肾移植病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌随机扩增多态DNA分型研究

目的 研究医院肾移植病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特征,以确定病房内是否存在MRSA流行.方法 用头孢西丁纸片扩散法检测MRSA,用双重PCR方法检测金黄色葡萄球菌的femA,mecA基因,采用随机扩增多态DNA技术(RAPD),对肾移植病房一段时间内临床患者感染部位及环境和医务人员分离的MRSA作同源性分析.结果 16例患者中有5例感染MRSA;从57份医护人员鼻腔、手部、环境分离出1株MRSA;5株患者MRSA的RAPD分型具有较高的同源性;医护人员分离的MRSA与患者分型结果无同源性.结论我们医院肾移植病房存在严重的MRSA局部流行,应及时检测MRSA,防止医院感染菌株的播散.     

外科重症监护室分离MRSA的流行病学研究

目的了解某院外科重症监护室(SICU)患者分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与同期环境分离的MRSA的同源性,为控制MRSA的院内传播提供依据。方法对2010年8—10月SICU送检临床标本进行MRSA的分离鉴定,同时对环境进行采样检测MRSA。对分离到的MRSA菌株,应用基于细菌基因组重复序列聚合酶链反应(Rep-PCR)技术的DiversiLab系统进行同源性分析。结果 124份临床标本共分离金黄色葡萄球菌12株,经鉴定全部为MRSA。对其中10株MRSA和环境分离的3株MRSA进行同源性分析,发现9株患者来源的MRSA和3株环境来源的MRSA具有高度同源性;另1株患者来源的MRSA不同于环境来源的MRSA。结论 SICU患者分离的MRSA与环境分离的MRSA呈高度同源性,可能为同一克隆株。该SICU MRSA的院内传播较为严重。     

38株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌同源性分析

目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点,进行同源性分析,为医院的MRSA防治提供依据.方法 采用重复序列-聚合酶链反应(rep-PCR)技术对医院不同病区及医院环境分离的38株MRSA进行同源性分析.结果 38株MRSA经rep PCR扩增后均见数量不等的条带,数量在6～8条,分型率达100.0％;用cross checker软件和spss软件进行聚类分析,可分为5型,各菌株之间遗传性状较为相似,型与型之间差异较小,其中Ⅰ型29株、Ⅱ型3株、Ⅲ型2株、Ⅳ型1株、Ⅴ型3株.结论 医院临床及医院环境中分离的MRSA存在rep-I型克隆传播,rep-Ⅰ型为医院主要流行株.     

医院感染金黄色葡萄球菌的流行与耐药机制

目的对医院感染金黄色葡萄球菌进行基因分型,研究流行菌株的传播及其耐药的分子机制,以控制医院感染的发生。方法对分离的21株金黄色葡萄球菌进行RAPD分型,并进行mecA、gyrA、grlA基因分析,研究其耐药机制。结果21株金黄色葡萄球菌根据RAPD带型可分为3型,其中Ⅰ型12株,是医院感染的主要流行株;在临床分离的17株金黄色葡萄球菌中14株对甲氧西林和喹诺酮类均耐药;在耐药株中除1株(13064)外,其余菌株均检测出mecA基因;14株耐药株中均存在gyrA和(或)grlA突变;gyrA突变点为gyrA 84位TCA→TTA,gylA突变点为grlA80位TCC→TTC。结论RAPD基因分型技术简便快捷,可为医院感染金黄色葡萄球菌准确分型,是分子流行病学研究的有效方法;医院医院感染的金黄色葡萄球菌流行株主要为Ⅰ型,有可能经飞沫传播;17株临床分离株中14株存在多重耐药,并有相应的基因变异。     

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性与SCCmec分型及同源性研究

目的 研究医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及分子流行病学特点,为预防和控制医院感染提供参考.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及葡萄球菌A蛋白(spa)分型技术,2009年3-4月对烧伤科、ICU、呼吸内科、急诊科、血液内科、儿童急救科和儿童呼吸科住院患者、医务人员及环境分离的MRSA,进行了药敏试验和同源性分析,并检测其杀白细胞毒素(pvl)基因.结果 从1352份标本中分离出108株金黄色葡萄球菌,MRSA为54株占50.0％,主要分离于烧伤科42株占77.8％;分离的临床菌株总体耐药率较高,除万古霉索外耐药率均＞50.0％,未发现万古霉素耐药株;SCCmec分型结果显示,54株MRSA以Ⅲ型为主占68.5％,pvl基因均为阴性;进行spa分型研究的23株MRSA中,22株为t030,1株为t2270,呈现高度的克隆一致性.结论 医护人员MRSA带菌率较高,部分医务人员、住院患者和环境中分离的MRSA有较高的同源性,存在人与人和人与环境之间的MRSA传播.     

