一种新的敏感的血吸虫皮试抗原的制备研究

<正> Tsang、陶义训证明用高浓度尿素提取的血吸虫卵水不溶物是一种高敏感性和特异性的抗原。对血吸虫成虫的水不溶性蛋白成分的提取尚未见报道。作者等采用一种不需特殊设备从废弃的虫渣中提取尿素溶解性抗原的简易方法,获得分子量较为均一的另一类大分子抗原(urea soluble schistosomajaponicum adult worm antigen,简称 JWU),并用于血吸虫病皮内反应试验,取得较满意的结果。现报道如下。     

日本血吸虫尿素溶解性抗原的应用研究

本文报告采用一种不需特殊设备,从废弃的日本血吸虫水不溶性沉渣中提取尿素溶解性抗原的简易方法,获得尿素溶解性虫卵抗原(JEU)和尿素溶解性成虫抗原(JWU),并应用于血吸虫皮内试验(ICT),以及 JEU 在间接血疑试验(IHA)中的敏感性、特异性和现场应用结果。日本血吸虫卵和成虫按常规方法提取水溶性抗原(SEA 或 AWA)后的沉渣分别用8MpH8.0尿素缓冲溶液,通过研磨、超声、反复冻融浸提,然后以     

一种新的血吸虫病诊断用皮试抗原的研究

<正> 对血吸虫成虫提取水溶性抗原(AWA)后的虫渣,用 BM 尿素为蛋白质裂解剂,进一步分离具有抗原性的结合蛋白成分(JWU),抗原得量可增加1.25倍。应用 JWU 制备皮内反应诊断用抗原,试验用浓度为1μg/ml,对1,395例血吸虫病人和健康人进行检测,同时用 AWA 作平行对照。对240例血吸虫病人检出率为97.5%,对680例健康人群的特异性为98.5%,经统计处理与 AWA 无显著差异。但 JWU 皮丘直径均值1.43cm 较 AWA 皮丘均值1.33cm 大。对58例肝吸虫病人未发现交叉反应,对36例肺吸虫病人的交叉反应为5.56%,低于 AWA 的8.33%。提取 JWU 并将其用于皮内反应试验,国内外尚未见报道。目前这种皮试抗原已批量生产,供应流行区现场用于普查血吸虫病过筛试验。     

广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原分析及其诊断价值的探讨

目的分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解,与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体。结果SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32000Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少。两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少。结论广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32000Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原。     

日本血吸虫微粒体抗原的研究 Ⅲ.成虫微粒体抗原在ELISA中的应用

<正> 1982年我们用差速离心法从日本血吸虫成虫中分离得到的微粒体粗抗原(JAMAC)用于ELISA表明其抗原活力远比成虫可溶性抗原(JSAA)为高。根据中美医药卫生科技合作协议,同年10月美国疾病控制中心曾凯(V.Tsang)来我所共同对JAMAC做进一步提取和分离,得到了尿素溶解部分(JMC)和提纯的微粒体抗原(JAMA)。用ELISA对血吸虫抗体进行检测时,JAMAC、JMC和JAMA三种抗原均呈现高的敏感性和特异性。由于JAMAC的制备方法较简便,无需柱层分离步骤,我们采用这一抗原对     

日本血吸虫与卫氏并殖吸虫抗原的研究Ⅰ.交叉反应组分的免疫学表现

<正> 在我国血吸虫流行地区常伴有肺吸虫共同流行。由于这两种吸虫的生物学特性非常相似,因此,在采用可溶性抗原进行免疫方法诊断血吸虫病时,往往由于肺吸虫感染者血清中抗体的干扰而出现假阳性反应。曾报道二者出现交叉反应的范围在3～8.8％不     

分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> 本文用斯氏肺吸虫代谢抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,首次成功地获得了2株分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞B_1-3B_4和C_2-3C。 在培养皿中收集斯氏肺吸虫代谢产物,经透析、     

