核治疗方案的患者CD4⁺、CD8⁺、B和NK细胞数量增加无统计学意义(t=1.19,1.04,0.39,1.82;P=0.23,0.30,0.70,0.07),44例合并免疫治疗的肺结核患者除NK细胞数量增加无统计学意义(t=0.80;P=0.42),CD4⁺、CD8⁺、B数量增加(t=2.15,2.17,3.12;P=0.03,0.03,0.00)。结论 肺结核患者免疫细胞的表达水平降低,痰菌阳性以及老年肺结核患者降低尤为明显,对于免疫细胞表达水平降低的肺结核患者,在化疗的基础上配合免疫治疗更有利于患者的康复。     

滤泡辅助性T细胞在肝棘球蚴病患者外周血中的表达

目的检测肝棘球蚴病患者和健康对照者外周血中滤泡辅助性T细胞(Tfh)和白细胞介素-21(IL-21)表达水平,探讨它们与肝棘球蚴病进展的关系。方法收集青海省人民医院肝棘球蚴病患者和健康体检者各50例,采用流式细胞术检测和比较肝棘球蚴病患者和健康对照者外周血中Tfh细胞表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测和比较肝棘球蚴病患者和健康对照者血清中IL-21水平,分析肝棘球蚴病患者外周血Tfh细胞表达水平和血清IL-21含量之间的相关性。结果肝棘球蚴病患者外周血中CD4+CXCR5+T细胞(18.49%±5.67%vs. 16.18%±4.04%,P0.05)、CD4+CXCR5+PD-1+T细胞(4.94%±1.91%vs. 2.29%±0.79%,P0.05)和CD4+CRCR5+ICOS+PD-1+T细胞比例(30.93%±24.10%vs.21.07%±14.25%,P0.05)均显著高于健康对照者,但肝棘球蚴病患者和健康对照者外周血CD4+CRCR5+ICOS+T细胞比例差异无统计学意义(0.29%±0.32%vs. 0.25%±0.31%,P 0.05)。肝棘球蚴病患者血清IL-21含量显著高于健康对照者([293.35±2 03.65)pg/mL vs.(192.72±70.09)pg/mL,P0.05],但肝棘球蚴病患者外周血Tfh细胞表达水平和血清IL-21含量无相关性(P 0.05)。结论肝棘球蚴病患者外周血Tfh细胞及血清IL-21表达水平升高,Tfh细胞和IL-21可能参与了肝棘球蚴病进展。     

肝泡状棘球蚴组织中HIF-1α、VEGFA的表达及对血管生成的作用

目的 探讨HIF-1α、VEGFA在沙鼠肝泡状棘球蚴组织的表达及血管生成过程中的作用。方法 126只沙鼠随机分成空白组(6只)、假手术组(60只)、模型组(60只),采用开腹直视肝脏穿刺法建立泡状棘球蚴动物模型,假手术组接种同体积的PBS,术后第3 d、7 d、14 d、28 d、42 d、56 d、70 d、84 d、98 d、112 d随机取6只沙鼠,取临近病变的边缘区组织及正常肝组织。采用HE观察病理改变;qRT-PCR、原位杂交、免疫组化检测HIF-1α、VEGFA表达,CD34标记微血管进行MVD计数。结果 HE染色根据病理特点将病程分为早期(14 d内)、中期(14 d~56 d)、晚期(56 d后)。模型组泡状棘球蚴组织随感染时间不同,其HIF-1αmRNA随感染时间呈动态改变,术后第14 d其表达量高于空白组、低于假手术组(F=82.732,P< 0.001);术后第42 d、112 d其相对表达量均高于空白组与假手术组(χ²=11.536,χ²=15.189,P< 0.01);模型组术后第14 d VEGFA mRNA相对表达量低于空白组及假手术组(χ²=15.174,P< 0.01);术后第42 d、112 d,VEGFA mRNA表达量均高于空白组与假手术组(χ²=15.158,χ²=15.158,P< 0.01)。模型组术后第14 d、42 d、112 d HIF-1α表达均高于空白组、假手术组(χ²=8.627,χ²=9.000,F=15.690,P< 0.01);模型组术后第14 d、42 d VEGFA表达高于空白组、假手术组(F=11.250, F=70.059,P< 0.001);模型组术后第14 d、42 d、112 d,其MVD-CD34均高于空白组、假手术组(χ²=12.517,P< 0.01,χ²=13.157,P< 0.01;χ²=13.220,P< 0.01)。结论 沙鼠感染肝泡状棘球蚴中期,病变边缘区HIF-1α、VEGFA表达均升高,同时伴有大量微血管生成,可能存在HIF-1α转录因子激活并上调VEGFA的表达,促进肝泡状棘球蚴组织边缘区的血管新生。;     

