压力超负荷早期大鼠心肌组织转化生长因子β1及c—myc和c-jun mRNA表达的差异

目的：观察转化生长因子β1，c-myc和c-jun癌基因mRNA在压力超负荷早期大鼠心肌中的表达。 方法：实验于2004-11／2005—07在华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科老年医学实验室完成。选择雄性Wistar大鼠50只，随机数字表法分为压力超负荷组和假手术组，每组25只。采用腹主动脉缩窄法建立左室压力超负荷模型，分子杂交系列观察心肌组织转化生长因子β1，c—myc和c-jun癌基因mRNA的变化，并用计算机图像分析技术定量分析，以假手术组作对照. 结果：纳入动物50只，均进入结果分析：①压力超负荷组转化生长因子β1mRNA术后4h开始升高，8h达峰值，48h降至术前水平（分别为1．08&;#177;0．30，5．83&;#177;0．40，0．90&;#177;0．61，0．86&;#177;0．22）；c-myc和c-jun癌基因mRNA均于术后8h开始升高，24h达峰值，48h降至术前水平（c-myc mRNA分别为4．25&;#177;0．97，5．94&;#177;1．42，0．80&;#177;0．43，0．68&;#177;0．11；c-jun mRNA分别为4．36&;#177;0．55，5．91&;#177;1．66，0．93&;#177;0．35，0．79&;#177;0．12）。②假手术组各时间点转化生长因子β1,c-myc，c-jun癌基因mRNA斑点积分光度均无明显差别。 结论：压力超负荷早期大鼠心肌组织中转化生长因子β1 mRNA先于c-myc及c-jun mRNA升高，提示转化生长因子β1可能是比c-myc及c-jun更早表达的信号因子。     

心脏超负荷时局部碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β1mRNA及其蛋白表达水平的临床研究

目的 探讨容量或压力超负荷患心肌局部碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）和转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂｅｔａ１,ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ及其蛋白表达水平在心室重构发病中的作用。方法 采用超声心科和术后病理检查结果证实的３２例心髯肥厚患分为容量超负荷组（ＶＧ）和压力超负荷组（ＰＧ）各１６例;以免疫组织化学,原位杂交和图像分析半定量的方法检测心肌内ｂＦＧＦ、ＴＧＦβｍＲＮＡ及其蛋白表达水平;以ＨＥ或天狼星红染色检测心肌组织和心肌间质纤维性胶原Ⅰ、Ⅲ型改变。结果 心脏空量或压力超负荷时心肌细胞大小和体积、心肌细胞外间质纤维性胶原,尤其是Ⅲ型胶原,心肌局部的ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ及其蛋白表达水平均明显增加,结     

川芎嗪和siRNA沉默转化生长因子β1干预大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子的表达

背景：作者前期研究发现川芎嗪可以通过抑制肝星状细胞的增殖、阻抑p38MARK信号通路、下调结缔组织生长因子的表达等多途径发挥抗肝纤维化的作用。一般认为转化生长因子β1是促进纤维化发生最重要的细胞因子,结缔组织生长因子是转化生长因子β1的下游效应介质,siRNA靶向抑制转化生长因子β1可能成为治疗肝纤维化的新方法。目的：观察川芎嗪及化学合成的siRNA转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法：体外培养大鼠肝星状细胞,从3条siRNA转化生长因子β1中筛选一条有效的基因沉默片段,然后利用脂质体转染试剂共同转染培养24h的细胞作为转染组,并设计空白对照组、转染试剂组、川芎嗪组及联合治疗组。结果与结论：与空白对照组相比,转染组、川芎嗪组、联合治疗组Ⅰ、Ⅲ型胶原及结缔组织生长因子mRNA表达均下调（P〈0.05）。在转染组、川芎嗪组及联合治疗组,结缔组织生长因子蛋白表达均下调（P〈0.05）;培养上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量均降低（P〈0.05）。结果表明,siRNA沉默转化生长因子β1基因能下调结缔组织生长因子的表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。川芎嗪也能下调结缔组织生长因子的表达,但对Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的抑制作用更加显著,提示川芎嗪抗肝纤维化可能是多种作用靶点。     

