单核细胞源性巨噬细胞MAC387对肝泡型包虫病患者肝脏炎症与纤维化的作用

目的 通过检测肝泡型包虫病（AE）患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法 收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织（CLT组）与远端对照肝组织（DLT组）。通过HE染色和天狼星红染色分别评估患者肝组织病理学炎症改变及胶原沉积,并对CLT组进行炎症分级评分和纤维化分期评分;用免疫组织化学实验分别检测CLT组和DLT组MAC387的阳性表达,并将AE患者分为MAC387高水平组和MAC387低水平组,分析临床主要肝功能生化指标的相关性及手术前后各指标的变化;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测两组肝组织MAC387mRNA的表达。结果 与DLT组相比,CLT组肝脏中MAC387显著增加（P <0.001）。此外,与炎症分级评分和纤维化分期评分较低的患者相比,炎症分级评分和纤维化分期评分较高的患者肝脏中MAC387浸润更多（P<0.001）,且MAC387高水平组与ALT、AST呈正相关（ALT:r=0.523,P=0.013;AST:r=0.503,P=0.017...     

GITR阳性的效应T淋巴细胞参与AAF/PH小鼠肝脏再生调控

目的 分析2-乙酰氨基芴联合部分肝切除(AAF/PH)小鼠肝脏再生模型肝组织中浸润的效应T淋巴细胞的变化情况。方法 C57BL/6J小鼠每天应用AAF连续灌胃5 d后切除1/3肝组织，术后继续每天应用AAF灌胃至术后7 d、14 d。利用免疫荧光染色、蛋白免疫印迹检测肝脏前体细胞活化情况；采用多色免疫荧光染色与流式细胞术检测肝组织中效应T淋巴细胞及其活化标志物GITR阳性细胞比例。结果 AAF/PH组小鼠术后7 d肝组织重量即可恢复至对照小鼠水平。肝组织中炎症细胞浸润和纤维化不明显，但术后14 d时，肝脏汇管区中出现明显的炎症细胞浸润与细胞外基质沉积。随着术后时间延长，肝组织中Sox9+肝脏前体细胞数量逐渐增多，肝组织Sox9蛋白表达水平亦显著增加。流式细胞分析结果显示，随着术后时间延长肝组织中浸润的CD8⁺ T淋巴细胞的比例显著增加，术后14 d为对照组的1.47倍(P=0.0289),而糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)阳性的CD8⁺ T淋巴细胞比例呈先升高再降低的变化趋势，术后7 d、14 d分别为对照组的1.5倍(P=0.0...     

非诺贝特对酒精性肝病患者肝脏巨噬细胞极化及肝纤维化指标的影响

目的 探究非诺贝特对酒精性肝病患者肝脏巨噬细胞极化及肝纤维化指标的影响。方方法选择2018年1月至2022年9月丽水市第二人民医院住院治疗的100例酒精性肝病患者作为研究对象,采用奇偶数字法将患者随机分为研究组和对照组,每组各50例。对照组入组后进行常规干预治疗,研究组在对照组的基础上口服非诺贝特片,连续治疗2个月。采用流式细胞术检测肝脏巨噬细胞的表型。采用蛋白质印迹法测定肝组织中M1型和M2型巨噬细胞标志物水平。比较2组的临床疗效,以及肝功能、肝纤维化和血脂指标的水平。结果 研究组治疗后的总有效率为88.00%,显著高于对照组(72.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。经治疗后,研究组肝脏巨噬细胞中M1促炎型巨噬细胞(CD45⁺F4/80⁺CD11B﹣CD86⁺)的占比显著低于对照组,M2抑炎型巨噬细胞(CD45⁺F4/80⁺CD11B﹣CD206⁺)的占比显著高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,研究组肝组织中诱...     

