多重聚合酶链反应快速鉴别葡萄球菌及mecA基因检测

目的：建立快速鉴定葡萄球菌及检测mecA基因的多重聚合酶链反应（PCR）诊断方法。方法：以葡萄球菌16SrRNA、金黄色葡萄球菌的nuc基因以及耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的mecA基因合成3对引物，采用多重PCR扩增法，快速鉴定葡萄球菌，同时判断MRS菌株。结果：107株葡萄球菌的16SrRNA基因扩增片段全部为阳性．与常规鉴定结果符合率为100％；nuc基因阳性48株。阴性59株，与金黄色葡萄球菌核酸酶试验一致；以PBP2a乳胶凝集试验结果为金标准，苯唑西林（含2％NaClMHA）及头孢西丁纸片扩散法的敏感性为98．7％和100％，特异性分别为75．0％和82．1％：PCR扩增法的敏感性和特异性均为100％。结论：多重PCR法能快速准确地从临床分离菌株中鉴别葡萄球菌，并可同步对mecA基因进行准确检测。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价

目的探讨研究头孢西丁(FOX K-B)法对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测价值。方法选取132株葡萄球菌,分别通过苯唑西林(OXA)琼脂平板筛选试验法、FOX K-B法以及OXA K-B法对MRS加以检测,将OXA琼脂平板筛选法的检测结果 作为标准,对比分析FOX与OXA K-B法的敏感性与特异性。结果 本组132株葡萄球菌中,74株金黄色葡萄球菌通过OXA琼脂平板筛选检测确定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为30株;58株葡萄球菌属于凝固酶阴性,其中48株检测确定为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)。参考以上标准,FOX K-B法对MRSA检测的特异性、敏感性均达到100%,但OXA K-B法检测的特异性为90.91%(40/44),敏感性为93.33%(28/30)。FOX K-B法对MRCNS检测的特异性、敏感性均达到100%,但OXA K-B法检测的特异性为40.0%(4/10),敏感性为95.83%(46/48)。结论 FOX K-B发检测MRS的敏感性与特异性极高,具有极高的应用价值。     

金黄色葡萄球菌鉴别方法探讨

目的探讨金黄色葡萄球菌的检验方法,提高金黄色葡萄球菌的鉴定准确率。方法本研究针对金黄色葡萄球菌的特异性、敏感性、准确性进行研究,比较该方法与传统国标法的检测结果。结果在传统国标法上增加APIStaph鉴定试条试验,检测结果与国标法的显示阳性的检测结果相一致。结论此方法可对似阳非阳的结果进行判定,甚至对假阴性进行修正,防止漏检,明显提高了金葡菌的检出水平和准确性,对日常的检验工作具有很现实的指导意义,值得推广。     

乳胶凝集法快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法评价

目的 评价PBP-2a乳胶凝集法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的试验方法。方法 应用美国临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐的苯唑西林盐琼脂筛选平皿法和PBP-2a乳胶凝集法对临床分离的30株金黄色葡萄球菌进行MRSA的检测。结果　用苯唑西林盐琼脂筛选平皿法检出MRSA 24株,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)6株,用PBP-2a乳胶凝集法检测的结果与前法完全相同。两种方法的符合率为100% 。结论 PBP-2a乳胶凝集法是一种快速、简便、准确检测MRSA的方法。     

2株山羊葡萄球菌药敏及诱导性耐药的检测

目的探讨患者山羊葡萄球菌药敏及诱导性耐药。方法用美国BD公司PhoenixTM100全自动细菌鉴定/药敏仪及其NMIC/ID-55鉴定/药敏板对患者血分离的2株山羊葡萄球菌（菌株92738、菌株100710）进行鉴定和21种抗菌药物敏感性检测,应用NMIC/ID-55鉴定/药敏板头孢硝噻吩试验检测其β-内酰胺酶,苯唑西林-头孢硝噻吩纸片法检测诱导性β-内酰胺酶,D试验检测大环内酯类和氨基糖诱导性耐药,苯唑西林纸片抑菌环周菌落乳胶凝集法检测诱导性青霉素结合蛋白2a。结果 PhoenixTM100细菌鉴定仪鉴定该二菌均为山羊葡萄球菌,可信度分别为95%、99%;1株全敏感,NT试验阴性。1株仅对青霉素、四环素耐药,NT试验阳性;该二菌D试验、纸片抑菌环周菌落青霉素结合蛋白2a乳胶凝集法均诱导阴性。结论这2株山羊葡萄球菌临床分离株耐药性较低,其机制为产β-内酰胺酶,未检出诱导性β-内酰胺酶、诱导性青霉素结合蛋白2a、大环内酯类和氨基糖耐药。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的比较

目的 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检测方法进行比较.方法 分别用mecA基因PCR扩增法、PBP2a胶乳凝集试验法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对临床分离的135株金黄色葡萄球菌进行榆测.结果 mecA基因PCR扩增法显示阳性79株,阴性56株;PBP2a胶乳凝集试验法的敏感性和特异性分别为96.2%和100.0%;头孢西丁纸片扩散法的敏感性和特异性分别为94.9%和96.4%;苯唑西林纸片扩散法的敏感性和特异性分别为94.9%和62.5%.结论 PBP2a胶乳凝集试验法和头抱西丁纸片扩散法与mecA基因PCR扩增法的检测结果高度一致;苯唑西林纸片扩散法特异性低,不再适用于MRSA的检测.     