靶向转化生长因子β1的siRNA真核表达载体的构建及鉴定

[目的]构建靶向转化生长因子β1（TGFβ1）小干扰RNA（siRNA）的真核表达载体.[方法]设计二个siRNA作用靶点,体外合成的相应双链DNA被插入pSilencer-2.1质粒中,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序.采用脂质体转入HSC-T6细胞中,利用RT-PCR法和western-blot分别检测TGFβ1 mRNA和蛋白的表达.[结果]靶向TGFβ1 的siRNA-a和siRNA-b二个表达质粒是成功构建; 与无关对照组相比,siRNA-b组对TGFβ1mRNA和蛋白表达均明显下调（ P 〈0.01）,siRNA-a组无明显下调（ P 〉0.05）.[结论]成功构建了靶向TGFβ1 基因的siRNA表达质粒,为进一步研究其阻断肝纤维化打下基础.     

川芎嗪和siRNA沉默转化生长因子β1干预大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子的表达

背景:作者前期研究发现川芎嗪可以通过抑制肝星状细胞的增殖、阻抑p38MARK信号通路、下调结缔组织生长因子的表达等多途径发挥抗肝纤维化的作用。一般认为转化生长因子β1是促进纤维化发生最重要的细胞因子,结缔组织生长因子是转化生长因子β1的下游效应介质,siRNA靶向抑制转化生长因子β1可能成为治疗肝纤维化的新方法。目的:观察川芎嗪及化学合成的siRNA转化生长因子β1对大鼠肝星状细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法:体外培养大鼠肝星状细胞,从3条siRNA转化生长因子β1中筛选一条有效的基因沉默片段,然后利用脂质体转染试剂共同转染培养24h的细胞作为转染组,并设计空白对照组、转染试剂组、川芎嗪组及联合治疗组。结果与结论:与空白对照组相比,转染组、川芎嗪组、联合治疗组Ⅰ、Ⅲ型胶原及结缔组织生长因子mRNA表达均下调(P<0.05)。在转染组、川芎嗪组及联合治疗组,结缔组织生长因子蛋白表达均下调(P<0.05);培养上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量均降低(P<0.05)。结果表明,siRNA沉默转化生长因子β1基因能下调结缔组织生长因子的表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。川芎嗪也能下调结缔组织生长因子的表达,但对Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的抑制作用更加显著,提示川芎嗪抗肝纤维化可能是多种作用靶点。     