骨桥蛋白与肝泡型棘球蚴转移的相关性研究

目的研究骨桥蛋白(OPN)在肝泡型棘球蚴组织中的分布和表达,探讨骨桥蛋白在肝泡型棘球蚴转移中的作用。方法采用开腹直视下肝脏穿刺注射的方法,用20%泡型棘球蚴组织混悬液感染长爪沙鼠40只,每只0.1ml,建立肝泡型棘球蚴长爪沙鼠模型。感染100 d后剖杀所有长爪沙鼠,观察泡型棘球蚴生长和转移等情况,取长爪沙鼠肝脏、肝泡型棘球蚴组织和转移灶标本。采用苏木素-伊红(HE)染色法和免疫组织化学SP法观察沙鼠肝泡型棘球蚴组织和转移灶中骨桥蛋白的表达情况。结果感染泡型棘球蚴的长爪沙鼠的肝脏和腹腔中见大小不等的团块状囊泡。免疫组织化学染色显示,肝泡型棘球蚴长爪沙鼠模型中肝泡型棘球蚴组织中可见骨桥蛋白不同程度的表达,其阳性细胞检出率为70%(28/40),骨桥蛋白主要分布在肝泡型棘球蚴纤维囊壁、炎症细胞和部分肝细胞中。60%(24/40)的长爪沙鼠模型经病理证实发生胸廓内淋巴结转移,伴有胸廓淋巴结棘球蚴转移的肝脏泡型棘球蚴组织的OPN阳性细胞检出率(83%,20/24)高于未发生胸廓淋巴结转移的肝脏泡型棘球蚴组织(50%,8/16)(P<0.05)。淋巴转移灶中骨桥蛋白阳性细胞检出率(92%,22/24)明显高于泡球蚴组织(...     

非酒精性脂肪性肝病患者外周血恒定自然杀伤T细胞和CD4+/CD8+T细胞活化差异研究*

目的 分析不同非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血恒定自然杀伤T细胞(iNKT)、CD4⁺和CD8⁺ T细胞活化标记物(CD69、CD25、HLA-DR和NKG2D)的表达差异。方法 2020年1月～2022年7月我院诊治的NAFLD患者64例和同期健康体检者50例,对NAFLD患者行肝穿刺活检,使用流式细胞仪检测外周血iNKT、CD4⁺和CD8⁺T细胞CD69、CD25、HLA-DR和NKG2D表达。结果 在64例NAFLD患者中,经组织病理学检查,诊断NAFL 37例和NASH 27例;健康对照者、NAFL和NASH患者健康对照者、NAFL和NASH患者外周血CD69⁺iNKT细胞百分比分别为(10.1±1.7)%、(6.1±1.3)%和(26.7±3.6)%(P<0.05),CD25⁺iNKT细胞百分比分别为(83.0±5.9)%、(94.1±8.0)%和(90.8±7.5)%(P<0.05),HLA-DR⁺iNKT细胞百分比分别为(15.3±1.7)%、(15.8±2.0)%和(22.3±2.0)%(P>0.05),NKG2D⁺iNKT细胞百分比分别为(44.5±3.5)%、(59.7±4.0)%和(71.3±6.0)%(P<0.05);外周血CD69⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(0.7±0.2)%、(0.4±0.1)%和(0.5±0.1)%(P>0.05),CD25⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(1.4±0.6)%、(3.0±1.3)%和(1.5±0.7)%(P>0.05),HLA-DR⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(2.7±0.7)%、(4.1±1.0)%和(3.9±1.0)%(P<0.05),NKG2D⁺CD4⁺ T细胞百分比分别为(1.6±0.5)%、(0.6±0.2)%和(0.9±0.2)%(P<0.05);外周血CD69⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(2.0±0.4)%、(1.6±0.3)%和(2.1±0.6)%(P>0.05),CD25⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(1.3±0.3)%、(1.1±0.2)%和(1.0±0.2)%(P>0.05),HLA-DR⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(5.0±0.7)%、(6.5±1.0)%和(9.6±1.4)%(P<0.05),NKG2D⁺CD8⁺ T细胞百分比分别为(0.6±0.1)%、(0.5±0.1)%和(0.9±0.2)%(P<0.05)。结论 本研究发现NAFL与NASH患者可能存在外周血iNKT细胞、CD4⁺和CD8⁺ T细胞活化的免疫表型差异,显示NASH患者CD69⁺iNK T细胞百分比增高,可能对诊断有帮助,值得进一步研究。     