一起金黄色葡萄球菌引起的学校食物中毒的流行病学调查与实验室分析

目的 对一起学校食物中毒事件发生的原因和可疑危险因素进行流行病学调查与实验室分析,提出有效防控措施。方法 利用现场流行病学与卫生学调查,了解患病情况及可疑食物;采集可疑食品、外环境和病例的标本进行荧光定量PCR检测、金黄色葡萄球菌分离与鉴定、药物敏感性分析、全基因组测序。结果 共11名患者,其临床症状主要是恶心、腹痛（100%）,其次为呕吐（81.82%）;可疑食物为某饼家生产的“脆皮法棍泡芙”,致病因素为金黄色葡萄球菌A型肠毒素,来源于食品泡芙样本的金黄色葡萄球菌和来源于患者肛拭子样本的金黄色葡萄球菌具有同源性,所检出的金黄色葡萄球菌均对青霉素耐药（耐药率100%）。结论本次食物中毒事件是由某饼家从业人员携带金黄色葡萄球菌,在制作“法棍泡芙”过程中污染食物而引起的金黄色葡萄球菌A型肠毒素中毒。     

尿液细菌培养药敏结果探析

目的：探讨分析引起泌尿系统感染的病原菌种类及分布,研究何种药物能有效抑制其生长。方法：采集最近一年内251例泌尿系统感染患者尿液标本,进行合理有效的培养与鉴定,进而对培养菌做药敏试验,统计分析其药物抗性与敏感性。结果：细菌鉴定显示,尿液样本中的主要细菌包括革兰阴性菌大肠埃希菌和革兰阳性菌金黄色葡萄球菌,药敏试验进一步显示,大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100%,金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性最高,为100%,而哌拉西林/他唑巴坦对两种细菌均有较好抑制效果。结论：导致泌尿系统感染的细菌主要是大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,而能同时有效抑制两种细菌生长的抗生素是哌拉西林/他唑巴坦,值得推广应用。     

异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的检测方法和耐药性分析

目的研究比较异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)的几种筛查方法,制定出适合的hVISA的筛查方法。方法收集2018年1月—2019年12月江南大学附属医院临床标本中分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株(MRSA),采用宏量E-test法(MET法)、BHIV3V、BHIV6V及MHA5T法筛查hVISA,最后用菌群曲线分析法(PAP-AUC)确认,比对4种筛查方法的敏感性及特异性。结果538株金黄色葡萄球菌经头孢西丁纸片法筛查出MRSA 266例,MRSA阳性率为49.4%;266株MRSA中经PAP-AUC确认hVISA菌株为17株,检出率为6.4%;MET法筛选出hVISA 21例,其中确认hVISA菌株为14例,敏感性为82.3%,特异性为97.1%。BHIV6V法筛查出hVISA 2株,确认均为hVISA,敏感性为11.8%,特异性100%。BHIV3V法筛查出hVISA 44株,确认为hVISA菌株为11株,敏感性为64.7%,特异性86.7%。MHA5T法筛查出hVISA 56株,确认hVISA为9株,敏感性为52.9%,特异性81.1%。MRSA除对利奈唑胺及万古霉素敏感外,对多种抗菌药物表现为多重耐药。结论本院MRSA检出率为49.4%,高于全国耐药监测网统计数据。hVISA的检出率为6.08%,MET法在敏感性及特异性方面优于其他3种方法,此方法较适合在本院开展hVISA的筛查。检出的MRSA及hVISA除对利奈唑胺及万古霉素敏感外,表现为多种抗菌药物的耐药性,尤其是hVISA具有更高的耐药性,临床治疗时应按照药敏结果选取治疗药物,切勿随意进行经验性用药。     

茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的：研究茶多酚对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度。方法：采用试管法体外抑菌试验,比较不同浓度茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制,找出最低抑菌浓度。结果：茶多酚浓度为62．5mg·ml^-1时能抑制金黄色葡萄球菌的生长。低于这个浓度,金黄色葡萄球菌能够生长;而高于这个浓度,金黄色葡萄球菌均无生长。结论：茶多酚对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为62．5mg·ml^-1。     