1型糖尿病大鼠心肌病变及转化生长因子β1和结缔组织生长因子表达的变化及意义

目的探讨不同病程糖尿病模型大鼠心肌的病理变化及转化生长因子β1（TCF-β1）和结缔组织生长因子（CTCF）的表达变化及意义。方法腹腔注射链尿佐菌素（65mg／kg）建立SD大鼠1型糖尿病模型,分别于4、12、24周检测心肌羟脯氨酸含量（HPC）,Masson染色观察胶原纤维容积分数（CVF）及血管周围胶原面积（PVCA）,用免疫组织化学法对心肌胶原蛋白（Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ）、TGF—β1和CTGF在心肌的分布及表达进行半定量分析,心肌光镜与透射电镜观察,并与同龄正常大鼠进行比较。结果①与对照组相比,糖尿病组大鼠心肌纤维化指标HPCI4周：（134．67±37．86）、（184．30±31．26）μg/g,12周：（151．17±21．59）、（202．80±40．06）μg／g,24周：（169．67±48．27）、（250．17±53．96）μg/g,P均〈0．05]、CVF[4周：（3．38±0．70）％、（5．68±0．93）％,12周：（4．76±1．34）％、（11．17±1．65）％,24周：（6．08±0．88）％、（13．36±0．85）％,P均〈0．05]、PVCA[4周：（26±13）％、（58±18）％,12周：（36±15）％、（93±33）％,24周：（54±44）％、（154±57）％,P均〈0．05]、Collagen Ⅰ[4周：（1．33±0．33）×10^3、（4．55±0．74）×10^3,12周：（2．16±0．11）×10^3、（6．06±0．73）×10^3,24周：（3．00±0．32）×10^3、（7．20±0.18）×10^3,P均〈0．05）、Collagen Ⅲ[4周：（1．56±0．23）×10^3、（3．42±1．40）×10^3,12周：（2．93±0．40）×10^3、（5．58±1．29）×10^3,24周：（3．25±0．26）×10^3、（4．20±0．17）×10^3,P均〈0．05]表达均明显增高。电镜发现糖尿病组心肌细胞肌丝稀疏,线粒体肿胀,间质胶原增生。②与对照组相比,糖尿病组TGF-β1[4周：（1．15±0．14）×10^3、（2．13±0．49）×10^3,12周：（2．96±0．24）×10^3、（5．28±0．24）×10^3,24周：（3．25±0．65）×10^3、（4．41±0．73）×10^3,P〈0．05]和CTGF的表达[4周：（2．28±0．86）×10^3、（5．98±1．38）×10^3,12周：（3．92±0．91）×10^3、（6．47±0．50）×10^3,24周：（4．54±1．01）×10^3、（7．85±1．45）×10^3,P均〈0．05]表达均明显增高。TGF-β13个月时达高峰,6个月时减少;CTGF随病程进展逐渐增高（F=4．06,P〈0．05）。结论早期糖尿病大鼠模型已出现心肌纤维化改变,糖尿病心肌纤维化与TGF-β1、CTGF表达增强有关。     

中药补肾复方对压力负荷增加大鼠左心室心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1表达的影响

目的：观察中药补肾复方对压力负荷增加致充血性心力衰竭大鼠左心室心肌Ⅰ，Ⅲ型胶原和转化生长因子β1表达的影响。 方法：实验于2005—03／10在解放军南京军区南京总医院动物实验中心完成。①选用成年SD大鼠64只。随机抽取12只大鼠作为假手术组：只分离腹主动脉，不用银夹缩窄，双蒸水灌胃，1．5g／kg，1次／d，连续4周，其余52只大鼠分离腹主动脉，用银夹缩窄，以左心室心肌质量指数≥0．3％，为造模成功，本组造模成功33只。将其按随机抽签法分为3组，每组11只：模型组（术后常规喂养4周，然后烈蒸水灌胃，15mL／kg，1次／d，连续4周），中药复方大、小剂量组[术后4周，分别用含生药24，12g／kg中药复方水煎浓缩液（中药复方由淫羊藿、熟地、川芎、丹参等中药组成，由解放军南京军区南京总医院制剂室提供，制成水煎液，浓缩至含生药1．6kg／L）15，7．5mL／kg,1次／d，连续灌胃4周1。术后至给药前均常规喂养。②用药4周后，称重左心室质量及体质量，计算左心室心肌质量指数[左心室质量（mg）／体质量（g）为左室质量指数]。采用免疫组织化学方法观察左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1蛋白表达。③计量资料差异比较采用完全随机方差分析，组问两两比较用t检验。 结果：造模失败21只，假手术组大鼠12只及造模成功大鼠31只（假手术组12只，模型组10只，中药复方大剂量组11只．中药复方小剂量组10只）进入结果分析。①大鼠左室心肌Ⅰ，Ⅲ型胶原含量：给药4周后，模型组明显高于假手术组（P〈0．01）；中药复方大、小剂量组明显低于模型组（P〈0．01）。②大鼠左心室心肌质量指数和转化生长因子β1蛋白表达：给药4周后模型组明显高于假手术组（P〈0．01）：中药复方大、小剂量治疗组明显低于模型组（P〈0．01）。 结论：中药补肾复方能逆转压力负荷增加大鼠左心室心肌肥厚和心肌纤维化，其作用机制可能是通过抑制心肌转化生长因子β1蛋白过度表达，减少细胞外基质胶原合成。     

