内源性一氧化氮在急性胰腺炎大鼠并发肺损伤中的作用及其与氧化应激的关系

为探讨内源性一氧化氮 (NO)对大鼠急性坏死性胰腺炎并发肺损伤的作用及其与巯基物质的关系 ,以 5 %牛磺胆酸钠溶液胰胆管注射 ( 1mL/kg)制成大鼠急性坏死性胰腺炎并发肺损伤模型 ,以工具药L 硝基精氨酸 (L NNA)为内源性NO阻断剂 ,观察内源性NO对肺损伤程度、肺组织内巯基物质和脂质过氧化终产物丙二醛 (MDA)质量摩尔浓度的影响。结果 :牛磺胆酸钠胰胆管注射可造成大鼠急性坏死性胰腺炎并发肺损伤 ,同时肺组织内巯基物质的质量摩尔浓度降低 ,MDA的质量摩尔浓度增加。以L NNA( 1 2 .5mg/kg)阻断内源性NO后 ,肺损伤更加明显 ,同时肺组织内MDA的质量摩尔浓度也进一步增加 ,但对巯基物质的质量摩尔浓度没有影响。提示 :内源性NO具有肺保护作用 ,其保护机制可能与抗氧化应激有关 ;巯基物质可能不参与NO的肺保护机制。     

Verapamil对胰腺炎大鼠胰腺血流的影响

目的:研究胰腺炎大鼠胰腺血流下降的机理及 Verapamil(Ver)的治疗作用。方法:大鼠胰管内注入5%牛磺胆酸钠,制成急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。结果:胰头部血流立即下降;胰腺组织中性粒细胞髓过氧化酶(MPO)、磷脂酶 A_2(PLA_2)活性及胰腺毛细血管通透性明显升高。血浆血栓素 A_2(TXA_2)与前列环素(PGl_2)比例增加。预先使用 Ver 可延缓胰头部血流下降;降低 MPO、PLA_2及毛细血管通透性;对 TXA_2PGl_2均有显著抑制作用。结论:ANP 初期存在缺血再灌注过程。胰头部血流下降是血管活性物质平衡失调致血管运动功能紊乱;中性粒细胞(PMN)活化释放氧自由基致内皮细胞损伤的结果。钙离子(Ca~(2+))异常内流可能在上述过程中发挥了关键作用。     

姜黄素对重症急性胰腺炎COX-2表达的影响

目的 探讨姜黄素对急性出血坏死性胰腺炎环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 将SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、急性出血坏死性胰腺炎模型组(AHNP)、姜黄素预处理(Cur)组.Cur组在造模前2 h经腹腔注射姜黄素溶液(200 mg/kg),SO组和AHNP组注射等剂量的二甲基亚砜(DMSO)溶液.AHNP组和Cur组用5%(50 g/L)牛磺黄胆酸钠0.1 mL/100 g胰胆管逆行注射建立急性出血坏死性胰腺炎模型,SO组大鼠开腹后翻动胰腺3次即关腹.3组大鼠分别于术后3、6、12 h处死大鼠,每时间点各6只大鼠,观察胰腺组织病理学改变、胰腺组织COX-2表达和血清淀粉酶的变化.结果 AHNP组胰腺组织 COX-2 表达和胰腺损伤评分进行性增加,Cur组在各时相点胰腺损伤的程度均显著减轻,COX-2 的表达水平下降(P<0.05).结论 COX-2 参与了急性胰腺炎的发生和发展,姜黄素可能通过抑制COX-2表达,发挥对急性出血坏死性胰腺炎的保护作用.     