HIFU消融联合化疗治疗中晚期肝母细胞瘤小儿5年随访研究

目的 观察采用高强度聚焦超声(HIFU)消融联合化疗治疗中晚期肝母细胞瘤(HB)患儿的5年随访疗效。方法 2013年8月～2017年2月我院诊治的41例中晚期HB患儿,其中18例对照组患儿接受CAO化疗方案治疗,另23例在化疗治疗结束后,行HIFU消融治疗。随访5年。使用流式细胞仪检测外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺细胞百分比。结果 观察组有效率和疾病控制率分别为65.2%和87.0%,显著高于对照组的33.3%和55.6%(P<0.05);治疗后,观察组外周血CD4⁺细胞百分比和CD4⁺/CD8⁺细胞比值分别为(42.5±3.9)%和(1.6±0.4),均显著高于对照组【分别为(39.4±3.5)%和(1.3±0.3),P<0.05】,而CD3⁺和CD8⁺细胞百分比分别为(55.4±5.2)%和(26.1±2.4)%,均显著低于对照组【分别为(60.1±5.9)%和(30.0±2.8)%,P<...     

复方甘草酸苷对小儿哮喘T淋巴细胞及NK细胞的影响

目的分析复方甘草酸苷对小儿哮喘T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞的影响。 方法选取2020年2月至2021年4月我院收治的81例小儿哮喘患儿为对象,随机分为观察组42例与对照组39例。对照组患儿行抗感染、抗炎、抗喘、止咳、化痰、吸氧等常规治疗,并静脉滴注氢化可的松注射液,观察组患儿在对照组基础上加用复方甘草酸苷。比较两组患儿的治疗效果及治疗期间的不良反应发生率,比较两组患儿治疗前后第1 s末用力呼气量(FEV₁)、用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值(PEF)、T淋巴细胞(CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)及NK细胞水平的差异。 结果观察组总有效率92.86%显著高于对照组76.92%(P<0.05);两组治疗后,观察组FEV₁、FVC、PEF显著高于对照组(P<0.05);两组治疗后CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、NK细胞水平显著高于治疗前,CD8⁺水平显著低于治疗前(P<0.05),观察组治疗后CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、NK细胞水平显著高于对照组,CD8⁺水平显著低于对照组(P<0.05);两组治疗期间不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论复方甘草酸苷用于小儿哮喘的治疗能调节患儿T淋巴细胞和NK细胞水平,使CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺、NK细胞水平上升,CD8⁺水平下降。     

鼠多房棘球绦虫原头蚴和微囊泡抗原性的比较

泡球蚴病(AE)是死亡率很高的人兽共患寄生虫病之一,因此,对该病的早期诊断极为必要。本文作者曾报道Em18-免疫印迹法和Em2~(plus)-酶联免疫吸附法在诊断AE中均具有很高的可信度,前者的特异性似乎更强。然而,有学者对Em18的特异性得出了相反     