制何首乌对CTLA-4抗体诱导的PD-1-/-小鼠肝损伤模型的改善作用

目的探讨制何首乌对CTLA-4抗体诱导PD-1^-/-小鼠肝损伤的作用特点及其免疫学机制。方法10只SPF级C57BL/6品系的PD-1^-/-小鼠随机分为对照组(n=4)和制何首乌组(n=6)。两组小鼠均于实验前3 d、前1 d及实验开始后每周腹腔注射CTLA-4抗体,同时分别给予0.9%NaCI溶液和何首乌连续灌胃42 d,第43天处死后留血和肝组织,进行生化、病理、免疫组织化学染色及肝组织流式细胞检测。结果制何首乌组小鼠ALT、AST水平较对照组有降低趋势为(43.2±15.5)U/L比(32.8±6.7)U/L和(32.3±7.5)U/L比(23.8±14.1)U/L但差异均无统计学意义(均P>0.05)。对照组小鼠肝脏病理表现为多个大小不等的炎症坏死灶,主要以巨噬细胞和CD4⁺T细胞浸润为主;而制何首乌组的炎症坏死灶数量显著减少,为121.5(104.0,147.3)比24(17.5,61.5),(P=0.014),肝组织浸润的巨噬细胞、CD4⁺T细胞数量亦明显减少。流式细胞检测显示,与对照组相比,制何首乌组肝脏内巨噬细胞比例显著降低(2.39±0.77)%比(1.37±0.28)%,(P=0.028),中性粒细胞比例显著降低(0.58±0.11)%比(0.34±0.14)%,(P=0.025),且其分泌的TNF-α比例显著降低(30.15±10.69)%比(11.56±6.05)%,(P=0.012);CD4⁺T及CD8⁺T细胞比例虽没有显著变化,但CD4⁺T细胞活化比例显著降低(26.20±3.47)%比(16.74±6.95)%,(P=0.044),CD8⁺T细胞分泌颗粒酶B比例显著降低(77.05±4.23)%比(59.70±10.81)%,(P=0.020)。结论制何首乌通过抑制巨噬细胞募集、中性粒细胞和效应性T细胞活化,对CTLA-4抗体诱导PD-1^-/-小鼠肝损伤模型起到改善和保护作用。     

miR-106b-25基因簇在肝泡型包虫病肝组织中的表达及意义

目的 检测肝泡型包虫病肝组织中miR-106b-25基因簇(miR-106b、miR-93、miR-25)的表达水平,分析3者在肝纤维化进程中的作用及其相互关系。方法 将20例经手术治疗的肝泡型包虫病肝组织匹配后分为病灶旁肝组织和正常肝组织,RT-PCR技术检测miR-106b-25基因簇的表达水平。HE和Masson染色观察病理变化与纤维化程度。结果 病灶旁肝组织纤维化程度高于正常肝组织;miR-106b-25基因簇在病灶旁肝组织的表达量均高于正常肝组织;miR-106b-25基因簇表达量与肝纤维化程度呈正相关;随着纤维化程度加重,miR-106b-25基因簇各成员的表达量也增加;3种miRNA之间表达呈正相关。结论 泡型包虫病病灶旁肝组织比正常肝组织纤维化程度严重,miR-106b-25基因簇参与肝泡型包虫病致肝纤维化。     

骨髓来源单核巨噬细胞对高血压小鼠心脏损伤和重构的影响

目的观察高血压介导骨髓来源单核巨噬细胞在心脏浸润的情况,探讨其对高血压心脏损伤和重构的影响。方法 20只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和AngⅡ灌注组,每组10只,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和AngⅡ,采用鼠尾套法监测小鼠动脉血压。于灌注后7 d,采用免疫组织化学、Masson染色和流式细胞技术观察心脏纤维化和心脏中单核巨噬细胞的浸润;采用流式细胞技术和实时荧光定量PCR(rt-PCR)观察循环中单核细胞上CCR2受体表达和心脏中CCR2受体的配体MCP-1表达;16只雄性小鼠随机分为4组,每组4只,采用尾静脉注射脂质体包裹氯膦酸二钠方法清除小鼠体内巨噬细胞,以注射脂质体包裹生理盐水为对照组,分别灌注生理盐水和AngⅡ后观察心脏纤维化。结果与生理盐水灌注对照组相比,AngⅡ灌注后1 d收缩压开始升高,7 d血压显著升高[收缩压:(157.0±13.9)mm Hg比(93.0±11.1)mm Hg,P<0.01],心脏中胶原沉积增加(4.1%±0.7%比0.4%±0.1%,P<0.01),Ⅰ型胶原和肌成纤维细胞的标志物α-SMA的蛋白表达增加。流式检测示心脏中CD45+F4/80+细胞浸润增加;心肌组织半乳糖凝集素2(Mac-2,巨噬细胞标志)和CD68阳性巨噬细胞浸润增加;外周血CD45+CD11B+单核细胞表达CCR2,心脏中MCP-1的mRNA表达增加;小鼠去除巨噬细胞后,AngⅡ灌注7 d的心脏中巨噬细胞浸润减少,心脏纤维化程度减轻。结论高血压促进骨髓来源单核巨噬细胞在心脏的募集,巨噬细胞浸润与心脏纤维化发生相关,去敲除巨噬细胞能够抑制高血压心脏纤维化。     