芸香苷对急性胰腺炎大鼠胰腺血流量的影响

目的 探讨芸香苷(Ru)对大鼠急性胰腺炎(AP)胰腺血流量的影响。方法经胰胆管内注射3％牛磺胆酸钠溶液(1ml／kg)制成SD大鼠急性胰腺炎模型。以芸香苷为预防性保护药物，观察不同时相急性胰腺炎大鼠胰腺血流量的变化及胰组织病理改变间内在联系。结果 急性胰腺炎时胰头部血流量明显下降。病理检查示胰腺组织明显坏死和中性粒细胞(PMN)浸润。预先使用芸香苷，可明显增加胰头部血流。胰腺出血及坏死明显减轻。结论 芸香苷可通过增加胰腺血流量，减轻胰腺出血和坏死，保护胰腺组织。     

三七皂甙对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB活性及胰腺损伤的影响

目的探讨三七总皂甙能否抑制急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB的活性,减轻ANP时胰腺病理损害。方法SD大鼠30只。随机分为3组每组10只：假手术模型组（SO组）,急性坏死性胰腺炎组（ANP组）,三七总皂甙预处理（PNS组）,SO组和ANP组造模前1h腹腔注射0.9%生理盐水（0.1ml/100g）,PNS组造模前1h腹腔注射50mg/ml三七总皂甙（0.1ml/100g）。5%牛磺胆酸钠大鼠胆胰管逆行注射制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型,SO组进腹后仅翻动胰腺和十二指肠后关腹,不注入牛磺胆酸钠。各组造模后6h点处死大鼠,取胰腺组织测定湿/干重比和测其中NF-κB活性。结果ANP组造模后6h胰腺组织NF-κB阳性细胞数明显高于SO组（P〈0.01）。结论NF-κB在大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺组织中明显激活;三七总皂甙可以在体内抑制NF-κB在胰腺组织中的激活,减轻各脏器的病理损害,可望用于治疗ANP。     

内源性一氧化氮在急性出血坏死性胰腺炎发病中的作用

为探讨内源性一氧化氮 (NO)在急性出血坏死性胰腺炎 (AHNP)发病中的作用 ,胰胆管内逆行注射 5 %牛磺胆酸钠 ,建立大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型 ,通过光镜观察胰腺的病理变化 ,用免疫组化SP法测定胰腺微血管内皮细胞内eNOS的表达 ,用Westernblot分析胰腺组织内iNOS的表达。结果 :诱导AHNP后 5min就出现胰腺微血管的病变 ,并伴有腺泡细胞凝固性坏死。随着时间的延长 ,上述病变加重。术后 1 0min ,胰腺间质小血管内皮细胞表达eNOS开始显著增高 (P <0 .0 5 ) ,并随着疾病的发展而逐渐增高。术后 5min,胰腺组织内iNOS表达开始增高 (P <0 .0 5 ) ,且随着时间的延长逐渐增高     

牛磺胆酸钠致大鼠急性出血坏死性胰腺炎早期胰腺血流的测定

作者以5％的牛磺胆酸钠(Na-Tc)注入大鼠胆胰导管内,引起急性出血坏死性胰腺炎,以注射生理盐水为实验对照组,测定血清脂肪酶和淀粉酶活性,结果注射Na-Tc后3小时此两酶的活性均显著升高,12小时最明显;用~(36)RbCl示踪法测定,显示胰腺血流量和胰组织灌流量于注射Na-Tc后1小时明显升高,并维持较高水平至12小时下降。这些结果提示:Na-Tc致大鼠急性出血坏死性胰腺炎早期胰腺血流量增加,为一般炎症充血反应。     

刺五加对大鼠急性胰腺炎的保护作用实验研究

目的:观察刺五加治疗大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)血清一氧化氮(NO)含量和过氧化物岐化酶(SOD)活性变化,及其病理学的改变,探讨刺五加对ANP的保护作用.方法:Wistar大鼠36只随机分为3组:ANP组,经胰胆管注入5%牛磺胆酸钠,建立大鼠ANP模型;治疗组,ANP模型建立后,经腹腔注入刺五加注射液;对照组,开腹后仅作翻动胰腺.结果:治疗组血清NO含量和SOD活性明显高于ANP组(P＜0.05),血清淀粉酶显著下降(P＜0.05),病理学观察,治疗组各时相点较胰腺炎组减轻.结论:刺五加对ANP可能有保护作用.     