临床检验ABO血型鉴定的质量控制方法探讨

目的对临床上检验ABO血型鉴定的质量控制方法进行比较、讨论。方法于2012年4月采集我院医务工作者246人血液标本作为研究对象。每人采集到的血液分为2份,采集后2 h内进行ABO血型鉴定。分别采用玻片法和试管法进行ABO血型鉴定并记录,比较两种方法在检验ABO血型鉴定方面的效果。结果采用玻片法和试管法进行ABO血型鉴定,虽然存在误差,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论临床上常用检验ABO血型鉴定的玻片法和试管法均能有效准确的鉴定血液的血型。     

两种梅毒血清学检验方法在大批量体检中的应用分析

目的比较胶体金法（GICA法）和酶联免疫吸附试验（ELISA法）对梅毒抗体检测的敏感性和特异性。方法对8977例参加国家免费孕前优生健康检查的受检者血清标本,分别同时用GICA、ELISA、TPPA法进行平行检测。以确证试验TPPA法为参照,分别比较两种方法对梅毒检测的阳性率、敏感性和特异性。结果经统计学分析发现,GICA法检测阳性率0.47%,敏感性97.67%,特异性100%;ELISA法检测阳性率0.48%,敏感性100%,特异性100%。两组数据比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论GICA法和ELISA法均可以作为大批量体检梅毒筛查的可靠方法,GICA法比较适合于基层实验室使用。ELISA法适合于仪器设备比较完备的实验室使用。     

不同检测方法对ABO血型鉴定的影响分析

目的：探讨不同检测方法对ABO血型鉴定的影响。方法154例进行ABO血型鉴定的受检者作为研究对象,154例受检者均分别用玻片法及试管法进行鉴定,对其鉴定结果进行比较。结果本组154例受检者经玻片法及试管法进行血型鉴定后其鉴定结果存在有一定的差异性,且试管法的鉴定准确率相对较高。结论ABO血型鉴定极易受多种因素的影响,在进行血型鉴定时应对多种因素进行综合考虑。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的两种检测方法的比较

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的有效手工检测方法。方法所有待检菌株均先用全自动细菌鉴定仪进行种属确认鉴定。对100株金黄色葡萄球菌采用NCCLS所推荐的MR-sA确认药敏试验（MIC法）进行确认鉴定,经35℃需氧培养24h后判定MIC值,MIC≥4μg／ml确认为MRSA。同时,将所有待检菌株直接接种到日本新一代MRSA选择性鉴定培养基上,35℃需氧条件下培养24～48h后观察各菌种在培养基上的分离培养状态,对生长的金黄色葡萄球菌按培养基判定说明书进行MRSA的菌种鉴定。结果MIC法检出57株MRSA,43株MSSA;选择性培养基法检出56株MRSA,44株MSSA;只有1株金黄色葡萄球菌鉴定两法结果不一致,两法阳性符合率98．2％,阴性符合率97．7％,两法结果总符合率为99％。结论日本新一代MRSA选择性鉴定培养基与NCCIS推荐的MIC法总符合率为99％,操作简便、特异性高,结果准确,适合于各级实验室推广应用。     

金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

目的：了解金黄色葡萄球菌感染的分布与耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供病原学调查及实验室依据。方法：收集临床分离的金黄色葡萄球菌,培养鉴定按《全国临床检验操作规程》进行,药敏试验采用纸片扩散法（K-B法）。结果：检出的金黄色葡萄球菌以痰标本为主,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的检出率为66.4%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）为33.6%;MRSA对常用抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,未检出耐万古霉素金黄色葡萄球菌。结论：加强临床金黄色葡萄球菌耐药情况监控,根据药物敏感试验合理用药十分重要。     

147株金黄色葡萄球菌临床分离及耐药分析

目的监测本地区儿童感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)情况,掌握儿童感染金黄色葡萄球菌(SAU)耐药情况,指导临床合理应用抗生素,为提高治疗效果提供依据。方法对各类感染标本分离的147株金黄色葡萄球菌应用VITEK-32微生物全自动分析系统进行鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA菌株,同时进行D-试验研究红霉素诱导克林霉素耐药情况。使用WHONET5.4软件对原始数据进行分析和统计学处理。结果小儿金黄色葡萄球菌感染标本主要来自于痰液,共分离到金黄色葡萄球菌121株,占阳性菌株的82.3%(121/147),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)42株。头孢西丁纸片扩散法结果显示147株金黄色葡萄球菌检出MRSA 47株(31.9%)。药物敏感试验结果显示147株金黄色葡萄球菌对青霉素全部耐药,而对万古霉素全部敏感,对苯唑西林、头孢唑啉、红霉素、克林霉素敏感率分别为64.6%、98.0%、44.2%、52.4%。药敏结果显示SAU存在多重耐药情况,有10株对红霉素和克林霉素同时耐药;D-试验结果显示诱导试验阳性率为54.5%。结论本文多数分离出金黄色葡萄球菌(SAU)菌株标本取自于呼吸道感染的痰液。通过药敏分析发现SAU对青霉素耐药率为100%,提示该种药物已不适合应用本地区SAU感染患儿的治疗。147株金黄色葡萄球菌中存在多重耐药情况并检出MRSA 47株(31.9%),提示本地区儿童感染SAU,特别是MRSA耐药形势不容乐观,仍需加强对MRSA的日常监测工作。     