CD27+ γδT淋巴细胞与远端胃癌根治术后患者临床病理特征及预后的关系

目的 探究CD27⁺γδT淋巴细胞与远端胃癌根治术后患者的临床病理特征及预后的关系。方法 选择2019年3月至2020年3月在十堰市国药东风总医院接受根治性手术的102例远端胃癌患者,收集术后胃癌组织和癌旁组织标本,制备单细胞悬液。记录患者的临床病理资料,采用流式细胞术检测CD27⁺γδT细胞表达。术后对所有患者进行为期2年的随访,记录总生存期(OS)。分析胃癌组织中CD27⁺γδT淋巴细胞表达与患者临床病理特征的相关性。采用Kaplan-Meier法分析胃癌组织中CD27⁺γδT淋巴细胞表达与患者预后的关系。采用ROC曲线分析CD27⁺γδT淋巴细胞表达判断患者预后的效能。结果 远端胃癌根治术后患者的胃癌组织中CD27⁺γδT淋巴细胞的占比显著高于癌旁组织(P<0.05)。Ⅲ～Ⅳ期、高分化、有淋巴结转移患者的胃癌组织中CD27⁺γδT淋巴细胞占比分别高于Ⅰ～Ⅱ期、未分化及低/中分化、无淋巴结转移患者,组间差异均有统计学意义(P...     

阿苯达唑治疗前后泡状棘球蚴病患者淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的　探讨泡球蚴病患者经阿苯达唑治疗后 ,机体免疫应答的状态和对病程转归的影响。　方法　 7例未治疗泡球蚴病患者 ,6例经阿苯达唑治疗 12个月泡球蚴病患者 ,6例经阿苯达唑治疗 2 4个月泡球蚴病患者和 18例非流行区健康人群 ,用 FCM分析了 CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD1 9+ 、CD38+ 、CD1 6 + 56 + 和 HL A- DR+ 细胞的数量。　结果　治疗 12个月后 ,患者 CD8+细胞数继续上升 (P<0 .0 1) ,CD4 + / CD8+比值进一步倒置 ;治疗 2 4个月后 ,CD4 +细胞数开始升高 (P<0 .0 5 ) ,CD8+ 细胞数下降 ,CD4 + / CD8+ 比值升高 (P<0 .0 5 ) ;CD1 9+ 细胞在治疗 2 4个月后显著性升高 (P<0 .0 5 ) ;CD38+ 和 HL A-DR+ 细胞在治疗 2 4个月后呈显著性下降 (P<0 .0 1)。　结论　泡球蚴病患者治疗后 ,CD8+ 细胞引起的免疫抑制状态有所减轻 ,机体的保护性免疫应答有所恢复。     

肺结核患者临床特征与外周血流式细胞亚群的相关性分析

目的 了解肺结核患者临床特征与外周血流式细胞亚群[T淋巴细胞亚群及自然杀伤 (NK)细胞]的相关性。方法 连续性收集2019年1月1日至5月25日期间同济大学附属上海市肺科医院肺结核住院患者1000例的临床资料进行回顾性分析。将患者各临床特征数据与外周血流式细胞亚群的检测值采用Eviews 8.0软件分别建立多元线性逐步回归模型,以明确各临床特征与外周血流式细胞亚群的检测值之间的相关性。结果 (1)肺结核患者的肺部病灶范围及呼吸道标本抗酸染色涂片结果与CD3⁺T细胞表达有关:肺部病灶范围越大、呼吸道标本抗酸染色涂片阳性程度越高,CD3⁺ T细胞数量越低(回归系数分别为-0.255、-0.499, P值分别为0.021、0.027)。(2)患者的年龄、性别、结核分子生物学检测结果与CD4⁺ T细胞表达有关: 0~<20岁年龄段患者CD4⁺ T细胞数量低于其他年龄段患者(回归系数-4.710,P=0.031);男性CD4⁺ T细胞数量低于女性患者(回归系数-2.150, P=0.001);分子生物学检测阳性的患者CD4⁺ T细胞数量高于检测阴性的患者(回归系数1.433, P=0.030)。(3)初治患者CD8⁺ T细胞数量高于复治患者(回归系数1.247, P=0.029);呼吸道标本抗酸染色涂片阳性程度越高CD8⁺ T细胞数量越高(回归系数0.442, P=0.033)。(4)并发肺外结核者的NK细胞低于未并发肺外结核者(回归系数0.375, P=0.030)。结论 肺结核患者的肺部病灶累及范围、呼吸道标本抗酸染色阳性与外周血流式细胞亚群CD3⁺ T细胞具有相关性;年龄、性别、结核分子生物学检测结果与CD4⁺ T细胞具有相关性;是否初治、呼吸道标本抗酸染色阳性与CD8⁺ T细胞具有相关性;是否并发肺外结核与NK细胞表达水平具有相关性。     