Smad2及P38MAPK在泡球蚴病灶旁肝脏组织中的表达及意义

目的 观察在泡球蚴肝脏组织中Smad2和P38MAPK的表达,并分析二者在肝纤维化进程中的作用及其相互关系.方法 将20例经手术治疗的肝泡状棘球蚴病肝组织匹配后分为邻近病变的组织(即病灶旁)与正常肝组织,利用免疫组织化学的方式检测Smad2及P38MAPK的表达情况.HE和Masson染色,光镜下观察病理改变与肝纤维化程度.结果 泡球蚴肝脏病灶旁组织比正常肝组织纤维化程度高;Smad2和P38MAPK在病灶旁组织均比正常肝组织的表达明显较高;Smad2和P38MAPK无论在正常肝组织,病灶肝组织,还是整个肝组织中,其表达水平均与纤维化程度正相关;随着纤维化程度的加重,Smad2和P38MAPK的表达水平也都相应增加;病灶旁组织中Smad2和P38MAPK的表达成正相关.结论 泡球蚴肝脏病灶旁组织比正常肝组织纤维化程度明显严重;Smad2和P38MAPK均参与促进泡球蚴致肝纤维化的机制;在病灶旁组织中,P38MAPK参与调控对Smad2的正向调节.     

苦参碱及其衍生物抗肝纤维化效应

目的探讨苦参碱及其衍生物抗肝纤维化效应及其抑制慢性炎症状况下单核细胞肝脏浸润作用。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组、造模组、苦参碱组以及衍生物组,每组6只。造模组、苦参碱组以及衍生物组进行肝纤维化造模。同时,苦参碱组予苦参碱30 mg/kg灌胃,衍生物组予衍生物30 mg/kg灌胃,造模组和正常对照组PBS液0.5 ml灌胃,1次/d,每周连续5 d。6 w末检测肝脏组织羟脯氨酸水平、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 m RNA水平,单核细胞数目。结果造模组羟脯氨酸水平、MCP-1 m RNA表达、单核细胞计数及百分比显著高于正常对照组,苦参碱组和衍生物组显著低于造模组,而衍生物组显著低于苦参碱组(P0.01或0.05)。结论苦参碱及其衍生物衍生物能够抑制肝脏纤维化,减少单核细胞肝脏浸润,降低MCP-1 m RNA的表达,并且其衍生物的作用较苦参碱更明显。     

TGF⁃β1 p38MAPK及BMP⁃7蛋白在肝多房棘球蚴病患者肝组织中的表达及意义

目的　检测肝多房棘球蚴病患者肝组织中转化生长因子⁃β1（transforming growth factor⁃β1, TGF⁃β1）、p38MAPK及骨形态发生蛋白⁃7（bone morphogenetic protein⁃7, BMP⁃7）表达水平,探讨其在肝多房棘球蚴病肝纤维化中的潜在作用。方法　以20例肝多房棘球蚴病患者为研究对象,分别采集距肝脏病灶0.5 cm内（A组）、距肝脏病灶0.5～1.5 cm（B组）肝组织及距肝脏病灶2 cm及以上的正常肝组织（C组）。肝组织标本分别行HE和Masson染色观察纤维化病理变化,采用Western blotting检测肝组织中TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平,分析TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达与肝纤维化的相关性。结果　HE染色结果显示,A组和B组肝组织中肝细胞结构排列紊乱、肝小叶结构有不同程度破坏,可见不同程度肝细胞变性、萎缩、坏死及纤维组织增生,并有嗜酸性粒细胞浸润;C组肝组织无异常病理改变,肝细胞结构形态正常、大小均匀,未见明显排列紊乱,肝小叶结构清晰,无或轻度细胞变性、坏死及炎性细胞浸润。Masson染色结果显示,A组和B组肝组织可见汇管区较多纤维结缔组织增生,出现不同程度小叶内纤维化;C组肝组织无明显异常病理改变。A、B、C组肝组织中TGF⁃β1（P < 0.001）、p38MAPK（P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（P < 0.05）表达水平差异均有统计学意义,A组和B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均显著高于C组（P均< 0.05）,B组TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平亦显著高于C组（P均< 0.05）。TGF⁃β1、p38MAPK及BMP⁃7蛋白表达水平均与肝纤维化程度呈正相关（r = 0.866、0.702、0.801,P均< 0.05）,不同纤维化程度肝组织中TGF⁃β1（F = 72.580,P < 0.01）、p38MAPK（[χ2] = 31.705,P < 0.01）及BMP⁃7蛋白（[χ2] = 48.388,P < 0.01）表达水平差异均有统计学意义。TGF⁃β1蛋白与p38MAPK、BMP⁃7蛋白表达水平均呈显著正相关（r = 0.607、0.702,P均 < 0.001）,BMP⁃7与p38MAPK蛋白表达水平亦呈显著正相关（r = 0.456,P < 0.001）。结论　TGF⁃β1、p38MAPK和BMP⁃7蛋白通过相互作用、共同介导了肝多房棘球蚴病肝纤维化发生。     

