RNA干扰技术及其在医学领域的研究进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是一种由双链RNA介导的基因沉默现象,可以在转录水平和转录后水平发挥作用。RNAi技术作为新兴的基因阻断技术是近几年研究的热点,已经广泛地应用于抗病毒感染、抗肿瘤等热门领域。RNAi技术有望开辟基因治疗的新途径。本文就RNAi的作用机制及RNAi技术在医学中的应用做一综述。     

RNA干扰与胶质瘤的基因治疗

RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术是一种新兴的由外源性或内源性的双链RNA介导的转录后基因沉默技术。RNAi可以使目标基因低表达或完全不表达。随着RNAi技术研究的不断进展，RNAi已成为研究基因功能和探索基因治疗的重要工具。本文就RNAi技术及其在胶质瘤治疗中的研究进展作一介绍。     

RNA干扰及其在肿瘤研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是近年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,该技术通过双链RNA的介导,可以特异性地阻断或降低相应基因的表达。在肿瘤研究中,通过RNAi技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。本文综述了小干扰RNA(siRNA)、微小RNA(miRNA)的生成和作用机制以及RNAi在肿瘤研究中的应用。     

RNAi在肿瘤治疗中应用的研究进展

RNA干涉(RNAi)是近年发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,该技术通过双链RNA的介导,可以特异性地阻断或降低相应基因的表达。在肿瘤研究中,通过RNAi技术可以选择性地抑制人类肿瘤相关基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的生长。该技术的应用为癌症的基因治疗提供了新的方法。本文综述了RNAi在肿瘤研究中的应用。     

RNA干扰及其在乳腺癌研究中进展

RNA干扰（RNAinterference,RNAi）是由双链RNA引发的序列特异性基因沉默现象,可高效、特异地沉默特定基因。RNA干扰提出时间并不长,但这项技术已应用于多个领域,并取得了突飞猛进的发展。随着研究的不断深入,RNAi在基因功能研究尤其是肿瘤相关基因研究及肿瘤治疗中的应用方面将有着巨大应用价值。     

RNAi技术在肿瘤基础研究中的应用

RNA干扰（RNAi）是内源性或外源性小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）引起的同源mRNA降解的细胞反应,自发现之初即成为科学研究的热点。至今短短十年的时间,RNAi技术已成为一种成熟的基因沉默工具,对生命科学研究产生了深远的影响。由于siRNA对目的基因的高度特异和高效率的抑制作用,使RNAi技术成为实验室用作基因沉默的常规技术,用于研究基因表达及调控,信号传导通路,药物的作用机制,肿瘤的临床治疗等诸多领域中,下面仅对其在肿瘤基础研究中的应用作一总结。     

RNA干扰技术在逆转肿瘤多药耐药中的应用研究

RNA干扰（RNAi）指与内源性mRNA编码区某段序列同源的双链RNA导入细胞时，该序列mRNA发生特异性的降解，并导致基因表达的沉默。小干扰RNA（siRNA）是RNAi作用的主要介质。其可经体外合成再转入细胞，也可通过各种载体内源性表达。RNAi为肿瘤的基因治疗提供新的思路，通过RNAi抑制肿瘤相关耐药基因的表达有望成为一种逆转肿瘤耐药新的策略。     

RNA干扰原理及应用研究进展

RNA干扰（RNAi）是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制,指内源性或外源性与靶基因的转录产物mRNA有同源互补序列的双链RNA（dsRNA）在细胞内特异降解该mRNA,从而致使特异性的基因有效封闭的过程,是一种序列特异性的转录后基因沉默（PTGS）。RNAi作为一种简单快速、特异、高效、经济、效果可预测的技术,具有明显的优势,它比反义核酸技术优越,比基因敲除简单,具有良好的应用前景。RNAi主要用于基因功能的分析、信号传导通路的研究、新药物的研究和开发、病毒感染和肿瘤的治疗等。     

RNA干扰技术及其应用

RNA干扰(RNAi)是一种由双链RNA诱发的基因沉默。在此过程中,与双链RNA有同源序列的信使RNA被降解,从而抑制了该基因的表达。从发现RNAi现象以来,对RNAi的了解已取得重大进展。包括从最初的,对其干扰模式的预测,到如今,能够精确了解RNAi在多个物种中调节基因表达的作用机制及多面性。RNAi技术也已经在很多领域成为研究基因功能的重要工具。     

RNA干扰抑制肝癌QGY细胞株hTERT基因表达的研究

目的 利用RNA干扰稳定筛选-抑制技术,抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达,探讨靶向hTERT基因RNAi对肝癌细胞增殖的抑制效应.方法 设计靶向hTERT基因的小干扰RNA,构建重组表达质粒pGenesil-shRNA-hTERT并导入人肝癌细胞系QGY细胞株,经G418筛选,建立稳定表达siRNA-hTERT的细胞株.采用real time RT-PCR、MTT和PCR-TRAP法同时检测pGenesil-shRNA-hTERT稳定抑制组和未处理QGY细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化.结果 在稳定表达pGenesil-shRNA-hTERT的QGY细胞株中,RNAi效力持续、稳定存在,hTERT的mRNA表达、端粒酶活性明显降低,瘤细胞增殖被抑制.结论 RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT的mRNA表达及肿瘤细胞增殖,是潜在的肿瘤基因治疗新方法.     