分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> 本文用斯氏肺吸虫代谢抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,首次成功地获得了2株分泌抗斯氏肺吸虫代谢抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞D_1—3B_4和G_2—3C_4。 在培养皿中收集斯氏肺吸虫代谢产物,经透析、浓缩,测蛋白含量为2.4mg/ml。用此抗原(0.1ml)与等量福氏完全佐剂经腹腔及皮下免疫BALB/c小鼠,每隔3周一次,共三次。末次免疫后10天用单纯代谢抗原0.1ml注入尾静脉一次,融合前3天再从尾静脉加强免疫一次。取对数生长期的SP2/0小鼠骨髓瘤细胞和免疫小鼠脾细胞以1:5比例混合,用     

日本血吸虫与卫氏并殖吸虫抗原的研究Ⅱ.EITB法在血吸虫病免疫诊断中的应用

<正> 血吸虫流行区常伴有肺吸虫流行,由于二者具有共同抗原,因此用免疫法诊断血吸虫病时,常由于患肺吸虫病而出现假阳性。已报道的交叉反应率为3～8.8形不等。近几年出现的EITB法具有敏感、特异性强的优点,国外有学者用此法分析曼氏血吸虫抗原,认为曼氏血吸虫抗原中31Kd的     

三峡库区肺吸虫病与血吸虫感染ELISA检测的交叉反应研究

目的探索三峡库区肺吸虫病与血吸虫病免疫反应的交叉反应率。方法在酶联免疫吸附试验（ELISA）标准条件下进行严格质量控制后,采用ELISA方法分别用肺吸虫成虫抗原检测血吸虫病人阳性血清,用血吸虫虫卵抗原检测肺吸虫病人阳性血清．观察二者间的交叉反应率。结果在质控条件下ELISA的检测结果显示,80例三峡库区肺吸虫患者血清经血吸虫虫卵ELISA检测阳性19例,交叉反应率为23．75％。30例血吸虫患者血清经肺吸虫成虫抗原检测阳性11例,交叉反应率为36．67％。二者间差异无统计学意义（χ^2=1．835,P〉0．05）。结论三峡库区肺吸虫病与血吸虫病ELISA检测有较高的交叉反应率,需建立肺吸虫和血吸虫病的特异性免疫学检测方法,减少交叉反应。对三峡库区上下游的血吸虫病流行区传入库区的血吸虫病作出特异诊断、早期预防,以达到控制血吸虫病在库区流行、扩散的目的。     

应用卵巢癌腹水免疫复合物解离抗原(OC_(41))制备单克隆抗体及其OC_(41)特性的研究

应用含有未知肿瘤抗原制备单克隆抗体(McAb),可能是难以获得高特异性抗肿瘤McAb的原因之一。我们从卵巢上皮癌患者腹水中提取免疫复合物(IC),并将其解离为抗体和抗原(OC_(41))免疫荧光证实,解离出的自身抗体与卵巢癌相关;而解离出     

系统性念珠菌病患者抗原血症的研究——用两种方法提取的白色念珠菌甘露聚糖制备的抗多糖血清的比较

为了迅速、正确地诊断系统性念珠菌感染,以利早期治疗,近年来许多学者用高效抗血清,结合高度敏感方法检测体液中的可溶性菌体表面特异性多糖抗原——甘露聚糖(Mannan,Mn)。我们在前文中报道了白色念珠菌(简称白念菌)Mn抗原的提取法并与BSA偶联,制成了M-B偶联抗原(简称偶联抗原)。此抗原的纯度很高,对家     

胃癌单抗MG5相应抗原的纯化及分析

作者报告鼠抗人胃癌单克隆抗体MG5相应抗原的纯化和初步鉴定。首先收集胃癌患者转移性腹水癌细胞。并制备可溶性抗原提取液。用concanavalin A(Con A)Sepharose 4B亲和层析法分离提取胃癌细胞糖蛋白成份后,再用MG5-Sepharose4B免疫亲和层析法纯化单抗MG5相应抗原。经高碘酸氧化,电泳脂蛋白染色SDS-PAGE和免疫印渍等实验分析,证实MG5相应抗原是一种含3个亚单位的糖蛋白,分子量分别为68kD、52kD和44kD,抗原决定簇存在于糖链上,免疫分析提示MG5相应抗原是一种新的胃癌相关抗原。     