金黄色葡萄球菌医院感染的临床及耐药性分析

目的探讨金黄色葡萄球菌所致医院感染的危险因素、临床特点及耐药情况,为临床治疗金黄色葡萄球菌医院感染提供指导。方法收集确诊为金黄色葡萄球菌医院感染病例的临床资料,分析发病的危险因素及临床特点,对分离到的菌株进行药物敏感性测定。结果共73例金黄色葡萄球菌医院感染患者,均存在着严重的基础疾病,82.19%的患者接受过侵入性操作,感染部位以肺部最多见;共分离出79株金黄色葡萄球菌,包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）66株（83.54%）和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）13株（16.46%）;金黄色葡萄球菌对多种抗菌药物呈普遍耐药,而MRSA的耐药性明显高于MSSA（P〈0.01）,未发现对耐万古霉素MRSA菌株。结论金黄色葡萄球菌医院感染常发生在有严重基础疾病、接受侵入性操作的患者,肺部感染最常见,MRSA表现为多药高度耐药,但糖肽类药物敏感性高。     

一起MRSA感染流行病学调查

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）医院感染的传播途径,为防控多重耐药菌医院感染及流行制定有效措施。方法对2012年2月24日-3月29日某院肿瘤内科因气管狭窄而收入院行支气管镜检查治疗的12例MRSA感染患者进行流行病学调查,采用实时荧光定量PCR方法扩增,检测16S rRNA、femA、mecA和Spa基因,前三者进行菌株鉴定,后者进行菌株同源性分析。结果12例MRSA感染患者均为多重耐药菌的易感人群,其中5例为此次住院发生的医院感染,7例可排除此次住院发生的医院感染。医务人员及环境卫生学采样检测结果为阴性;12株MRSA的 Spa基因分型结果显示均为t030 型,为亚洲医院主要流行株;分离自护士鼻腔的普通金黄色葡萄球菌Spa基因型为t1425 型。结论此次流行病学调查结果不支持医护间传播,12株MRSA基因型相同,但基因分型结果不能作为此次感染同源的依据;同时,医院应主动对MRSA感染高危患者进行筛查,尽早实施接触隔离,预防和控制医院感染的发生。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的 研究湖南省4所综合医院分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分子流行病学特点,为临床预防、临测MRSA的流行,并制定合理的防治方案提供确实可靠的依据.方法 采用质粒图谱分析4所医院MRSA是否存在质粒流行,并分析其型别;采用RAPD分析对住院患者、环境、医务人员分离的MRSA进行同源性分析.结果 对89株MRSA进行质粒图谱分析,有7株未检测到质粒,82株携带有质粒,可分为17型,4所医院MRSA均存在1～2种主要质粒的流行;经RAPD分型89株MRSA可分为A、B、C、D、E 5型,其中A型85株占所有菌株的95.50%,B型1株、C型1株、D型1株、E型1株.结论 质粒图谱分析及RAPD分型方法 可很好用于MRSA分子流行病学分析,医院MRSA临床株与环境株及湖南省4所综合医院之间MRSA 菌株具有同源性,呈暴发流行.     

食源性和病原性金黄色葡萄球菌分离鉴定和耐药性研究

目的 了解食源性与病原性金黄色葡萄球菌分布及耐药情况,为由该菌引起的食物中毒和临床用药提供依据. 方法 采集食品和医院感染病人标本进行金黄色葡萄球菌分离鉴定及药敏试验. 结果 食品中沙拉金黄色葡萄球菌污染率最高为15.14％,56.84％的医院分离株来自呼吸道标本痰液,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）整体耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）,病原性金黄色葡萄球菌耐药性高于食源性金黄色葡萄球菌. 结论 加强食源性金黄色葡萄球菌的监测,对于金黄色葡萄球菌的感染治疗应根据药敏结果选择合理的抗生素.     

住院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植与感染相关研究

目的调查住院患者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）定植及感染的状况，分析MRSA定植与感染的关系。方法对某大医院神经内科住院患者在入院48h内及以后每周一、三、五采集鼻前庭标本，同时收集该期间住院患者送检临床标本中分离的MRSA菌株。以低频限制性位点聚合酶链反应（IRS—PCR）基因分型法对患者鼻前庭标本和临床标本分离的MRSA菌株进行同源性分析。结果共调查265例患者，MRSA定植者14例（5．28％），其中7例为入院前定植，7例为入院后定植；MRSA感染者10例（3．77％），其中8例的鼻前庭标本和临床标本均分离出MRSA，另2例仅临床标本分离出MRSA。IRS—PCR基因分型显示MRSA感染患者临床标本和鼻前庭标本分离出的MRSA具有很高的同源性。结论住院患者定植MRSA是发生MRSA医院感染的一个重要危险因素。     

