细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究

低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂最区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂最照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.     

低剂量辐射超敏感性分子机制的研究进展

0引言低剂量辐射超敏感性(hyper-radiosensitivity,HRS)是细胞对很低剂量照射(约0.02~0.50Gy)较敏感而对其后剂量区域(0.50~1.00Gy)敏感性下降的现象[1]。该现象首先于1963年从玉米低于0.5Gy剂量的照射研究中被证实,它表现为玉米接受低剂量(≤0.5Gy)γ射线照射时,存在超敏感性,诱导的花粉突变及致死性均比剂量高时敏感。随后,在许多离体和在体实验中均证实了该现象的存在,目前就已知有超过40种细胞系存在着HRS[2]。对HRS进行研究有着深刻的现实意义,但对其发生的机理目前尚不十分明确。迄今为止,对HRS机制的研究,主要是从细胞凋亡、细胞周期调控以及DNA断裂双链(DNA DS-Bs)的修复这三个方面来进行;一些基因、蛋白,如p53,bcl-2,c-myc,共济失调毛细血管扩张突变(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)激酶和DNA依赖的蛋白激酶(DNA-dependent protein kinase,DNA-PK)等被认为可能与HRS的发生有关。     

丁酸钠诱导HT 29结肠癌细胞凋亡及其对 p 53靶基因的调控

目的：〖HT5"SS〗分析丁酸钠对HT29结肠癌细胞p53三个主要靶基因（p21waf1,bax和gadd45）的调控,并探讨其作用机制。〖HT5W〗方法：〖HT5"SS〗HT29细胞常规培养在含有和不含有丁酸钠的培养液中。分别用MTT和流式细胞仪(flow cytometry,FCM) 检测细胞增殖和细胞周期分布,通过形态学观察、亚G1峰的检测和AnnexinVFITC 双标记观察细胞凋亡情况;RTPCR和Western blot分别检测丁酸钠对p21waf1,bax和gadd45三种基因mRNA和蛋白表达水平的影响。〖HT5W〗结果：〖HT5”SS〗丁酸钠以剂量和时间依赖的方式抑制HT29细胞增殖和诱导凋亡,并阻滞细胞于G1期。RTPCR 和Western blot结果显示丁酸钠可以促进p21waf1和bax基因mRNA和蛋白的表达,而对gadd45基因的表达无明显影响。〖HT5W〗结论：〖HT5”SS〗2.5 mmol/L以上浓度的丁酸钠可以抑制HT29细胞增殖并诱导凋亡,该作用可能通过上调p21waf1和bax基因表达而实现。     

低剂量辐射超敏感性的分子机制及临床应用进展

摘 要：全文对近年来低剂量辐射超敏感性（low dose hyper- radiosensitivity,HRS）的体内及体外实验,从细胞周期调控、细胞凋亡、DNA损伤修复、辐射诱导的旁观者效应等四个方面的分子机制进行探讨,并对HRS临床意义进行阐述和展望,以期为临床研究提供参考。     

c-erbB-2-siRNA对结肠癌HT-29细胞放射敏感性影响的研究

目的:观察单纯放射及放射联合应用siRNA对细胞增殖、细胞周期、凋亡和放射增敏性的影响.方法:分别用X射线单纯放射和放射合并转染c-erbB-2-siRNA质粒的结肠癌细胞(分别分为3组pGenesil-erbB-2实验组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组),MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖和放射敏感性,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:6、8GyX射线照射组较0、2和4 Gy组的吸光度A值分别为0.314±0.035、0.117±0.009和0.721±0.044、0.608±0.018、0.584±0.041,6、8 Gy组显著低于0、2和4 Gy组,P=0.000 1;放射合并c-erbB-2-siRNA组在0、2、4、6和8 Gy照射组的吸光度A值分别为0.741±0.024、0.611±0.071、0.538±0.041、0.245±0.029和0.117±0.011,均显著低于其他两组,P=0.000 1.4、6、8组和0、2 Gy组G2/M期细胞数分别为12.19±0.41、15.02±0.38、18.56±0.94及6.50±0.43、5.26±0.71,前者显著高于后者,P=0.000 1;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、转染试剂对照组及阴性质粒对照组G0/G1期细胞数分别为79.93±0.79、69.34±1.17和69.40±0.84,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.0、2、4、6和8 GyX射线照射诱导HT-29细胞发生凋亡的无明显差别,P=0.065;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组的细胞凋亡率分别为19.21±3.54、6.82±0.74和7.56±0.35,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.放射合并c-erbB-2-siRNA组的放射增敏比为1.283和1.242,均＞1.结论:放射联合应用c-erbB-2-siRNA对结肠癌HT-29细胞具有抑制细胞增殖、诱导凋亡和放射增敏作用.     