大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1 mRNA表达变化及甲基强的松龙的干预作用

目的:观察大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1mRNA表达的变化,及甲基强的松龙对其影响。方法:实验于2003-06/2004-03在上海市药物工业研究院与解放军第二军医大学长海医院病理实验室完成。选择雄性SD大鼠45只,随机分为空白对照组5只、损伤对照组(6,24h,3,7d)、甲基强的松龙组(6,24h,3,7d),每时间点5只。制作脊髓损伤模型后,损伤对照组及空白对照组给予等渗盐水,甲基强的松龙组给予甲基强的松龙(30mg/kg),分别于伤后6,24h,3,7d切取损伤及临近部位脊髓组织,运用原位杂交技术,二氨基联苯胺显色,苏木精轻度复染。采用光学显微镜进行观察,高倍镜下(200倍),随机选择5个高表达视野,记数每个高倍镜视野下阳性细胞的百分比(阳性细胞数/细胞总数)。细胞胞浆内呈棕黄色为转化生长因子β1mRNA。观察甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤转化生长因子β1mRNA表达的影响。结果:纳入动物45只,均进入结果分析。①脊髓损伤后甲基强的松龙组转化生长因子β1mRNA的表达阳性细胞数与损伤对照组相比明显降低眼损伤对照组伤后6,24h,3,7d分别为(8.91±0.82)%,(28.27±1.10)%,(42.09±0.93)%,(45.24±0.85)%,甲基强的松龙组伤后6,24h,3,7d分别为(7.93±0.40)%,(20.36±1.10)%,(31.34±0.62)%,(16.62±0.97)%演。②阴性对照未见转化生长因子β1mRNA阳性表达。甲基强的松龙组和损伤对照组均有转化生长因子β1mRNA阳性表达,甲基强的松龙组同损伤对照组相比,各时段转化生长因子β1mRNA表达均有减少,且差异明显。结论:甲基强的松龙能抑制大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1mRNA的表达,说明甲基强的松龙对脊髓损伤的治疗作用不是通过转化生长因子β1来实现的。     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌组织转化生长因子β1和血浆血管紧张素Ⅱ的影响

目的:研究葛根素对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和血浆血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响.方法:采用ISO[5 mg/(kg·d)×14 d]皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素100 mg/(kg· d)腹腔注射或卡托普利100 mg/(kg·d)灌胃,实验共8周.32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组8只;葛根素组8只;卡托普利组8只;葛根素+卡托普利组8只.实验末检测大鼠左室射血分数及缩短分数,计算左心室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色,分别测算胶原容积积分,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度,RT-PCR检测TGF-β1 mRNA水平和Western Blot测定TGF-β1蛋白,测定血浆Ang-Ⅱ浓度.结果:与模型组比较,葛根素和卡托普利均改善大鼠左室收缩功能(LVEF％,FS％,P＜ 0.01),减少左心室质量指数(P＜0.01)及羟脯氨酸浓度(P＜0.01),减少左室心肌组织TGF-β1(P＜ 0.05),降低血浆Ang-Ⅱ浓度(P＜0.01).以葛根素+卡托普利最显著(P＜0.01).结论:葛根素改善左心室收缩功能,抑制左室心肌组织中TGF-β1表达和降低血浆Ang-Ⅱ,葛根素与卡托普利合用作用更强.     