被动血凝试验检测人体结核的抗结核杆菌抗体

本文报告了用被动血凝(PHA)试验检测人体抗结核抗体的实验研究。为了比较分析,作者采用从结核菌制得的三类抗原来致敏经两次醛化固定(DAS)的红细胞:可溶性抗原(MSA)、三氯醋酸沉淀的胞质抗原(TCA-PA)和纯化蛋白衍生物(PPD)。运用了三种试验方法:除PHA外还有酶联免     

分泌旋毛虫McAb杂交瘤细胞株的建立

<正> 用旋毛虫肌幼虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞NS-1系融合,用50％的PEG(MW4,000)作融合剂,融合率达B2.8％。用ELISA间接法和环蚴沉淀试验检测培养上清,共获得抗体     

巨细胞病毒特异性淋巴细胞转化试验的研究

为探讨巨细胞病毒(CMV)的致病机理,本文采用CMV特异性淋巴细胞转化试验(CMV-LTT)。比较CMV甘氨酸提取抗原和CMV细胞结合抗原(CMV-FF抗原)对致敏淋巴细胞刺激的结果,发现后者转化值明显高于前者(0.02>P>0.01),CMV-FF抗原最适工作浓度为1×10~5细胞/ml;在培养液中以自身血浆代替小牛血清对提高敏感淋巴细胞体外增殖效果显著(0.02>P>0.01)。结果提示:CMV-LTT特异性高,与其它疱疹病毒(HSV、VZV)抗原无交叉反应性;用本法检测94名健康成人外周血标本,其平均转化值血清抗体阳性者(77例)17.21±9.25,血清抗体阴性者(17例)1.60±1.20。     

淋巴细胞电泳试验检测细胞免疫反应性

<正> Field等和Pritchard等发展了巨噬细胞电泳试验(MEM),来检测淋巴细胞再次接触抗原的反应性。我们曾以脑胶质瘤碱性蛋白(GBP)作为抗原,应用MEM进行脑瘤和其他恶性肿瘤诊断,表明有一定的意义。Shenton等成功地用鞣化绵羊红细胞电泳(TSEEM)代替了MEMC,国内赵斌华     

被动血凝试验检测结核杆菌抗体的标准化

被动血凝(PHA)试验是较早用于检测结核杆菌抗体的方法之一,但由于不够标准化,所得结果各异。目前不少发展中国家需要能大规模应用的简便而敏感的血清学方法来诊断结核。为此,本文作者标准化了一种检测结核菌免疫动物抗结核抗体的微量PHA试验。他们对以往的方法稍加改进,试验中所用的致敏红细胞是先经丙酮乙醛和戊二醛二次醛化固定(DAS),再经结核杆菌可溶性抗原(MSA)致敏的羊红细胞。试验时,用在制备MSA过程中的沉淀抗原加福氏完     

Tamm-Horsfall糖蛋白单克隆抗体制备及其临床应用

用0.58mol/L NaCl沉淀提取Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)制备了三株抗THP单克隆抗体(McAb)。免疫印迹技术(Immunoblotting Technigue,IBT)证明这些McAb特异性地和94kD THP抗原结合,ELISA抑制试验表明三株McAb识别THP抗原的不同位点。用McAb双夹心ELISA法测定尿THP的含量,表明尿THP含量与血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)呈显著负相关(P<0.01),与内生肌酐清除率(Ccr)呈明显正相关(P<0.01),BUN、Scr、Ccr正常的各种肾病尿THP含量无明显异常(P<0.05)。测定尿THP含量可作为判断肾功能损害程度的良好指标。     

五种抗ENA抗体同时检测方法的建立及其意义

制备出一种含五种可提取性核抗原(ENA),用免疫双扩散法一次可同时检测抗Sm,抗RNP,抗SSA,抗SSB及抗Jo-1五种自身抗体。免疫印迹法证明所提取的ENA抗原对五种标准抗体具有抗原活性。本方法在琼脂糖板中加入3.5％的PEG-6000及用考马斯亮蓝染色,明显增加了沉淀线的清晰度,提高了抗ENA抗体检测的敏感性。