低剂量超敏感性在分次放射治疗中的意义

目的：分析低剂量放射超敏感性现象对分次放射治疗剂量效应关系的影响。探讨低剂量超敏感性的临床意义。方法：搜集文献中相关低剂量超敏感性的数据，选择文献的标准是最低照射剂量至少达0．1Gy，1Gy以内剂量分辨率≥0．2Gy，对文献数据进行拟合，然后以拟合曲线为基础计算分次效应关系。结果：（1）根据低剂量区超敏感性程度的大小和中高剂量区对放射线的耐受性将细胞分为4种类型；A类低剂量超敏感性不明显，高剂量放射抗拒，B类低剂量超敏感性明显，高剂量放射抗拒，C类低剂量超敏感性不明显，高剂量放射敏感，D类低，高剂量均放射敏感，（2）分次效应曲线是一条多相曲线，在总剂量不变的条件下，曲线在低分次剂量区域内随分次剂量增加而明显下降，在某一分次剂量（V79）细胞约为0.2-0.3Gy）时达到一个相对最低值，区域内剂量效率较高；之后曲线在分次剂量增在时反而下降变缓甚至有所上，区域内剂量效率较前下降，超过前述剂量段（0.5-1.0Gy）后曲线随分次剂量的增大而迅速下降，剂量效率遵循IQ模式单调增加。（3）按照分次效应存活曲线对不同分割模式的评价结果，分次剂量很低的超分割方式利用细胞低剂量超敏感性，适用于B、D类细胞，超分割希望通过降低分次量同时提高总量来达到提高疗效的目的，但降低分次量同时可能会降低剂量剂量效率，因此是否能提高疗效并不确定；常规分割在中、高剂量分次剂量水平上在提高分次效率和保护正常组织之间寻找平衡，高剂量分割在利用放射线剂量效率上很理想，但需要特殊方法（如适形照射、重粒子照射等）来降低正常组织的受量，适用于A、C类细胞。结论：低剂量超敏感性现象展示的低剂量区剂量效率的微小波动在分次照射情况下被指数性放大，会使分次效应存活曲线产生明显的多相性变化，对分次模式的评估选择，正常组织的保护等方面均有一定的意义。     

低剂量超敏感性的研究现状及其在放射治疗中的意义

低剂量超敏感性是指细胞对很低剂量照射(约＜0.50Gy)较敏感及对其后的剂量区域(0.5Gy～1.0Gy)敏感性下降的现象.20世纪60年代,研究人员在进行玉米类植物照射研究中首次发现:用低剂量(＜0.5Gy)的γ射线照射时存在超敏感性,并且诱导的花粉突变及致死率均比高剂量时高.     

二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞周期的阻滞作用

[目的]探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞周期的阻滞作用及其分子机制.[方法]应用MTF法及细胞计数法测量HT-29细胞生长抑制,流式细胞术检测细胞时相分布,免疫细胞法测定p21、C-myc、Cyclin E表达.[结果]MTT法显示,不同浓度DADS作用HT-29细胞12、24、48h后,细胞生长抑制率及细胞群体倍增时间呈浓度、时间依赖性增加.流式细胞仪分析,30、60pmol/LL DADS阻滞HT29细胞在G1期,与对照组相比,可使G1期细胞增加约2倍,而90、120μmol/L DADS显著地将细胞阻滞在G2/M期.免疫细胞化学分析表明在细胞周期阻滞的同时有p21wafl蛋白表达上调,Cyclin E、C-myc蛋白表达下降.[结论]DADS对HT-29细胞的抑制增殖作用可能与细胞周期阻滞有关,DADS对HT-29细胞周期阻滞的分子机制可能与调节p21wafl、Cyclin E、C-myc表达相关.     