中药WPY对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺及肺组织表达ICAM-1及MPO活性的影响

目的探讨中药WPY对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠胰腺及肺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达及细胞过氧化物酶(MPO)活性的影响。方法35g／L牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射诱发大鼠．ANP及中药WPY治疗后,用免疫组化技术观察胰腺、肺组织ICAM-1的表达改变,测定胰腺、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果ANP后3h胰腺的ICAM-1表达及MPO活性明显增强,12h达高峰。ANP后6h肺组织的ICAM-1表达及MPO活性明显增强,12h达高峰。中药WPY治疗组胰腺及肺组织ICAM-1表达及MPO活性下降,在12h时相点与模型组比较具有统计学意义。结论中药WPY可以减轻胰腺及肺组织ICAM-1的表达,使MPO活性下降。     

蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎及其肺损伤中的保护作用

目的观察蛋白酶体抑制剂MG-132在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）中的保护作用,并探讨其可能机制。方法SD大鼠30只,5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射制作重症急性胰腺炎（SAP）模型,观察各组大鼠胰腺、肺组织形态学改变,并测定血清淀粉酶及胰腺、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性。结果MG-132治疗组与胰腺炎组及假手术组比较,血清淀粉酶、胰腺及肺组织MPO活性下降（P〈0．05）,组织病理学改变均有不同程度的改善（P〈0．05）。结论制模前30min腹腔注射10mg／kg的MG-132可以明显减轻5％牛磺胆酸钠诱导的大鼠的肺损伤严重程度,并可减轻胰腺炎所致的肺损伤。     

芸香苷对急性胰腺炎大鼠血浆丙二醛的影响

目的探讨芸香苷（Ru）对大鼠急性胰腺炎（AP）血浆丙二醛的影响。方法经胰胆管内注射3%牛磺胆酸钠溶液（1ml/kg）制成SD大鼠急性胰腺炎模型。以芸香苷为预防性保护药物,观察各组大鼠血浆丙二醛、酶学及胰腺的病理学改变。结果AP大鼠血浆丙二醛显著升高,病理检查显示胰腺组织明显坏死和中性粒细胞浸润。预先使用芸香苷,可改善上述各项病理生理指标的变化,动物存活明显改善。结论Ru能有效降低AP大鼠血浆丙二醛,减轻胰腺出血和坏死,保护胰腺组织。     

静脉注射罗格列酮治疗大鼠急性胰腺炎的量效关系

目的:探讨罗格列酮(ROSI)静脉给药治疗大鼠急性胰腺炎(AP)的量效关系。方法:雄性Wistar大鼠42只,随机分为7组(n=6):假手术组(SO组)、急性胰腺炎组(AP组)、ROSI 0.3,3,6,10 mg/kg预处理组和药物对照组。胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠制备AP模型。SO组、AP组造模前30 min股静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO)(2 ml/kg),不同剂量预处理组则注射等量、10%DMSO溶解的ROSI。术后12 h心脏取血检测各组血清淀粉酶(AMY)、谷氨酸氨基转移酶(ALT)变化,观察胰腺组织病理学改变。药物对照组根据ROSI干预效果选择最佳剂量,造模前30 min股静脉注射最佳剂量的ROSI取代10%DMSO。术后12 h检测其血清AMY、ALT及胰腺组织病理学改变。结果:与AP组比较,0.3,3 mg/kg ROSI预处理组AMY、ALT没有改变,胰腺组织病理学评分有所改善(P<0.05);6 mg/kg ROSI预处理组上述指标较AP组显著降低(P<0.01),10 mg/kg ROSI预处理组AMY、胰腺组织病理学评分较AP组显著降低(P<0.01),但ALT与AP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。药物对照组(6 mg/kg)上述指标与SO组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针对胆胰管逆行注射牛磺胆酸钠制备的大鼠AP模型,6 mg/kg静脉注射罗格列酮是安全、有效的剂量。     