重症监护病房分离金黄色葡萄球菌的分子流行特征

目的了解某三甲医院重症监护病房(ICU)患者分离金黄色葡萄球菌的分子流行特点及其同源性,为有效控制医院感染的发生提供实验室依据。方法收集该院2013年3—8月ICU患者各类感染标本分离的62株金黄色葡萄球菌,采用PCR方法扩增7个管家基因并进行测序分析,采用多位点序列分型(MLST)技术获得菌株ST分型,对ST分型进行亲缘关系分析。结果 62株金黄色葡萄球菌均可以扩增出7个管家基因的特异性产物;共分为10个ST基因型,其中2个基因型为新发现的ST型(STn1和STn2),1个为国内新发现的ST型(ST675)。ST239是ICU患者分离的金黄色葡萄球菌主要ST型别,占74.20%,分布于6个ICU,分布范围最广;其次为ST5,分布于3个ICU。62株菌株在系统进化树上形成7个主要分支,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)55株,占88.71%。结论医院ICU分离的金黄色葡萄球菌具有一定的同源性,并且少数型别表现出集中分布趋势。     

2010—2012年万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MIC值的变化

目的了解万古霉素对不同标本来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）最低抑菌浓度（MIC）值的变化。方法收集某院2010-2012年临床分离的MRSA菌株,测定MRSA万古霉素MIC值;并按不同标本来源,对菌株万古霉素MIC值进行分析。结果3年共收集金黄色葡萄球菌1 434株,其中分离自痰标本857株,血液标本239株,其他标本338株;2010-2012年MRSA检出率分别为41.12%（169/411）、44.96%（214/476）和48.08%（263/547）。2010-2012年血液标本分离的金黄色葡萄球菌MRSA检出率分别为29.03%、30.86%、30.21%,痰标本分离的金黄色葡萄球菌MRSA检出率分别为46.89%、51.03%、57.10%;3年间痰标本MRSA检出率均高于血液标本（χ2值分别为6.41、10.36、21.43,均P＜0.05）。血液及痰标本分离的MRSA对万古霉素均敏感。2010-2012年血液标本分离的MRSA万古霉素MIC≥1.00 μg/mL菌株分别占38.89%（7株）、40.00%（10株）及37.93%（11株）,3年间比较,差异无统计学意义（χ2=0.02,P=0.999）;痰液分离的MRSA万古霉素MIC≥1.00 μg/mL菌株分别占36.28%（41株）、40.94%（61株）及49.73%（92株）,3年比较,差异亦无统计学意义（χ2=5.72,P=0.057）。结论该院2010-2012年临床MRSA检出率呈增高趋势。痰标本的MRSA检出率及万古霉素MIC值有所增高;血液标本的MRSA检出率及万古霉素MIC变化不明显。     

临床分离金黄色葡萄球菌的耐药特点和MRSA分子分型

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及其基因分型。方法收集某院2014年1月—2015年11月检出的非重复金黄色葡萄球菌967株,检测其药敏结果及mecA抗性基因、杀白细胞素(PVL)基因;MRSA菌株经多重PCR进行葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)分型、多位点序列分型(MLST)、金黄色葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型、金黄色葡萄球菌附属因子调节子(agr)分型。结果 967株金黄色葡萄球菌共检出210株MRSA,MRSA检出率为21.72%;痰标本MRSA检出率高于皮肤软组织标本(68.09%vs 11.83%,P0.05);金黄色葡萄球菌中未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,MRSA对庆大霉素、四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因、利福平的敏感率均低于MSSA,差异均有统计学意义(均P0.05);MRSA对复方磺胺甲口恶唑的敏感率高于MSSA,差异有统计学意义(P0.05)。皮肤软组织分离的MRSA对庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、利福平的敏感率为86.90%~95.24%,而痰分离的MRSA仅为1.56%~15.63%。967株金黄色葡萄球菌检测出210株携带mecA基因,10株携带PVL基因,210株MRSA中有8株未分型,占3.81%。MLST主要以ST239(177株)为主;SCCmec分型主要以Ⅲ型(177株)为主;spa分型主要以t 030(177株)为主;agr分型主要以Ⅰ型(196株)为主。结论该院MRSA菌株主要流行克隆ST239-MRSA-SCCmecⅢ-t030,耐药形势严峻,应加强医院内耐药菌株的监测。     