168株金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解我院金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性特征,为合理使用抗生素提供依据.方法 采用MicroScan WalkAway40和PC 20药敏板进行菌株鉴定及药敏试验,以SPSS软件对数据进行分析处理.结果 金黄色葡萄球菌分离率高的科室是ICU、呼吸内科和脑外科,标本主要来自痰、分泌物和血.168株金黄色葡萄球菌中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌菌株(MRSA)占31.0%,ICU分离的MRSA占52.6%.金黄色葡萄球菌感染的患者中以21～40岁人群为主,占41.0%;60岁以上的人群24.5%,各年龄段男性感染率均较女性高,ICU感染者40岁以下的患者占47.4%,50岁以下的患者占68.4%.ICU患者分离的38株菌痰标本占78.9%,血标本15.8%.万古霉素和利奈唑胺的敏感率为100%,青霉素耐药率为94.6%,红霉素耐药率56.0%、克林霉素46.4%和四环素47.6%.结论 ICU、呼吸内科和脑外科是金黄色葡萄球菌感染前三位的科室,主要患者人群为中青年男性,肺部感染为主,其次是血流感染,金黄色葡萄球菌呈高度的耐药性,万古霉素和利奈唑胺是金黄色葡萄球菌体外药敏试验敏感性最高的抗菌药物.     

抗环瓜氨酸肽抗体与类风湿因子在类风湿性关节炎诊断中的诊断价值

目的探究在类风湿性关节炎诊断中抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子的诊断意义。方法类风湿性关节炎患者50例设为观察组,另选本院同期收治患有非风湿性自身免疫性疾病患者50例设为对照组。对两组患者同时进行抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子的检测,检测方式分别为酶联免疫吸附试验和乳胶增强免疫比浊法。结果对类风湿性关节炎,类风湿因子敏感性为80.0%,特异性为52.0%;抗环瓜氨酸肽抗体敏感性为50.0%,特异性为96.0%;两者联合测试敏感性为72.0%,特异性为86.0%。结论抗环瓜氨酸肽抗体和类风湿因子对类风湿性关节炎患者诊断在敏感性与特异性上各有优点,两者联合检测能够更好的提高诊断的敏感性和特异性,具有重要的临床意义。     

Rh血型抗原检测卡临床研究

目前，Rh血型的筛查及鉴定基本上采用盐水法、酶法及聚凝胺等技术在试管中进行。微柱凝胶免疫检测技术是一项新的免疫学技术，近几年来已经成为临床输血工作常规技术，取代了应用100年的传统血凝试验。本研究通过与试管法对比，考核Rh血型抗原检测卡（单克隆抗体）的特异性、敏感性，报道如下。     

哺乳期乳腺脓肿病原菌分布及耐药性研究

目的分析哺乳期乳腺脓肿病原菌分布及耐药状况,指导临床用药。方法收集111份乳腺脓肿脓汁标本进行细菌分离鉴定及药敏试验,用法国梅里埃公司生产的API鉴定系统进行细菌菌株鉴定,用K-B纸片扩散法作药敏试验。结果培养出68株病原菌,金黄色葡萄球菌61株,占89.7%,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MR-SA)为13株;表皮葡萄球菌2株,占2.9%,草绿色链球菌、路邓葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、粘质沙雷菌、产酸克雷伯菌各1株,均占1.5%。金黄色葡萄球菌呈现多重耐药趋势,对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率分别为88.5%、52.5%、44.3%,对磷霉素、庆大霉素、左氧氟沙星、万古霉素、替考拉宁及复方磺胺甲恶唑高度敏感;其中MRSA对青霉素、头孢唑啉、氨苄西林+舒巴坦、苯唑西林的耐药率达100%,对红霉素、克林霉素耐药率亦达92.3%。结论哺乳期乳腺脓肿细菌感染主要为金黄色葡萄球菌;治疗哺乳期乳腺脓肿不宜选用青霉素,红霉素、克林霉素不宜作为治疗的常规用药,对于MRSA头孢唑啉、氨苄西林+舒巴坦、苯唑西林亦不能作为治疗的常规药物,抗菌药物的选择应以药敏结果为指导。