肝脏巨噬细胞及其在肝损伤中的作用

肝脏巨噬细胞来源和功能复杂,包括肝脏固有巨噬细胞和单核细胞来源的浸润巨噬细胞,在宿主防御机制及维持机体内环境稳定中起着重要作用,也是参与肝脏损伤和修复的主要细胞成分.解析不同来源肝脏巨噬细胞在不同病因导致肝损伤过程中表型分化、生物学作用的动态变化及其分子机制,对理解肝损伤的病理过程,探索以肝脏巨噬细胞为靶点预防和治疗肝损伤以及肝纤维化的方案具有重要意义.     

桥本甲状腺炎患者内脏脂肪M1型巨噬细胞与胰岛素抵抗的相关分析

<正>桥本甲状腺炎（HT）又名慢性淋巴细胞细胞性甲状腺炎,发病核心是炎性细胞及炎症因子浸润甲状腺^[1]。最新研究发现,HT患者可伴有胰岛素抵抗（IR）^[2-3],甲状腺功能亢进或减退均伴有不同程度的IR,但具体机制尚不清楚。此外,有学者发现HT患者肾脏组织甲状腺过氧化物酶抗体（TPO）染色阳性,也反映出HT患者中多器官的自身免疫损害^[4]。IR是一种慢性系统性低度炎症,巨噬细胞（M?）浸润内脏脂肪是IR发生的关键步骤^[5]。脂肪组织的M?存在不同的表型:M1型M?,     

IL-33缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的CD8+ T细胞应答

目的 探讨IL-33缺陷(IL-33^-/-)对弓形虫感染小鼠的炎症反应和CD8⁺ T细胞功能的影响。方法 C57BL/6野生型(Wild-type, WT)和IL-33^-/-小鼠分别设感染组和对照组，建立弓形虫感染模型，记录小鼠死亡时间，绘制生存曲线；分别取感染后48 h、96 h各组小鼠外周血及肝、脾组织，HE染色观察组织病理变化；微量样本多指标流式蛋白定量技术(cytometric bead array, CBA)及ELISA检测血浆炎症因子(IL-12P70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-6及IL-4)水平；qPCR检测小鼠脾细胞中弓形虫速殖子表面抗原-1(SAG-1)的mRNA水平；流式细胞术分析脾脏CD8⁺ T细胞穿孔素、颗粒酶和IFN-γ水平。结果 与WT感染组小鼠比较，96 h时IL-33^-/-感染组小鼠脾脏SAG-1 mRNA表达降低(F=13.96,P<0.05),肝、脾组织的炎症改变较轻，生存时间延长(χ²=6.87,...     

单核细胞趋化蛋白-1与慢性肝病及并其发症的相关性

持续的肝脏炎症是慢性肝脏疾病进展的一个重要因素,趋化因子通过调节肝细胞、库普弗细胞、肝星状细胞、内皮细胞和循环免疫细胞的活动和迁移,在肝脏炎症的发生和发展中起着重要作用。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)属于CC趋化因子家族,在机体发生炎症反应和组织损伤时发挥激活、招募、迁移单核-巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的功能。MCP-1对慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、非酒精性脂肪性肝病、自身免疫性肝病、肝纤维化和肝硬化自发性细菌性腹膜炎等的发生、发展及预后有重要影响。本文对近几年MCP-1与慢性肝病及并发症相关性的进展进行综述。     

徐春军教授治疗酒精性肝硬化经验

<正>酒精性肝硬化是由于长期大量饮酒导致的肝脏疾病,主要以肝小叶结构毁损,假小叶形成以及肝脏纤维化为特征,在失代偿期,一些患者会出现腹水、消化道出血、肝性脑病等并发症,严重威胁着患者生命健康^[1]。目前西医学治疗酒精性肝病以改善生活方式为主,如戒酒、减重、提供营养支持以及对症保肝降酶等为主,临床并无特效药物^[2]。     