住院患者与医院环境耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

[目的]了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）在医院内的流行及耐药特征,为预防和控制MRSA引起的院内感染提供科学依据。[方法]以上海某区一家综合性二级医院临床患者标本中分离的78株金黄色葡萄球菌（SA）和同时期该医院诊疗环境中分离的53株sA共131株sA为研究对象,分别用头孢西丁药敏纸片法和PCR法检测MRSA,K-B法检测该131株sA对15种抗菌药物的敏感性。[结果]131株SA中,MRSA构成比为55．73％（73／131）。其中,临床分离株和环境分离株中的MRSA构成比分别为52．56％（41／78）和60．38％（32／53）,两者相比差异无统计学意义（JP〉0．05）。临床MRSA株主要分布于痰液及伤口分泌物;环境MRSA株主要分布于床头柜、监护仪以及医护人员手。抗菌药物敏感性实验显示,MRSA对β-内酰胺类药物耐药率100％,对糖肽类药物、利奈唑胺、利福平高度敏感,对其他抗菌药物均呈多重耐药。[结论]MRSA在医院内有较高流行度,而且呈多重耐药性。应加强抗生素的合理使用,及时进行MRSA院内感染目标性监测,切实做好MRSA感染患者的消毒隔离工作。     

重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌监控研究

目的了解某院重症监护室（ICU）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）医院感染情况,评价干预效果。方法收集2008年8月-2010年9月间ICU住院患者MRSA医院感染病例,对分离的阳性菌株用分子生物学方法验证。2009年9月-2010年9月,对ICU MRSA医院感染患者实施具体干预、监控,并与干预前一年的MRSA医院感染率进行比较,评价干预效果。结果ICU环境中MRSA检出率,干预前为29.90%（87/291）,干预后为7.90%（23/291）,两者比较,差异有统计学意义(χ2=45.910,P＜0.05); ICU住院患者MRSA医院感染率,干预前为35.87％（113/315）,干预后为14.66%(51/348),两者比较,差异有统计学意义(χ2=25.11,P＜0.05)。干预前后ICU内的MRSA感染危险因素相同,主要是气管插管及使用呼吸机等侵入性操作、神经外科大手术、广谱抗菌药物的长期使用、免疫抑制剂的应用和未采取隔离措施等。MRSA新发感染主要集中在入住ICU 2周后,入住时间越长,干预效果越不明显。结论ICU获得性感染MRSA发生率较高。早期强化干预措施,加强监测、控制,可有效降低MRSA医院交叉感染率。     

金黄色葡萄球菌的耐药分析

目的调查临床分离的金黄色葡萄球菌耐药现状,为临床合理使用抗生素提供依据。方法收集2007年1月-2009年5月无锡市第二人民医院连续分离的非重复金黄色葡萄球菌643株,用全自动微生物仪进行菌种鉴定和药敏实验,以K—B法测替考拉宁的药敏。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占分离总数的71．7％,所有菌株对替考拉宁、万古霉素、呋喃妥因和利奈唑胺均敏感。MRSA的耐药性显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）,MRSA对β-内酰胺类、红霉素、四环素、亚胺培南、克林霉素、庆大霉素、左氧氟沙星等抗菌药物的耐药率为82．6％～100％、92．7％、74．8％、92．O％、74．5％、90．5％、78．6％,说明MRSA多重耐药严重,对其他受试药的耐药率均〈10％。MSSA除对青霉素、克林霉素及红霉素耐药率高达93．0％、45．6％和45．6％,对其余抗菌药物的耐药率较低,为0～23％之间。结论MSSA对大部分抗菌药物保持较好的敏感性,MRSA较MSSA的耐药性高,MRSA多重耐药严重,必须加强金黄色葡萄球菌的监控,以最大限度降低其耐药性发生。     

金黄色葡萄球菌超抗原在不同人群中的分子特征研究

目的了解菌血症患者血液,医护工作者、非感染性疾病入院患者以及社区健康人群前鼻腔内的金黄色葡萄球菌超抗原基因分子特征。方法用PCR和multiplex-PCR方法对277株菌的毒性休克综合征毒素-1(toxicshock syndrome toxin-1,TSST-1)和肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)编码基因进行了扩增。结果 277株分离的金黄色葡萄球菌中共有142株(51%)肠毒素基因检测结果为阳性。从医院内各人群组(包括医院菌血症患者组、医护人员组和非感染性疾病入院患者组)分离菌株的阳性率在50%~59%,要比社区健康人群组阳性率(36%)高(χ2=10.86,P<0.05)。医院内各人群组分离株的SE基因主要以A型为主,而社区健康人群组的分离菌株则以D型为优势型别。另外,菌血症患者血液的金黄色葡萄球菌携带基因tsst-1的阳性率要高于其他人群组(χ2=21.91,P<0.01)。结论本研究表明不同人群分离得到的金黄色葡萄球菌超抗原分子特点具有特异性,对临床金黄色葡萄球菌的诊断治疗和流行病学研究具有一定的指导意义。