大承气汤诱导实验性急性胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的研究

目的：观察大承气汤对实验性急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法：36只雄性SD大鼠随机分入12h和24h时间点假手术组、模型组和治疗组,每组6只;其中24只逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠建立急性胰腺炎模型,12只为假手术组。治疗组予大承气汤喷雾干燥颗粒20g/kg灌胃治疗一次,模型组和假手术组给予等量的生理盐水。给药后12h和24h,断头处死取血及胰腺组织,检测胰腺组织中一氧化氮（nitric oxide,NO）含量和诱生型一氧化氮合成酶（inducible NOsynthetase,i NOS）的活性,原位缺口末端标记法检测胰腺组织细胞凋亡率,并观察胰腺组织病理积分。结果：与模型组比较,治疗组两个时间点的血清淀粉酶活性显著降低（P〈0.05）,胰腺组织内NO含量和i NOS活性明显升高（P〈0.05）;治疗组大鼠的胰腺腺泡细胞凋亡指数增加,伴随胰腺组织病理学积分的降低（P〈0.05）。结论：大承气汤可诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡而改善胰腺病理改变,其机制可能与增加胰腺组织NO含量有关。     

趋化因子CINC在急性胰腺炎大鼠肺组织中的表达

目的探讨细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子(CINC)在急性胰腺炎大鼠肺损伤中的作用。方法大鼠胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠,制作大鼠重症急性胰腺炎并发肺损伤模型。分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理学评分,酶显色法测定血清脂肪酶水平,并测定肺组织湿/干质量比;反转录聚合酶链反应技术检测各组大鼠肺组织CINCmRNA的表达。结果造模后1 h,大鼠即出现较明显的胰腺损伤,伴有血清脂肪酶升高,12 h时,胰腺损伤最为严重。造模后1 h,肺损伤评分即有升高,但肺组织湿/干质量比无明显变化,此后,肺损伤程度逐渐增加,以24 h时最为严重。正常大鼠肺组织内CINCmRNA呈低水平表达。造模1 h后,大鼠肺组织内CINCmRNA表达明显增加,至24 h达最高水平;大鼠肺组织内CINCmRNA表达与胰腺损伤程度、肺损伤程度成正相关。结论大鼠肺组织内CINC参与胰腺炎肺损伤过程。抑制肺组织内中性粒细胞的趋化,可能成为治疗胰腺炎肺损伤的新途径。     

实验性急性出血坏死性胰腺炎血浆及脑组织氧自由基与磷脂酶A_2的关系及纳屈酮治疗作用

目的 :探讨大鼠急性出血坏死性胰腺炎 (AHNP)并发胰性脑病的机理及评价纳屈酮治疗效果。方法 :应用 5 %牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射诱发大鼠AHNP并发脑组织损害模型。实验分为对照组、胰性脑病 (PE)组及纳屈酮 (NTX)治疗组 :分别于 6、12、2 4h检测血浆及脑组织脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)含量、磷脂酶A2(PLA2 )活性、氧自由基清除剂超氧化物歧化酶 (SOD)活性、脑指数及胰腺和脑组织病理学改变。结果 :PE组 6、12、2 4h血浆及脑组织较对照组 :MDA含量、PLA2 活性升高 ;SOD活性下降。PE组光镜下 6、12、2 4h分别出现胰腺红细胞渗出、炎性细胞浸润、灶性坏死及脑组织水肿、点状出血、脱髓鞘改变。电镜下 6h胰腺细胞线粒体肿胀 ,嵴模糊 ,粗面内质网扩张 ;12h线粒体破损 ,粗面内质网脱颗粒 ;2 4h线粒体及粗面内质网破裂 ,次级溶媒体出现及泡心细胞绒毛断失。NTX治疗组较PE组 ;血浆及脑组织MDA含量、PLA2 活性下降及SOD活性升高 ;而且胰腺及脑组织损害减轻。结论 :大鼠AHNP模型可引发胰性脑病 ;NTX可降低血浆及脑组织氧自由基 (OFR)含量、PLA2 活性 ,同时增加SOD活性 ,进而减轻脑组织损害作用 ;从而 ,延长大鼠生存时间及降低其病死率     