肺纤维化模型大鼠肺组织中转化生长因子β1及转化生长因子β1mRNA的表达及黄芪莪术合剂的干预效应

目的:分析中药黄芪莪术合剂对博莱霉素所致大鼠肺间质纤维化的干预作用。方法:实验于2002-10/2003-02在天津中医药大学动物实验室完成。①健康SD大白鼠60只,正常饲养1周后,随机分为正常对照组6只、模型组18只、黄芪莪术合剂组18只、强的松组18只。②经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,黄芪莪术合剂组给予40.5mg/L黄芪莪术合剂,强的松组给予0.63g/L强的松盐水溶液,均采用灌胃方式给药,每次1.5mL,1次/d。正常对照组、模型组给予等量生理盐水。③模型组、黄芪莪术合剂组、强的松组分别于造模第3,7,21天每组6只麻醉下取右肺下叶组织后处死,正常对照组于第3天麻醉下取右肺下叶组织后处死。④采用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测肺组织转化生长因子β1及转化生长因子β1mRNA的表达。结果:进入结果分析大鼠55只,中途脱落5只。①转化生长因子β1表达:造模第3,7,21天模型组高于正常对照组(P<0.01),黄芪莪术合剂组和强的松组明显低于模型组(P<0.01～0.05)。造模第3,21天强的松治疗组低于黄芪莪术合剂治疗组(P<0.05)。②转化生长因子β1mRNA表达:造模第3,7,21天模型组高于正常对照组,黄芪莪术合剂组和强的松组明显低于模型组(P<0.01);第7天时,强的松治疗组低于黄芪莪术合剂治疗组,第21天时黄芪莪术合剂治疗组低于强的松治疗组,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:中药黄芪莪术合剂具有显著抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用,抑制转化生长因子β1及转化生长因子β1mRNA的表达是其可能的机制之一。     

大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1 mRNA表达变化及甲基强的松龙的干预作用

目的：观察大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1 mRNA表达的变化，及甲基强的松龙对其影响。方法：实验于2003-06／2004—03在上海市药物工业研究院与解放军第二军医大学长海医院病理实验室完成。选择雄性SD大鼠45只，随机分为空白对照组5只、损伤对照组（6，24h，3，7d）、甲基强的松龙组（6，24h，3，7d），每时间点5只。制作脊髓损伤模型后，损伤对照组及空白对照组给予等渗盐水，甲基强的松龙组给予甲基强的松龙（30mg／kg），分别于伤后6，24h，3，7d切取损伤及临近部位脊髓组织，运用原位杂交技术，二氨基联苯胺显色，苏木精轻度复染。采用光学显微镜进行观察，高倍镜下（200倍），随机选择5个高表达视野，记数每个高倍镜视野下阳性细胞的百分比（阳性细胞数／细胞总数）。细胞胞浆内呈棕黄色为转化生长因子β1 mRNA。观察甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤转化生长因子β1 mRNA表达的影响。结果：纳入动物45只，均进入结果分析。①脊髓损伤后甲基强的松龙组转化生长因子β1 mRNA的表达阳性细胞数与损伤对照组相比明显降低[损伤对照组伤后6，24h，3，7d分别为（8．91&;#177;0．82）％，（28．27&;#177;1．10）％，（42．09&;#177;0．93）％，（45．24&;#177;0．85）％，甲基强的松龙组伤后6，24h，3，7d分别为（7．93&;#177;0．40）％，（20．36&;#177;1．10）％，（31．34&;#177;0．62）％，（16．62&;#177;0．97）％]。②阴性对照未见转化生长因子β1 mRNA阳性表达。甲基强的松龙组和损伤对照组均有转化生长因子β1 mRNA阳性表达，甲基强的松龙组同损伤对照组相比，各时段转化生长因子β1 mRNA表达均有减少，且差异明显。结论：甲基强的松龙能抑制大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1 mRNA的表达，说明甲基强的松龙对脊髓损伤的治疗作用不是通过转化生长因子β1来实现的。     