RNA干扰技术在妇科恶性肿瘤中的应用进展

RNA干扰(RNAi)是一种在动植物中广泛存在的通过双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平上诱导特异性序列基因沉默的过程。随着对RNAi研究的不断深入,其作用机制的逐步阐明,RNAi技术也日趋完善和成熟,作为一种新型研究工具已广泛应用于医学领域中,尤其在恶性肿瘤的研究中作用显著,有望成为攻克肿瘤、病毒性疾病及遗传性疾病的新手段。现就RNAi技术应用于妇科肿瘤的研究与治疗进行综述。     

RNA干扰技术及应用

目的综述RNA干扰(RNAi)技术的发现、作用机制、作用特点以及应用研究新进展。方法检索国内外有关RNAi技术研究资料并整理总结。结果RNAi技术是利用双链小片段RNA高效、特异性的降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内基因表达,使细胞出现靶基因缺失的表型。结论RNAi技术是一项较新的研究技术,可用于基因功能、基因治疗以及新的药物筛选等研究领域。     

RNA干扰技术的应用

RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)是与靶基因序列同源的双链RNA诱导的一种特异性的转录后基因沉默现象。目前 ,RNAi的作用机制已经基本明确 ,并显示了广阔的应用前景。RNAi技术作为新的基因阻断技术已经成功地应用于人类基因组功能的研究 ,同时提供了一条人类抗病毒治疗的新技术。另外 ,借助RNAi技术还有望在将来于基因水平对肿瘤进行治疗。     

RNA干扰技术的研究及进展

RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因静默机制。RNAi具有高效、稳定、特异性强等特点。RNAi为基因和蛋白质学等的研究提供了新的技术和方法,RNAi被发现10年来,在基础研究和临床研究领域已经得到了长足的发展,并且已经初步显示出其巨大的潜力。现主要对介导siRNA方法及RNAi技术在抗肿瘤、抗病毒、功能基因组学、药物筛选和遗传疾病研究等领域中的最新研究进展综述。     

RNA interference and its current application in mammals

Objective The aim of this review was to assess RNA interference (RNAi) and its possibility as a potential and powerful tool to develop highly specific double-stranded RNA (dsRNA) or small interfering RNA (siRNA) based gene-silencing therapeutics. Data sources The data used in this review were obtained from the current RNAi-related research reports. Study selection dsRNA-mediated RNAi has recently emerged as a powerful reverse genetic tool to silence gene expression in multiple organisms. The discovery that synthetic duplexes of 21 nucleotides siRNAs trigger gene-specific silencing in mammalian cells has further expanded the utility of RNAi in to the mammalian system. Data extraction The currently published papers reporting the discovery and mechanism of RNAi phenomena and application of RNAi on gene function in mammalian cells were included. Data synthesis Since the recent development of RNAi technology in the mammalian system, investigators have used RNAi to elucidate gene function, and to develop gene-based therapeutics by delivery exogenous siRNA or siRNA expressing vector. The general and sequence-specific inhibitory effects of RNAi that will be selective, long-term, and systemic to modulate gene targets mentioned in similar reports have caused much concern about its effectiveness in mammals and its eventual use as a therapeutic mordality. Conclusions It is certain that the ability of RNAi in mammals to silence specific genes, either when transfected directly as siRNAs or when generated from DNA vectors, will undoubtedly accelerate the study of gene function and might also be used as a potentially useful method to develop highly genespecific therapeutic methods. It is also expected that RNAi might one day be used to treat human diseases.     

MMP-9基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建小鼠基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体。方法针对小鼠MMP-9基因序列,利用公用网站按照RNAi序列设计原则,设计RNAi靶点序列,并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ酶切后的pGCL-GFP载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体,用插入鉴定引物进行PCR鉴定阳性克隆并测序,应用Western blot在293T细胞中鉴定MMP-9表达的下调作用。结果PCR鉴定和DNA测序结果显示合成的含MMP-9 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确;构建的MMP-9RNAi慢病毒载体能够抑制MMP-9的表达。结论应用基因工程技术,成功构建了小鼠MMP-9基因RNAi慢病毒载体,为应用于在体基因治疗创造了条件。     

应用RNA干扰抑制目的基因在小鼠体内表达

目的研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用。方法以PCR方法从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi)。将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况。结果RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达。结论RNAi技术能抑制目的基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具。