泡球蚴蛋白通过Wnt/β-Catenin信号通路调控小鼠肝星状细胞二肽基肽酶-4的表达研究

目的 探讨泡球蚴蛋白对肝星状细胞中纤维化关键基因二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4,DPP4)表达的调控机制。方法 免疫组织化学法检测二肽基肽酶-4在泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端与远端的表达情况。体外培养小鼠肝星状细胞系JS1,以60μg/mL浓度的泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis Protein, EmP)刺激JS1细胞,检测细胞活化及Wnt通路的激活情况,Wnt通路抑制剂(IWP-2)和激动剂(LY2090314)靶向干预检测肝星状细胞活化标志物COL1A1、α-SMA与PPARγ,Wnt通路关键分子Wnt5a、β-catenin、GSK3β以及DPP4的表达水平。结果 免疫组化检测结果显示泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端DPP4的表达(5927±987.1)显著高于病灶远端(2478±696.9),差异有统计学意义(t=9.026,P<0.05);EmP可显著促进JS1细胞活化并促进DPP4的表达,差异有统计学意义(F_DPP4=10.65,P<0.05);与对照组相比,EmP刺激组Wnt通路...     

中晚期非小细胞肺癌患者化疗前后T淋巴细胞亚群表达差异分析及临床意义

目的回顾性分析中晚期非小细胞肺癌患者化疗前后淋巴细胞亚群表达差异,以及与化疗疗效的相关性。 方法选择2014年1月至2018年6月在我院进行化疗治疗的中晚期非小细胞肺癌患者122例作为病例组,同期在我院进行健康体检64例作为对照组,对比分析各组T淋巴细胞亚群CD3⁺(%)、CD8⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺细胞比值差异。 结果病例组化疗前及后的CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺细胞比值均显著低于对照组(P<0.05);化疗后CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺细胞比值均较化疗前有显著升高(P<0.05);化疗前后病例组患者CD8⁺(%)略高于对照组,但差异未发现统计学意义(P>0.05),且化疗前后CD8⁺(%)对比,差异未发现统计学意义(P>0.05)。化疗治疗后,将病例组分为疾病控制组共90例(73.77%),其中完全缓解(CR)0例,部分缓解(PR)25例(20.49%),疾病稳定(SD)65例(53.28%);疾病进展(PD)32例(26.23%)。疾病控制组的年龄、性别与疾病进展组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。疾病控制组治疗前CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD8⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺与疾病进展组对比,差异均无统计学差异(P>0.05),疾病控制组治疗后CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺显著高于疾病进展组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。DCR和PD两组治疗后CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺细胞比值均显著高于治疗前。两组治疗后CD8⁺(%)对比,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺水平在预测非小细胞肺癌患者化疗效果的AUC面积分别为：0.789、0.823、0.758。通过最大约登指数计算得出CD3⁺(%)、CD4⁺(%)、CD4⁺/CD8⁺指标的最大AUC面积相应参数截止值,其中CD3⁺(%)截止值为65.95(%)(敏感度＝83.30%,特异性＝78.60%,P＝0.021),CD4⁺(%)截止值为39.81(%)(敏感度＝87.30%,特异性＝85.20%,P＝0.034),CD4⁺/CD8⁺截止值为1.250(敏感度＝81.20%,特异性＝76.70%,P＝0.017)。 结论中晚期非小细胞肺癌患者的T淋巴细胞比例显著降低,细胞免疫功能呈现紊乱状态。化疗治疗的效果可能与机体外周血T淋巴细胞表达状态有关,提示肺癌患者的外周血T淋巴细胞亚群表达状态可能成为预测化疗临床效果的一种标记物。     