垂体腺苷酸环化酶激活多肽拮抗剂对实验性急性胰腺炎的影响

目的　探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽 (PACAP)受体拮抗剂 PACAP6 - 2 7和 (4 - Cl- D- Phe6 ,L eu17)VIP对实验性急性胰腺炎 (AP)发生发展的影响。方法　将 Wistar大鼠分为正常对照组、AP组和 PACAP受体拮抗剂干预组等 ;使用蛙皮缩胆囊肽和牛磺胆酸钠诱发 AP,4 h后观察胰腺改变并测定血清淀粉酶、胰腺干湿比和PACAP含量等。结果　静脉输注 PACAP6 - 2 7(10 ,10 0 μg/ kg)可导致胰腺组织水肿和炎性细胞浸润 ,血清淀粉酶显著高于正常对照组〔(14 6 4 .33± 2 6 5 .6 ) IU/ L 和 (16 92 .17± 312 .18) IU/ L vs正常对照组 (5 2 0 .8± 16 3.2 7) IU/L,P<0 .0 5〕;PACAP6 - 2 7和 (4 - Cl- D- Phe6 ,L eu17) VIP促使蛙皮缩胆囊肽诱发 AP胰腺腺泡细胞空泡化加剧 ,胰腺组织有出血、脂肪和实质坏死 ,病变严重程度与牛磺胆酸钠诱发 AP相似 ;PACAP6 - 2 7加剧牛磺胆酸钠诱发 AP胰腺出血、腺泡细胞空泡化和实质坏死。EL ISA检测显示 ,蛙皮缩胆囊肽和牛磺胆酸钠诱发 AP胰腺和十二指肠组织的 PACAP水平较正常对照显著增高。结论　 PACAP6 - 2 7和 (4 - Cl- D- Phe6 ,L eu17)可诱发轻型胰腺炎 ,加重实验性 AP;PACAP可能参与了实验性 AP的发生发展     

Establishment of an Infected Necrotizing Pancreatitis Model by Retrograde Pancreatic Duct Injection of Sodium Taurocholate and E. coli in Rats

A stable and reliable infected necrotizing pancreatitis （INP） model in rats was established in order to study the pathophysiological mechanism and pathological development role of INP and explore the new therapeutic methods for the diseases. Forty-six SD rats were randomly divided into 5 groups. The animals in group A received the injection of 5% sodium taurocholate into the pancreatic duct and those in group B underwent that of E. coli into the pancreatic duct. The rats in groups C, D and E were subjected to the injection of 5% sodium taurocholate in combination with different concentrations of E. coli （10^3, 10^4, 10^5/mE, respectively） into the pancreatic duct. The dose of injection was 0.1 mL/100 g and the velocity of injection was 0.2 mL/min in all the 5 groups. Eight h after the injection, the survival rate of animals was recorded and the surviving rats were killed to determine the serum content of amylase and perform pathological examination and germ cultivation of the pancreatic tissue. The results showed that acute necrotizing pancreatitis model was induced by injection of 5% sodium taurocholate into the pancreatic duct. The positive rate of germ cultivation in group A was 12.5%. The acute necrotizing pancreatitis model was not induced by injection of E. coli into the pancreatic duct and the positive rate of germ cultivation in group B was 0. The INP model was established in groups C to E. The positive rate of germ cultivation was 60%, 100% and 100% and 8-h survival-rate 100%, 100% and 70% in groups C, D and E, respectively. It was concluded that a stable and reliable model of INP was established by injection of 5% sodium taurocholate in combination with 10^4/mL E. coli into the pancreatic duct with a dose of 0.1 mL/100 g and a velocity of 0.2 mL/min. The pathogenesis of INP might be that the hemorrhage and necrosis of pancreatic tissue induced by sodium taurocholate results in weakness of pancreatic tissue in fighting against the germs. Meanwhile, the necrotic pancreatic tissue provides a good p