补肾中药密骨片对成骨细胞生长因子转化生长因子β1 mRNA表达的影响

背景：补肾中药密骨片可有效防治骨质疏松，但其具体的药理学机制仍不是很清楚。转化生长因子β1是调节骨吸收与骨形成的重要耦联因子。 目的：探讨补肾方对成骨细胞转化生长因子β1mRNA表达的影响。设计：随机分组设计，对照实验。单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院骨伤科研究室。材料：实验于2003—05／2004—04在华中科技大学同济医学院附属协和医院中西结合骨代谢实验室完成。动物：选择出生一两天清洁级SD大鼠16只。实验药：密骨片药液在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨伤科研究室制备，主要成分为淫羊藿、杜仲、胡桃肉、干地黄、淮牛膝等；阳性对照药：重组碱性成纤维细胞生长因子由北京邦定公司提供。阴性对照组分为探针阴性对照和抗体阴性对照。 方法：将体外分离培养的新生SD大鼠的颅骨成骨细胞加入100，1000，5000，10000mg／L补肾中药密骨片药液及阳性对照药5μg/L重组碱性成纤维细胞生长因子。24h后，利用自行制备的地高辛标记的鼠转化生长因子β1 cDNA探针进行成骨细胞的核酸分子原位杂交分析，以其细胞内杂交阳性颗粒的平均光密度值代表转化生长因子β1 mRNA的表达水平。在200倍视野下，每组随机选取40个成骨细胞，用TJTY-300型全自动图像分析仪测定细胞内杂交颗粒的平均光密度值（A）。主要观察指标：各组成骨细胞转化生长因子β1mRNA表达。结果：全自动图像分析显示，5000，10000mg／L密骨片药液组的细胞转化生长因子β1mRNA表达分别是阴性对照组的1．18倍和1．30倍，差异有显著性[5000，10000mg／L密骨片药液组、阴性对照组的细胞内杂交颗粒的平均光密度值似）分别为0．21367&;#177;0．01500，0．23703&;#177;0．02173，0．18127&;#177;0．01528，P〈0．05和P〈0．01]，5μg/L重组碱性成纤维细胞生长因子组的细胞内杂交颗粒的平均光密度值（A）（0．25445&;#177;0．02081）虽高于5000，10000mg／L密骨片药液组，但差异无显著性（P〉0．05）。 结论：补肾中药密骨片可刺激成骨细胞转化生长因子β1的分泌和合成，从而促进骨形成和抑制骨吸收。     

芪丹颗粒对鼠肺间质纤维化转化生长因子β1mRNA和肿瘤坏死因子α mRNA表达的影响

目的：探讨由黄芪、白术、丹参、川芎等中草药提纯的芪丹颗粒对大鼠肺间质纤维化的疗效及其转化生长因子-β1 mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响.方法：实验于2003-04/08在山东省医学科学研究院基础研究所病理实验室完成.40只Wistar雄性大鼠随机分为4组：模型组、芪丹组、激素刎组和正常对照组,每组10只.利用BLEMA 5建立大鼠肺间质纤维化模型,模型组、芪丹组、激素组分别气管内一次性灌注平阳霉素5 mg/kg后,模型组常规饲养,芪丹组以芪丹颗粒灌胃250mg/（kg&;#183;d）,激素组肌注氢化考的松25 mg/（kg&;#183;d）：正常对照组一次性气管内灌注生理盐水2 mL/kg.各组饲喂28 d后麻醉状态下处死,取大鼠右肺中叶行苏木精-伊红染色、VanGieson氏苦味酸酸性品红法染色观察肺间质纤维化程度,利用核酸原位杂交技术检测转化生长因子βimRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达情况.结果：进入结果分析的大鼠为28只.[1]大鼠肺纤维化程度比较：模型组肺泡炎和肺纤维化程度较重,且其胶原纤维沉积较多,芪丹组可见肺泡间隔增厚程度减轻,炎性细胞较少,肺泡结构基本正常,肺泡炎与肺纤维化多为轻度.激素组肺泡炎及纤维化减轻不甚明显.[2]转化生长因子β1mRNA和肿瘤坏死因子αmRNA的表达量灰度扫描积分面积比较：芪丹组转化生长因子β1mRNA灰度扫描积面积明显低于模型组[（1.856 0&;#177;0.135 6,3.432 0&;#177;0.206 3）mm^2,（Q=12.857 5,P＜0.01）];激素组肿瘤坏死因子-αmRNA灰度扫描积分面积高于正常对照组[（2.622 0&;#177;0.3815,1.480 0&;#177;0.122 1）mm^2,（Q=13.907 3,P＜0.01）];芪丹组肿瘤坏死因子αmRNA灰度扫描积分面积明显低于激素组[（1.910 0&;#177;0.193 5,2.622 0&;#177;0.381 5）mm^2,（Q=8.265 9,P＜0.01）].结论：中药芪丹颗粒可以减少肺组织转化生长因子β1mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达量,减弱了细胞因子网络对于肺间质纤维化形成的促进作用,从而减轻和抑制了纤维化的发展.     