多房棘球蚴感染小鼠辅助Th17细胞,转录因子RORγτ及相关细胞因子的实验研究

目的探讨多房棘球蚴感染小鼠脾脏细胞中辅助性T细胞17比例,转录因子RORγτ和IL-17因子的表达及其意义。方法选用6~8周龄BALB/c小鼠共30只,随机分为多房棘球蚴感染组(Em)、多房棘球蚴感染阿苯达唑治疗组(Em+Albendazole,Em+ABZ)和健康对照组(healthy controls,HC),每组10只。通过腹腔注射法建立泡型包虫病小鼠模型。Em+ABZ治疗组给予灌胃阿苯达唑治疗(100μl/d,35d)通过流式细胞术检测小鼠脾脏细胞中辅助性T17细胞(CD4+IL-17+Th17细胞/CD4+T细胞)比例,采用实时荧光定量PCR检测脾脏细胞中维甲酸孤独受体(retinoid acid orphan receptor-γτ,RORγτ)mRNA的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-17水平。结果 CD4+IL-17+Th17细胞/CD4+T细胞比例,Em组为(2.10±1.00)%,与HC组(0.85±0.71)%比较,差异有统计学意义(F=3.07,t=2.66,P<0.01)。Em+ABZ组为(1.54±1.19)%,与HC组和Em组比较,差异无统计学意义(F=3.07,P>0.05);脾脏细胞RORγτmRNA在Em组中的表达(6.1×10-4±5.8×10-4)高于在Em+ABZ组(6.0×10-4±3.5×10-4)和HC组(3.4×10-4±2.4×10-4)中的表达,但差异无统计学意义(F=0.66,P>0.05)。Em+ABZ组与HC组比较,差异亦无统计学意义(F=0.66,P>0.05)。脾脏细胞培养上清液中IL-17A,Em组为(10.71±1.85)ng/ml,明显高于Em+ABZ组[(5.58±3.56)ng/ml]和HC组[(7.31±1.22)ng/ml],差异有统计学意义(F=9.82,t1=3.12,t2=5.57,P<0.01)。Em+ABZ组与HC组比较差异无统计学意义(F=9.82,t=0.84,P>0.05)。结论 Th17细胞参与BALB/c小鼠多房棘球蚴感染免疫和炎性应答过程,阿苯达唑治疗能够减轻免疫损伤和炎症反应。Th17细胞及IL-17A可能是潜在的多房棘球蚴病新的分子免疫干预靶点。     

PD-1溶瘤病毒对小鼠卵巢癌的抗肿瘤活性

目的 探讨程序性细胞死亡蛋白(PD)-1溶瘤病毒对卵巢癌的抗肿瘤活性。方法 向C57BL/6J小鼠右前腋下注射人卵巢癌腺癌细胞系SKOV3构建卵巢癌小鼠模型,分别以不同滴度的PD-1溶瘤病毒,测量小鼠肿瘤体积,筛选最佳滴度。将构建好的卵巢癌模型小鼠随机分为模型组、PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组、PD-1溶瘤病毒组,每组16只。同时设置对照组16只。测定小鼠肿瘤体积、肿瘤质量;流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺;酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-10、干扰素(IFN)-γ浓度;免疫组化法检测肿瘤组织中P53、Ki67阳性表达情况。结果 不同PD-1溶瘤病毒滴度的卵巢癌小鼠肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.01);随着PD-1溶瘤病毒滴度的升高肿瘤体积逐渐降低。当PD-1溶瘤病毒滴度达到5×10⁷时卵巢癌小鼠肿瘤体积不再明显降低,与1×10⁸时肿瘤体积之间比较差异无统计学意义(P>0.05),因...