不同临床类型HBV感染患者肝组织中单核细胞趋化蛋白-1的表达及意义

目的：研究乙肝病毒（HBV）携带者、慢性乙型肝炎（CHB）、乙型肝炎肝硬化患者肝组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达,并探讨其临床病理意义。方法：20例HBV携带者、18例CHB患者、13例乙型肝炎肝硬化患者肝组织经10%中性甲醛固定后制作石蜡包埋切片,并以两份正常人肝组织作为对照,采用免疫组织化学法（SP法）检测肝组织MCP-1的表达水平。结果：正常肝组织MCP-1无表达,HBV携带者、CHB、乙型肝炎肝硬化患者肝组织MCP-1表达阳性率依次为25%、77.78%、84.62%,差异均有显著性意义。结论：MCP-1在肝组织中的表达随肝脏炎症和纤维化的发展而升高,MCP-1可能在病毒性肝炎肝脏炎症和纤维化的病理过程中起重要作用。MCP-1的研究对乙型病毒性肝炎的病情诊断、发病机制探讨及治疗提供新思路。     

受体相互作用蛋白3介导自身免疫性肝炎肝脏单核细胞来源巨噬细胞募集

目的:探索受体相互作用蛋白3(RIP3)对自身免疫性肝炎(AIH)肝脏单核细胞来源巨噬细胞浸润的调控作用。方法:纳入2018年1至6月于天津医科大学总医院消化科行肝穿刺活组织病理学检查的AIH患者10例,同期选择年龄和性别均匹配且无肝功能异常的5例肝囊肿患者作为对照,应用免疫荧光染色观察AIH患者和对照者肝组织单核细胞...     

复方皂矾丸对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部免疫功能及Notch/Hes信号通路的影响

目的 探究复方皂矾丸对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠的肺部免疫功能的影响及Notch/发状分裂相关增强子(Hes)信号通路的作用机制。方法 将72只SD大鼠随机分成对照组、模型组、复方皂矾丸低剂量组、复方皂矾丸中剂量组、复方皂矾丸高剂量组和氨茶碱组，每组12只。除对照组外，其余各组建立COPD大鼠模型，并给予相应药物的灌胃治疗。观察各组大鼠的一般情况并进行肺功能检测；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-10、IL-17和干扰素γ(IFN-γ)水平；苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学变化；流式细胞仪检测大鼠外周血CD4⁺IL-17⁺/CD4⁺、CD4⁺叉头框蛋白(FOX)P3⁺/CD4⁺水平；Western印迹法检测肺组织中Notch1、Hes1蛋白表达水平。结果 对照组肺组织结构正常，未见炎性细胞浸润；模型组肺组织表现出严重的炎症反应，肺泡囊、肺泡间隙增大，肺泡壁增厚；复方皂矾丸各剂量组大鼠肺组织的炎症细胞浸润明显减少，肺泡...     

童光东教授治疗肝癖临床经验

<正>肝癖是由于脏腑功能失调,导致痰湿脂浊内积于肝,日久肝络瘀阻,脉络不通,以胁肋胀痛、胁下积块为主要临床表现的疾病,相当于现代医学中非酒精性原因引起的肝内脂肪蓄积过多,久而出现炎症、纤维化甚至肝硬化的病理状态^[1]。目前非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)全球流行率约25%^[2],中国NAFLD患病率为29.2%^[3]。NAFLD不是单纯的脂肪堆积,通过脂毒性、氧化应激、肠道菌群失衡等多种机制可引起肝脏炎症及纤维化^[4],而且常伴有肥胖、高血压、糖尿病、     

非酒精性脂肪性肝病与肝硬化

非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD）发病与胰岛素抵抗（Insulin resistance, IR） 和遗传易感性密切相关,病理学改变与酒精性肝病（Alcoholic liver disease, ALD）相似,但无过量饮酒史^[1]。在此要强调NAFL与NASH的不同,NAFL是指病理活检显示肝脏脂肪变性,但是不具有肝纤维化或气球样变性的肝细胞损伤。NASH指在肝脏脂肪变基础上出现气球样肝细胞损伤伴或不伴肝纤维化^[2],NASH发生肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌风险明显增高,而NAFL则很低^[2],NASH是NAFL发生肝硬化的必经阶段^[3]。