芪丹颗粒对鼠肺间质纤维化转化生长因子β1mRNA和肿瘤坏死因子α mRNA表达的影响

目的探讨由黄芪、白术、丹参、川芎等中草药提纯的芪丹颗粒对大鼠肺间质纤维化的疗效及其转化生长因子-β1 mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响.方法实验于2003-04/08在山东省医学科学研究院基础研究所病理实验室完成.40只Wistar雄性大鼠随机分为4组模型组、芪丹组、激素刎组和正常对照组,每组10只.利用BLEMA 5建立大鼠肺间质纤维化模型,模型组、芪丹组、激素组分别气管内一次性灌注平阳霉素5 mg/kg后,模型组常规饲养,芪丹组以芪丹颗粒灌胃250mg/(kg·d),激素组肌注氢化考的松25 mg/(kg·d)正常对照组一次性气管内灌注生理盐水2 mL/kg.各组饲喂28 d后麻醉状态下处死,取大鼠右肺中叶行苏木精-伊红染色、VanGieson氏苦味酸酸性品红法染色观察肺间质纤维化程度,利用核酸原位杂交技术检测转化生长因子βimRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达情况.结果进入结果分析的大鼠为28只.[1]大鼠肺纤维化程度比较模型组肺泡炎和肺纤维化程度较重,且其胶原纤维沉积较多,芪丹组可见肺泡间隔增厚程度减轻,炎性细胞较少,肺泡结构基本正常,肺泡炎与肺纤维化多为轻度.激素组肺泡炎及纤维化减轻不甚明显.[2]转化生长因子β1mRNA和肿瘤坏死因子αmRNA的表达量灰度扫描积分面积比较芪丹组转化生长因子β1mRNA灰度扫描积面积明显低于模型组[(1.856 0±0.135 6,3.432 0±0.206 3)mm2,(Q=12.857 5,P＜0.01)];激素组肿瘤坏死因子-αmRNA灰度扫描积分面积高于正常对照组[(2.622 0±0.3815,1.480 0±0.122 1)mm2,(Q=13.907 3,P＜0.01)];芪丹组肿瘤坏死因子αmRNA灰度扫描积分面积明显低于激素组[(1.910 0±0.193 5,2.622 0±0.381 5)mm2,(Q=8.265 9,P＜0.01)].结论中药芪丹颗粒可以减少肺组织转化生长因子β1mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达量,减弱了细胞因子网络对于肺间质纤维化形成的促进作用,从而减轻和抑制了纤维化的发展.     