结肠癌HT29细胞的相关分子表达及与多药耐药的相关性

目的:探讨结肠癌HT29细胞的相关分子表达及与多药耐药的相关性。方法:选择人结肠癌HT29细胞株进行三维培养,采用RT-PCR与免疫组化检测整合素ανβ的表达情况,同时在三维培养和整合素ανβ3阻断型抗体加入条件下对细胞的多药化疗耐药性进行检测。结果:结肠癌HT29细胞在三维培养24h后,部分聚集成由数个细胞组成的细胞团,电镜观察多细胞球球体呈较规则的致密的球形结构,多细胞球球体模型构建成功。结肠癌HT29细胞多细胞球球体中整合素ανβ3基因的表达比一般平面培养细胞高,整合素β3蛋白、整合素αν主要定位于胞浆,在多细胞球球体中表达明显高于普通平面培养细胞。HT29细胞多细胞球球体+整合素ανβ3抗体组在5-氟尿嘧啶和奥沙利铂作用后48h的细胞凋亡率为0.31±0.04,细胞坏死率为0.52±0.02;而HT29细胞多细胞球球体组的细胞凋亡率与坏死率分别为0.14±0.03和0.21±0.03,对比差异明显(P<0.05)。结论:结肠癌HT29多细胞球球体中的整合素ανβ3在基因与蛋白水平都呈现表达升高的趋势,可能是细胞多药耐药产生的重要原因。     

大肠癌细胞辐射敏感性的蛋白组学研究

背景与目的: 大肠癌细胞系SW480与LoVo具有不同的辐射敏感性,我们运用蛋白组学技术筛选大肠癌细胞辐射敏感相关的蛋白.方法: 采用SELDI-TOF蛋白芯片技术分别对经0 Gy、2 Gy、4 Gy和6 Gy照射后24 h的SW480与LoVo细胞进行蛋白质谱分析.结果: LoVo细胞在平均质荷比分别为2 478.24、4 521.30、5 383.82和8 454.03的蛋白质峰值随辐射剂量增加而逐渐下降;SW480细胞在平均质荷比分别为5 655.29、7259.53的蛋白质峰值随辐射剂量增加逐渐升高,在平均质荷比分别为15 829.02,17 859.47的蛋白质峰值随辐射剂量增加呈梯度下降.结论: 大肠癌细胞辐射敏感性的预测可以通过蛋白质水平来体现.     

RNA干扰RhoBTB1表达促进结肠癌HT29细胞增殖、抑制其凋亡的相关研究

目的:探究RNA干扰RhoBTB1基因表达对结肠癌HT29细胞增殖、凋亡的影响。方法:采用Lipofectamine 2000将siRNA RhoBTB1或siRNA NC转入HT29细胞中，实验分为Control组、转染对照组和siRNA Rho组，噻唑蓝（MTT）和流式细胞术分别检测细胞的的活力和凋亡率，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中RhoBTB1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量。结果:与对照组相比，HT29细胞转染siRNA RhoBTB1后，细胞中RhoBTB1蛋白的表达量显著低于对照组（P<0.05），细胞活力显著升高（P<0.05），凋亡率显著降低（P<0.05），Cleaved Caspase-3、Bax蛋白水平明显降低(P<0.05)，Bcl-2蛋白水平显著增加（P<0.05）。结论:RNA干扰RhoBTB1表达促进结肠癌HT29细胞增殖，抑制其凋亡，可能通过调节线粒体凋亡通路相关蛋白的表达量发挥作用。