补肾中药密骨片对成骨细胞生长因子转化生长因子β1 mRNA表达的影响

背景:补肾中药密骨片可有效防治骨质疏松,但其具体的药理学机制仍不是很清楚。转化生长因子β1是调节骨吸收与骨形成的重要耦联因子。目的:探讨补肾方对成骨细胞转化生长因子β1mRNA表达的影响。设计:随机分组设计,对照实验。单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院骨伤科研究室。材料:实验于2003-05/2004-04在华中科技大学同济医学院附属协和医院中西结合骨代谢实验室完成。动物:选择出生一两天清洁级SD大鼠16只。实验药:密骨片药液在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨伤科研究室制备,主要成分为淫羊藿、杜仲、胡桃肉、干地黄、淮牛膝等;阳性对照药:重组碱性成纤维细胞生长因子由北京邦定公司提供。阴性对照组分为探针阴性对照和抗体阴性对照。方法:将体外分离培养的新生SD大鼠的颅骨成骨细胞加入100,1000,5000,10000mg/L补肾中药密骨片药液及阳性对照药5μg/L重组碱性成纤维细胞生长因子。24h后,利用自行制备的地高辛标记的鼠转化生长因子β1cDNA探针进行成骨细胞的核酸分子原位杂交分析,以其细胞内杂交阳性颗粒的平均光密度值代表转化生长因子β1mRNA的表达水平。在200倍视野下,每组随机选取40个成骨细胞,用TJTY-300型全自动图像分析仪测定细胞内杂交颗粒的平均光密度值(A)。主要观察指标:各组成骨细胞转化生长因子β1mRNA表达。结果:全自动图像分析显示,5000,10000mg/L密骨片药液组的细胞转化生长因子β1mRNA表达分别是阴性对照组的1.18倍和1.30倍,差异有显著性[5000,10000mg/L密骨片药液组、阴性对照组的细胞内杂交颗粒的平均光密度值(A)分别为0.21367±0.01500,0.23703±0.02173,0.18127±0.01528,P<0.05和P<0.01],5μg/L重组碱性成纤维细胞生长因子组的细胞内杂交颗粒的平均光密度值(A)(0.25445±0.02081)虽高于5000,10000mg/L密骨片药液组,但差异无显著性(P>0.05)。结论:补肾中药密骨片可刺激成骨细胞转化生长因子β1的分泌和合成,从而促进骨形成和抑制骨吸收。     

Genealogy,expression, and cellular function of transforming growth factor-beta

The transforming growth factor-beta (TGF-beta) gene superfamily expresses a large set of structurally and functionally related polypeptides. Three TGF-beta isoforms are regulated by specific genes and have been identified in mammals (TGF-beta1, -beta2, and -beta3). All three-protein isoforms are observed abundantly during development and display overlapping and distinct spatial and temporal patterns of expressions. Each isoform plays a distinct role, the nature of which depends on the cell type, its state of differentiation, and growth conditions, and on the other growth factors present. TGF-beta regulates many of the processes common to both tissue repair and disease, including angiogenesis, chemotoxins, fibroblast proliferation and the controlled synthesis, and degradation of matrix proteins, such as collagen and fibronectin. This review will examine the genealogy and mode of actions of TGF-beta on the cell types involved in inflammation and repair, as well as in carcinoma.     

Altered expression of small proteoglycans, collagen, and transforming growth factor-beta 1 in developing bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats.

The development of bleomycin-induced pulmonary fibrosis in rats was studied over a period of 21 d after an intratracheal instillation of bleomycin. The expression of three small proteoglycans (biglycan, decorin, and fibromodulin), collagen III and TGF-beta 1 was studied by RNA-transfer blot analysis. The proteoglycans were also studied by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Western blots. TGF-beta 1 mRNA increased threefold already on day 3 and remained elevated until day 10. After the increase of TGF-beta 1 mRNA the messages for biglycan and collagen III steadily increased to reach a maximum 10 d after bleomycin instillation. The mRNA for biglycan increased maximally fourfold and that of collagen III 2.5-fold. Decorin mRNA, in contrast to biglycan decreased and reached 20% of control on day 10. The message for fibromodulin remained constant throughout the study period. The amounts of biglycan and decorin in the tissue changed in accordance with the mRNA levels. The results corroborate and extend previous in vitro studies concerning the effect of TGF-beta 1 on the metabolism of small proteoglycans and show that these macromolecules are regulated differently also in vivo. The marked alterations of biglycan and decorin during the development of fibrosis suggests that these proteoglycans have a regulating role in this process.